Заболевания человека, вызываемые микоплазмами

Размещено на http://www.allbest.ru/

Введение

В последнее время резко возросла частота вирусной, микоплазменной и смешанной инфекции, борьба с которыми представляет значительные трудности в связи с развивающейся устойчивостью к антибиотикам и особенностями ответных реакций организма. Заболевания человека, вызываемые микоплазмами, объединяют в группу микоплазмозов. Возбудители этой группы инфекций - микоплазмы - являются самыми мелкими, свободно живущими прокариотами. Согласно современной классификации, они относятся к семейству Мycoplasmataceae (N. Romano, et al, 1984). Это семейство разделяют на 2 рода - род Мycoplasma, включающий около 100 видов, и род Ureaplasma, в котором насчитывается только 3 вида. Широкий спектр заболеваний, вызываемых этими микроорганизмами, заставляет ученых в последнее время пристально изучать микоплазмы. Из числа микоплазм, выделенных от человека, 5 видов - M. pneumonie, M. hominis, M. genitalium, M. fermentans, U. urealiticum условно патогенны для человека.

M. pneumonie являются возбудителями респираторного микоплазмоза, М. fermentans и М. penetrans, по данным исследований последних лет, играют определенную роль в развитии СПИДа, а три другие - микоплазмоза урогенитального тракта.

Какова роль микоплазм в организме человека?

В организме человека с разной частотой встречаются 14 видов микоплазм, но способны вызвать болезнь далеко не все из них:

Mycoplasma pneumoniae (микоплазма пневмоние) возбудитель первичной атипичной пневмонии и микоплазменного бронхита (легочный микоплазмоз) у взрослых и детей.

Mycoplasma hominis (микоплазма хоминис), Mycoplasma genitalium (микоплазма гениталиум), Mycoplasma fermentans (микоплазма ферментанс), Ureaplasma urealyticum (уреаплазма уреалитикум) - обитает в мочеполовых путях здоровых людей. Предполагается, что именно этот вид микоплазм является возбудителем микоплазмоза половых органов (урогенитальный микоплазмоз).

Цель: Ознакомится с историей открытия и исследований микоплазм, их разнообразии, биологических свойствах и распространении.

Познакомится с современными представлениями о микоплазмах и заболеваниями вызываемыми микоплазмами -- микоплазмоз.

Задачи:

Дать представление о классификации микоплазм, их распространении.

Изучить общую характеристику микоплазм, биологические свойства, их морфологию, физиологию, устойчивость.

Ознакомится с заболеваниями,вызываемые микоплазмами.

Познакомить с диагностикой и подавлением микоплазменных инфекций.



1. Микоплазмы: история открытия и изучения: до 1960 г.

респираторный микоплазмоз инфекция

Открытие микоплазм произошло в конце XIX в. в связи с попытками выяснения природы плевропневмонии крупного рогатого скота (КРС) - смертельного заболевания животных, вспышки которого регистрировались в Европе с середины XVI в. Плевропневмония КРС сопровождается накоплением экссудата в соединительной ткани легких. Инъекции нескольких капель этой жидкости здоровому животному достаточно для возбуждения заболевания. В 1860 г. в Англии от этой болезни погибло более 60000 коров. Попытки выявить возбудителя в вирулентной жидкости путем микроскопических исследований и культивирования на питательных средах долгое время оказывались безуспешными. Наконец, в 1898 г. в лаборатории Пастера патогенный агент удалось выделить (Nocard et al., 1898). Выяснилось, что возбудитель плевропневмонии КРС способен проходить через асбестовые фильтры, а культивирование его возможно лишь на богатых средах, содержащих сыворотку крови. Возбудитель плевропневмонии КРС сначала был назван Asterococcus mycoides и лишь позднее - Mycoplasma mycoides. В 1923 г. из тканей овец, больных инфекционной агалаксией, был выделен микроорганизм, по свойствам похожий на возбудителя плевропневмонии КРС. Этот агент вызывал у животных воспаление молочных желез и суставов и заболевание глаз, приводившее к слепоте. В настоящее время этот микроорганизм известен как Mycoplasma agalactica. Все выделенные позднее микроорганизмы, характеризующиеся фильтруемостью и одновременно способные расти на стерильных средах, получили название PPLO (pleuropneumonia-like organisms) . В 40-х годах было установлено (Eaton et al., 1944, цит. по: Тимаков, Каган, 1967), что интраназальная инокуляция мокроты людей, больных первичной атипичной пневмонией (ПАП), хлопковым крысам и хомячкам вызывает у животных развитие негнойных пневмоний. Вскоре после этого были выявлены фильтруемость и резистентность возбудителя к пенициллину, а также возможность воспроизведения пневмонии при инокуляции его добровольцам. Возбудитель ПАП был назван агентом Итона и условно отнесен к вирусам. Доказательства микоплазменной природы агента Итона были получены после того, как микроорганизм удалось культивировать на бесклеточной среде оригинальной прописи (Chanock et al., 1961). Инфекционный агент был назван Mycoplasma pneumoniae, а его патогенность была подтверждена при заражении добровольцев чистой культурой микоплазмы (Вrunner et al., 1972).

Начиная с 1937 г. микоплазмы выделяют из урогенитального тракта человека (Тимаков, Каган, 1973). Эти микоплазмы вначале подразделяли по размерам и морфологии колоний на виды, образующие классические двухфазные колонии (M. hominis, M. fermentans), и Т-штаммы (Ureaplasma urealyticum), получившие такое название из-за малого размера колоний. Впервые U. urealyticum была выделена от мужчины, больного негонококковым уретритом (НГУ), в 50-х годах (Shepard, 1957). Однако этиологическая роль этой микоплазмы в развитии НГУ (и, следовательно, патогенность уреаплазмы для человека) была доказана в исследованиях по воспроизведению заболевания у добровольцев значительно позднее (Taylor-Robinson, McCormack, 1979).

Несмотря на то, что с момента открытия микоплазм прошло более 100 лет, природа этих микроорганизмов для их исследователей в значительной мере остается загадкой. Нет другой группы бактерий, которая вызывала бы столько недоразумений при их идентификации. Поначалу микоплазмы считали вирусами, поскольку они могли проходить через фильтры, препятствующие прохождению обычных бактерий. В 30-х годах в результате выяснения природы вирусов стало ясно, что микоплазмы и вирусы представляют различные группы микроорганизмов. Однако микоплазма, обнаруженная в конце 80-х годов у ВИЧ-инфицированных пациентов с синдромом приобретенного иммунодефицита, опять была принята за новый вид вируса.

