Иммунный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространённых болезнях и его коррекция

- 61 -

На правах рукописи

МАСЬЯНОВ

Юрий Николаевич

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени доктора ветеринарных наук

Иммунный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространённых болезнях и его коррекция

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология с микотоксикологией и иммунология

06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных, патология,

онкология и морфология животных

Воронеж - 2010

Работа выполнена в ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН (ГНУ ВНИВИПФиТ), г. Воронеж

1 Общая характеристика работы

Актуальность темы. Перевод животноводства на промышленную технологию, особенностью которой является новые методы содержания, кормления и эксплуатации, и связанное с этим увеличение концентрации поголовья, потенциально патогенных микроорганизмов в помещениях, изменение первоначальных их свойств, влияние на организм животных технологических стресс-факторов, экологическое неблагополучие внешней среды, усугубляющееся практически повсеместным дефицитом в кормах микроэлементов, ставит перед ветеринарными специалистами новые сложные задачи по охране здоровья животных (А.Г. Шахов, 2005).

Воздействие этих факторов влияет на приспособительно-адаптационные механизмы у животных, изменяя их, что приводит к снижению неспецифической резистентности и иммунитета или повышению реактивности.

Возникновение нарушений функций иммунной системы является одним из патогенетических механизмов любого патологического процесса (Ю.Н. Фёдоров, 2006).

В связи с этим приобрели широкое распространение так называемые факторные инфекции, проявляющиеся у маточного поголовья нарушениями воспроизводительной функции, эндометритами, маститами, а у молодняка диарейным и респираторным синдромами (В.В. Макаров, 2005; А.Г. Шахов, 2005).

Возникновение этих болезней обусловлено, как правило, ассоциациями микроорганизмов. Вирусы вызывают альтерацию и иммуносупрессию, что является пусковым механизмом для развития вторичной бактериальной инфекции наряду с грибами и простейшими (Е.В. Андреев, 1985; В.А. Мищенко с соавт., 2001; D.G. Bryson, 1996).

При этом в каждом случае среди животных имеются особи, которые не болеют или переболевают в относительно лёгкой форме. Кроме того, в неблагополучных хозяйствах среди больных и здоровых животных регистрируются серопозитивные и серонегативные, контаминированные и свободные от тех или иных патогенов особи. Это, безусловно, свидетельствует о сложном характере взаимоотношения между микроорганизмами и состоянием защитных систем, обусловленных адаптационными возможностями организма животных к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды.

Во многом остаются не до конца решёнными и морфологические аспекты, связанные как с физиологическим состоянием систем органов, так и патологическими изменениями.

Поэтому в настоящее время является актуальной оценка иммунного статуса животных в зависимости от возраста, физиологического состояния, воздействия патогенных факторов, обусловливающих возникновение болезней, и возможность его коррекции препаратами, обладающими антиоксидантным и опосредованно иммуномодулирующим действием.

Цель и задачи исследований. Изучить иммунный статус крупного рогатого скота и свиней при наиболее распространённых болезнях и возможность его коррекции препаратами, обладающими антиоксидантным и иммуномодулирующим действием.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить влияние нормализации обмена веществ на иммунный статус в системе мать-плод-новорожденный.

2. Изучить иммунный статус в зависимости от возраста маточного поголовья и его влияние на качество приплода.

3. Изучить иммунный статус при послеродовой патологии матки и молочной железы у коров и свиноматок.

4. Изучить иммунный статус у телят и поросят при болезнях, проявляющихся диарейным и респираторным синдромом.

5. Провести сравнительную оценку коррекции иммунного статуса взрослого поголовья и молодняка крупного рогатого скота и свиней лигфолом, селедантом и лигавирином при специфической профилактике болезней молодняка.

6. Разработать и дать оценку информативности методам тестирования системного и локального иммунитета животных.

Научная новизна. Впервые у крупного рогатого скота и свиней разного возраста изучен иммунный статус, уровень факторов неспецифической защиты и морфология локального иммунитета в органах первичного поражения при распространённых факторно-инфекционных болезнях. Изучено модулирующее влияние лигфола, селеданта и лигавирина на иммунный статус и ответ к бактериальным и вирусным антигенам при вакцинации коров, свиноматок и молодняка. Разработаны методы тестирования локального и системного иммунитета, дана оценка их информативности при некоторых болезнях животных послеродового периода.

Научная новизна исследований подтверждена шестью патентами РФ: «Способ профилактики колибактериоза телят» №2275935 от 10.05.2006; «Способ профилактики респираторных болезней телят» №2287986 от 27.11.2006; «Способ профилактики вирусных респираторных болезней телят» №2287992 от 27.11.2006; «Способ профилактики острых респираторных болезней телят» №2292916 от 10.02.2007; «Способ профилактики желудочно-кишечных болезней телят» №2295975 от 27.04.2007; «Способ повышения неспецифической резистентности и иммунологической реактивности свиней при вакцинации» №2321414 от 10.04.2008.

Практическая значимость. Дана доклиническая оценка иммунного статуса взрослого поголовья и молодняка крупного рогатого скота и свиней и при развитии патологии с учётом влияния факторов окружающей среды, этиологической структуры инфекционных болезней и морфологии локального иммунитета в поражённых органах, что позволило установить нарушения, обусловливающие их возникновение, а также статус, характеризующий норму. На этой основе проведена оценка коррекции иммунного статуса животных препаратами, обладающими антиоксидантным и иммуномодулирующим действием, установлена её роль в повышении эффективности специфической профилактики болезней молодняка.

Материалы диссертации вошли в одобренные секцией «Патология, фармакология и терапия» Россельхозакадемии «Методические рекомендации по оценке и коррекции естественной резистентности животных» (Воронеж, 2005), «Методические рекомендации по оценке и коррекции иммунного статуса организма животных» (Воронеж, 2005), «Методические рекомендации по оптимизации формирования колострального иммунитета у новорожденных животных» (Воронеж, 2009), методическое пособие «Методы морфологических исследований» (Воронеж, 2000).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 39 научных работ, из них 16 в рекомендованных ВАК изданиях.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Международной научно-практической конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных» 21-23 сентября, Воронеж, 2004; на Международной научно-практической конференции посвящённой 100-летию со дня рождения академика ВАСХНИЛ Я.Р. Коваленко «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных» 16-17 мая, Москва, 2006; на Всероссийском ветеринарном конгрессе «XV. Московский ветеринарный конгресс по болезням мелких животных» 21-23 апреля, Москва, 2007.

Объём и структура диссертации. Материал диссертации изложен на 410 страницах текста в компьютерном исполнении, включает обзор литературы, материал и методы исследований, результаты собственных исследований и их анализ, выводы, практические предложения, список литературы, содержащий 478 источников, в том числе 211 зарубежных авторов и приложения. Диссертация содержит 48 таблиц и 81 рисунок.

