Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных инфекций

На четвертом этапе учитываем результаты. Это энтеропатогенная КП.

Серодиагностика является вспомогательным методом и направлено на направлена на обнаружение антител различных классов. Наличие в сыворотке АТ только класса Iq G характерно для бактерионосительства. Уточнить диагноз эшерихиоза помогает обнаружение АТ в РА с гретой культуроу аутоштамма. Результаты исследования сывороток имеют значение для эпидемиологического анализа.

Бактерифаг брюшнотифозный поливалентный с кислотоустойчивым покрытием. Бактериофаг брюшнотифозный поливалентный с кислотоустойчивым покрытием - медико-биологический препарат. Содержит брюшнотифозный бактериофаг. В ЧК возбудителя брюшного тифа выделяют с последующим культивированием в ней бактериофага с последующим получением фильтрата фаголизата и определением титра фага. Используется для лечения и профилактики брюшного тифа в возрасте от 6 месяцев. Кратность и длительность приема определяется врачом.

Диарейныеэшерихии. Их биологические свойства. дифференциация патогенных эшерихий от представителей нормальной микрофлоры.

. Патогенные эшерихии, кот. являются возбудителями кишечного эшерихиоза, ОКИ, называются диареегенными.

4 основные категории: энтеротоксигенные КП, энтероинвазивные КП, энтеропатогенные КП, энтерогеморрагические КП. Эти виды отличаются по антигенной структуре и вызывают характерные для каждого вида кишечные заболевания. Повреждающее действие на клетки и ткани оказывает эндотоксин, кот. выделяется при гибели микроорганизма. Способность вызывать патологические процессы связана с наличием у КП фимбрий, обеспечивающих прикрепление к эпителиальным клеткам. Адгезины фимбрий обладают специфичностью узнавания комлементарных им рецепторов

ЭТКП является возбудителем холероподобных заболеваний у детей и взрослых за счет действия токсина, сходного с холерогеном, токсин термолабильный. Большое количествоэндотоксинов высвобождается при колонизации ими слизистой оболочки. Это приводит к нарушению водно-солевого обмена, приводя к водянистой диареии. Воспалительной реакции нет. Механизм развития диарейного сидрома связан с активацией аденилатциклазы кишчнника. Заражение ЭТКП происходит водным и алиментрным путями.

ЭИКП адгезируются на поверхности эпит. клеток слизистой оболочки тонкой кишки, проникают в эпителиоциты в цитоплазме, которых они размножаются. Клетки при этом гибнут-возникает язвенно-катаральное воспаление. Клинически это проявляется дизентериеподобным синдромом. Водный и алиментарный пути заражения

ЭПКП размножается на поверхности эпителия тонкого кишечника с разрушением микроворсинок и повреждения апикальной поверхности эпителия. Возникают эрозии. Попадание бактерий в макрофаги и лейкоциты приводит к бактеремии (после разрушения фагоцитирующих клеток). Контактно-бытовой путь заражения.

ЭГКП способна вызывать кровавый понос с последующим осложнением в виде гемолитического уремического синдрома, тромбоцитопенической пурпуры. Источник-крупный рогатый скот и овцы. Путь передачи алиментарный через мясо, прошедшее недостаточную термическую обработку. Механизм действия такой же, как и у ЭПКП.

Эти типы КП различаются по антигенной структуре, а именно по О-АГ. Для определения О-АГ в ряд пробирок с диагностическими сыворотками вносят гретую (кипяченную в течние1-2часов) взвесь микроорганизмов. Кипячение разрушает поверхностно расположенный К-АГ, кот. мешает определению О-АГ. Через сутки инкубирования при 37град. гомологичные сыворотке штаммы агглютинируются до титра. Культуру, давшую развернутую РА с одной из сывороток, сеют на дифференциальные среды для окончательной идентификации.