Достигнутые в 60-х годах успехи в изучении ультраструктуры микоплазм, их клеточной мембраны, генома и метаболизма способствовали признанию независимого таксономического статуса микоплазм и определению их как мельчайших и наиболее примитивно организованных самореплицирующихся организмов, принадлежащих к группе грамположительных бактерий.

2. Микоплазмы: история открытия и изучения: после 1960 г.

Начало современной истории изучения микоплазм связано с реализацией в 60-х г. проекта по выявлению на Земле самых простых форм жизни и проверке концепции "минимальной клетки".

Первый крупномасштабный проект по прочтению всего генома микоплазмы был начат в 1990 г. в Гарвардской геномной лаборатории. Однако выбор объекта - M. capricolum - оказался неудачным, отчасти по причине сравнительно большого размера генома этой микоплазмы (более 1000 т. п. о.). В 1995 г., когда финансирование проекта было завершено, только 20% генома было секвенировано и проанализировано (Bork et al., 1995). В этой работе впервые были получены данные о значительной части генома M. capricolum, однако обобщение неполных данных могло бы привести к ошибочным выводам.

В Лаборатории молекулярной биологии (Гейдельбергский университет) под руководством профессора Р. Геррманна (R. Herrmann) для секвенирования был выбран геном M. pneumoniae размером около 800 т. п. о. За три года напряженной работы лаборатории поставленная задача была решена (Himmelreich et al., 1996). Авторы впервые сконструировали космидную библиотеку, а затем секвенировали космиды и расположили их в исходном порядке, так что геном M. pneumoniae был неоднократно прочтен в обоих направлениях (Himmelreich et al., 1996). Однако группа Р. Геррманна оказалась не первой, представившей полную нуклеотидную последовательность генома микоплазмы.

Почти одновременно сотрудники этого института приступили к расшифровке генома микоплазмы - M. genitalium. Эффективность работы команды по секвенированию генома M. genitalium была обеспечена мощью секвенирующего и информационного оборудования TIGR. Первая экстракция ДНК из клеток M. genitalium была выполнена в начале января 1995 г., а результаты определения полной нуклеотидной последовательности генома и ее анализ были представлены в журнале "Science" уже к 11 августа 1995г. (Fraser et al., 1995). Это стало возможным в результате применения стратегии "shotgun" к целому геному без предварительного построения и упорядочения космид.

M. genitalium, являясь самым малым среди микоплазм (и, таким образом, самым малым среди известных свободноживущих организмов), представляет особый интерес. Предполагают, что этот геном содержит минимальный набор генов, необходимых для независимой жизни.

Вскоре после опубликования полной нуклеотидной последовательности геномов M. genitalium и Н. influenfae появилась полная последовательность генома M. pneumoniae, а в начале 2001 г. была представлена нуклеотидная последовательность генома еще одной микоплазмы - Ureaplasma urealyticum, что позволило описать клеточные процессы микоплазм в терминах молекулярной биологии, а также провести сравнительный анализ полных геномов микроорганизмов и выявить особенности их эволюции.

3. Биологические свойства

Морфология. Микоплазмы обладают полиморфизмом: имеют вид кокков, нитей, ветвистых структур. Клетки имеют различную величину, которая по колеблется от 125 до 600 нм. Фильтруются через бактериальные фильтры. Грамотрицательны. Большинство - факультативные анаэробы, но имеются облигатные аэробы. Неподвижны. Вместо клеточной стенки они имеют трехслойную мембрану, цитоплазму с ядерной субстанцией, гранулами и вакуолями. Мембрана состоит из полярных липидов и протеинов. В отличие от бактериальных клеток в состав микоплазм входит стерол, составляющий до 20 % общего мембранного липида. Основным компонентом паразитических видов является свободный и этерифицированный холестерин, обеспечивающий энергию и структурную организацию клетки.

Химический состав клетки: состоит из белка в количестве 59,80 %, общего азота -- 11,2 % нуклеиновых кислот -- 6,63 %, липидов -- 5,10 %, и жирных кислот -- 2,35 %. Количество белка в сухой массе микоплазм колеблется от 54 до 62 мг %, в его состав входит до 17 аминокислот. Кроме этого, белковый компонент включает различные ферменты, играющие основную роль в метаболизме микробной клетки.

Геном клетки микоплазм состоит из циркулярной двух спиральной ДНК. При этом репликация генома происходит, как правило, в одной точке роста. Полагают, что форма клетки зависит от цикла развития микроорганизма.

Физиология. Микоплазмы, в силу своих структурных особенностей, слабо адаптируются на питательных средах. Одни штаммы вызывают помутнение среды, другие образуют легкую пленку. Одни штаммы растут в верхнем слое питательной среды, другие -- в придонной части. На полужидких средах с ростовыми добавками микоплазмы растут по уколу или образуют взвешенные крошковатые колонии.

На плотных питательных средах микоплазмы формируют характерные колонии, напоминающие яичницу-глазунью. При этом в первичных посевах рост начинается на 3 и 7 сутки, адаптированные штаммы растут значительно быстрее. В случае длительного культивирования микоплазмы в глубине агаровой среды образуют полосы преципитации, являющиеся следствием ферментной активности. Колонии прорастают глубоко, поэтому их снимают вместе с агаром. Размер колоний не превышает 2 мм. Бывают также колонии меньших размеров, которые можно видеть, вооружившись лупой или микроскопом.

Колонии микоплазм, изолированные из патологического материала и принадлежащие разным видам, морфологически сходны. Подмечено, что увеличение периода инкубации повышает частоту выделения патогена. Поэтому посевы на питательных средах рекомендуется выдерживать до 10 дней.

Рост микоплазм определяется присутствием различных питательных веществ. Из белковых веществ для их роста нужен альбумин, стерины, углеводы и витамины. Они нуждаются в РНК и ДНК и муцине. Микоплазмы и процессе роста избирательно потребляют аминокислоты, к тому же необходимо, чтобы эти аминокислоты были в определенных соотношениях. Незаменимыми при этом оказались аргинин, изолейцин, метионин, фенилаланин, аспарагин. Присутствие аминокислот, а также ДНК особенно необходимо в первичных посевах, когда микоплазмы еще не адаптировались к новым условиям. Подмечена также потребность микоплазм в фосфолипидах, солях желчных и жирных кислот.