Основные положения, выносимые на защиту:

- влияние иммунного статуса в системе мать-новорожденный на заболеваемость и продуктивность молодняка крупного рогатого скота и свиней;

- иммунный статус и морфогенез в поражённых органах при массовых болезнях у взрослого поголовья и молодняка крупного рогатого скота и свиней;

- сравнительная оценка влияния коррекции иммунного статуса крупного рогатого скота и свиней лигфолом, селедантом и лигавирином при специфической профилактике желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка.

2 Материалы и методы

Работа выполнена в 1993-2008 гг. в отделе микробиологии, вирусологии и иммунологии и лаборатории патоморфологии ГНУ Всероссийский НИВИ патологии, фармакологии и терапии РАСХН. Экспериментальные исследования проведены в хозяйствах Воронежской, Волгоградской и Орловской областей.

Клинические и лабораторные исследования по теме диссертации проведены в соответствии с планом НИР ГНУ ВНИВИПФиТ по заданию 08.04.02. «Изучить системные иммунодефициты в возникновении массовых желудочно-кишечных и респираторных болезней молодняка сельскохозяйственных животных и разработать средства и способы их коррекции для профилактики и терапии» (№ гос. регистрации 01.200.117019); по заданию 08.04.01. «Разработать методы ранней диагностики, эффективные средства и способы профилактики и лечения массовых незаразных и вызываемых условно-патогенными микроорганизмами заболеваний у молодняка высокопродуктивных животных» (№ гос. регистрации 15070. 3666026906. 06.8.001.2).

Отдельные исследования проведены при участии сотрудников отделов клинической биохимии, патологии органов размножения и молочной железы животных, физико-химических методов исследований ГНУ ВНИВИПФиТ Золотарёва А.И., Близнецовой Г.Н., Нежданова А.Г., Климова Н.Т., Михалёва В.И., Коцарева В.Н., Шушлебина В.И., Чусовой Г.Г. и др., которым автор выражает искреннюю признательность за оказанную помощь и плодотворное сотрудничество.

Иммунный статус и показатели неспецифической резистентности изучали в сравнительном аспекте:

- у коров с нарушенным (n=28) и нормализованным обменом веществ (n=30), и полученных от них телят, соответственно (n=26) и (n=30).

- в период сухостоя и после родов у здоровых коров (n=4) и заболевших эндометритом (n=11), а также у здоровых (n=6) и заболевших субклиническим (n=10) и клиническим маститом (n=6);

- у телят, родившихся как от коров с нарушенным и нормализованным метаболизмом, заболевших омфалитом, соответственно (n=10) и (n=8), диареей (n=11) и (n=8), с респираторной патологией (n=15) и (n=11) и клинически здоровых (n=8). Исследования проведены до клинического проявления патологии и у больных животных;

- у свиноматок в зависимости от возраста, соответственно 1-2 (n=10), 3-6 (n=10) и 7-8 (n=7) опоросов, со сроками супоросности 35 и 100-105 дней, и его влияние на качество приплода, заболеваемость и сохранность поросят;

- до и после опороса у здоровых свиноматок (n=8) и заболевших послеродовым гнойно-катаральным эндометритом (n=19) и маститом (n=7);

- у больных 3-5 дневных поросят при диарейном синдроме - энзоотическом течении трансмиссивного гастроэнтерита (n=7) и здоровых (n=9);

- у 35 дневных поросят перед отъёмом, предрасположенных к респираторной патологии (n=20), 70-дневного возраста, заболевших (n=9) и оставшихся здоровыми (n=11), а также 3-3,5 месячного возраста, больных хронической бронхопневмонией (n=5) и здоровых (n=5).

С целью повышения эффективности специфической профилактики колибактериоза у телят проведена коррекция иммунного статуса у коров при двукратной вакцинации их в сочетании с лигфолом (n=6), лигавирином (n=5) и селедантом (n=8) по сравнению с иммунизированными без применения препарата (n=5) и интактными животными (n=5).

Влияние иммуномодуляторов на формирование у новорожденных телят колострального иммунитета и эффективность специфической профилактики сальмонеллёза, парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита при двукратной вакцинации их в месячном возрасте в сочетании с лигфолом (n=6), лигавирином (n=5) и селедантом (n=8), по сравнению с интактными животными (n=5) и контрольной группы (n=5).

Коррекцию иммунного статуса свиноматок с целью специфической профилактики эшерихиоза и сальмонеллёза у поросят проводили при двукратной вакцинации их в период 1,5 месяцев супоросности в сочетании с применением лигфола (n=6), лигавирина (n=6) и селеданта (n=6) в сравнении с интактными животными (n=6) и контрольной группы (n=6). Исследования проведены также за 1-2 недели до опороса и на 2-4 день после него.

Коррекцию иммунного статуса поросят лигфолом (n=6), лигавирином (n=6) и селедантом (n=6) с целью специфической профилактики эшерихиоза и сальмонеллёза, на фоне животных контрольной (n=6) и интактной групп (n=6). Исследования проведены до и после вакцинации, соответственно в 2-3 недельном, а также 38-43, 48-53 и 79-84 дневном возрасте.

Гематологические показатели определяли общепринятыми методами.

Лимфоциты выделяли из гепаринизированной крови (25 ЕД/мл) на фиколл-верографине (плотность -1,077 г/см³). Количество Т-лимфоцитов в крови определяли у КРС и свиней методом спонтанного розеткообразования с эрироцитами барана (Е-РОК) по M. Jondal et. al. (1972), В-лимфоцитов - методом комплементарного розеткообразования (ЕАС-РОК) с использованием стандартного кроличьего гемолизина и в качестве комплемента - свежей сыворотки, соответственно КРС и свиней, В-лимфоцитов с IgM и IgG-рецепторами (у КРС) - в антииммуноглобулиновом розеткообразующем тесте, Fc⁺-лимфоциты (у свиней) с помощью ЕА-РОК. О-лимфоциты вычисляли по разнице от общего количества лимфоцитов суммы Е- и ЕАС-РОК, а количество резистентных и чувствительных к теофиллину Т-клеток - согласно методическим указаниям А. М. Земскова с соавт. (1988). Концентрацию иммуноглобулинов G, М и А классов, а также С1q- и С3-компонентов комплемента определяли методом РИД по G. Mancini (1965) (Выражаем иcкреннюю благодарность д.б.н., профессору, член-корр. РАСХН Ю.Н.Фёдорову за предоставление диагностикумов для определения концентраций IgG, IgМ и IgА у свиней). Выделение секреторной формы IgA (SIgA) проводили согласно Г. Фримелю (1987), С1q- и С3-компонентов комплемента КРС, получение к ним кроличьих антисывороток и доведение их до моноспецифичности - с помощью комплекса методов, которые отражены в «Методических рекомендациях по оценке и коррекции иммунного статуса животных» (Воронеж, 2005). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузминой (1966), лизоцимную (ЛАСК) - по К.А. Каграмановой и З.В. Ермольевой (1966), комплементарную (КАСК) - по Г.Ф. Вагнеру (1963), титры нормальных антител - в РГА, фагоцитарную активность лейкоцитов (ФАЛ), индекс и число (ФЧ и ФИ) - по В.С. Гостеву (1950), индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) - по И.М. Карпутю (1993). Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) осаждали из сыворотки крови - 3,5% ПЭГ-6000. Наличие вируса ТГС у больных поросят в фекалиях, в содержимом кишечника и составе ЦИК, определяли встречным иммуноэлектрофорезом (ВИЭФ) с полученной на кроликах преципитирующей антисывороткой к культуральному вирусу ТГС, антитела к вирусу ТГС в сыворотке крови поросят - методом задержки ВИЭФ. Диссоциацию ЦИК с последующей идентификацией в их составе антигена ТГС проводили путём восстановительного сульфитолиза по О. Я. Поповой и Л. С. Косицкой (1977). Титры антител в сыворотке крови свиней к вирусу РРСС - в РДП (очистку антигена РРСС проводили гельфильтрацией на сефадексе G-50 живой лиофилизированной вирусвакцины).