Вакцина тифозно-паратифозная столбнячная химическая сорбированная. Вакцина тифозно -паратифозная, столбнячная сорбированная- медико -биологический препарат. Содержит полные антигены возбудителя брюшного тифа и паратифов А и В, а также столбнячный анатоксин, сорбированные на гидроокиси аллюминия. Предназначена для профилактики брюшного тифа, паратифов и столбняка. Вводят однократно подкожно. Ревакцинацию проводят только по эпид. показаниям.

Столбнячный анатоксин- обезвреженный токсин получают путем воздействия 0, 4% формальдегида, 37гр., В течение 3-4 недель. Полученный анатоксин подвергают очистке и концентрированию физико-химическими методами для удаления балластных веществ. К такому анатоксину добавляют адъюванты. Полученные таким образом препараты наз-ся очищенными сорбированными анатоксинами.

Эшерихии, их основные свойства (морфологические, культуральные, ферментативные, антигенные).

Семейство: Enterobacteriacae

Род: Esherichia

Вид: E. coli

Морфология: прямые Гр - палочки, размер 1: 5*0. 4: 0. 8 мкм, подвижные за счёт перетрехиально расположенных жгутиков, спор не образует.

Ферментативные свойства. Обладают дыхательным и бродильным метаболизмом. Оксидазоотрицательны, каталазоположительны. Способны восстанавливать нитраты, за счёт наличия нитратредуктазы

Биохимические свойства. 1) продуцируют кислоту при ферментации глюкозы; 2) ферментация лактозы; 3) не образуют сероводород; 4) продуцируют индол.

Культуральные свойства. На плотных средах образуют колонии S-R формы

Растут на простых питательных средах, большинство культивируется при t=37 гр.

Факультативные анаэробы.

Антигенные свойства: E. coli

1) Имеет соматический О-антиген, определяющий серогруппу, 171 разновидностей О-антигенов

2) поверхностный К-антиген (А, В, L-отличающиеся по чувствительности к температуре.

3) типоспецифический Н-антиген, определяющий серовар.

Резистентонсть: в течении нескольких месяцев сохраняется в воде и почве. Погибает при нагревании до 55 гр. В течении 60 мин., при 60 гр. -15 мин.

Микробиологическая диагностика пищевыхтоксикоинфекций, вызываемых протеем.

Пищевые токсикоинфекции отличаются от интоксикации тем, что в первом случае в организм могут попасть не только микроорганизмы, но и готовые экзотоксины.

Материал для исследования отбирает врач: рвотные массы, остатки пищи.

Бактериальный метод проводится длительно, поэтому для оказания быстрой своевременной помощи используется экспресс-диагностика: РН, РИФ, ИФА.

В основе РН лежит способность специальной антитоксической сыворотки нейтрализовать экзотоксин. Для проведения реакции исследуемый материал смешивают с антитоксической сывороткой, выдерживают в термостате и вводят животным (морским свинкам, мышам). Контрольным животным вводят фильтрат исследуемого материала, не обработанный сывороткой. В том случае, если произойдёт нейтрализация экзотоксина антитоксический сывороткой, животные опытной группы останутся живыми. Контрольные животные погибнут в результате действия экзотоксина.

Антитоксические сыворотки для людей получают путем гипериммунизации лошадей.

Введение осуществляется по методу Безредки, для профилактики сывороточной болезни: вначале вводят небольшую дозу (0, 01; 0, 1 мл), а затем через 1-1, 5 часа-основную дозу, для адаптации организма к препарату.

Необходимо выяснить источник инфекции для предупреждения многочисленных заболеваний, чаще всего это мясо крупного рогатого скота.

Бактериологический метод исследования: Не уверена, что правильно. По-моему это здесь писать не нужно.

На первом этапеиз исследуемого материала делают посев на среду Эндо и инкубируют в термостат на 24ч, 37гр. для получения изолированых колоний.

На втором этапе производим макроскопию и микроскопию полученных колоний. Макроскопия-???

Микроскопия-Гр-палочки

Далее делаем посев на скошенный агар или на среду Ресселя. Инкубируем на24ч, 37гр. для выделения чистой культуры.