В процессе изучения метаболизма установлена биохимическая активность микоплазм. На основе этого признака микоплазм разделяют на ферментативно активные и ферментативно неактивные. Первые сбраживают различные сахара, вторые не обладают таким свойством.

Существует несколько гипотез репродукции микоплазм. Одна из них представляет их развитие как последовательную смену пяти фаз: зернистой, волокнистой, разветвления, образования цепочек и их распада на зерна. Согласно второй теории цикл развития микоплазм состоит из двух фаз. В первой фазе происходит образование гранул, во второй -- разрыв волокон и отпочковывание шаровидных телец. Существует также мнение, что размножение микоплазм происходит по типу аутолиза, в результате которого появляются вакуоли, наполненные волокнистыми структурами. В последующем стенка вакуоли разрывается, содержимое оказывается в окружающей среде и цикл репродукции повторяется. Исследования в световом и фазовоконтрастном микроскопах показали, что началом репродуктивной субстанции является элементарное тельце, из которого вырастает гомогенная нить, несущая терминальное образование, такой же величины, что и элементарное тело. На весь цикл образования микробной клетки уходит 12--18 часов. Полагают о наличии в структуре микоплазм мицелиальных образований, хорошо просматриваемых при электронной микроскопии. Считают, что характер мицелия влияет на форму колоний. На этой основе различают три формы колоний: тип А, характеризующийся длиннонитчатым мицелием, тип В -- с коротким, скудно развивающимся мицелием; третий тип -- мицелий занимает промежуточное положение. Развитие мицелия обуславливается составом питательной среды, в частности, присутствием холестерина и видовой принадлежностью сыворотки.

По форме и архитектурному оформлению микоплазмы сходны с Л-формами бактерий. Последние от них отличаются врастанием в среду колоний плотным их центром с нежным кружевным краем. Л-формы имеют два типа колоний, известные под названием ЗВ и ЗА. Колонии типа ЗВ имеют слизистую консистенцию, врастают в глубь среды. Клетки Л-форм сохраняют клеточную стенку, фаговосприимчивые рецепторы, способны лизироваться. В (настоящее время Л-трансформация известна у многих форм бактерий, они описаны также у спирохет.

Превращение бактерий в Л-формы происходит по многим причинам и осуществляется различными путями. В одних случаях в результате незавершенного морфогенеза образуются шаровидные тела, превращающиеся в разнообразные формы, образующие Л-колонии типа ЗВ, в других -- происходит разрыв клеточных стенок с освобождением содержимого, из которого формируются Л-колонии.

Устойчивость. Рост микоплазм происходит в диапазоне 18--42°, что зависит от видового состава микроорганизмов. Оптимальной температурой для роста патогенных микоплазм человека и животных является 37--38°. Возбудитель устойчив к низким температурам. При --20° бульонные культуры сохраняются до года, при --4° -- не более двух недель. При комнатной температуре жизнеспособность микоплазм сохраняется до 90 дней, в условиях термостата 15--75 дней. Микоплазмы погибают при температуре 60о в течение 10 минут. Они хорошо переносят леофильное высушивание, многие годы сохраняют биологические свойства. Микоплазмы растут при рН 7,5--8,0. Увеличение или снижение рН сказывается избирательно для микроорганизма. Они слабо адаптируются к гипо- и гипертоническим условиям. Чувствительны к ультразвуковой дезинтеграции. Действие ультразвука при частоте 9 кгц и температуре 4° инактивирует их. Губительно также действуют ультрафиолетовые лучи. Гибель микоплазм наступает в течение трех часов.

4. Микоплазмы

Микоплазмы - это группа одноклеточных микроорганизмов, занимающих промежуточное место между вирусами и бактериями. Несмотря на свою малую величину и недостаточно прочную оболочку, микоплазмы способны к размножению и росту в тканях человека и животных. Микоплазмы обитают также в почве, на растениях и даже в гейзерах, но размножаются они лишь внутри клеток организма человека или животного (клетка-хозяин). Размножение микоплазм проходит интенсивно за короткий промежуток времени. Малые размеры микоплазм не позволяют им синтезировать все необходимые вещества для своего существования, поэтому для роста и развития они используют ресурсы клетки-хозяина (внутриклеточный паразитизм). Обычно микоплазмы заселяют слизистые оболочки органов животных и человека. Заражение микоплазмами способно вызвать хроническое воспаление дыхательных и мочеполовых путей и суставов. Заболевания, вызванные микоплазмами, входят в группу микоплазмозов. Лечение микоплазмозов проводится преимущественно антибиотиками их группы макролидов, тетрациклина и фторхинолонов.

Как микоплазма влияет на иммунитет?

Микоплазма способна подавлять рост и развитие клеток, иммунной системы. Таким образом, на фоне микоплазмоза снижается иммунитет организма в целом. Кроме того, вступая во взаимодействие с клетками организма человека, микоплазма нарушает процесс распознавания антигенов (чужеродных организму веществ, клеток) и начинается выработка антител (белки плазмы крови, обладающие способностью нейтрализовывать действие чужеродных микробов, вирусов, токсинов) против собственных клеток. Этот процесс называется аутоиммунным.

5. Диагностика микоплазмы

Существует несколько методов лабораторной диагностики микоплазм:

бактериологический метод - выращивание культур микробов (микоплазм)

серологический метод - определение специфических антител против микоплазм

полимеразная цепная реакция (ПЦР) - определение ДНК микоплазм

определение антигенов микоплазм методом иммуноферментного анализа (ИФА) и иммунофлюоресценции (ПИФ) - определение микоплазм при помощи специальных окрашенных антител

метод генетических зондов - определение микоплазм при помощи специфических фрагментов ДНК

Наиболее эффективными и информативными методами диагностики являются бактериологический метод и ПЦР. Остальные методы диагностики микоплазмоза назначаются для получения более точных данных о виде микоплазмы и её чувствительности к антибиотикам.

Каковы симптомы микоплазменной инфекции?

Существует две основные разновидности микоплазменной инфекции (микоплазмоз): респираторная (поражение дыхательных путей) и урогенитальная (поражение мочеполовых путей).