Для определения интенсивности абсорбции иммуноглобулинов в кишечнике новорожденных телят учитывали: концентрацию IgG в молозиве и объём его потребления в каждую выпойку (четырёхкратно в течение суток); рассчитывали абсолютное количество IgG (г) поступившего в желудочно-кишечный тракт телёнка после первой выпойки молозива, а также за сутки, как сумму произведений объёма потреблённого телёнком молозива и концентрации в нём IgG (г/л) при каждой выпойке (У). Величину интенсивности всасывания иммуноглобулинов в кровь определяли в процентах абсолютного содержания IgG (г) в общем объёме крови от абсолютного уровня его поступления в желудочно-кишечный тракт телёнка. Для вычисления абсолютного уровня IgG (г) в крови телёнка (Х) использовали следующие показатели: концентрация IgG г/л в сыворотке крови (n); масса телёнка в кг (m); общий объём крови у телёнка (л), исходя из 9% её содержания от массы тела (К=0,09); показатель гематокрита (Нt), и формулу: Х = n (К_m -(К_m Ht)/100). Величину интенсивности всасывания (И) определяли в процентах по формуле: И = (Х·100)/У.

Бактериологические исследования проводили общепринятыми методами, ПЦР определяли геном вируса ЦВС-2, РРСС, хламидий.

Материалом для патоморфологических исследований служили образцы из поражённых органов коров, свиноматок и молодняка животных (матка, молочная железа, тонкий кишечник и лёгкие), которые фиксировали в 10% нейтральном формалине, обезвоживали в спиртах и хлороформе и заключали в парафин. Гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином. Материалом для исследования ультраструктурных особенностей абсорбции в тонкой кишке материнских факторов защиты служили поросята до приёма молозива, 3-6 часов жизни, а также одно- и трёхсуточного возраста, убитые декапитацией, от которых были взяты образцы из разных её отделов. Фиксацию материала для ультраструктурных исследований проводили в 2,5% растворе глютарового альдегида на 0,111М S-коллидиновом буфере (+4С) с постфиксацией в 1% растворе тетраокиси осмия на том же буфере. Материал обезвоживали в спиртах и заключали в Эпон-812. Срезы приготавливали на ультрамикротоме «LKB-3800», контрастировали цитратом свинца и уранилацетатом и просматривали в электронном микроскопе «Tesla» BS-500.

Полученный цифровой материал подвергали математической обработке с помощью программы ExStat на ЭВМ РС AMD K7-800 AthIon.

3 Результаты собственных исследований

3.1 Влияние нормализации обмена веществ на иммунный статус коров и полученных от них телят

Изучен иммунный статус в сравнительном аспекте у коров с нарушенным (контроль) и нормализованным метаболизмом (опытная группа). Коррекция рациона, проведённая у коров до запуска, состояла в исключении дачи соломы, её замены сеном, введении жмыха подсолнечного (1,0), муки овсяной (1,0) и увеличении вдвое патоки (1,0). Это позволило снизить в рационе избыток сухого вещества с 19,1 до 6,9%, сырой клетчатки - с 43,4 до 13,1%, устранить дефицит переваримого протеина (+13,3%), сахара (+20,4%), фосфора (+31,1%), меди (+381,2%), несколько снизить дефицит цинка (-13,6%) и кобальта (-57,4%). На основании исследования рациона и биохимических показателей крови животных был разработан и применён в период сухостоя премикс, содержащий недостающее количество микро- и макроэлементов, витаминов, введён трикальцийфосфат и 0,5% раствор селенита натрия в дозе 2мл/100 кг массы тела подкожно, что способствовало нормализации белкового, углеводного, жирового и минерального обменов.

Установлено, что у коров при коррекции рациона за 2-2,5 мес. до отёла, по сравнению с животными контрольной группы, увеличилось относительное количество Т-лимфоцитов на 17,1%, IgМ - на 48,3%, IgG - на 20,7%, титры нормальных гемагглютининов - в 1,4 раза, гуморальные и клеточные факторы естественной резистентности: БАСК - на 23,2%, ЛАСК - в 2,4 и КАСК - в 1,7 раза, ФАЛ - на 57,8%, ФЧ и ФИ - в 2,24 и 1,5 раза. При этом снизилась напряжённость локального иммунитета - уровень IgА в крови (на 18,8%), что обусловлено на фоне более высокой у них естественной резистентности снижением антигенного воздействия на иммунную систему слизистых. По этой же причине усиление антигенного воздействия на периферические органы иммунной системы у коров с нарушенным метаболизмом, по-видимому, индуцировало развитие частичной иммунологической толерантности системного гуморального ответа.

За 2-10 дней до отёла у них отмечали достоверное повышение относительного уровня Т-клеток на 58,5% при снижении (на 7,9%) в контроле, С3-компонента комплемента (на 24,7%), что свидетельствует о нормализации белоксинтезирующей функции печени, относительного количества В-клеток (ЕАС) - на 31,6%, умеренную поглотительную способность нейтрофилов (ФЧ). При закономерном снижении перед родами вследствие транссудации в молочную железу IgG и IgМ, их уровень в крови оставался значительно выше (Р<0,001; Р<0,01), а содержание IgА - ниже (Р<0,05).

На 3-6 день после отёла у коров опытной группы уровни показателей иммунитета и неспецифической резистентности оставались более высокими за исключением - ФЧ. Те же тенденции сохранялись у коров сравниваемых групп и через две недели после родов.

