Влияние Мексидола на мозговой натрийуретический пептид кардиомиоцитов в постреперфузионном периоде в эксперименте

Размещено на http://www.allbest.ru/

Статья по теме:

Влияние Мексидола на мозговой натрийуретический пептид кардиомиоцитов в постреперфузионном периоде в эксперименте

М.Л. Бугрова, Д.А. Абросимов, Е.И. Яковлева

Введение

Ключевые слова: мозговой натрийуретический пептид; МНП; постреперфузионный период; Мексидол.

Мозговой натрийуретический пептид (МНП), как и предсердный натрийуретический пептид, участвует в поддержании водно-солевого баланса в организме, играет роль в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний и имеет прогностическую значимость в клинике. Представляет интерес изучить особенности взаимодействия МНП и лекарственных препаратов, например широко применяемого в кардиологии антигипоксанта метаболического типа действия Мексидола, оказывающего кардиопротекторный эффект. Анализ воздействия Мексидола на МНП в условиях постреперфузионного периода проведен впервые.

Цель исследования -- оценить влияние Мексидола на интенсивность процессов накопления и выброса МНП в гранулах кардиомиоцитов крыс в постреперфузионном периоде.

Материалы и методы. Эксперименты проведены на 25 аутбредных крысах-самцах массой 220-250 г. Тотальную ишемию (10 мин) моделировали пережатием сердечно-сосудистого пучка по В.Г. Корпачеву. Мексидол вводили после реанимации внутрибрюшинно в течение первого часа дробно через каждые 20 мин. Интенсивность накопления и выброса МНП оценивали количественным анализом иммуномеченых гранул предсердных миоцитов в трансмиссионном электронном микроскопе.

Результаты. Введение Мексидола в дозе 25 мг/кг массы тела в течение первого часа после восстановления кровообращения оказывает положительное пролонгированное действие на МНП: через 60 сут постреперфузионного периода усиливаются процессы образования и выведения пептида в предсердных миоцитах крысы, что вызывает дополнительный кардиопротекторный эффект. Увеличение выброса МНП, происходящее на фоне высокой синтетической и пролиферативной активности фибробластов, способствует снижению развития кардиосклероза в отдаленном постреперфузионном периоде.

Анализ иммуномеченых гранул с МНП миоцитов правого предсердия крысы позволил выявить новый механизм кардиопротекторного действия Мексидола в отдаленном постреперфузионном периоде.

Заключение. Мексидол оказывает пролонгированное влияние на мозговой натрийуретический пептид, значительно усиливая его накопление и выведение в предсердных кардиомиоцитах крысы в отдаленном постреперфузионном периоде, что вызывает дополнительный кардиопротекторный эффект, уменьшая развитие кардиосклероза.

Основная часть

Мозговой натрийуретический пептид (МНП), открытый в 1988 г., входит в систему натрийуретических пептидов, способных снижать артериальное давление и поддерживать водно-солевой баланс путем стимуляции диуреза и натрийуреза [1]. МНП является антагонистом ренин-ангиотензин-альдостероновой системы [1, 2]. Ранее считалось, что сердце -- это основной источник МНП: сначала пептид был выявлен в желудочках, позднее -- в секреторных гранулах предсердий. По последним данным, МНП обнаружили в фибробластах и эндотелиоцитах сети коронарных артерий [3, 4].

В настоящее время МНП активно изучается в связи с его прогностической значимостью в клинической практике в качестве эффективного маркера таких заболеваний, как инфаркт миокарда, ишемия, аритмия, острая декомпенсированная сердечная недостаточность, атеросклероз [5-8]. Исследуются возможности его терапевтического применения [9-14]. В связи с этим изучение синтеза и выброса МНП в условиях сердечно-сосудистой патологии является актуальной проблемой.