При респираторном (легочном) микоплазмозе - першение в горле, покраснение слизистой горла, насморк, сухой надоедливый кашель, повышение температуры. Респираторный микоплазмоз развивается постепенно (по мере развития болезни наблюдается ухудшение состояния больного) и переходит в микоплазменный бронхит и пневмонию.

При урогенитальном микоплазмозе поражаются слизистые оболочки половых органов и возникают следующие заболевания:

У мужчин: уретрит (воспаление мочеиспускательного канала), простатит (воспаление предстательной железы), эпидермит (воспаление придатков яичка), цистит (воспаление мочевого пузыря), различные поражения почек (пиелонефрит) и мочевыводящих путей.

У женщин: вульвовагинит, уретрит аднексит, эндометрит, сальпингит, воспаление и абсцессы яичников (оофорит).

Основными симптомами урогенитального микоплазмоза являются боли в низу живота, боли или зуд в мочеиспускательном канале, усиливающиеся при мочеиспускании, скудные выделения из мочеиспускательного канала и влагалища (у женщин).

6. Как происходит заражение микоплазмозом?

Половой путь - характерен для распространения микоплазмы хоминис. Передача инфекции осуществляется во время незащищенного полового акта с человеком больным микоплазмозом.

Контактный - то есть через предметы домашнего обихода, не стерильный медицинский инструментарий. К этому пути передачи относят так же заражение новорожденного при прохождении через родовые пути матери.

Воздушно-капельный путь - характерен для микоплазмы пневмоние. Инфекция характеризуется поражением дыхательных путей с исходом в пневмонию. Такой путь распространения микоплазм обычно наблюдается в детских коллективам, в которых нередко наблюдаются вспышки легочного микоплазмоза.

Трансплацентарный путь (от матери к плоду) на сегодняшний день не доказан.

Осложнения микоплазмоза:

бесплодие;

невынашивание плода;

хронический эндометрит;

первичная плацентарная и вторичная фетоплацентарная недостаточность;

высокая перинатальная заболеваемость;

аномалии развития плода.

Диагностика микоплазмоза

Решающе значение в диагностике урогенитального микоплазмоза имеют лабораторные методы диганостики. Материал для исследования: мазки из уретры, влагалища, цервикального канала.

Методы исследования.

Культуральный метод -- посев на питательные среды для количественной оценки микоплазм в исследуемом материале. Диагностическое значение имеет концентрация микоплазм более 104 КОЕ в одном мл. При этом более низкие концентрации учитываться не должны, поскольку в таких количествах микоплазмы могут находиться у здоровых людей. Одновременно определяют чувствительность микоплазм к антибиотикам в двух концентрациях. Следует помнить, что M. genitalium сложно культивировать, поэтому диагностику необходимо проводить методом ПЦР.

Молекулярнобиологические методы. Метод ПЦР позволяет определить возбудителя, но не может дать ответ о его количестве, поскольку регистрирует только факт присутствия генетического материала микоплазмы. ПЦР в реальном времени с помощью специальной аппаратуры обеспечивает и количественное определение копий ДНК микоплазмы в материале.

Иммунологические методы направлены на обнаружение Аг микоплазм и специфических АТ к ним. Наиболее распостранены: иммуноферментный анализ, реакция непрямой иммунофлуоресценции, реакция пассивной гемагглютинации (имеют меньшее клиническое значение в связи с низкой чувствительностью и специфичностью).

7. Заболевания вызываемые микоплазмами-микоплазмоз

Респираторный микоплазмоз - Mycoplasma pneumoniae

Респираторный микоплазмоз - это заболевание инфекционной природы, которое поражает дыхательные пути. Возбудителем является микроорганизм Mycoplasma pneumonia. До 20% диагностированных пневмоний вызваны именно этим паразитом.

Mycoplasma pneumoniae



Является плеоморфным организмом, у которого в отличие от бактерий имеется недостаточная клеточная оболочка, и в отличие от вирусов не нуждаются в клетке - хозяине для репликации. Длительный надсадный кашель, который отмечается при этом заболевании, предполагается, возникает из-за торможения реснитчатого движения. М. pneumoniae имеет замечательную скользящую подвижность и специальный нитевидный заостренный конец, который позволяет М. pneumoniae проникать между ресничками в эпителия дыхательной системы, в конечном счете, вызывая отторжение некротических масс дыхательных эпителиоцитов.

У М. pneumoniae есть две особенности, которые, по-видимому, хорошо коррелируют с его патогенностью у человека: 1) Селективная близость к дыхательным эпителиоцитам, и 2) способность продуцировать перекись водорода, который, как считается, ответственен за разрушение клеток в дыхательных путях и ответственен за повреждения мембраны эритроцита.

Оказалось, что М. pneumoniae также ассоциирована такими заболеваниями как острый гепатит, тромбоцитопеническая пурпура, тяжелая аутоиммунная гемолитическая анемия, синдромом Стевенс-Джонсона, артритом. М. pneumoniae признана как одна из самых частых причин внебольничной пневмонии у здоровых пациентов моложе 40 лет, наиболее часто у пациентов в возрасте 5-20 лет. М. pneumoniae поражает верхние и нижние отделы дыхательной системы во всех возрастных группах, особенно в умеренных климатических зонах, а летом может быть причиной до 50 % всех внебольничных пневмоний.

Практически все пациенты с М. pneumoniae-ассоциированной пневмонией выздоравливают без серьезных осложнений. Редко М. pneumoniae может вызывать тяжелую пневмонию у сильно ослабленных лиц, например, у детей с серповидно-клеточной анемией.

У пневмоний, вызванных М. pneumoniae не отмечено расовых и половых особенностей. По некоторым данным заболевание протекает несколько тяжелее у мужчин. Микоплазменная пневмония распространена во всех возрастных группах, однако чаще встречается у лиц моложе 20 лет, особенно у детей до 5 лет.

Микоплазменная пневмония имеет постепенное начало - от нескольких дней до нескольких недель. Из анамнеза можно установить следующее: Лихорадка, недомогание, постоянный, медленно усиливающийся сухой кашель. Если нет кашля, скорее всего возбудитель пневмонии не М. pneumoniae. Головная боль, чувство холода (не ознобы), ангина, першение в горле или болезненность в результате длительного кашля.

Через несколько недель большинство случаев М. pneumoniae -ассоциированных пневмоний рассасывается, хотя сухой кашель может присутствовать около месяца; в некоторых случаях болезнь может длиться до 6 недель.