У телят, полученных от коров с нормализованным метаболизмом, до приёма молозива отмечали более высокий относительный уровень Т-клеток (на 17,4%), относительное (Р<0,02) и абсолютное число В-клеток (ЕАС) - на 20,9 и 25,0%, В-RIgM-клеток - в 2,97 и 2,65 раза (Р<0,02), БАСК - на 10,8%, ЛАСК - на 76,8%, КАСК - на 57,5% в сочетании с С1q - на 4,5% и С3 - на 29,6%, при этом более низкий уровень лейкоцитов в крови на 20,2%, ФАЛ (Р<0,05), ФЧ и ФИ - на 30,8 и 15,8%, а также (вдвое) концентрации IgG, IgА (Р<0,05; Р<0,02) и IgМ - в 1,55 раза, что свидетельствует о снижении фетоплацентарной недостаточности.

После приёма молозива у всех телят 2-4 дневного возраста повышались: БАСК, КАСК в сочетании с уровнем С1q и С3, ФАЛ, достоверно - процент Т- и В (ЕАС)-клеток. У молодняка контрольной группы вследствие заболевания омфалитом и диареей отмечали более раннюю В-клеточную дифференцировку - увеличение абсолютного их количества с IgG-рецепторами (Р<0,01), содержания в крови С3 (острофазный белок), ФАЛ и КАСК - на 23,3; 9,0 и 33,1% соответственно.

У телят контрольной группы 2-х недельного возраста, переболевших омфалитом и диареей, отмечали лейкоцитоз и лимфоцитоз (Р<0,001), увеличение концентрации С3 на 12,3%, IgМ - на 9,3% в сочетании с уровнем В-RIgM-клеток, ЛАСК - на 27,2%, но более низкие (на 11,0 и 13,5%) значения - ФЧ и ФИ, а в месячном возрасте - повышенный уровень IgМ в крови - на 23,2% (Р<0,001) и IgG - на 24,4%, то есть активацию первичного и вторичного гуморального иммунитета.

Таким образом, установлено прямое влияние оптимизации обмена веществ на иммунный статус в системе мать-плод-новорожденный, что обусловило умеренную реактивность у них иммунной системы и повышение устойчивости телят к возникновению неонатальных болезней.

3.2 Иммунный статус и морфология локального иммунитета при болезнях коров в послеродовой период

3.2.1 Иммунный статус коров, заболевших эндометритом

У коров, предрасположенных к заболеванию после родов эндометритом, по сравнению с оставшимися здоровыми, за 2-2,5 мес до отёла отмечали повышенный уровень в крови лейкоцитов на 40,5% и лимфоцитов - на 80,0% (Р<0,05), напряжённость локального иммунитета (уровня IgА) - в 1,74 раза (Р<0,01), ЛАСК - на 27,2%, ФЧ - на 11,4%, ФИ - на 7,8%, но низкую БАСК (Р<0,02). Эти изменения свидетельствуют о мобилизации защитных систем организма, вероятно, на эндогенную интоксикацию. При этом также был выше на 67,8% (Р<0,02) абсолютный уровень Т-клеток за счёт лимфоцитоза.

За 1-2 недели до отёла у заболевших коров наблюдали отрицательную динамику количества лейкоцитов и лимфоцитов в крови, вероятно, вследствие повышенной миграции в стенку матки, снижение КАСК на 32,8% (Р<0,05) в сочетании с уменьшением уровня С1q на 41,3% и С3 - на 26,8% (Р<0,05), ФЧ и ФИ (Р<0,05; Р<0,02). По отношению к контролю, произошло увеличение относительного количества Т-лимфоцитов на 9,9% и абсолютного - на 41,2%, у них были выше также процент и абсолютное число В-клеток с IgG- (Р<0,02; Р<0,01) и IgМ-рецепторами.

На 3-6 день после отёла у больных животных, вследствие мобилизации неспецифических защитных механизмов, отмечали динамическое увеличение до уровня у коров контрольной группы ФЧ и ФИ, КАСК в сочетании с показателями - С1q и С3, числа лимфоцитов, более высокую ЛАСК на 24,6%. При этом заметно ниже концентрация IgМ на 18,6%, исчезал или снижался коэффициент достоверности между уровнями IgА в крови, что обусловлено повышенной транссудацией иммуноглобулинов из сыворотки крови. Однако отрицательная динамика уровня IgG в крови была менее выраженной, что предположительно связано с активацией вторичного гуморального иммунитета. Вследствие нарушения адаптации к родовому стрессу у больных коров значительно уменьшился (на 14,4%) процент Т-лимфоцитов при увеличении (на 16,6%) у здоровых животных.

Через 2 недели после родов у больных, по сравнению со здоровыми, отмечали выраженный лейкоцитоз и лимфоцитоз, соответственно - на 36,2 и 56,3%, в результате чего было стабильно выше абсолютное число Т-клеток (на 44,7%), В-RIgG- и RIgМ-клеток (в 3,36 и 2,4 раза), наблюдали активацию локального иммунитета - увеличение концентрации IgА в крови в 1,76 раза, а также вторичного ответа - уровня IgG на 20,0% (Р<0,05).

Таким образом, у заболевших послеродовым эндометритом коров вследствие повышенного антигенного воздействия, отмечаются значительные изменения (дисбаланс) в иммунном статусе, характеризующиеся напряжённостью защитных систем организма и неустойчивой динамикой показателей.

3.2.2 Локальный иммунитет у коров, больных послеродовым эндометритом

Через неделю после отёла в маточной слизи у больных эндометритом коров выше, чем у здоровых, концентрация IgG в 4,5 раза, IgМ - в 5,6 раза, а также С1q - в 7,7 раза (Р<0,02) в результате усиления локального его образования макрофагами, и С3 - в 1,55 раза, но ниже уровень IgА - в 2,0 раза, и практически равное соотношение SIgA/cIgA у них - 1:0,47 и у здоровых животных - 1:0,48 (табл. 1).

Таблица 1

Содержание иммуноглобулинов и белков системы комплемента в маточной

слизи у здоровых и больных послеродовым эндометритом коров

Показатели	здоровые животные	эндометрит	здоровые животные	эндометрит
	Через неделю после отёла	Через 2 недели после отёла
IgG, г/л	0,376±0,17	1,690±0,43хх	0,543±0,20	3,690±0,40**
IgM, г/л	0,032±0,01	0,180±0,053хх	0,073±0,016	0,410±0,081*
IgA (общ.), г/л	0,562±0,17	0,280±0,039	0,187±0,019	0,420±0,109**
SIgA, г/л	0,378±0,11	0,190±0,024	0,123±0,01	0,260±0,063
сIgA, г/л	0,183±0,056	0,090±0,016	0,064±0,004	0,160±0,047**
SIgA/cIgA	1:0,48	1:0,47	1:0,52	1:0,62
C1q, ЕД	11,3±11,3	86,7±23,5хх	6,67±6,67	136,0±33,3*
C3, ЕД	3,29±1,39	5,09±1,02	3,78±0,69	13,2±1,94**

^х -Р<0,05; ^хх-Р<0,02; *-Р<0,01; **-Р<0,001 - по сравнению с контролем

Через две недели после отёла у больных коров, вследствие выраженных гемодинамических расстройств, концентрация IgG увеличилась - в 6,8 раза (Р<0,001), IgМ - в 5,6 раза (Р<0,01). Существенно повысился уровень IgА - в 2,25 раза (Р<0,001) и снизилось соотношение SIgA/cIgA - 1:0,62 против 1:0,52 в норме. Значительно увеличилась концентрация С1q - в 20,4 раза (Р<0,01) и С3 - в 3,5 раза (Р<0,001).

