Сравнительная характеристика методов определения скорости оседания эритроцитов

Размещено на http://www.allbest.ru/

Размещено на http://www.allbest.ru/

Государственное бюджетное профессиональное образовательное учреждение

Департамента здравоохранения города Москвы

«Медицинский колледж № 1»

ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА

Сравнительная характеристика методов определения скорости оседания эритроцитов

Специальность: Лабораторная диагностика

Форма обучения: очная

Студентка: Булатова Хаишат Хамидбиевна

Руководитель:

Марьяшина Ольга Степановна

Москва 2017

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОЭ

1.1 Практическое значение

1.2 Факторы, влияющие на СОЭ

1.3 Повышенное и пониженное значение СОЭ

ГЛАВА 2. РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Метод Панченкова

2.2 Метод Вестергрена

2.3 Автоматизированный метод

2.4 Ошибки при выполнении анализа СОЭ

2.5 Сравнение полученных результатов

2.6 Сравнение методов

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Впервые в 1918 году шведский патолог и гематолог Robert (Robin) Sanno Fеhrжus обнаружил увеличение СОЭ у беременных, а в 1931 году совместно с терапевтом Torsten Lindqvist опубликовал статью в Американском Журнале Физиологии (The viscosity of the blood in narrow capillary tubes), посвященную изучению прохождения эритроцитов через тонкие капилляры, в которой авторы указали на изменение данного показателя при целом ряде заболеваний.

Таким образом, клиническое использование этого лабораторного теста основано на почти вековом опыте. До появления специфических маркеров воспаления, увеличение показателя СОЭ считалось практически несомненным признаком воспаления.

Актуальность выбранной темы. Медицина не стоит на месте - каждый день появляются и внедряются новые диагностические приемы, позволяющие выявить причины изменений, происходящих в человеческом организме и приводящих к заболеваниям.

Несмотря на это, определение СОЭ не потеряло своей актуальности и активно используется для диагностики у взрослых и маленьких пациентов. Это исследование является обязательным и во всех случаях показательно, будь то обращение к врачу вследствие заболевания, диспансеризация или профилактическое обследование.

Данный диагностический тест интерпретируется врачом любой специальности, поэтому и относится к группе общих исследований крови. И, если анализ крови СОЭ повышен, причину врач обязательно должен установить.

СОЭ неспецифический лабораторный показатель крови, отражающий соотношение фракций белков плазмы; изменение СОЭ может служить косвенным признаком текущего воспалительного или иного патологического процесса. Несмотря на свою не специфичность, определение СОЭ всё ещё является одним из наиболее популярных лабораторных тестов для установления факта и интенсивности воспалительного процесса. Определение СОЭ в динамике, в комплексе с другими тестами, используют в контроле эффективности лечения воспалительных и инфекционных заболеваний. Таким образом, СОЭ широко используется в настоящее время, совершенствуясь с развитием современных технологий.

Цель работы: Охарактеризовать различные методы определения СОЭ, используемые в КДЛ и выявить их общие закономерности.

Задачи работы:

1. Изучить научную литературу по теме;

2. Провести анализ СОЭ методом Панченкова и Вестергрена;

3. Сравнить результаты проведенных исследований, рассмотрев недостатки и достоинства выбранных методов определения СОЭ.

Объект: гематологические методы исследования крови.

Предмет: особенности определения СОЭ методами Панченкова и Вестергрена.

Методы исследования: Поисково-информационный, поисково-аналитический, эмпирический.

Практическая значимость работы заключается в сравнении методов исследования СОЭ, рассмотрении их параметров и выборе наиболее оптимального способа проведения анализа в КДЛ.

ГЛАВА 1. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОЭ

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) - показатель, определение которого входит в общий анализ крови. Это неспецифический лабораторный скрининговый тест, изменение которого может служить косвенным признаком текущего воспалительного или иных патологических процессов, таких как злокачественные опухоли и диффузные заболевания соединительной ткани [1,с.230].

Честь введения определения СОЭ в медицинскую практику принадлежит молодому врачу, ординатору клиники Варшавского университета, в последующем известному польскому терапевту, патологу и историку медицины Эдмунду Бернацкому (1856-1911), впервые опубликовавшему свои наблюдения в 1894 году. Он разработал оригинальную методику исследования СОЭ, причем цитратная кровь помещалась в специальные градуированные цилиндрики. Э. Бернацкий впервые в клинических условиях определил величины СОЭ при самых разнообразных заболеваниях. Он также вскрыл многие стороны механизма этого феномена, высказал интересные и частично оправдавшиеся в дальнейшем соображения о механизмах увеличения СОЭ в патологических условиях (увеличение содержания фибриногена в крови, изменения концентрации электролитов и др.) [1,с.230]. Справедливо заметить, что феномен ускоренного оседания эритроцитов, вероятно, был подмечен в глубокой древности, еще во времена Гиппократа и Галена. Широко используя метод кровопусканий, врачи того времени заметили, что расслоение окрашенной и бесцветной частей выпущенной крови у многих больных выражено резче, чем у здоровых людей. Слой неокрашенной жидкости ( zona phlogistica ), образующийся при стоянии выпущенной крови, даже считался непосредственной причиной многих страданий человека. Эту «воспалительную плеву» (как materia pe с cans ) и стремились удалять из организма с лечебной целью. Не зная о работах Э. Бернацкого, в 1917 году Р. Фареус на съезде хирургов и гинекологов в Стокгольме сообщил об ускорении оседания эритроцитов при беременности, считая даже этот феномен «Реакцией на беременность» (« Schwangerschaftreaction »). Применяемый вначале в акушерстве и гинекологии, этот тест быстро вышел за их пределы, стал с успехом использоваться в клинике легочного туберкулеза и вскоре получил репутацию объективного критерия воспаления, некроза и инфекции. Категоричность термина Р.Фареуса оказалась несостоятельной; первая часть его была отброшена, появилось название РОЭ (реакция оседания эритроцитов), которым долгое время пользовались врачи. Более правильным следует считать термин «скорость оседания эритроцитов» (СОЭ), который и утвердился в настоящее время [8,с.336]. Предложенные вначале способы определения СОЭ представляли собой макрометоды и предполагали взятие крови из вены. Практически важным было предложение Т.П. Панченкова (1924) микрометода, завоевавшего широкую популярность. Определение СОЭ превратилось в одну из самых распространенных лабораторных проб. [2,с.84]. Несмотря на столь долгое время применения метода, по поводу механизма ускорения СОЭ нет единого мнения. Выявлялись многочисленные факторы, влияющие на СОЭ. Это привело к созданию значительного числа теорий, с помощью которых авторы старались объяснить ее механизм. Основываясь на изучении многочисленных публикаций и собственных данных, можно выдвинуть объяснение механизма оседания эритроцитов, приводимое ниже. Этому способствовали и многочисленные наблюдения за динамикой СОЭ у разнообразных больных и пострадавших в многопрофильной больнице [8,с.84].