Урогенитальный микоплазмоз

Урогенитальный микоплазмоз -- инфекционное воспалительное заболевание мочеполовых путей, вызываемое исключительно микоплазмами.

Широкое распространение урогенитальных микоплазм и их частое выявление у практически здоровых людей затрудняет решение вопроса о роли этих микроорганизмов в патогенезе заболеваний урогенитального тракта. С точки зрения одних исследователей, они относятся к абсолютным патогенам, другие исследователи считают микоплазмы условно-патогенными микроорганизмами.

По мнению ряда авторов (И.И. Мавров, 1991; В.В. Делекторский, 1991), трудность диагностики микоплазменных инфекций, распространенность заболевания, половой путь передачи и неадекватность проводимой терапии в скором времени приведут к преобладанию этих инфекций над классическими венерическими заболеваниями.

Наиболее часто из гениталий выделяют U. urealyticum, M. hominis, M. Genitalium. M.Fermentans



Micoplasma hominis

Короткие неподвижные нитевидные бактерии длиной 2-5 мкм, не проявляющие гемолитической активности. Этот вид микоплазм известен с 1937 года, когда микроорганизм был выделен из гноя бартолиниевой железы. Обычно содержится в вагинальном отделяемом как здоровых женщин, так и страдающих некоторыми заболеваниями, например, бактериальным вагинозом. При некоторых осложнениях послеродового периода этот микроорганизм был выделен из эндометрия и из крови, а также из маточных труб при сальпингоофорите.

Самым распространенным заболеванием, при котором почти всегда присутствуют генитальные микоплазмы, является бактериальный вагиноз. При этом заболевании, кроме генитальных микоплазм, в выделениях из влагалища присутствуют многие другие микроорганизмы, в частности анаэробные бактерии-- гарднереллы, превотеллы, анаэробные вибрионы, являющиеся симбионтами микоплазм. При гонорее, трихомонозе, хламидиозе часто также находят оба вида генитальных микоплазм.

Воспалительные заболевания органов малого таза могут быть связаны с M. hominis, что подтверждается не только выделением этого вида микоплазм из пораженного органа, но также динамикой нарастания антител к нему в крови и повышением уровня С-реактивного белка.

В начальный период изучения роли M. hominis была установлена частая ассоциация присутствия этого вида микоплазм и неблагоприятного течения беременности при преждевременных родах, самопроизвольных выкидышах, некоторых заболеваниях новорожденных детей. Часто микоплазмы выделяли из родовых путей, тканей изгнанного плода, от заболевших новорожденных детей. В настоящее время осложнения беременности и инфекцию у детей больше связывают с другим видом генитальных микоплазм-- U.urealyticum.

Ureaplasm urealyticum

По антигенному строению и генотипу этот вид генитальных микоплазм разделен на несколько сероваров и биоваров. В настоящее время различают биовары Parvum и Т-960, при этом биовар Parvum сейчас выделен в отдельный вид U.parvum. Такое разделение видов уреаплазм основано на анализе генов и, возможно, внесет ясность в разделение патогенных и непатогенных уреаплазм. Так, инвазивные штаммы в 79,4% случаев относятся к U.parvum, они чаще выделяются из околоплодных вод женщин с неблагоприятным исходом беременности. Вид U.parvum содержит 3 подвида, но связь отдельных подвидов с патогенными свойствами и инвазивностью не доказана. Следует помнить, что у одного пациента или пациентки могут быть выявлены несколько подвидов и серотипов уреаплазм. Биовар U.urealyticum Т-960 выделяют при воспалительных заболеваниях органов малого таза.

Уреаплазмы признают возбудителями уретрита у мужчин (так называемый негонококковый уретрит). Роль U.urealyticum при этом заболевании считается доказанной, поскольку заболевание воспроизведено у добровольцев с возникновением воспалительного процесса в уретре и появлением М-антител к U.urealyticum. Описаны также уреаплазменные простатиты. В этиологии этих заболеваний определенную роль играет также M.genitalium. Современные методы выявления уреаплазм в моче, сперме у бесплодных мужчин в сопоставлении с морфологией спермиев показали, что при большой концентрации уреаплазм деформируется сперматозоид, уреаплазмы прикрепляются к головке сперматозоида в средней его части, что может снижать их подвижность и фертильность.

Много внимания уделено изучению роли U.urealyticum в происхождении спонтанных абортов, мертворождения и рождения детей с низкой массой тела. Многочисленные опубликованные данные недостаточно убедительно доказывают «причастность» этих микроорганизмов к перечисленным патологическим состояниям.

Генитальные микоплазмы способны вызвать послеабортные и послеродовые осложнения, иногда довольно тяжелые, с повышением температуры тела до 37,8°C. Они характеризуются повышением титра специфических антител и С-реактивного белка. Восходящая инфекция характерна для преждевременных родов, при этом генитальные микоплазмы проникают в околоплодные воды и при целом околоплодном пузыре. В этих случаях возникают воспалительные очаги в плодных оболочках и эндометрии, обусловленные U.urealyticum. Эти данные лежат в основе современного представления о роли U.urealyticum в происхождении самопроизвольных абортов и преждевременных родов.

Частота амниотической инфекции тем выше, чем меньше срок беременности при преждевременных родах. Однако бессимптомная бактериурия и бактериальный вагиноз значительно чаще, чем присутствие уреаплазм в половом тракте, констатируются при преждевременных родах и расцениваются как их причина. Восходящее инфицирование околоплодных вод и возникающий воспалительный процесс ассоциируются с продукцией интерлейкинов и началом преждевременных родов.

Остается неясным вопрос, почему у одних беременных при наличии уреаплазм наступает восходящая инфекция, а у других нет. Возможно, играет роль высокая или низкая степень колонизации влагалища уреаплазмами.

Результаты исследования околоплодных вод, полученных при проведении амниоцентеза, показали наличие в них уреаплазм в 1,8% случаев. Прерывание беременности во втором триместре наступило у 11,4% леченных эритромицином женщин и у 44,4% не леченных, а преждевременные роды-- у одинакового количества женщин как леченных, так и не леченных. Передача уреаплазм от матери ребенку наблюдалась у 38% доношенных детей и у 95% недоношенных с низкой массой тела при рождении.