Выраженные нарушения гемодинамики у больных послеродовым эндометритом коров обусловливают транссудацию сывороточных белков и эмиграцию форменных элементов крови в стенку матки, что при морфологическом исследовании подтверждалось наличием отёка, вакуолизации и нейтрофильной инфильтрации эндометрия.

При эндометрите у коров локальный иммунный ответ проявлялся очаговой и диффузной лимфоидно-макрофагальной инфильтрацией, плазмоклеточной реакцией и фагоцитозом микроорганизмов в основной пластинке матки (рис. 1).

Рис.1. Состояние местного иммунитета в матке у коров, больных послеродовым эндометритом: а) миграция нейтрофилов в эпителиальный слой и его разрушение; б) очаговая нейтрофильная инфильтрация и плазматизация эндометрия; в) очаговая лимфоидно-макрофагальная инфильтрация эндометрия; г) очаговая лимфоидная инфильтрация и плазматизация эндометрия; д) активный фагоцитоз кокковой микрофлоры.

3.2.3 Иммунный статус коров при мастите

У коров, предрасположенных к заболеванию субклиническим и клиническим маститом, по сравнению с оставшимися здоровыми, за 2-2,5 месяца до отёла повышены: содержание в крови лейкоцитов, соответственно - на 19,0 и 21,1%, лимфоцитов - на 33,9 и 37,9% (Р<0,05), абсолютное число Т-клеток - на 14,8 (Р<0,05) и 40,0%, В-клеток (ЕАС) - на 83,1 и 37,3%, уровень IgА - в 1,56 (Р<0,05) и 1,55 раза, а клиническим маститом также IgG - на 11,8%.

За 1-2 недели до отёла наблюдали повышение БАСК - на 4,1 и 7,5% (Р<0,05), но снижение КАСК - на 28,4 (Р<0,05) и 30,2% в сочетании с уровнем С1q - на 12,1и 13,6% и С3 - на 14,6 и 15,5%, ЛАСК - на 42,7 и 16,9%, ФЧ - на 16,8 и 31,0% (Р<0,05), ФИ - на 17,5 и 30,6% (Р<0,01), числа лейкоцитов и лимфоцитов в крови до такового у здоровых животных, увеличение относительного количества Т-клеток - на 19,0 и 23,8%, более высокий процент В-RIgG-клеток - в 2,24 и 1,6 раза и абсолютное их число - в 2,36 и 1,5 раза, снижение концентрации IgG в крови - на 21,6 и 21,2% вследствие повышенной транссудации в пораженные доли молочной железы.

На 3-6 день после отёла у больных коров произошло увеличение до уровня у здоровых животных или превышение его показателей: ЛАСК, КАСК, С1q, С3, ФЧ и ФИ, но отмечали дефицит относительного количества Т-клеток - на 22,7 и 13,2%, относительного и абсолютного числа В-RIgG-клеток - на 30,8 и 25,6%, более низкую концентрацию в крови IgG - на 14,1 и 7,7%, IgМ - на 32,8 (Р<0,05) и 9,0%, и выраженную тенденцию снижения уровней IgА.

Через две недели после отёла у больных скрытым и клиническим маститом наблюдали лейкопению (на 10,5 и 21,2%), у последних также - лимфоцитопению (на 18,9%) вследствие усиления миграции клеток в поражённые доли молочной железы в отсутствие своевременного лечения, снижение ФЧ - на 31,1 и 46,4%, ФИ - на 32,9 и 47,0%, повышение: ЛАСК - на 25,0 и 12,3%, содержания IgА в крови - в 2,0 (Р<0,02) и 1,95 раза (Р<0,01), у последних также IgG - на 23,0%.

Таким образом, установлено, что при гнойных инфекциях независимо от локализации (эндометрит, мастит) у коров, находящихся в равных условиях, наблюдаются практически идентичные изменения иммунного статуса в исследуемые периоды.

3.2.4 Локальный иммунитет в молочной железе у коров при мастите

У коров через две недели после отёла при возникновении субклинического мастита защита молочной железы осуществляется за счёт локального иммунитета. В молоке поражённых долей, по сравнению с нормальным, достоверно увеличивается общий уровень IgА на 233% (SIgA - на 194%, сывороточная форма IgA - на 300%), IgМ - на 40,4% при незначительном повышении уровня IgG - на 12,4% (табл. 2).

Развитие воспалительного процесса при скрыто протекающем мастите сопровождалось усилением транссудации белков из сыворотки крови. Концентрации IgG и IgМ в поражённых долях повысились, соответственно - на 91 и 113%, IgА - на 310% (SIgA - на 269%, сIgA - на 371%), соотношение SIgA/сIgA снизилось и составило - 1:0,85 против 1:0,67 в молоке из нормальных долей.

При клиническом мастите, вследствие усиления сосудистых расстройств, в поражённых долях значительно повышается уровень IgG - на 580%, IgМ - на 101%, IgА - на 300% (SIgA - на 167% и сIgA - на 577%), соотношение SIgA/сIgA снижается до 1:1,22 против 1:0,48 в здоровых долях.

При морфологическом исследовании установлено, что субклинический мастит характеризуется очаговым поражением молочной железы, наличием в просвете альвеол небольшого количества полиморфноядерных лейкоцитов, утолщением межальвеолярной соединительной ткани и увеличением числа лимфоидных и плазматических клеток, что подтверждает преимущественно локальный синтез иммуноглобулинов. При клиническом мастите наблюдали обширную внутридольковую и междольковую нейтрофильную инфильтрацию, диффузную межальвеолярную и междольковую лимфоидную инфильтрацию, менее выраженную плазмоклеточную реакцию, деструктивные изменения и снижение секреции в молочной железе (рис. 2).

