Синтез, свойства и биологическая активность производных ариламидов аминокарбоновых кислот

Размещено на http://www.allbest.ru/

На правах рукописи

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

синтез, свойства и биологическая активность производных ариламидов аминокарбоновых кислот

15.00.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

Гашкова Оксана Владиславовна

Пермь - 2009

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный руководитель: зав. кафедрой органической химии

ГОУ ВПО «Пермская государственная

фармацевтическая академия»

доктор фармацевтических наук, профессор,

заслуженный работник высшей школы РФ

Панцуркин Владимир Иванович

Научный консультант: зав. кафедрой физиологии и патологии

ГОУ ВПО «Пермская государственная

фармацевтическая академия»

доктор медицинских наук, профессор

Сыропятов Борис Яковлевич

Официальные оппоненты: зав. кафедрой биологической химии

ГОУ ВПО «Пермская государственная

фармацевтическая академия»

доктор фармацевтических наук, профессор

Михалев Александр Иванович

доктор химических наук,

старший научный сотрудник

Института технической химии УрО РАН г.Пермь

Глушков Владимир Александрович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Башкирский государственный

медицинский университет Федерального агентства

по здравоохранению и социальному развитию»

Защита диссертационной работы состоится 22 декабря 2009 года на заседании диссертационного совета Д 208.068.01 при ГОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 614990, г. Пермь, ГСП-277, ул. Ленина, 48, e-mail: perm@pfa.ru факс: 2-12-90-06

С диссертационной работой можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 614070, г. Пермь, ул. Крупской, 46

Дата размещения объявления о защите диссертации на сайте ПГФА 22 ноября 2009 г. http://www.pfa.ru

Автореферат разослан «__» ноября 2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 208.068.01,

к.ф.н., доцент Липатникова И.А.

Общая характеристика работы

Актуальность работы. В XXI столетии сердечно-сосудистые заболевания остаются основной причиной смертности населения большинства развитых стран мира. К тому есть ряд причин, одной из которых является возникающие аритмии сердечной деятельности. Различные по патогенезу аритмии требуют расширения поиска соответствующих антиаритмических средств.

Перспективным классом соединений для поиска веществ с разнообразной биологической активностью, в том числе и антиаритмической активностью, являются ариламиды аминокарбоновых кислот и их производные. Их расширенный синтез и исследование биологической активности начались с открытия присущей им анестезирующей активности. Результатом исследований явилось внедрение в 1948 году в медицинскую практику местного анестетика ксилокаина (лидокаина). В дальнейшем в СССР из соединений данной группы был внедрен в медицинскую практику местный анестетик тримекаин.

С момента выявления в 1950 году антиаритмической активности у лидокаина амиды аминокислот стали объектами изучения данного вида активности исследователями различных стран. Тримекаину также оказалась присуща антиаритмическая активность. В то же время было выявлено, что из-за быстрого разрушения лидокаина и тримекаина в печени терапевтический эффект их оказывается кратковременным.

Дальнейшими исследованиями различных авторов было показано, что получение на основе лидокаина, тримекаина четвертичных аммониевых производных (ЧП) приводит к повышению эффективности и длительности их антиаритмического действия. Помимо антиаритмической активности данным соединениям присуща и местноанестезирующая активность. Поэтому поиск новых соединений, обладающих значительной и длительной антиаритмической активностью, а также местноанестезирующим действием среди четвертичных производных ариламидов аминокарбоновых кислот и их солей является актуальным. Исходными веществами для синтеза ЧП послужили ранее выявленные в ходе научно-исследовательской работы ПГФА соединения, проявляющие выраженную антиаритмическую активность 2-метилфениламид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты гидрохлорид (мономекаин), 2-метилфениламид морфолиноэтановой кислоты гидрохлорид (морфолид), а также 2-бромфениламид 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты (анилокаин).

Цель работы - осуществить синтез различных солей ариламидов аминокарбоновых кислот и их четвертичных производных, отличающихся структурой аминного фрагмента, а также длиной алкильной цепочки кислотной части. Исследовать их свойства, влияние структуры заместителя при аммонийном атоме азота, а также природы аниона кислоты на проявление биологической, и в частности, антиаритмической активности.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Осуществить синтез четвертичных производных 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты, 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты, 2-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты;

2. Провести синтез различных солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты, 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты, 2-бромфениламида 3-N,N - диэтиламинопропановой кислоты с некоторыми неорганическими и органическими кислотами;

3. Осуществить синтез солей 2,6-диметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты, 2,4,6-триметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты с некоторыми неорганическими и органическими кислотами;

4. Доказать структуру синтезированных соединений спектральными методами анализа;

5. С целью выявления возможных факторов, влияющих на проявления биологической активности, исследовать зависимость структура-активность.