В терапии постреанимационных осложнений применяют так называемые антигипоксанты метаболического типа, действия которых направлены на коррекцию внутриклеточных нарушений в условиях гипоксии. Среди таких фармакологических средств широкое распространение получил отечественный препарат Мексидол (сукцинатсодержащее производное 3-оксипиридина) [15, 16]. В клинике и в экспериментальных исследованиях показано нейро- и кардиопротекторное действие Мексидола в постреперфузионном периоде (ПРП) [15-17]. Ранее нами было изучено влияние Мексидола на предсердный натрийуретический пептид (ПНП) в изолированном перфузируемом сердце и в условиях целостного организма через час после ПРП. Установлено выраженное положительное влияние на процессы образования и выведения пептида [18, 19]. Считается, что МНП и ПНП имеют большое сходство: активируют одинаковые рецепторы органов-мишеней, которые через каскад цГМФ-зависимых клеточных реакций реализуют их физиологические эффекты. На синтез обоих пептидов влияют практически одни и те же факторы: повышение артериального давления, гипоксия, активация ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и т.д. [1].

Различие между ПНП и МНП состоит в том, что ПНП начинает выбрасываться в кровь в ответ на кратковременное повышение артериального давления и быстро инактивируется эндопептидазой. Для МНП необходимо более длительное воздействие, и время циркуляции его в крови больше, вследствие чего этот пептид получил широкое распространение в клинике в качестве прогностического агента [20].

Все вышесказанное способствовало возникновению научного интереса к исследованию воздействия Мексидола на синтез и выведение МНП.

Цель исследования -- оценить влияние Мексидола на процессы накопления и выброса мозгового натрийуретического пептида в гранулах кардиомиоцитов в постреперфузионном периоде у крыс.

Материалы и методы. Экспериментальное исследование проводили на 25 аутбредных крысах-самцах массой 220-250 г. в соответствии с правилами, установленными Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (принятой в Страсбурге 18.03.1986 г. и подтвержденной в Страсбурге 15.06.2006 г.). Тотальную ишемию по В.Г. Корпачеву моделировали 10-минутным пережатием сердечно-сосудистого пучка [21]. Всех животных разделили на 5 групп:

1-я группа (n=5) -- интактные животные;

2-я группа (n=5) -- контрольная, 60 мин ПРП;

3-я группа (n=5) -- 60 мин ПРП + Мексидол;

4-я группа (n=5) -- контрольная, 60 сут ПРП;

5-я группа (n=5) -- 60 сут ПРП + Мексидол.

В 3-й и 5-й группах Мексидол вводили после реанимации внутрибрюшинно в течение первого часа дробно в дозе 25 мг/кг массы тела через каждые 20 мин. Как известно, терапевтические эффекты Мексидола выявляются в диапазоне доз от 10 до 300 мг/кг: препарат в дозе 25 мг/кг оказывает выраженное вазопротекторное и кардиопротекторное действие [16].

Электронно-микроскопический анализ образцов ткани правого предсердия проводили по стандартной методике [22]. Иммуноцитохимические реакции для выявления локализации МНП осуществляли на ультратонких срезах с помощью поликлональных антител Rabbit anti-Brain Natriuretic Peptide-32 (Rat) Serum (Peninsula Laboratories Inc., США) и антител Protein-A/Gold (15 nm) (EM Grade, Electron Microscopy Sciences, США). Срезы контрастировали уранилацетатом, цитратом свинца и анализировали в электронном микроскопе Morgagni 268D (FEI, США). По классификации гранул секреторных кардиомиоцитов выделяли два типа гранул: А-тип -- зрелые, запасающие и В-тип, растворяющиеся [23]. Гранулы считали в полях зрения (38Ч38 мкм). Статистическую обработку проводили с использованием программы Statistica 10.0, применяли критерий Манна-Уитни (р<0,05).

Результаты

Через 60 мин ПРП количественный анализ гранул секреторных кардиомиоцитов правого предсердия животных 3-й группы (60 мин ПРП + Мексидол), содержащих МНП-иммунореактивный материал, выявил статистически значимое увеличение гранул А-типа на 93%, В-типа -- на 147% по сравнению с интактными животными (рис. 1). Во 2-й группе (60 мин ПРП) достоверных изменений не обнаружено.

В этот период в 3-й группе изменение ультраструктуры секреторных кардиомиоцитов проявлялось в незначительном просветлении матрикса митохондрий и расширении цистерн саркоплазматического ретикулума. Ядра содержали эухроматин, в саркоплазме находилось значительное количество цитоплазматических гранул (рис. 2). Во 2-й группе преобладали митохондрии в набухшем состоянии, содержание цитоплазматических гранул визуально было меньше, чем в 3-й группе, а саркоплазматический ретикулум был расширен в большей степени (рис. 3).