Таблица 2

Концентрации иммуноглобулинов в секрете молочной железы у здоровых и больных маститом коров

Группы животных	IgG, г/л	IgM, г/л	IgA, г/л	SIgA, г/л	сIgA, г/л	SIgA/cIgA
Клинически здоровые коровы, доли (n=14)	0,660±0,11	0,201±0,041	0,115±0,033	0,065±0,014	0,050±0,018	1:0,77
Субклинический мастит (ранняя стадия):
Поражённые доли (n=6) Здоровые доли (n=4)	0,679±0,087 (+12,4%)	0,132±0,045 (+40,4%)	0,180±0,046х (+233,3%)	0,100±0,023х (+194,4%)	0,080±0,037х (+300,0%)	1:0,80
	0,620±0,12	0,094±0,031	0,054±0,013	0,034±0,007	0,020±0,006	1:0,59
Субклинический мастит:
Поражённые доли (n=11) Здоровые доли (n=9)	0,899±0,091** (+91,3%)	0,226±0,045х (+113,2%)	0,246±0,045** (+310,0%)	0,133±0,021 (+269,4%)	0,113±0,025* (+370,8%)	1:0,85
	0,470±0,051	0,106±0,019	0,060±0,008	0,036±0,005	0,024±0,004	1:0,67
Клинический мастит:
Поражённые доли (n=8) Здоровые доли (n=6)	3,040±0,37** (+580,1%)	0,329±0,088 (+100,6%)	0,320±0,089х (+300,0%)	0,144±0,032х (+166,7%)	0,176±0,062х (+576,9%)	1:1,22
	0,447±0,086	0,164±0,048	0,080±0,027	0,054±0,022	0,026±0,007	1:0,48

^х-Р<0,05; *- Р<0,01; **-Р<0,001 - по сравнению с здоровыми долями; (%) - прирост по отношению к уровню в здоровыхдолях

Рис.2. Структурные изменения и состояние локального иммунитета в молочной железе у коров: а) норма; б) нейтрофилы в секрете альвеол очага поражения, межальвеолярная лимфоидная инфильтрация; в) интенсивная плазмоклеточная реакция при субклиническом мастите; г) выраженная внутриальвеолярная и межальвеолярная нейтрофильная инфильтрация при клиническом мастите.

3.3 Иммунный статус и морфология локального иммунитета при болезнях телят

3.3.1 Формирование и причины нарушения колострального иммунитета у телят, его связь с заболеваемостью колибактериозом

Установлено, что колостральный иммунодефицит у телят при своевременной выпойке молозива (не позднее 1,5 часов после рождения) обусловлен:

- низким содержанием иммуноглобулинов в молозиве первого удоя, индивидуальные концентрации которых у коров 3-5 отёлов, значительно варьировали: IgG - от 29,0 до 177,0 г/л, IgМ - 7,4 - 23,0 г/л и IgА - 1,35 - 14,1 г/л. Выявлена положительная коррелятивная связь между содержанием IgА, IgG и IgМ в молозиве матерей и сыворотке крови у однодневных телят (r=0,591; r=0,543 и r=0,509);

- недостаточным потреблением телятами молозива в первую выпойку (от 0,5 до 2,0 литров), зависящим от выраженности у них сосательного рефлекса в течение первых 1-1,5 ч жизни, который был слабее у телят, полученных при затяжных родах, что связано с наличием у них дыхательного ацидоза.

Так, количество потреблённого телятами с молозивом матери IgG в первую выпойку варьировало от 29 до 177 г, в четвёртую - от 6 до 100 г, а в сумме в первые сутки при 4-кратной выпойке - от 140 до 475 г. При этом не у всех телят количество потреблённого с молозивом IgG при каждой последующей выпойке носит убывающий характер, что отразилось на повышении коэффициента корреляции между уровнем IgG (г/л) в сыворотке крови телят и абсолютным количеством IgG (г), поступившим в желудочно-кишечный тракт с молозивом за сутки (r=0,725), чем с молозивом первого удоя (r=0,683);

- низкой абсорбцией иммуноглобулинов в кишечнике (от 2,44 до 31,9%). При поступлении в пищеварительный тракт телят низкого количества иммуноглобулинов абсорбция снижается. Так, у телят, получивших за сутки в 2 и 1,5 раза меньше количества IgG, чем новорожденные контрольной группы, интенсивность всасывания была ниже (7,44±2,45%), соответственно в 1,91 и 1,76 раза, в итоге содержание IgG в сыворотке крови ниже - в 4,1 и 2,6 раза.

Одновременно с поступлением иммуноглобулинов в систему циркуляции крови, происходит перераспределение их на «отдалённые» слизистые оболочки.

Наряду с IgG, IgМ и сывороточной формой IgА в систему кровообращения телят абсорбировался и SIgА, при этом соотношение SIgА/сIgА индивидуально, и менялось соответствуя содержанию их в молозиве.

Установлено, что в носовом секрете телят до приёма молозива содержание иммуноглобулинов незначительно: IgG - от 0,019 до 0,090 г/л, IgА - 0,006-0,021 г/л при соотношении SIgА/сIgА - 3:1. На 2-е сутки после приёма телятами молозива концентрация IgG в носовом секрете увеличилась в среднем в 8 раз, а общее содержание IgА только в 1,75 раза, причём за счёт сывороточной формы IgА, тогда как уровень SIgА оставался практически неизменным. Следовательно, переход SIgА на поверхность слизистой верхних дыхательных путей не происходит, а местная защита в первые дни жизни телят осуществляется, главным образом, за счёт перехода из сыворотки крови IgG и незначительного поступления сывороточной формы IgА. Однако через две недели общее содержание IgА в носовом секрете у телят значительно возросло - в среднем в 9 раз (SIgА - в 10 раз, сывороточная форма IgА - в 7,7 раза), что при снижении (в 6 раз) уровня IgА в сыворотке крови свидетельствует о локальной их продукции. Содержание IgG повышалось лишь в 1,2 раза.

У телят с колостральным иммунодефицитом (IgG<8 г/л) наблюдали более ранний первичный, вторичный и локальный иммунный ответ: увеличение уровня IgМ в крови - в двухнедельном возрасте, IgG и IgА - в месячном, а у телят с высоким лактогенным иммунитетом (IgG>17 г/л), повышение уровня IgМ и IgА происходило в возрасте 2-х, а IgG - 2,5 месяцев.

Выявлена прямая связь между уровнем противоэшерихиозных антител и IgG в сыворотке крови у однодневных телят, родившихся от привитых коров. Так, при концентрации IgG выше 20 г/л признаки диареи отсутствовали, от 10-17 г/л, отмечали в 54%, а ниже 8 г/л - в 75% случаев.

Нарушение формирования колострального иммунитета повышает риск возникновения у новорожденных неонатальных патологий - омфалита, септицемии, диарейного и респираторного синдромов.

3.3.2 Иммунный статус телят при омфалите

Изучено влияние иммунного статуса на заболеваемость телят омфалитом, родившихся от коров с нарушенным (1-я опытная группа) и нормализованным обменом веществ (2-я опытная группа).

В патогенезе омфалита принимали участие условно патогенные микрорганизмы - Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Str. fаecalis, стрептококки группы С.