СОЭ - показатель скорости разделения крови в пробирке с добавленным антикоагулянтом на 2 слоя: верхний (прозрачная плазма) и нижний (осевшие эритроциты) [20,с.150]

Скорость оседания эритроцитов оценивается по высоте образовавшегося слоя плазмы в мм за 1 час. Удельная масса эритроцитов выше, чем удельная масса плазмы, поэтому при наличии антикоагулянта под действием силы тяжести эритроциты оседают на дно. Скорость, с которой происходит оседание эритроцитов, в основном определяется степенью их агрегации, т.е. способностью слипаться вместе [19,с.150]

Агрегация эритроцитов главным образом зависит от их электрических свойств и белкового состава плазмы крови. В норме эритроциты несут отрицательный заряд (Z-потенциал эритроцитов), который обусловлен заряженными группами сиаловых кислот на эритроцитарной мембране, он способствует их взаимному отталкиванию и поддержанию эритроцитов во взвешенном состоянии. Степень агрегации эритроцитов (а значит и СОЭ) повышается при увеличении концентрации белков острой фазы (фибриноген, С - реактивный белок, гаптоглобин, альфа-1 антитрипсин, церулоплазмин, иммуноглобулины и д.р.). Напротив, СОЭ снижается при увеличении концентрации альбуминов. На Z-потенциал эритроцитов влияют и другие факторы: рН плазмы (ацидоз снижает СОЭ, алкалоз - повышает), ионный заряд плазмы, липиды, вязкость крови, наличие антиэритроцитарных антител.

Число, форма и размер эритроцитов также влияют на СОЭ. Снижение количества эритроцитов (анемия) в крови приводит к ускорению СОЭ и, напротив, повышение количества эритроцитов замедляет скорость оседания [18,с.173].

1.1 Практическое значение

- СОЭ - недорогой, простой тест на активность хронического воспаления;

- СОЭ увеличивается с возрастом, но это может просто отражать повышенную частоту заболеваний у пожилых;

- Применение СОЭ при отсутствии симптомов ограничено низкой чувствительностью и специфичностью данного анализа;

- Повышенная СОЭ - важный критерий для диагностики ревматической полимиалгии и височного артериита, но ее нормальные величины не исключают этих заболеваний;

- Когда имеются довольно веские подозрения на заболевание, СОЭ может использоваться как "показатель патологии";

- В основе очень сильного повышения СОЭ (>100 мм/ч) обычно лежит очевидная причина - чаще всего инфекционно-воспалительные процессы, злокачественная опухоль или височный артериит;

- Слабо или умеренно повышенная СОЭ без явной причины служит показанием к повторению этого анализа через несколько месяцев, но не для изнуряющих поисков скрытого заболевания [17,с.942].

При острых воспалительных и инфекционных процессах увеличение СОЭ отмечается через 24 часа после повышения температуры и увеличения числа лейкоцитов. Показатель СОЭ меняется в зависимости от множества физиологических и патологических факторов. Показатели СОЭ у женщин несколько выше, чем у мужчин. Изменения белкового состава крови при беременности ведут к повышению СОЭ в этот период. В течение дня возможно колебание значений, максимальный уровень отмечается в дневное время.

Измерение СОЭ необходимо рассматривать как скрининговый тест, который не имеет специфичности при каком-либо заболевании. Обычно исследование СОЭ назначают вместе с общим анализом крови [13,с.304].

Удельная масса эритроцитов выше, чем удельная масса плазмы, поэтому в пробирке при наличии антикоагулянта (цитрата натрия) под действием силы тяжести эритроциты оседают на дно. Процесс оседания (седиментации) эритроцитов можно разделить на 3 фазы, которые происходят с разной скоростью:

· Первая фаза: медленное оседание отдельных эритроцитов.

· Вторая фаза: образование агрегатов эритроцитов (т.н. "монетные столбики"), ускорение оседания.

· Третья фаза: образование множества агрегатов эритроцитов и их «упаковка», оседание замедляется и постепенно прекращается [15,с256].

1.2 Факторы, влияющие на СОЭ

На скорость оседания эритроцитов воздействуют многие факторы. Главными из них являются качественные и количественные изменения белков плазмы крови. Увеличение содержания крупнодисперсных белков (глобулинов, фибриногена) ведет к повышению СОЭ, уменьшение их содержания, то есть, увеличение содержания мелкодисперсных белков (альбуминов) - к ее снижению[16,с.228].