На третьем этапе тоже проводим макроскопию-гомогенный ползучий, образуя роящиеся Н-колонии рост.

Микроскопия- Гр-палочки. Это проверка чистоты культуры. Пересев на пестрый ряд: ферментируют углеводы с образованием кислоты и газа, продуцируют сероводород, индол. Определяем чувствительность к фагу, используя протейный бактериофаг. Микроорганизмы сеют газоном на чашки Петри, разделяют на сектора, затем добавляют бактериофаг и если некоторое время образуются образуются стерильные пятна, значит это действительно протеи, также определяют чувствительность к антибиотикам, используя фильтровальную бумагу с антибиотиком. Инкубируем в термостат на24ч, 37гр.. Выявляем зоны лизиса.

На четвертом этапе производим учет результатов. Возбудитель протеи чувствителен к тому или иному антибиотику.

Вакцина брюшнотифозная споровая, обогащенная Vi-антигеном

Вакцина брюшнотифозная споровая, обогащённая Vi-аг- МБП, содержит капсюлярный антиген возбудителя брюшного тифа.

Состоит из двух компонентов: сухой брюшнотифозный спиртовой вакцины и раствора Vi-аг, кот. соединяются непосредственно перед применением.

Раствор Vi-аг- поверхностый аг выделенный из лиофилизированных микробных клеток S. tiphi

1 мл комплексного препарата содержит 500 млн микробных клеток и 400 мкг Vi-АГ

Используется для профилактики брюшного тифа.

Значение нормальной микрофлоры.

Микрофлора- стабильное сообщество микроорганизмов, т. е. микробиоциноз. Место обитания сообщества микроорганизмов наз-ся биотопом.

- большинство микроорганизмов, входящие в состав нормальной микрофлоры, выделяют кислоты, лизоцим, спирты, что оказывают тормозное влияние на развитие гнилостных бактерий в кишечнике.

- способствуют пищеварению: расщепление клетчаткки, пектинов.

с деятельностью микроорганизмов связаны обмен липидов, различных желчных кислот, различных белков до конечных продуктов.

-участие в процессах обезвреживания токсинов, поступающих с пищей

-НМ способствует всасыванию из кишечника ионов Fe, вит. Д, участвует в образовании вит. К., фолиевой, никотиновойкислот и т. д., участвует в водно-солевом обмене.

НМ обеспечивает образование Ig A, не позволяет возбудителям проникать в ткани.

-у взрослого человека по весу в толстом кишечнике нахдится 1, 5 кг полезных микроорганизмов.

-НМ выполняет антимутагенную функцию, разрушая канцерогенные вещества в кишечнике.

-НМ участвует в переваривании и детоксикации субстратов и метаболитов, что сравнимо с функцией печени.

-участие в колонизационной резистентности.

Диагностика дисбактериоза.

Посевы изучают на наличие патогенных микроорганизмов и на нарушение соотношения различных видов микробов. Результаты исследования следует считать объективными при анализе роста изолированных колоний в том числе, если можно изучить морфологию и подсчитать количество колоний на чашку Петри. После идентификации проводят пересчет содержания микроорганизмов каждого вида на 1 г исследуемого материала. При обнаружении патогенной микрофлоры необходимо изучить ее чувствительность к антибактериальным препаратам и бактериофагам.

Отбор и доставка материала на дисбактериоз

Материалом для исследования является кал не позже 2 часов после дефекации.

Для получения достоверного результата стул должен быть обязательно утренним, самостоятельным, не на фоне лечения. У грудных детей забирать материал не с памперсов и пеленок.

Одну столовую ложку фекалий помещают в прокипяченную стеклянную баночку.

Лабораторная диагностика дисбактериоза кишечника

Метод исследования - бактериологический: мерный посев исследуемого материала с целью определения количества микроорганизмов наиболее значимых групп.