Передача генитальных микоплазм от матери ребенку происходит как антенатально, так и в родах. Колонизация кожных покровов, слизистых оболочек полости рта, глотки, мочеполовых органов обычно не сопровождается выраженными клиническими проявлениями. Лишь у недоношенных детей U.parvum может вызвать тяжелые заболевания легких, головного мозга, иногда со смертельным исходом. Уреаплазмы у таких детей обнаруживают в ликворе, жидкости из мозговых желудочков, трахеальном аспирате. Один и тот же биовар уреаплазм обнаруживается при исследовании материалов, взятых из разных мест.

Чем выше количественное содержание уреаплазм в половых путях матери, тем чаще наблюдается колонизация новорожденных. К тому же степень колонизации строго коррелирует с неблагоприятным действием на мать, плод, новорожденного ребенка: наблюдается низкая масса тела ребенка, ниже гестационный возраст, чаще констатируется хориоамнионит. При низком уровне колонизации влагалища генитальными микоплазмами не наблюдается влияния на исход беременности. Тяжелые летальные микоплазменные поражения у недоношенных новорожденных детей описаны преимущественно в 1990-1993 годах. По-видимому, они не являются частыми и описаны как казуистические.



Mycoplasma genitalium

Этот вид микоплазм открыт позднее, чем остальные генитальные микоплазмы, -- в 1981 году, изучен хуже, чем другие генитальные микоплазмы из-за трудности выращивания на питательных средах. Медленный рост на питательных средах не позволяет детально изучить биологические свойства микроорганизма.

Известно, что по целому ряду признаков M.genitalium сходны с другим патогенным для человека видом микоплазм-- M.pneumoniae. Среди этих свойств, кроме требовательности к питательным средам и медленного роста, исследователи отмечают способность обоих видов микоплазм прикрепляться к стеклу, погруженному в питательную среду.

Для диагностических целей культуральные методы выделения этого вида микоплазм непригодны, поэтому используют генодиагностику, наиболее часто полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

В связи с тем, что M.genitalium трудно культивируется, данные об этиологической роли этого микроорганизма в развитии воспалительных заболеваний урогенитального тракта как женщин, так и мужчин стали накапливаться только после разработки молекулярно-биологических методов, основанных на ПЦР. Применение метода ПЦР позволило получить доказательства того, что M.genitalium-- это возбудитель, передаваемый половым путем, способный индуцировать ряд заболеваний репродуктивного тракта у мужчин и у женщин. Спектр этих заболеваний аналогичен спектру заболеваний, вызываемых двумя другими возбудителями инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), Chlamydia trachomatis и Neisseria gonorrhoeae, и включает уретрит, цервицит, эндометрит, воспалительные заболевания органов малого таза.

M.genitalium-- это самая мелкая из известных на сегодняшний день бактерий; ее геном составляет 580 kbp. M.genitalium принадлежит к подвижным видам микоплазм, подобно большинству подвижных бактерий, имеет колбообразную форму и использует удлиненную терминальную структуру для прикрепления к поверхности клеток и обеспечения скользящего движения. Скорость ее передвижения составляет примерно 0,1 мкм/с. За прикрепление к поверхностям окружающих клеток отвечают белки-адгезины, главным из которых у M.genitalium является белок MgPa.

M.genitalium преимущественно инфицирует эпителий урогенитального тракта. Повреждение тканей, индуцируемое M.genitalium, только частично может быть отнесено на счет микоплазменных токсинов и вредных метаболитов, таких как перекись водорода и супероксиды, которые, как известно, секретируются M.genitalium. Полагают, что при инфекции, вызываемой M.pneumoniae, ткани повреждаются в ходе иммунного ответа хозяина, и, предположительно, то же самое происходит в случае с M.genitalium.

Имеются сведения о некоторых заболеваниях урогенитального тракта, обусловленных этим видом микоплазм. К ним относятся уретрит у мужчин и цервицит у женщин.

В отношении возможной роли M.genitalium в развитии бесплодия накоплены только косвенные доказательства. Так, Clausen и соавт. исследовали сыворотку крови женщин с бесплодием на наличие антител к M.genitalium. У 22% (29 из 132) женщин с трубным бесплодием в сыворотке крови были обнаружены антитела к M.genitalium, тогда как среди женщин контрольной группы частота их выявления составила только 7% (11 из 176).

Ряд исследований был посвящен изучению возможной роли M.genitalium в индукции неблагоприятных исходов беременности, однако доказательств вовлечения M.genitalium в эти процессы получено не было. Также не было выявлено корреляции между обнаружением M.genitalium и диагнозом бактериального вагиноза.

Mycoplasma fermentans

Наиболее часто mycoplasma fermentans (штамм incognitos) выделяют при нефропатиях у ВИЧ-инфицированных пациентов. Mycoplasma fermentans разлагает углеводы и вызывает сдвиг рН мочи в кислую сторону, что приводит к деструкции эпителия канальцев почек.

Инфекции mycoplasma fermentans сопровождаются образованием AT к IgG (за счёт связывания Fc-фрагментов), то есть ревматоидного фактора, участвующего в повреждении клеток. У возбудителя выявлен токсический фактор -- причина шока и гибели животных после внутрибрюшинного введения большой дозы микоплазм.

Подобно прочим урогенитальным микоплазмам, mycoplasma fermentans играет важную роль в гидрологической и акушерско-гинекологической патологии.

Mycoplasma fermentans принадлежит особая роль в развитии хронического пиелонефрита. Клиническую картину моноинфекций характеризуют высокая активность патологического процесса, непрерывное рецидивирование и отсутствие стойкого эффекта от проводимой терапии.

Mycoplasma fermentans впервые была выделена из урогенитального тракта человека в начале 50-х годов и рассматривалась как микроорганизм, встречающийся у человека крайне редко. Позднее, благодаря применению в диагностической практике ПЦР, эту микоплазму обнаружили у мужчин-гомосексуалистов, зараженных вирусом СПИД а, в моче, в мононуклеарных клетках периферической крови, а также в мазках из горла с частотой встречаемости 5, 10 и 20 % соответственно и примерно с такой же частотой у лиц, не зараженных вирусом СПИДа, большинство из которых были гомосексуалистами (Katseni et al., 1993). В другом исследовании с использованием метода ПЦР в тканях и органах человека M. fermentans была обнаружена в мазках из ротовой полости и в моче у 20 % здоровых студентов-медиков. В связи с этими результатами вопрос о первичной локализации и патогенности M. fermentans остается пока не решенным.