Полагают, что фибриноген и глобулины способствуют агломерации эритроцитов, увеличивая, таким образом, СОЭ. Изменение нормального соотношения альбуминов и глобулинов в сторону глобулинов может быть связано как с абсолютным повышением уровня отдельных фракций глобулинов в плазме крови, так и с относительным увеличением их содержания при различных гипоальбуминемиях[21,с.123].

Абсолютное повышение содержания в крови глобулинов, ведущее к увеличению СОЭ, может возникать в связи с увеличением а-глобулиновой фракции, в частности а-макроглобулина или гаптоглобина (плазменные глюко- и мукопротеиды оказывают существенное влияние на повышение СОЭ), а также у-глобулиновой фракции (большая часть антител принадлежит к г-глобулинам), фибриногена и особенно парапротеинов (особых белков, относящихся к классу иммуноглобулинов). Гипоальбуминемия, с относительной гиперглобулинемией, может развиться в результате потери альбуминов, например, с мочой (массивная протеинурия) или через кишечник (экссудативная энтеропатия), а также вследствие нарушения синтеза альбуминов печенью (при органических и функцией ал ьньгх ее поражениях)[20,с.125].

Помимо различных диспротеинемий, на СОЭ влияют такие факторы, как соотношение холестерина и лецитина в плазме крови (при повышении содержания холестерина СОЭ увеличивается), содержание желчных пигментов и желчных кислот в крови (увеличение их количества ведет к уменьшению СОЭ), вязкость крови (при повышении вязкости СОЭ уменьшается), кислотно-щелочное равновесие плазмы крови (сдвиг в сторону ацидоза снижает, а в сторону алкалоза повышает СОЭ), физико-химические свойства эритроцитов: их число (при уменьшении числа эритроцитов повышается, а при увеличении снижается СОЭ), величина (увеличение объема эритроцитов способствует их агломерации и повышает СОЭ), насыщенность гемоглобином (гипохромные эритроциты хуже агломерируют) [15,с.256]

Факторы, не оказывающие клинически значимого влияния

на изменения показаний СОЭ:

- ожирение;

- температура тела;

- прием пищи накануне анализа;

- аспирин;

- нестероидные противовоспалительные препараты.

1.3 Повышенное и пониженное значение СОЭ

Наряду с повышением температуры тела и величины пульса ускорение СОЭ встречается при многих заболеваниях. Изменение состава белков плазмы и их концентрации, которые являются основной причиной повышения СОЭ, - признак любого заболевания, связанного со значительным повреждением тканей, воспалением, инфекцией или злокачественной опухолью [21,с.123].

Несмотря на то, что в ряде случаев СОЭ при этих состояниях может оставаться в пределах нормы, в целом, чем выше СОЭ, тем больше вероятность наличия у больного повреждения тканей, воспалительного, инфекционного или онкологического заболевания. Наряду с лейкоцитозом и соответствующими изменениями лейкоцитарной формулы, повышение СОЭ служит достоверным признаком наличия в организме инфекционных и воспалительных процессов. В остром периоде при прогрессировании инфекционного процесса происходит увеличение СОЭ, в период выздоровления СОЭ замедляется, но несколько медленнее в сравнении со скоростью уменьшения лейкоцитарной реакции[15,с.256].

Снижение СОЭ встречается в клинической практике значительно реже и не имеет большого клинического значения. Наиболее часто снижение СОЭ выявляют при эритремии и реактивных эритроцитозах (вследствие увеличения количества эритроцитов), выраженной недостаточности кровообращения, серповидно-клеточной анемии (форма клеток препятствует образованию монетных столбиков), механической желтухе (предположительно связано с накоплением в крови желчных кислот).

Причины снижение СОЭ:

*Серповидноклеточная анемия;

*Сфероцитоз;

*Гипофибриногенемия;

*Гипербилирубинемия;

*Голодание, снижение мышечной массы;

*Прием кортикостероидов;

*Беременность (особенно 1 и 2 семестр);

*Вегетарианская диета;*Гипергидратация;

*Миодистрофии;

*Выраженные явления недостаточности кровообращения.

Причины повышения СОЭ:

*Инфекции, воспалительные заболевания, деструкция тканей;

*Состояния, приводящие к повышению содержания фибриногена и глобулинов в плазме, такие, как злокачественные опухоли, парапротеинемии (например, макроглобулинемия, множественная миелома);

*Инфаркт миокарда;

*Пневмония;

*Заболевания печени - гепатит, циррозы печени, рак и др., ведущие к выраженной диспротеинемии, иммунному воспалению и некрозам ткани печени;

*Заболевания почек (особенно сопровождающиеся нефротическим синдромом (гипоальбуминемия) и сопровождающиеся нефротическим синдромом (гипоальбуминемия) и другие);

*Коллагенозы;

*Заболевания эндокринной системы (диабет);

*Анемии (СОЭ увеличивается в зависимости от тяжести), различные травмы;

*Беременность;

*Отравления химическими агентами;

*Пожилой возраст;

*Интоксикации;

*Травмы, переломы костей;

*Состояние после шока, операционных вмешательств.

Чаще всего СОЭ используется для диагностики и контроля терапии воспалительных заболеваний. Однако сочетание факторов, увеличивающих и снижающих СОЭ, может привести к ложному результату и неправильной оценке состояния пациента.

Так же имеется ряд причин, которые влияют на результат СОЭ, что может привести к ложному результату.