У 2-4 дневных телят до проявления клинических признаков как тяжёлого (1-я группа), так и лёгкого течения омфалита (2-я группа), по сравнению с оставшимися здоровыми, отмечали лейкоцитоз (Р<0,01; Р<0,05), лимфоцитоз (Р<0,01), дефицит относительного уровня Т-клеток - на 30,4 (Р<0,01) и 7,4%, в обоих случаях (вдвое) ниже процент и (в 1,31 и 1,36 раза) абсолютное число В-клеток с С3-рецепторами, в 1,81 (Р<0,01) и 1,67 раза - с IgМ-рецепторами. У них был выраженный колостральный иммунодефицит - достоверно (вдвое) ниже уровень IgG в крови, в 3,48 и 2,79 раза - IgМ, в 2,63 и 2,29 раза - IgА, а также показатели естественной резистентности: БАСК - на 4,5 и 8,2%, ЛАСК - в 1,45 и 1,6 раза, С1q - на 28,5% (Р<0,01) и 31,6% (Р<0,001), но более высокие уровни С3 - на 67,0% (Р<0,02) и 45,1% (Р<0,05) и показатели фагоцитоза - ФЧ - в 1,49 (Р<0,01) и 1,48 раза, ФИ - в 1,28 и 1,16 (Р<0,05) раза, что свидетельствуют о возникновении воспалительного процесса.

У больных телят 2-х недельного возраста, особенно 1-й группы, увеличилось содержание лейкоцитов и лимфоцитов в крови, в обоих случаях (в 1,47 раза) - абсолютное число Т-клеток, превысив показатель контроля - в 1,21 и 1,22 раза соответственно. Вследствие активной дифференцировки, у молодняка 1-й группы выше относительный и абсолютный уровень В-RIgG-клеток - на 9,7 и 87,5% (Р<0,05), у телят 2-й группы - на 10,3 и 31,3% соответственно, а также количество В-RIgМ-клеток, что сочеталось с ранней (скрытой) индукцией первичного и вторичного гуморального ответа - менее выраженной отрицательной динамикой уровня IgМ и IgG в крови, чем у здоровых животных. У первых, достоверно снизилась БАСК (Р<0,001), у всех больных оставались ниже: ФАЛ, уровень С1q (Р<0,001; Р<0,001), но повысилась в динамике ЛАСК, и достоверно, уровень С3 (Р<0,001; Р<0,01), у телят с лёгким течением омфалита также ФЧ и ФИ (Р<0,01; Р<0,001).

У переболевших омфалитом телят месячного возраста отмечали дефицит абсолютного количества Т-клеток (на 26,1 и 11,3%), более низкие: БАСК (Р<0,05; Р<0,05), уровень С1q (Р<0,02; Р<0,001), ФАЛ - на 5,1 и 11,9% (Р<0,02), у первых из них - ЛАСК в 1,53 раза, но активацию первичного гуморального ответа - увеличение уровня IgМ в крови на 7,5%, у вторых, менее выраженное его снижение, чем у здоровых, оставался выше уровень С3 - на 35,5 (Р<0,001) и 19,3%, ФЧ и ФИ (Р<0,05-Р<0,01), то есть наблюдался выраженный дисбаланс специфических и естественных факторов защиты.

Заболеваемость омфалитом телят, родившихся от коров с нормализованным обменом веществ с показателем зателейение диагностикумов для определения концентраций по сравнению с молодняком, полученным от коров с нарушенным метаболизмом, существенно снижалась и составила - 30,8% против 63,3%, а продолжительность болезни - 6,6 против 16,5 дней.

3.3.3 Иммунный статус телят при диарейном синдроме

Изучено влияние иммунного статуса на заболеваемость телят колибактериозом, родившихся от коров с нарушенным (1-я опытная группа) и нормализованным обменом веществ (2-я опытная группа).

Из содержимого кишечника и паренхиматозных органов больных телят выделены культуры E. coli серовариантов: О41, О2, О4, О142 и О103. В пробах фекалий методом ПЦР определено наличие генома вируса ВД-БС в 60%, хламидий - в 40%.

У 2-4 дневных телят 1-й и 2-й групп, которые были предрасположены соответственно к тяжёлому и лёгкому течению диареи, выше, чем у оставшихся здоровыми, количество лейкоцитов в крови - на 27,0 (Р<0,01) и 6,6%, у первых также лимфоцитов - на 36,4% (Р<0,05), но дефицит относительного уровня Т-клеток - на 25,5% (Р<0,05), в обоих случаях кроме того - В-клеток с С3- и IgМ-рецепторами (Р<0,001; Р<0,05), заметно выражен колостральный иммунодефицит - достоверно ниже содержание в крови IgG - на 37,4 и 46,3%, IgМ - на 57,5 и 44,7%, IgА - на 51,3 и 43,6%, титры антител к Е. соli - в 3,75 и 2,0 раза, БАСК - на 13,5 (Р<0,01) и 3,0%, ЛАСК - на 22,2 и 16,7%, С1q - на 29,2 и 25,5% (Р<0,01; Р<0,02). При этом более высокий уровень С3 - на 58,3 (Р<0,01) и 19,7%, а у телят с тяжёлым течением болезни - ФЧ и ФИ (Р<0,05), свидетельствуют о наличии воспалительного процесса.

У больных телят 2-х недельного возраста обеих групп наблюдали тенденцию к снижению абсолютного числа Т-клеток. У молодняка 1-й группы - лейкоцитоз, тенденция уменьшения количества лимфоцитов, увеличение относительного и абсолютного числа В-клеток с С3- и IgМ-рецепторами, что сопровождалось активацией первичного ответа - менее выраженным снижением уровня IgМ в крови - в 2,05 раза против 2,48 раза у здоровых телят, но более интенсивное снижение уровня IgG - в 1,83 раза против 1,4 раза в контроле, что связано с усилением элиминации и выведением белков при диарее. У больных телят 2-й группы - снижение числа лейкоцитов и лимфоцитов в крови, менее выражен первичный ответ. У больных животных обеих групп оставались ниже, чем у здоровых, БАСК (на 10,3 и 10,4%), ЛАСК (на 10,4 и 38,8%), уровень С1q (на 43,5 и 36,0%), ФАЛ - на 8,4% (Р<0,001) и 8,1%, значения - ФЧ и ФИ (Р<0,01-0,05), но заметно выше уровни С3 (на 12,7 и 11,6%), отражающие более высокую активность системы комплемента.

У переболевших диареей телят месячного возраста, по сравнению со здоровыми, отмечали дефицит абсолютного количества Т-клеток (на 20,0 и 12,4%), у телят 1-й группы также относительного (на 29,8%), увеличение уровня IgМ в крови - на 33,8 и 15,0%, у первых положительную динамику уровня IgG (на 7,6%) в сочетании с увеличением процента и абсолютного числа В-RIgG-клеток (Р<0,02; Р<0,02). В обоих случаях, оставались ниже БАСК - на 8,4 (Р<0,001) и 5,2%, у телят 1-й группы - ФАЛ (Р<0,01), уровни С1q - на 35,9% (Р<0,001) и 22,1%, но выше ФЧ - на 76,7 (Р<0,01) и 43,5%, ФИ - на 87,8 (Р<0,001) и 63,0%, у телят 1-й группы также уровень С3 - на 11,0%.