8. Лечение микоплазмоза

Поскольку генитальные микоплазмы принадлежат к УПМ, цель лечения -- снижение частоты рецидивов и тяжести воспалительных процессов в пораженных органах, а при высокоээфективной терапии -- элиминация возбудителя.

Немедикаментозное лечение микоплазмоза

Использование фитобиотиков (например, чеснока экстракт, эхинацеи узколистной экстракт) и интерфероноподобных фитосредств (экстракт кошачьего корня).

Медикаментозное лечение микоплазмоза

Антибактериальная терапия показана всем пациентам только при выявлении M.genitalium. Клинические проявления заболевания при доказанной этиологической значимости микоплазм; выделение микоплазм у больных с нарушением фертильности, репродуктивными потерями, предгравидационной подготовкой; выделение микоплазм и осложнённое течение беременности.

Антибактериальная терапия не показана при выделении Ureaplasma spp., M.hominis в низких титрах (103 КОЕ/мл) и отсутствии клинических проявлений (носительство).

Антибактериальная терапия включает применение в течение 7-14 дней одного из препаратов (с учётом чувствительности) фармакологических групп макролидов, тетрациклинов, фторхинолонов:

доксициклин, внутрь, 100 мг 2 раза в сутки;

тетрациклин, внутрь, 500 мг 4 раза в сутки;

азитромицин, внутрь 250 мг 2 раза в сутки;

джозамицин, внутрь 500 мг 2-3 раза в сутки;

кларитромицин, внутрь 500 мг 2 раза в сутки;

офлоксацин, внутрь 200 мг 2 раза в сутки;

спирамицин, внутрь, 3 млн МЕ 2-3 раза в сутки.

Для профилактики одновременно с антибиотикотерапией назначают антимикотические препараты (флуконазол, итраконазол) и препараты метронидазолового ряда (метронидазол), энзимные препараты (вобэнзим©, флогэнзим©). Эффективность лечения оценивают через 10-14 дней после окончания терапии по отсутствию (или снижению титра) микоплазм по результатам посева и восстановлению микробиоценоза влагалища, а M. genitalium чере 4 недели по результатам ПЦР.



Вывод

Интерес исследователей к микоплазмам определяется, с одной стороны, уникальностью биологии этих мельчайших прокариот, в структурной организации которых присутствуют черты, характерные для клеток высших эукариот, а с другой - связан с практической необходимостью. Многие микоплазмы - возбудители болезней человека, животных, растений. При этом один и тот же вид микоплазм может колонизировать клетки человека, животных и растений.

Микоплазменные контаминации клеточных культур, использующихся в научных исследованиях, могут приводить к ложной интерпретации экспериментальных данных, поскольку микоплазмы способны влиять практически на любой параметр клетки in vitro.

В организме человека и животных микоплазмы могут вызывать острые респираторные и урогенитальные инфекции, обусловливающие отягощенный акушерский анамнез (в том числе патологию и внутриутробную гибель плода), активировать многие вирусы, в том числе онкогенные и ВИЧ, способствовать развитию иммунопатологии. Подавление микоплазменных инфекций представляет проблему. При правильном подборе антибиотиков развитие микоплазменных инфекций человека можно подавить, но антибиотикотерапия, приводящая к клиническому благополучию, вовсе не обязательно обеспечивает удаление возбудителя из организма. Под влиянием факторов, ослабляющих иммунный статус организма, микоплазмы могут снова активироваться. Кроме того, селективное давление антибиотиков способствует размножению штаммов микоплазм, устойчивых к этим антибиотикам.

Успешная реализация геномных проектов позволила в значительной мере приблизиться к возможности описания метаболизма мельчайшей самореплицирующейся клетки в терминах молекулярной биологии - цели программы, предложенной американским исследователем Дж. Моровитцем в 1984 г. Почти полвека назад в отношении микоплазм как примитивных форм жизни была выдвинута концепция минимальной клетки. Малый размер генома обусловливает ограниченные биосинтетические возможности микоплазм и соответственно зависимость их от высших организмов. Компактность генома микоплазм отражает паразитический образ их жизни. Воз- можность использования "готовых" компонентов метаболизма, вероятно, способствовала утрате в процессе эволюции микоплазм генов, кодирующих ферменты многих ассимиляционных процессов.

Выполнение геномных проектов внесло существенный вклад в понимание биологии микоплазм и представления об эволюции этих микроорганизмов. К настоящему времени получено генетическое обоснование того, что микоплазмы являются ветвью грамположительных бактерий. Они образовались в процессе регрессивной эволюции, связанной с редукцией генома.

Взаимодействие микоплазм с иммунной системой может приводить к развитию глубоких патологических процессов в организме. Микоплазмы обладают способностью иммуномодуляции и могут как стимулировать, так и супрессировать реакции иммунной системы. Подобные процессы могут возникать из-за непосредственного воздействия микоплазм на иммуноци-ты, а также вследствие индукции ими различного спектра цитокинов. У некоторых микоплазм обнаружены митогенньге компоненты.

Микоплазмы отнесены к условно-патогенным микроорганизмам, которые вызывают главным образом латентные инфекции. Для этих инфекций характерно хроническое течение, причем исчезновение симптомов инфекции не означает элиминации микоплазм из организма. Следствием перенесенной микоплазменной инфекции часто является длительная (а иногда и пожизненная) персистенция микоплазм в организме. Микоплазменные инфекции могут быть индикатором дистресса организма, возникающего в связи с массированным воздействием биотических и абиотических стрессоров в условиях антропогенных перегрузок.