Причины ложноположительного снижения СОЭ:

Морфологические изменения эритроцитов. Наиболее часто встречающиеся формы эритроцитов могут приводить к изменению агрегационных свойств эритроцитов, что, в свою очередь, повлияет на СОЭ. Эритроциты аномальной или необычной формы, такие как серповидные, с формой, препятствующей образованию столбиков, приводят к снижению СОЭ. Сфероциты, анизоциты и пойкилоциты также оказывают влияют на агрегацию эритроцитов, снижая СОЭ [17,с.942];

*Полицитемия. Оказывает влияние, противоположное тому, какое анемия оказывает на агрегацию эритроцитов;

*Значительное повышение уровня лейкоцитов;

*ДВС-синдром (из-за гипофибриногенемии);

*Дисфибриногенемия и афибриногенемия;

*Значительное увеличение уровня желчных солей в плазме крови (вследствие изменения свойств мембраны эритроцитов);

*Застойная сердечная недостаточность;

*Вальпроевая кислота;

*Низкомолекулярный декстран;

*Кахексия;

*Кормление грудью;

*Технические погрешности. Ввиду того, что СОЭ увеличивается при повышении температуры окружающей среды, охлажденные образцы крови не могут быть использованы при проведении теста. В случае, если образцы всё-таки были заморожены, перед определением СОЭ необходимо нагреть пробирку с кровью до комнатной температуры. Не менее важно, чтобы определение СОЭ производилось с использованием образцов крови, полученных за 2 ч до проведения теста. Если пробирка с кровью надолго оставлена на лабораторном столе, эритроциты принимают сферическую форму, что приводит к снижению способности к образованию столбиков[10,с.472];

*Применение на момент определения СОЭ: кортикотропина, кортизона, циклофосфамида, фторидов, глюкозы, оксалатов, хинина.

Причины ложноположительного увеличения СОЭ:

*Анемия с нормальной морфологией эритроцитов. Данный эффект объясняется изменением соотношения эритроцитов и плазмы, способствующему образованию столбиков эритроцитов в независимости от концентрации фибриногена;

*Увеличение в плазме концентрации всех белков, кроме фибриногена (М-протеина, макроглобулинов и агглютининов эритроцитов);

*Почечная недостаточность. У компенсированных пациентов почечная недостаточность, возможно, связана с увеличением уровня фибриногена в плазме;

*Гепарин. Дигидрат цитрата натрия и ЭДТА не влияют на СОЭ;

*Гиперхолистеринемия;

*Крайняя степень ожирения. Увеличение СОЭ возможно связано с повышением уровня фибриногена;

*Беременность (определение СОЭ изначально использовали для установления беременности);

*Женский пол;

*Пожилой возраст. По приблизительным подсчётам, у мужчин верхний уровень нормальной СОЭ составляет цифру, получающуюся при делении возраста на 2, для женщин - возраст плюс 10, и разделённое на 2;

*Технические погрешности. Отклонение пробирки от вертикального положения в стороны увеличивает СОЭ. Эритроциты оседают на дне пробирки, а плазма поднимается в верхнюю часть. Соответственно, тормозящий эффект плазмы ослабевает. Угол в 3° от вертикальной линии может приводить к увеличению СОЭ до 30 единиц;

*Ввведение декстрана;

*Вакцинация против гепатита В;

*Использование пероральных контрацептивов;

*Прием витамина А[3,с.36-40];

Небольшое ускорение СОЭ наблюдается у женщин во время менструации, более значительное -- во время беременности и максимальное -- к моменту родов. Чем ближе к нижнему концу пипетки находится граница между плазмой эритроцитами, тем более ускоренной считается СОЭ[9,с.720].

Следует помнить, что обильный прием белковой пищи, длительный прием соды, физиотерапевтические процедуры, введение профилактических и лечебных сывороток и вакцин, переливание крови могут сами по себе вызвать ускорение СОЭ не только в день их применения, но и на следующий день. Прием снотворных, кальция, препаратов салициловой кислоты, хинина может, наоборот, замедлять СОЭ. Температура комнаты также должна быть учтена: лучше всего определять СОЭ при температуре 15--20° С. При значительном повышении температуры (нахождение штатива с пипетками около горячих радиаторов центрального отопления, против солнца) СОЭ ускоряется[10,с.472].

Таким образом, СОЭ меняется в зависимости от целого ряда физиологических и патологических моментов. Более ста лет данный лабораторный тест применяется для количественного определения интенсивности разнообразных воспалительных процессов. Так, чаще всего увеличение СОЭ связано с острой и хронической инфекцией, иммунопатологическими заболеваниями, инфарктами внутренних органов.

ГЛАВА 2 РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнялась на базе ГБУЗ «ГКБ № 15 им. О.М. Филатова ДЗМ».

Нами было проведено исследование крови 10 пациентов хирургического отделения стационара в возрасте от 20 до 80 лет. Материалом для исследования служила капиллярная и венозная кровь. Венозная кровь доставляется в вакуумных пробирках, регистрируется в единую лабораторную базу данных. В самом процессе оседания эритроцитов выделяют 3 фазы:

1. агрегация - первичное формирование столбиков эритроцитов;

2. седиментация - быстрое появление эритро-плазматической границы - продолжение формирования столбиков эритроцитов и их оседание;

3. уплотнение - завершение агрегации эритроцитов и оседания столбиков эритроцитов на дне пробирки.

В практике КДЛ применяются следующие методы определения СОЭ:

1. метод Панченкова;

2. метод Вестергрена и его модификации;

У нас в стране широкое распространение получил метод Панченкова.