Рис. 2 - Ультраструктура кардиомиоцита правого предсердия крысы через 60 мин постреперфузионного периода с применением Мексидола: Мх -- митохондрии; ЦГ -- цитоплазматические гранулы; Ч28 000

Рис. 3 - Ультраструктура кардиомиоцита правого предсердия крысы через 60 мин постреперфузионного периода: Мх ??-- митохондрии; СПР -- саркоплазматический ретикулум; Ч14 00

Через 60 сут ПРП количественный анализ гранул кардиомиоцитов в 5-й группе (60 сут ПРП + Мексидол) показал увеличение всех типов гранул, содержащих МНП, по сравнению с показателями остальных групп. Количество гранул А-типа возросло по сравнению с группой интактных животных более чем в 3 раза, В-типа -- почти в 4,5 раза (см. рис. 1). В 4-й группе (60 сут ПРП) содержание секреторных гранул было повышенным: на 33% -- гранул А-типа и на 51% -- гранул В-типа.

По сравнению с результатами 3-й группы (60 мин ПРП + Мексидол) количество гранул в 5-й группе увеличилось более чем в 2 раза: число гранул А-типа -- на 118%, гранул В-типа -- на 119%. Интересно отметить, что в 4-й группе число А-гранул с МНП также возросло относительно раннего ПРП (2-я группа) на 35%, при этом количество В-гранул достоверно не изменилось.

В этот период в миокарде правого предсердия животных 5-й группы отмечалась выраженная синтетическая активность секреторных кардиомиоцитов: большое количество гранул с пептидом, гипертрофия комплекса Гольджи (рис. 4). В большинстве клеток ядра содержали эухроматин и ядрышки; цитоплазматических гранул было визуально меньше, чем у животных 3-й группы (60 мин ПРП + Мексидол). В межклеточном пространстве выявлено незначительное количество коллагеновых волокон.

В миокарде животных 4-й группы среди кардиомиоцитов встречались клетки как в состоянии некроза, так и апоптоза. В некоторых кардиомиоцитах выявлено расхождение вставочных дисков, имели место набухание митохондрий, образование вакуолей, содержание цитоплазматических гранул было меньше, чем у животных 5-й группы (рис. 5). В межклеточном пространстве отмечалось значительное увеличение компонентов соединительной ткани.

Обсуждение. Через 60 мин ПРП в 3-й группе с введением Мексидола увеличение зрелых и растворяющихся форм гранул с МНП свидетельствовало об его активном накоплении и высвобождении. В то же время совпадение количественных показателей с контрольной серией, без введения препарата, указывало на отсутствие влияния Мексидола на синтез и выброс пептида в этот период. По-видимому, факторы ишемии и реперфузии через активацию HIF (hypoxia inducible factors) воздействовали на МНП в условиях раннего ПРП и оставались основными как в контрольной, так и в опытной группах животных. Установлено, что HIF-1б запускает промотор в последовательности, кодирующей МНП, и стимулирует транскрипцию его мРНК [24-26]. По данным T. Ogawa, A. De Bold [1] известно, что ответ МНП на воздействие различных патологических факторов и динамика его плазменной концентрации во многом близки с реакцией ПНП. В ранее проведенных нами исследованиях [19] было установлено выраженное влияние Мексидола на синтез и секрецию ПНП через 60 мин после восстановления кровообращения в аналогичных условиях. С одной стороны, это может свидетельствовать о значительных отличиях в механизмах запуска образования и выброса обоих пептидов. С другой стороны, не противоречит данным авторов [1], показывающих более медленный ответ МНП на различные факторы и необходимость более длительного их воздействия. Морфологическая картина отражала вазопротекторное и цитопротекторное действия Мексидола на миокард, что согласовывалось с данными других исследователей [17]. Отсутствие агрегации эритроцитов, сохранение ультраструктуры кардиомиоцитов (незначительное расширение цистерн саркоплазматического ретикулума, энергизованное состояние митохондрий, большое количество цитоплазматических гранул) были обусловлены антиоксидантной активностью 3-оксипиридинов и антигипоксическим свойством янтарной кислоты. Сукцинат, поступая во внутриклеточное пространство, окислялся дыхательной цепью в условиях гипоксии; производные 3-оксипиридинов снижали микровязкость мембран, стабилизируя липидный компонент, ингибировали процессы перекисного окисления липидов и оказывали влияние на активность мембраносвязанных ферментов [16]. Интересно отметить, что похожая морфологическая картина выявлена нами в кардиомиоцитах изолированного по Лангендорфу сердца крысы с введением Мексидола такой же дозы -- 25 мг/кг [18]. В нашем эксперименте на крысах было доказано функционирование сердца на интракардиальном уровне в раннем ПРП [27]. По-видимому, действие препарата в условиях целостного организма в этот период осуществлялось непосредственно на внутриорганном и внутриклеточном уровнях [18].