В основе патогенеза, развивающегося вследствие персистенции микоплазм и у человека, и у животных, и у растений, лежит окислительный стресс, обусловливающий неспецифичные патологические реакции. Молекулярные механизмы защиты самих микоплазм от воздействия окислительного стресса пока не выяснены, в клетках микоплазм не обнаружены известные системы антиоксидантной защиты. Это позволяет предполагать, что микоплазмы используют нетрадиционные способы защиты от окислительного стресса. Выяснение механизмов быстрого реагирования на окислительный стресс и регуляции стрессорного ответа у микоплазм имеет не только фундаментальное, но и прикладное значение. Следствием хронического окислительного стресса у человека и млекопитающих являются перманентное повреждение эндотелия кровеносных сосудов, микротромбозы, нарушение микроциркуляции и развитие иммунопатологии. При этом степень выраженности соответственных патологических реакций у разных индивидуумов при персистенции микоплазм существенно различается. Подобные процессы возникают, как известно, и при персистенции ряда других микроорганизмов (например, Helicobacter pylori, Chlamydia trachomatis, цитомегаловируса и некоторых других). В связи с этим микоплазменные инфекции, как и другие персистирующие инфекции, могут быть факторами риска развития атеросклероза, коронарной болезни и инфаркта миокарда. Представители класса Mollicutes в отличие от многих других микроорганизмов обладают разнообразными средствами воздействия на сигнальные системы инфицированных клеток эукариот, так что колонизация клеток тканей эукариот микоплазмами может как вызывать, так и не вызывать патологические реакции. Подобные проявления колонизации паразитами тканей макроорганизма, характерные для различных возбудителей персистирующих инфекций, в принципе противоречат парадигме микробного патогенеза, основанной на постулатах Коха. В связи с этим в настоящее время исследователи переходят от дискуссии о необходимости смены парадигмы микробного патогенеза, основанной на постулатах Коха, к разработке новой. Вероятно, в ней будут учтены генетическая детерминированность сигнальных сетей организмов и взаимодействия их в системе паразит-хозяин.

Широкое распространение микоплазм в природе свидетельствует в пользу того, что в эволюционном плане они являются весьма преуспевающими микроорганизмами. Кроме того, микоплазмы эволюционируют сравнительно быстро. Не исключено, что процессы видообразования у микоплазм могут происходить в очень короткие временные отрезки, не привычные для представления об эволюционных темпах изменчивости и видообразования. Предполагают, что эволюция микоплазм ориентирована на эндосимбиоз. Косвенным свидетельством этому может служить обнаруженный нами в системе in vitro (а позднее сотрудниками лаборатории проф. Sh. С. Lo (США) в системе in vivo) факт специфической индукции микоплазмами геномных перестроек в коротком плече 6-й хромосомы (в частности, в сайтах ГКГС) человека. Из-за высокой скорости собственной эволюции микоплазмы могут быть немаловажным фактором эволюции биосферы. Персистенция микоплазм может приводить к заметным сдвигам в генетической структуре популяции организмов, поскольку генетически опосредованные восприимчивость и чувствительность к микоплазменным инфекциям оборачиваются серьезными патологиями организма и, как правило, нарушают его репродуктивные функции.



Список литературы

1. Ноников В.Е., Воробьева М.Г., Батенкова С.В. и др. Микоплазменные пневмонии. Кремлев. мед. (клин. вестн.). 1999; 4: 7-10.

2. Прозоровский С.В., Раковская И.В., Вульфович Ю.В. Медицинская микоплазмология. М.: Медицина, 1995.

3. Zackon H. Pulmonary Differential Diagnosis. Saunders. 2000.



Приложение

Морфология M. hominis

а) - морфологические превращения при оптимальных условиях культивирования in vitro; б) - морфологические формы при неоптимальных условиях, на стационарной фазе роста культуры

Частота обнаружения генитальных микоплазм при качественном определении (методом ПЦР)

у здоровых женщин:	M. homihis -5-20%, Ureaplasma spp.-40-50%;
при бактериальном вагинозе	25,7-52%;
при воспалительных заболеваниях органов малого таза	40,6-76,5%;
при эндометритах	до 40%;
при бесплодии	22-85%;
при патологии шейки матки	20-56%;
при ГПЭ	18-42%;
при привычном невынашивании	45-75%
при циститах	60-75%;
при негонококковых уретритах	30-65%;
бессимптомное носительство	40%;
в качестве моноинфекции	37,5%
в составе микробных ассоциаций	62%



Примечание. Колонизация влагалища встречается в 2-3 раза чаще нежели уретры у мужчин.

Препараты для лечения микоплазмоза

Тактика лечения микоуреаплазмоза зависит от фазы воспалительного процесса (В.И. Козлова, А.Ф. Пухнер, 2003):

Фазы воспалительного процесса

Острая	Подострая	Хроническая, торпидная
купирующая химиотерапия; лечение сопутствующей патологии (микробные ассоциации).	¦ купирующая химиотерапия; ¦ местное лечение.	¦ иммуностимуляция; ¦ местное лечение (первый этап); ¦ купирующая химиотерапия (второй этап); ¦ поддерживающее (оптимизирующее) лечение.

Купирующая химиотерапия:

Тетрациклины:

доксициклина гидрохлорид (юнидокс-солютаб, вибрами-цин, доксибене) 1-й прием 200 мг затем по 100 мг per os 2 раз/сут., в течение 10-21 дней;

моноциклин -- первый прием 200 мг, затем по 100 мг 10--21 дней;

тетрациклин -- внутрь по 500 мг 4 раз/сут., 10--14 дней; курсовая доза -- до 27г.

Макролиды и азалиды:

азитромицин (сумамед) -- в 1 -й день 1000 мг, затем 500 мг 1 раз/сут., в течение 4 дней;

кларитромицин (клацид,фромилид) - 500 мг 2 раз/сут., 10-14 дней;

рокситромицин (рулид) -- по 300 мг 2 раз/сут. per os, 10 дней;

джозамицин (вильпрафен) -- по 500 мг 2 раз/сут., 10-14 дней;

мидекамицин (макропен) -- по 400 мг 3 раз/сут., 7-- 10 дней.

Фторхинолоны:

ципрофлоксацин (цифрам, ципринол) -- внутрь по 500 мг 2 раз/сут., в течение 10--14 дней;

пефлоксацин (абактал) -- по 400 мг 2 раз/сут., 7 дней;

офлоксацин -- по 200 мг 2 раз/сут. peros, 7-10 дней;

левофлоксацин (таваник) -- по 500 мг 1 раз/сут., 5--7 дней;

норфлоксацин -- 400 -- 800 мг 1 раз/сут., 7--10 дней.

Местное лечение:

вагинальные суппозитории с синтомициновым линиментом (хлорамфеникол) 2 раз/сут., 2--4 недели;

тетрациклиновая мазь (1-3 %) -- на тампонах во влагалище 2 раз/сут., 10-15 дней;

эритромициновая мазь (1 %) -- на тампонах во влагалище 2 раз/сут., 10--14 дней;

далацин Ц{2% вагинальный крем) -- по 5 г во влагалище (дозатором) на ночь, 7 дней;

бетадин -- свечи по 200 мг поливидона йодида во влагалище на ночь, 14 дней.

Размещено на Allbest.ru