2.1 Метод Панченкова

Панченкова метод (Т.П. Панченков) - метод определения скорости оседания эритроцитов, при котором для забора и разведения крови, а также для измерения величины показателя используют одни и те же градуированные капиллярные пипетки, а для предотвращения свертывания крови применяют трехзамещенный цитрат натрия.

Наиболее распространенный способ определения скорости оседания эритроцитов. Этот способ выгодно отличается от других существующих тем, что требует незначительного количества крови, которая добывается из мякоти пальца при помощи обычного укола иглой[5,с.160].

Аппарат Панченкова представляет собой устойчивый пластмассовый штатив, представлен на рисунке 1. На нижней планке его имеются цилиндрические гнезда с резиновыми кружочками на дне. На верхней планке над каждым гнездом имеются зажимы, служащие для укрепления стеклянных капиллярных пипеток (можно делать сразу несколько определений скорости оседания эритроцитов). Капилляры укрепляются так, что их нижние заостренные концы прижимаются к резиновым кружочкам на дне гнезд, а верхние широкие концы плотно прикрываются. Расположение зажимов и гнезд обеспечивает строго вертикальное положение укрепленных между ними пипеток.

Рисунок 1

Однако нужно следить, чтобы и площадь, на которую ставится штатив, была строго горизонтальной. На пипетке, внутренний диаметр которой составляет около 1 мм, имеется 100 делений, помеченных цифрами от 0 (на верхнем конце) до 100 (на нижнем). Около метки 0 на пипетке имеется буква К (кровь), а около метки 50, т. е. посередине пипетки, -- буква Р (реактив). Расстояние между двумя соединениями делений равно 1 мм. Капилляры представлены на рисунке 2.

скорость оседание эритроцит анализ

Рисунок 2

В качестве реактива, служащего для предохранения крови от свертывания, пользуются 5% раствором лимоннокислого натрия. В соотношение 1:4, т. е. к одному объему реактива следует прибавить четыре таких же объема крови.

Определение СОЭ по методу Панченкова

1. Капилляр Панченкова промыть раствором цитрата натрия.

2. Набрать раствор цитрата до метки «Р» и выдуть на дно пробирки.

3. Тем же капилляром набирать 2 раза кровь из пальца сплошным столбиком, без пузырьков воздуха до метки «К» и внести ее в пробирку с отмеренным раствором цитрата натрия. (разведение крови 1:4) представлено на рисунке 3



Рисунок 3

4. Тщательно перемешать кровь с цитратом натрия.

5. Набирать смесь до метки «О» без пузырьков воздуха. Манипуляия представлена на рисунке 4

Рисунок 4

6. Капилляр установить в штатив в вертикальном положении, механизм представлен на рисунке 5



Рисунок 5

7. Отметить время установки капилляра.

8. Величину оседания, определить по столбику плазмы над осевшими эритроцитами через 1 час, результат представлен на рисунке 6

9. Ответ записать как величину СОЭ в миллиметрах в час (мм/ч) в бланк исследования.

Рисунок 6

Нормы по методу Панченкова:

мужчины 2-10;

женщины 2-15.

Достоинства метода:

· доступность;

· простота использования;

· не требует дорогостоящего оборудования;

· не требует отдельного помещения;

· Отсутствие необходимости венепункции (нужно 200 мкл крови);

· Может использоваться как стабилизированная антикоагулянтом капиллярная, так и венозная кровь;

Недостатки метода:

· плохая стандартизация производимых промышленностью капилляров;

· необходимостью использовать для анализа только капиллярную кровь;

· капилляр плохо отмывается при многократном применении;

· много физических и химических факторов влияет на результат.

В последние годы метод Панченкова стал применяться для определения СОЭ венозной крови, несмотря на то, что никаких научно-практических исследований по референтным величинам для этого метода, по изучению влияния различных факторов при исследовании венозной крови проведено не было. Поэтому метод Панченкова в настоящее время является источником ошибочных результатов и проблем в работе КДЛ и деятельности врачей-клиницистов, не используется в других странах (кроме стран бывшего СССР) и должен быть исключен из практики лабораторий[9,с.720].

2.2 Метод Вестергрена

Кровь может 2 часа храниться при комнатной температуре и 6 часов в холодильнике -- это не влияет на результаты исследования; Опускание столбика эритроцитов на 2 мм соответствует значению 1 мм в час, то есть метод более точен, по сравнению с Панченкова; При одном проколе вены можно взять кровь на несколько анализов, в том числе и на СОЭ. Наиболее широкое распространение в развитых странах мира для определения СОЭ получил метод Вестергрена, который с 1977 года рекомендован Международным Советом по Стандартизации в гематологии для применения в клинической практике. В классическом методе Вестергрена используют стандартные капилляры из стекла или пластика длиной 300 мм ± 1,5 мм (рабочей является длина капилляра 200 мм), диаметром - 2,55 мм ± 0,15 мм, что повышает чувствительность метода, штатив для постановки, капилляр и пробирка для забора представлены на рисунке 7,8. Время измерения - 1 ч. Для анализа может быть использована как венозная, так и капиллярная кровь [6,с.96].

Рисунок 7



Рисунок 8

Методика определения СОЭ методом Вестергрена включает следующие этапы:

1. Венозная кровь берется в вакуумные пробирки с К-ЭДТА (капиллярная кровь берется в пробирки с К-ЭДТА); пробирки представлены на рисунке 9

2. Пробу венозной (капиллярной) крови смешать с 5% раствором натрия цитрата в соотношении 4:1;



Рисунок 9

3. Произвести забор крови в капилляр Вестергрена; манипуляция представлена на рисунке 10

Рисунок 10

4. Через 1 ч измерить СОЭ по высоте столба прозрачной плазмы, результат представлен на рисунке 11.