Этапы исследования:

*приготовление серийных разведений суспензии испражнений;

*посев на питательные среды из разведений;

*учет результатов посева и ориентировочная идентификация микроорганизмов;

*оценка результатов.

На первом этапе 1 грамм нативных фекалий растирают в ступке с 9 мл физ. растовора. из этого разведения делают посев на плотные питательные среды (среда Плоскирева или Левина). Одновременно делают массивный посев нативного кала на жидкие среды обогащения (Мюллера, селенитовая). Из основного разведения 1: 10 делают дополнительные 100-кратные, затем вносят по 1 мл на среды (Эндо, Левина) и

0, 01 мл на 3-5% кровяной агар. Для получения роста изоллированных, доступных для счета колоний, применяют стеклянные бусы. Стерилизованные бусинки опускают в чашку с посевным материалом, при лёгком покачивании чашки с бусами в течении 1 мин материал равномерно распределяется по питательной среде. Посев бусами начинают с кровянного агара, затем бусы переносят на чашки с другими средами, все седы помещают в термостат (37 гр., 24 ч)

На втором этапе на среде Эндо посчитывают число и процент лактозонегативных бесцветных колоний (по отношению ко всему числу выросших колоний). Колонии со слабовыраженными ферментативными свойствами (слабое разложение лактозы-розовые колонии) подсчитывают по отношению к общему числу колоний. С чашек со средами (Эндо, Левина, Плоскирева) выделяют не менее 4-5 колоний отличающихся по морфологии окраски. Пересевают на среды Реселла или на среду Олькеницкого, а так же в пробирку с бульоном, под пробку которой подвешена индикаторная бумажка для определения индола. В дальнейшем лактозонегативные культуры изучают прежде всего в отношении энтеробактерий (33 вопрос)

Рост микробов рода Протея характеризуется разложением мочевины и окрашиванием среду Ресселя фиолетово-коричневый цвет. Необходимо делать расчеты всех микроорганизмов, входящих в состав микрофлоры. Определить чувствительность к антибиотикам.

Факторы, влияющие на состав нормальной микрофлоры

Лечение и профилактика дисбактериозов.

Дисбактериоз - состояние, развиваются в результате утраты нормальных функций микрофлоры. При дисбактериозе происходят стойкие количественные и качественные изменения бактерий, входящих в состав НМ.

Развитию дисбактериоза способствует:

1) длительное применение антибиотиков.

2) снижение местного и общего иммунитета

3) чрезмерное использование антибактериальных средств

4) нарушения в гормональной системе организма

5) общее ухудшение экологии, несбалансированное питание, низкое качество воды.

6) раннее искусственное вскармливание

Для восстановления нормальной микрофлоры

а) проводят селективную деконтаминацию-избирательное удаление из пищ. тракта аэробных бактерий и грибов для повышения сопротивляемости организма к инфекционным агентам.

б) назначают препараты пробиотиков (эубиотиков), полученные из лиофильно высушенных живых бактерий-представителей нормальной микрофлоры кишечника-бифидобактерий (бифидумбактерии), кишечной палочки (колибактерин), лактобактерий (лактобактерин) и др.

Профилактика:

1) во время беременности необходимо отказаться от использования лекарственных препаратов, в частности антибиотиков

2) постоянно употреблять в пищу продукты, богатые бифидо- и лактобактериями, а также взять себе за правило 1-2 раза в полгода проводить лечбно-профилактический курс Нормофлоринами Л, Б и Д, а также Зостерин-Ультра 30%.

3) строго следить за питанием, обязательно включать в рацион кисломолочные продукты, обогащенные микрофлорой, употреблять биологически активные добавки, поливитамины, полиферменты, а также противогрибковые препараты (пребиотики и пробиотики), создающие благоприятные условия для роста собственной микрофлоры.

4) беспорядочный прием антибиотиков или гормонов приводит к очень тяжелым и стойким нарушениям микробиоценоза.

5) Рациональное питание

Размещено на Allbest.ru