Заболеваемость колибактериозом телят, родившихся от коров с нормализованным метаболизмом, была существенно ниже и составила - 65,4% против 96,7%, а продолжительность болезни - 3,53 против 7,14 дней у молодняка, полученного от коров с нарушенным обменом веществ.

Таким образом, установлено, что одной из основных причин возникновения неонатальных патологий (омфалита и диареи) у телят, родившихся от коров с разным метаболизмом, является дефицитный уровень пассивной колостральной защиты. Заболеваемость последних с более высоким содержанием Т-лимфоцитов в крови снижалась, что, по-видимому, связано не с реализацией Т-клеточного иммунитета, а с морфофункциональным состоянием тимуса, его гормональным статусом, влияющим на синтез Е-рецепторов, и отражающим степень развития всех органов и систем организма новорожденных. Это подтверждалось также наличием у них более высокого, близкого к таковому у здоровых животных, уровня В-клеток в крови, показателей естественной резистентности - БАСК, ЛАСК и С1q-компонента комплемента.

Учитывая то, что С1q вырабатывается наряду с макрофагами также энтероцитами подвздошной и толстой кишки, можно предположить, что интенсивность его биосинтеза у новорожденных отражает степень морфофункционального развития пищеварительного тракта и устойчивость к воздействию патогенов.

При гистологическом исследовании в тонком кишечнике больных колибактериозом телят 4-10 дневного возраста установлены выраженные сосудистые расстройства - гиперемия и стаз. В сосудах подслизистой основы наличие значительного количества лимфоцитов и нейтрофилов, что связано с активной их эмиграцией, сосуды субэпителиальной области ворсинок кровенаполнены, кровоизлияния в строму, инфильтрация её нейтрофилами, впоследствии разрушение эпителия ворсинок, выход нейтрофилов в полость кишечника и скопление их в углублениях крипт, а также клеточного детрита в полости органа. Об активации иммунных механизмов свидетельствует наличие в ворсинках тонкой кишки значительного количества межэпителиальных лимфоцитов, появление плазмоцитов в собственном слое слизистой, а в отдельных лимфоидных фолликулах пейеровых бляшек подвздошной кишки - светлых (реактивных) центров (рис. 3).

Рис.3. Структурное состояние локального иммунитета при колибактериозе у телят: а) стаз, значительное количество нейтрофилов в сосудах; б) миграция нейтрофилов в эпителиальный слой и его разрушение; в) скопление нейтрофилов в углублениях крипт; г) увеличение числа МЭЛ; д) появление плазмоцитов в lamina propria тонкой кишки; е) появление светлых центров в лимфоидных фолликулах подвздошной кишки.

3.3.4 Иммунный статус телят при респираторном синдроме

Изучен иммунный статус телят, заболевших респираторным синдромом, полученных от коров с нарушенным (1-я опытныя группа) и нормализованным (1-я опытныя группа) обменом веществ. Заболевали телята, переболевшие диареей, что наблюдалось в 70 и 64% соответственно, поэтому иммунный статус телят 2-х недельного возраста соответствовал таковому у больных колибактериозом.

Этиологическая структура респираторных болезней телят при исследовании 6 проб носовой слизи представлена наличием генома вируса ВД-БС в 50,0%, микоплазм - в 100% и хламидий - в 16,7%. В сыворотке крови коров до запуска обнаружены в диагностических титрах антитела к вирусу ПГ-3 (1:320-1:1256) в 100%; ВД-БС (1:16-1:64) в 92,9% и ИРТ (1:16) в 17,9%, что свидетельствует о циркуляции этих возбудителей в хозяйстве.

Из носовой слизи больных телят выделены культуры: Staph. haemolyticus (25%), Staph. aureus (8,3%), Staph. saprophiticus (8,3%), стрептококков группы С, В и Str. faecium (каждый - 16,7%), Str. salivalis (8,3%), E. сoli серогрупп - 08, 0101, (каждый - 8,3%), 026 (16,7%), 01, 04, 0103 (каждый - 25,0%), Enterobacter cloceae (8,3%).

Результаты исследований свидетельствуют о наличии ассоциированной вирусно-бактериальной респираторной патологии у молодняка в хозяйстве.

У телят, родившихся от коров с нарушенным метаболизмом до появления клинических признаков болезни, выше, чем у здоровых животных уровень лейкоцитов в крови на 32,1% (Р<0,01), лимфоцитов - на 14,8%, дефицит относительного количества Т-клеток - на 19,9%, В-клеток с С3-рецепторами - на 34,6%, у них и телят 2-й группы - колостральный иммунодефицит, содержание IgG в крови ниже - на 46,5 и 39,2%, IgМ - на 39,7 и 51,9%, IgА - на 53,6 и 60,0%, а также БАСК - на 10,9 и 12,2% (Р<0,01-0,05), С1q - на 36,5 и 27,2%, ФАЛ - на 6,3 и 7,9%, но выше процент В-RIgG-клеток - в 1,5 и 2,4 раза и абсолютное их число - в 1,77 и 2,0 раза (Р<0,02), уровень С3 - на 34,8% (Р<0,02) и 11,5%, ФЧ - в 1,6 и 1,74 раза, ФИ - в 1,7 и 1,9 раза.

У больных телят месячного возраста 1-й группы увеличилась степень дефицита относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов, повысилось число В-клеток с С3- и IgG-рецепторами в сочетании с уровнем IgG в крови. У больных животных обеих групп наблюдали менее выраженное снижение уровня IgМ - на 4,3 и 16% против 26,3% у здоровых и тенденцию увеличения концентрации IgА, что свидетельствует о более ранней активации первичного и локального иммунитета.

Однако у телят 2-й группы в возрасте 1,5 месяцев после перевода на доращивание в помещения с недостаточной освещенностью, повышенной влажностью, наличием сквозняков, вследствие нарушения адаптации к стресс-воздействию, произошло значительное снижение относительного и абсолютного количества Т-клеток - на 29,8 и 32,3% (Р<0,01; Р<0,01), В-RIgМ-клеток - на 32,2 и 35,4% (Р<0,01; Р<0,05), угнетение синтеза IgG и IgМ. В отличие от них у молодняка 1-й группы количество В-RIgG-клеток увеличилось, и достоверно по отношению к показателю контроля - концентрация IgG в крови (Р<0,01). У больных телят 1-й и 2-й группы, независимо от проявления системного гуморального ответа, отмечали значительное усиление локального иммунитета, концентрации IgА в крови, по отношению к таковой у здоровых телят, в обоих случаях повысились - в 1,4 раза. У них был стабильно ниже уровень С1q в крови (Р<0,01; Р<0,01), формировался дефицит содержания С3 (Р<0,02; Р<0,02), а у телят 2-й группы также снижались - ЛАСК (Р<0,001), ФАЛ (Р<0,001), ФЧ и ФИ.