Рисунок 11

Метод Вестергрена в настоящее время полностью автоматизирован, что существенно повышает производительность КДЛ и качество результатов. Вместе с тем, необходимо понимать, что классический метод Вестергрена имеет целый ряд модификаций, сущность которых состоит в уменьшении длины капилляра (например, используются моноветты или вакуумные пробирки с раствором натрия цитрата рабочая длина которых составляет 120 мм, а не 200 мм, как в классическом методе Вестергрена), изменении угла установки капилляра (например, ряд фирм использует установку вакуумных пробирок под углом 18°), укорочении времени для наблюдения за оседанием эритроцитов (до 30-18 мин) или сочетании этих изменений. Насколько такие модификации можно называть методом Вестергрена в научной литературе не решен [18,с.173].

Нормы:

Возраст	Нормы
новорожденные	0-2 мм/ч
в конце 1-й -- начале 2-й недели жизни	3-4 мм/ч
с конца 2-й -- начала 3-й недели жизни и до окончания полового созревания	12-17 мм/ч

Начиная с 20-летнего возраста, верхняя граница нормы, непрерывно повышается по гиперболе, причем у женщин она в среднем немного выше чем у мужчин, так что у 98% здоровых небеременных женщин в 20-летнем возрасте нормальные границы СОЭ простираются от 2 до 20 мм/ч (а у беременных до 30 мм/ч), а в 65-летнем возрасте -- от 3 до 35 мм/ч; у 98% здоровых мужчин границы нормы изменяются от значений от 1 до 15 мм/ч в 20-летнем возрасте до значений от 2 до 35 мм/ч в 65-летнем возраст [20,с.152].

Достоинства:

· возможность использования капиллярной и венозной крови;

· одноразовые капилляры для исследования;

Недостатки:

· дороговизна;

· много физических и химических факторов влияет на результат.

Соответствие результатов СОЭ, полученных методами Панченкова и Вестергрена. Результаты, получаемые в медицинских лабораториях при использовании метода Вестергрена, в области нормальных значений совпадают с результатами, получаемыми при определении СОЭ методом Панченкова. Однако метод Вестергрена более чувствителен к повышению СОЭ, поэтому результаты в зоне повышенных значений, полученные методом Вестергрена, выше результатов, которые получены методом Панченкова.

Таблица-1 Соответствие результатов СОЭ (получаемых методами Вестергрена и Панченкова)

В	П	В	П	В	П	В	П
1	1	31	27	61	48	91	66
2	2	32	27	62	49	92	67
3	3	33	28	63	49	93	67
4	4	34	29	64	50	94	68
5	5	35	30	65	50	95	68
6	6	36	30	66	51	96	69
7	7	37	31	67	52	97	69
8	8	38	32	68	52	98	70
9	9	39	33	69	53	99	70
10	10	40	33	70	54	100	71
11	11	41	34	71	54	101	71
12	12	42	35	72	55	102	72
13	13	43	36	73	55	103	72
14	14	44	36	74	56	104	73
15	14	45	37	75	57	105	73
16	15	46	38	76	57	106	74
17	16	47	38	77	58	107	74
18	17	48	39	78	59	108	75
19	17	49	40	79	59	109	75
20	18	50	40	80	60	110	76
21	19	51	41	81	60	111	76
22	20	52	42	82	61	112	77
23	21	53	43	83	61	113	77
24	21	54	43	84	62	114	78
25	22	55	44	85	63	115	78
26	23	56	45	86	63	116	79
27	24	57	45	87	64	117	79
28	24	58	46	88	64	118	80
29	25	59	47	89	65	119	80
30	26	60	47	90	65	120	81

В- метод Вестергрена

П -- метод Панченкова

Из таблицы видно методы Панченкова и Вестергрена дают сходные результаты лишь в диапазоне нормальных значений СОЭ. В области высоких значений метод Вестергрена показывает более высокие уровни СОЭ. Пример результатов СОЭ у одних и тех же пациентов, определенных методом Панченкова и методом Вестергрена [7,с.288].

2.3 Автоматизированный метод

Анализатор SRT 10/II - автоматический прибор, контролируемый микропроцессором и используемый исключительно для измерения скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Изображение прибора представлено на рисунке 12.

Рисунок 12

Простота в эксплуатации, точность и возможность получить результат, уже приведенный к температуре 18°C (согласно Манлею) делает эту систему новаторской и наиболее гибкой в данном виде исследований. Прибор может одновременно анализировать сразу десять образцов в специально изготовленных для него пробирках. Анализатор SRT 10/II следит за оседанием (седиментацией) эритроцитов в каждом образце независимо, запоминая уровни оседания эритроцитов в течение всего анализа. Прибор может использоваться с постоянной или случайной загрузкой образцов в количестве 10 пробирок каждый раз. Когда анализ одного образца закончен, он может быть немедленно заменен другим, таким образом, производительность анализатора составляет примерно 20 тестов/час. С анализатором могут использоваться только специальные вакуумные пробирки VACUETTE®, представлены на рисунке 13. Они содержат цитрат натрия 3.2%, соотношение кровь: реагент 4:1. Пробирки могут быть объемом 1,6 мл (стеклянные) или 1,5 мл (пластиковые). Технические характеристика анализатора представлены в приложение А



Рисунок 13

Пробы с кровью перемешивают и устанавливают в анализатор, манипуляция представлена на рисунке 14. Результат появится на экране через 30 минут. Эта особенность прибора позволяет проводить анализ СОЭ непосредственно в палате пациента, в пунктах приема крови и небольших лабораториях. Во время анализа SRT 10/II - анализатор следит за комнатной температурой и пересчитывает результат относительно референтного значения температуры, равного 18°C. (в соответствии с таблицей Манлея). Пересчет результатов необходим во избежание существенных вариаций значений при различных температурах анализа. Удобна функция предварительной оценки результатов: через 9 минут после помещения пробирки в анализатор, не дожидаясь завершения анализа, SRT 10/II-анализатор может показывать на дисплее предварительный результат. Предварительный результат: (через 9 минут) мм/ч.