Через 60 сут после эксперимента большое количество гранул обоих типов в правом предсердии 5-й группы животных (введение Мексидола) и статистически значимое отличие от показателей всех остальных групп свидетельствовали о выраженном стимулирующем эффекте препарата на накопление и выброс МНП в условиях отдаленного ПРП. Можно предположить, что Мексидол, введенный животным после реанимации, влияет на МНП двумя путями. С одной стороны, препарат оказывает прямое пролонгированное действие на синтетический аппарат сердца, о чем свидетельствует гипертрофия комплекса Гольджи и значительное количество гранул. С другой стороны, низкое по сравнению с контрольной серией содержание коллагеновых волокон в межклеточном пространстве и отсутствие некротически измененных кардиомиоцитов указывают на выраженный кардиопротекторный эффект Мексидола на миокард, который также может способствовать усилению процессов синтеза и секреции МНП. Ранее в наших работах по исследованию ПНП [28] выявлено значительное увеличение всех типов гранул с пептидом в миокарде крыс в условиях отдаленного ПРП. Увеличение накопления и выброса ПНП происходило на фоне высокой синтетической и пролиферативной активности фибробластов, обсуждался кардиопротекторный эффект пептида, способствующий снижению степени развития кардиосклероза. Обнаруженное в контрольной серии без введения Мексидола большое количество гранул с МНП наводит на мысль о сходстве действий ПНП и МНП в этих условиях. По данным авторов [29], МНП играет важную роль в процессах ремоделирования миокарда у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Экспериментально доказано [30], что МНП ингибирует синтез коллагена, усиливает действие металлопротеиназ, подавляет пролиферацию кардиальных фибробластов. Сниженное количество соединительнотканного компонента в миокарде 5-й группы животных с введенным ранее Мексидолом на фоне повышенного содержания гранул с МНП подтверждает важную роль пептида в ремоделировании миокарда в качестве антифиброзного фактора.

Таким образом, экспериментальное исследование МНП в раннем и отдаленном ПРП на уровне целостного организма с помощью метода количественного анализа иммуномеченых гранул предсердных миоцитов позволило выявить пролонгированный положительный эффект Мексидола в дозе 25 мг/кг массы тела на синтез и выброс МНП и подтвердить кардиопротекторные свойства данного препарата. Полученные результаты вносят определенный вклад в изучение взаимодействия МНП с лекарственными средствами в условиях сердечно-сосудистой патологии, что, несомненно, имеет научную и практическую значимость.

Заключение

Мексидол оказывает пролонгированное влияние на мозговой натрийуретический пептид, значительно усиливая его накопление и выведение в предсердных кардиомиоцитах крысы в отдаленном постреперфузионном периоде, что вызывает дополнительный кардиопротекторный эффект, уменьшая развитие кардиосклероза.

Финансирование исследования. Работа выполнена в рамках ведомственной НИР «Системные и молекулярные механизмы регуляции физиологических функций в норме и патологии» (2015-2017 гг.).

Конфликт интересов. У авторов нет конфликта интересов.

Литература

мексидол пептид кардиомиоцит крыса

1. Ogawa T., de Bold A.J. The heart as an endocrine organ. Endocr Connect 2014; 3(2): R31-R44, http://dx.doi.org/10.1530/ec-14-0012.

2. Sun Y., Deng T., Lu N., Yan M., Zheng X. B-type natriuretic peptide protects cardiomyocytes at reperfusion via mitochondrial calcium uniporter. Biomed Pharmacother 2010; 64(3): 170-176, http://dx.doi.org/10.1016/j.biopha.2009.09.024.