Рисунок 14

2.4 Ошибки при выполнении анализа СОЭ

На результаты определения СОЭ методом Панченкова и классическим методом Вестергрена могут оказывать существенное влияние ряд факторов преаналитического и аналитического этапов (не связанных с заболеванием пациента) производства лабораторных анализов:

- Температура в помещении где проводится анализ (повышение температуры в помещении на 1 °С увеличивает СОЭ на 3%);

- Время хранения пробы (не более 4 ч при комнатной температуре);

- Используемый антикоагулянт (рекомендован цитрат натрия);

- Правильная вертикальность установки капилляра;

- Длина капилляра;

- Внутренний диаметр капилляра;

- Степень разведения крови антикоагулянтом (рекомендуемое разведение 4:1);

- Величина гематокрита. Низкие значения гематокрита (35%) могут вносить искажения.

Метод определения СОЭ сложен для стандартизации, что затрудняет внедрение новых способов измерения. Использование автоматических систем, показывающих удовлетворительную корреляцию с методом Вестергрена, позволило улучшить воспроизводимость, снизить влияние некоторых внешних факторов, увеличить производительность выполнения метода. И хотя определение СОЭ не относится к группе экспресс-тестов, желание врачей получить результат в более короткие сроки вполне оправдано.

2.5 Сравнение полученных результатов

Нами было проведено исследование крови 10 пациентов, СОЭ измерялось тремя методами, результаты представлены в таблице 2

Таблица-2 Результаты СОЭ

№	Результаты
	Автоматический метод (венозная кровь) мм/ч	Метод вестергрена (венозная кровь)мм/ч	Метод Панченкова (капилярная кровь)мм/ч
1	28	24	21
2	33	29	24
3	6	4	4
4	10	8	7
5	6	4	2
6	16	12	12
7	44	38	33
8	26	24	22
9	8	4	2
10	14	8	6

На основание полученных результатов была построена диаграмма (диаграмма. 1)

Из построенной диаграммы наглядно видно, что показатели СОЭ в венозной крови выше чем в капиллярной. Автоматизированный метод в сравнении с классическим методом Вестергрена также дает результаты выше. В группе пациентов с нормальными значениями диапазн значений выражен незначительно, в несколько единиц. В группе с повышенными результатами разница увеличивается, причем чем выше значение СОЭ тем шире диапазон результатов между методами.

2.6 Сравнение методов

Результаты сравнение методов определения СОЭ, представлены в таблице 3

Таблица-3 Сравнение методов СОЭ

Исследуемые параметры	Метод Панченкова	Метод Вестергрена (с венозной кровью)	Метод Вестергрена (автоматический)
Подготовка реактивов	Требуется	Не требуется	Не требуется
Время постановки	5-7 минут	1-2 минуты	1-2 минуты
Влияние факторов окружающей среды	Присутствует	Присутствует	Отсутствует
Ошибки аналитического этапа	Возможны	Исключены	Исключены

Из представленной таблицы видно, что метод Панченкова имеет ряд недостатков, автоматическая модификация по всем параметрам является предпочтительной.

Выводы по практической части:

1. Методики с использованием венозной крови дают более высокие показатели по результатам чем из капилярной крови.

2. Метод Панченкова технологически устарел, занимает больше времени, чем другие методы определения СОЭ;

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исследование СОЭ имеет практически вековую историю и за это время возник ряд модификаций этого исследования. Методика исследования СОЭ основывается на трех основных процессах: агрегация (первичное формирование столбиков эритроцитов); седиментация (быстрое появление эритро-плазматической границы - продолжение формирования столбиков эритроцитов и их оседание); уплотнение (завершение агрегации эритроцитов и оседания столбиков эритроцитов на дне пробирки). Несмотря на внедрение более специфических показателей, Определение СОЭ до сих пор остается одним из актуальных показателей. Повышение СОЭ служит достоверным признаком наличия в организме инфекционных и воспалительных процессов. В остром периоде при прогрессировании инфекционного процесса происходит увеличение СОЭ, в период выздоровления СОЭ замедляется, но несколько медленнее в сравнении со скоростью уменьшения лейкоцитарной реакции. Важный критерий для диагностики ревматической полимиалгии и височного артериита. Снижение СОЭ встречается в клинической практике значительно реже и не имеет большого клинического значения. Наиболее часто снижение СОЭ выявляют при эритремии и реактивных эритроцитозах. Показатель СОЭ меняется в зависимости от множества физиологических и патологических факторов. Показатели СОЭ у женщин несколько выше, чем у мужчин. Измерение СОЭ необходимо рассматривать как скрининговый тест, который не имеет специфичности при каком-либо заболевании. Обычно исследование СОЭ назначают вместе с общим анализом крови.

На результаты СОЭ полученные методом Панченкова влияет ряд факторов, температура окружающей среды, отсутствие прямых солнечных лучей, качество цитрата натрия, четкое соотношение крови и антикоагулянта, разница во времени постановки первого и последнего капилляра. Данную методику невозможно стандартизировать и провести контроль качества.

Необходимо отметить, что, рассмотренные два метода, метод Вестергрена и его автоматизированная модификация и метод Панченкова выполнение этих методик требует особого внимания, ведь для исследований нужно соблюдать четкое выполнение правил анализа с использованием современных разработок, не только улучшающих качество результатов теста, но и существенно повышающих безопасность пациента и персонала при взятии проб крови.

Сравнение методов показывает разницу в результатах. Метод Панченкова трудоемок и сложен в исполнении. Автоматизированная модификация метода Вестергрена более предпочтительна, т. к. исключено влияние факторов окружающей среды, отсутствуют возможные ошибки на аналитическом этапе.

Таким образом, изучив научную литературу по теме, проведя анализ СОЭ методом Панченкова и Вестергрена, сравнив результаты проведенных исследований, рассмотрев недостатки и достоинства выбранных методов, задачи исследования были выполнены, цель работы достигнута.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абрамов М.Г. Гематологический атлас. - М., 2004 - 230с.

2. Алимова Е.К. Морфологическому составу и биохимические показатели крови. Ростов н/Д, 2002- 84с.

3. Байдун Л.В., Логинов А.В. Значение автоматического анализа крови в клинической практике //Гематология и трансфузиология.- 1996.-Т.41, №2.- С.36-40.

4. Барановская И.Б., Зенцова О.А., Самохина О.Ф и др. Новые показатели общего анализа крови в клинической практике // Клиническая лабораторная диагностика. -2013 - № 12. - С.19-23.

5. Батуев А.С. и др. Биология. Человек. М.: Дрофа, 2002-160с.

6. Блиндарь В.М. Гематологические методы исследования. Клиническое значение показателей крови. Руководство для врача.-М.: Медицинское информационное агентство, 2013 - 96с.

7. Захаров В.Б. Анатомия и физиология человека. М: Просвещение, 2004- 288с.

8. Камышников В.С. Норма в лабораторной медицине: Справочник/ В.С.Камышников. - М. : МЕДпресс-информ, 2014. - 336 с.

9. Камышников В.С. Клиническая лабораторная диагностика. М.: МЕД-пресс-информ, 2015 - 720 с.

10. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии / руководство по клинической лабораторной диагностике: 2т. [В.В. Алексеев] под. ред., А.И. Карпищенко. - 3-е изд., - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2014. - 472 с.: ил.

11. Леонтьева М.Н., Маринова К.В. Анатомия и физиология детского организма. М.: Просвещение, 2004 -124с.

12. Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е., Долгов В.В. Лабораторная гематология. - М., 2006. - 115с.

13. Луговская С.А. Лабораторная гематология / С.А. Луговская., М.Е. Почтарь., В.Т. Морозова., В.В. Долгов Москва.: 2012. - 304 с.

14. Льюис, С.М. Практическая и лабораторная гематология / С.М. Льюис, Б. Бэйн, И. Бэйтс; пер. с англ. под ред. А.Г. Румянцева. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013.-516 с.

15. Сапин М.Р. Анатомия и физиология человека.М.: Просвещение, 2005 - 256 с.

16. Татаринов В.Г. Анатомия и физиология. - М.: Медицина, 2003 -228с.

17. Тиц Н. (ред.). Энциклопедия клинических лабораторных тестов: Пер. с англ. - М.: Лабинформ, 2011. - 942с.

18. Чижевский А.Л., Биофизические механизмы реакции оседания эритроцитов. - Новосибирск: Наука, 2010. - 173с.

19. Атлас клеток крови и костного мозга / Под ред. Г.И Козинца. - М.,2001. - 150с.

20. Руководство по гематологии / Под ред. А.И. Воробьева. - М., 2003.

21. Панченков Т.П. Определение оседания эритроцитов при помощи микрокапилляра // Врач. дело. - 2000.

ПРИЛОЖЕНИЕ А

Технические характеристики анализатора SRT 10/II

Таблица А1

Технические характеристики
Область применения	Определение скорости оседания эритроцитов
Принцип определения	Оптический (пК-датчик)
Методика определения	Референсный метод Вестергрена
Размеры, ВхШхГ	200х280х200мм
Вес	2кг
Электропитание: Внешнее питание Питание прибора	100-240В, 0,5 А, 50/60 Гц 12В/1,5А
Условия работы	Температура окружающей среды 15-13 0 С, влажность 45%-85%
Каналы для проб	10
Время измерения пробы, мин	30
Производительность, тестов/час	20
Одновременная загрузка, проб	10
Возможность дозагрузки	Непрерывная
Цикл измерения, мин	3,0
Число циклов измерения на каждый тест	10
Внешний термопринтер (2 стоки/сек, термобумага 57мм)	опция
Возможность подключения стороннего принтера	Наличие, «аппаратный» принтер
Интерфейс стороннего принтера	RS-232
Эксплуатационные свойства:
Механическая/Оптические точность определения	+/-0,2мм (Разрешение зависит от версии встроенного программного обеспечения)
Точность результата	+/-1,0мм
Воспроизводимость метода	C.V. <5%
Приведение результатов к температуре 18 0 С (Таблица Манлея)	Автоматическое
Чувствительность к уровню наполнения кровью пробирки	Допустимый диапазон наполнения пробирки: -10/+4 от номинального
Диапазон измерения	1-140 мм/ч
Предварительная оценка результатов, мин	9
Хранение результатов измерений в памяти	500 результатов
Возможность получения графика седиментации	Наличие
Используемые пробирки	Вакуумные пробирки Vacuette, пластиковые, с цитратом натрия 3,2% (1:4) объем 1,5 мл

Размещено на Allbest.ru