3. Jarai R., Kaun C., Weiss T.W., Speidl W.S., Rychli K., Maurer G., Huber K., Wojta J. Human cardiac fibroblasts express B-type natriuretic peptide: fluvastatin ameliorates its up-regulation by interleukin-1б, tumour necrosis factor-б and transforming growth factor-в. J Cell Mol Med 2009; 13(11-12): 4415-4421, http://dx.doi.org/10.1111/j.1582-4934.2009.00704.x.

4. de Bold A.J. Thirty years of research on atrial natriuretic factor: historical background and emerging concepts. Can J Physiol Pharmacol 2011; 89(8): 527-531, http://dx.doi.org/10.1139/y11-019.

5. Voulteenaho O., Ala-Kopsala M., Ruskoaho H. BNP as a biomarker in heart disease. Adv Clin Chem 2005; 40: 1-36, http://dx.doi.org/10.1016/s0065-2423(05)40001-3.

6. Tang W.H. B-type natriuretic peptide: a critical review. Congest Heart Fail 2007; 13(1): 48-52, http://dx.doi.org/10.1111/j.1527-5299.2007.05622.x.

7. Levine Y.C., Rosenberg M.A., Mittleman M., Samuel???M., Methachittiphan N., Link M., Josephson M.E., Buxton A.E. B-type natriuretic peptide is a major predictor of ventricular tachyarrhythmias. Heart Rhythm 2014; 11(7): 1109-1116, http://dx.doi.org/10.1016/j.hrthm.2014.04.024.

8. Xin W., Lin Z., Mi S. Does B-type natriuretic peptide-guided therapy improve outcomes in patients with chronic heart failure? A systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Heart Fail Rev 2013; 20(1): 69-80, http://dx.doi.org/10.1007/s10741-014-9437-8.

9. Arakawa K., Himeno H., Kirigaya J., Otomo??F., Matsushita K., Nakahashi H., Shimizu S., Nitta M., Takamizawa ??T., Yano H., Endo M., Kanna M., Kimura K., Umemura ?S. B-type natriuretic peptide as a predictor of ischemia/reperfusion injury immediately after myocardial reperfusion in patients with ST segment elevation acute myocardial infarction. Eur Heart J Acute Cardiovasc Care 2015 Jan [Epub ahead of print], http://dx.doi.org/10.1177/2048872615568964.

10. Ejaz N., Khalid M. Utility of brain natriuretic peptide in diagnosis of congestive heart failure and comparison with trans-thoracic echocardiography: a multicenter analysis in South Asian and Arabian population. J Coll Physicians Surg Pak 2015 Jan; 25(1): 12-15.

11. Lyu T., Zhao Y., Zhang T., Zhou W., Yang F., Ge H., Ding ??S., Pu J., He B. Natriuretic peptides as an adjunctive treatment for acute myocardial infarction. Int Heart J 2014 Feb; 55(1): 8-16, http://dx.doi.org/10.1536/ihj.13-109.

12. Hu G., Huang X., Zhang K., Jiang H., Hu X. Anti-inflammatory effect of B-type natriuretic peptide postconditioning during myocardial ischemia-reperfusion: involvement of PI3K/Akt signaling pathway. Inflammation 2014; 37(5): 1669-1674, http://dx.doi.org/10.1007/s10753-014-9895-0.

13. Shang C. B-type natriuretic peptide-guided therapy for perioperative medicine? Open Heart 2014 Aug; 1(1): e000105, http://dx.doi.org/10.1136/openhrt-2014-000105.

14. Toufektzian L., Zisis C., Balaka C., Roussakis A. Effectiveness of brain natriuretic peptide in predicting postoperative atrial fibrillation in patients undergoing non-cardiac thoracic surgery. Interact Cardiovasc Thorac Surg 2015 Jan [Epub ahead of print], http://dx.doi.org/10.1093/icvts/ivu454.

15. Блинов Д.С., Сернов Л.Н., Балашов В.П., Блинова Е.В., Пивкина Л.В., Гогина Е.Д., Ванькова Л.В., Вертянкин М.В., Бойко Г.Г., Красилина Т.В. Антиишемическая активность нового отечественного антиоксиданта -- производного 3-гидроксипиридина этоксидола. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2011; 152(11): 514-517.

16. Zamotaeva M.N., Inchina V.I., Chairkin I.N., Drozdov I.A. Experimental substantiation for the use of mexidol and 3-hydroxypyridine fumarate in chronic myocardial injury. Bull Exp Biol Med 2013; 155(2): 212-213, http://dx.doi.org/10.1007/s10517-013-2115-3.

17. Андреева Н.Н. Экспериментальные и клинические аспекты применения мексидола при гипоксии. Медицинский альманах 2009; 4: 193-197.

18. Бугрова М.Л., Харьковская Е.Е., Яковлева Е.И. Влияние Мексидола на предсердный натрийуретический пептид в изолированном по Лангендорфу сердце крысы. Современные технологии в медицине 2014; 6(2): 25-31.

19. Бугрова М.Л., Яковлева Е.И., Ермолин И.Л. Образование и выброс предсердного натрийуретического пептида в кардиомиоцитах под воздействием мексидола в раннем постреперфузионном периоде в эксперименте. Морфологические ведомости 2014; 2: 19-25.

20. Мухина И.В., Рахчеева М.В., Бугрова М.Л. Натрийуретические пептиды в регуляции сердечно-сосудистой системы. Нижегородский медицинский журнал 2006; 5: 96-102.

21. Корпачев В.Г., Лысенков С.П., Телль Л.З. Моделирование клинической смерти и постреанимационной болезни у крыс. Патологическая физиология и экспериментальная терапия 1982; 3: 78-80.

22. Бисерова Н.М. Методы визуализации биологических ультраструктур. Подготовка биологических объектов для изучения с помощью электронных и флуоресцентных конфокальных лазерных микроскопов. М: Товарищество научных изданий КМК; 2013; 104 с.

23. Рахчеева М.В., Бугрова М.Л. Изменение соотношения гранул А- и В-типов, содержащих предсердный и мозговой натрийуретические пептиды, в предсердных миоцитах крыс в условиях вазоренальной гипертензии. Цитология 2010; 8: 629-633.

24. Weidemann A., Klanke B., Wagner M., Volk T., Willam C., Wiesener M., Eckardt K., Warnecke C. Hypoxia, via stabilization of hypoxia-inducible factor HIF-1б is a direct and sufficient stimulus for brain-type natriuretic peptide induction. Biochem J 2008; 409(1): 233-242, http://dx.doi.org/10.1042/bj20070629.

25. Arjamaa O., Nikinmaa M. Hypoxia regulates the natriuretic peptide system. Int J Physiol Pathophysiol Pharmacol 2011; 3(3): 191-201.

26. Ramos L.W.F., Murad N., Goto E., Antфnio E.L., Silva J.A.Jr., Tucci P.F., Carvalho A.C. Ischemia/reperfusion is an independent trigger for increasing myocardial content of mRNA B-type natriuretic peptide. Heart Vessels 2009; 24(6): 454-459, http://dx.doi.org/10.1007/s00380-009-1148-z.

27. Бугрова М.Л., Яковлева Е.И., Абросимов Д.А. Взаимосвязь интенсивности синтеза, накопления и секреции предсердного натрийуретического пептида кардиомиоцитов с уровнем регуляции сердечного ритма у крыс в условиях раннего постреперфузионного периода. Современные технологии в медицине 2012; 3: 26-30.

28. Бугрова М.Л., Абросимов Д.А., Яковлева Е.И., Баскина О.С., Ермолин И.Л. Исследование предсердного натрийуретического пептида кардиомиоцитов в условиях отдаленного постреперфузионного периода в эксперименте. Современные технологии в медицине 2013; 5(4): 39-44.

29. Watson C., Phelan D., Xu M., Collier P., Neary R., Smolenski A., Ledwidge M., McDonald K., Baugh J. Mechanical stretch up-regulates the B-type natriuretic peptide system in human cardiac fibroblasts: a possible defense against transforming growth factor-в mediated fibrosis. Fibrogenesis Tissue Repair 2012; 5(1): 9, http://dx.doi.org/10.1186/1755-1536-5-9.

30. Huntley B., Ichiki T., Sangaralingham J., Chen H., Burnett ??J. B-type natriuretic peptide and extracellular matrix protein interactions in human cardiac fibroblasts. J Cell Physiol 2010 Oct; 225(1), http://dx.doi.org/10.1002/jcp.22253.

Размещено на Allbest.ru