6. На основе анализа результатов биологической активности синтезированных соединений провести отбор перспективных соединений для углубленного изучения.

Научная новизна работы:

1. Синтезировано 85 соединений, из них 78 ранее не описанных в литературе;

2. Изучены физико-химические свойства, а также спектральные особенности структуры синтезированных соединений;

3. Выявлены особенности влияния структуры синтезированных соединений на их свойства и биологическую активность;

4. Проведен анализ результатов скрининга острой токсичности, а также антиаритмической, местноанестезирующей, противомикробной, гипогликемической активности, влияние на гемостаз;

Практическая значимость. 1. Осуществлен направленный синтез 85 четвертичных производных, солей минеральных и органических кислот ариламидов аминокарбоновых кислот. 2. Рекомендованы для углубленных фармакологических исследований 2-метилфениламид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты нитрат, N,N-бис-(2-метилфенилкарбамоил)-N,N-диэтиламмоний хлорид, N-(2-метилфеникарбамоилметил)-N-(21-метоксифенилкарбамоилметил)-N,N-диэтиламмоний хлорид, проявляющие анти-аритмическую активность. 3. Даны рекомендации по синтезу биологически активных веществ. 4. Подано 3 заявки на получение патентов, 1 решение о выдаче патента на изобретение.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на конгрессах и конференциях различного уровня. Среди них международная научно-практическая конференция «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2006), межрегиональная научно-практическая конференция студентов и молодых ученых «Молодежь и наука. Итоги и перспективы» (Саратов, 2006), XIV Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (Москва, 2007), конференция аспирантов, посвященная 70-летию ПГФА (Пермь, 2007), Российская научно-практическая конференция ПГФА в рамках 14-ой международной выставки «Медицина и здоровье» (Пермь, 2008), конференция «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2008), украинская научно-практическая конференция «Проблемы синтеза биологически активных веществ и создание на их основе лекарственных субстанций» (Харьков, 2009).

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 11 научных работ: 1 статья в журнале, рекомендуемом ВАК, 3 статьи в сборниках, 7 тезисов докладов на конференциях различного уровня, подано 3 заявки на получение патентов, 1 решение о выдаче патента на изобретение.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, глав, посвященных синтезу и установлению структуры соединений, результатам изучения их биологической активности, а также главы, посвященной анализу структуры и биологической активности, заключения, рекомендаций, выводов, списка литературы, приложения. Работа иллюстрирована 16 схемами, 28 таблицами и 4 рисунками. Список литературы включает 96 работ отечественных и зарубежных авторов.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Синтез и физико-химические свойства полученных соединений;

2. Структуры впервые синтезированных соединений, установленные на основе спектральных данных;

3. Анализ корреляционной зависимости токсичности и липофильных констант заместителей при аминном атоме азота;

4. Исследование природы аниона солей ариламидов аминокарбоновых кислот на распределение электронной плотности в молекуле и их токсичность.

5. Характеристика соединений с выраженной антиаритмической активностью, перспективных для внедрения в медицинскую практику.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

производный ариламид аминокарбоновый кислота

С целью изучения влияния структуры заместителей при аминном атоме азота на проявление антиаритмической активности и в продолжение поиска антиаритмических средств были синтезированы четвертичные производные (ЧП) и соли минеральных, а также органических кислот 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты. Исходный 2-метилфениламид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты был получен путем ацилирования 2-метиланилина хлорангидридом хлорэтановой кислоты с последующим его аминированием и пропусканием сухого HCl через его эфирный раствор. Далее гидрохлорид подвергался очистке путем перекристаллизации с последующим подщелачиванием и выделением 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты.

Алкилированием 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты различными галогенопроизводными алканов с нормальной цепью, алкенов, арилалканов при нагревании в среде ацетона получали четвертичные производные (ЧП) по схеме 1:

Схема1

I(б-т)

R = СН3-(Iб); С2Н5-(Iв, Iг); н-С3Н7-(Iд ); -СН2-СН=СН2 (Iе, Iж); н-С4Н9- (Iз); н-С5Н11-( Iи);

н-С6Н13-( Iй, Iк); бензил (Iл); н-С9Н19-(Iм); н-С10Н21-( Iн);

(Iо); (Iп); (Iр); (Iс); (Iт).

X- = I -( Iб, Iг, Iд, Iж, Iк); Вr-( Iв, Iе, Iз, Iи, Iй, Iм, Iн); Сl-(Iл, Iо, Iп, Iр, Iс, Iт).

Значительную антиаритмическую активность при малой токсичности проявил гидрохлорид 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты (морфолид). Учитывая структурную близость данного соединения к мономекаину, лидокаину и тримекаину, были получены на его основе четвертичные производные и исследована их биологическая активность.

Алкилированием 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты, выделенного из гидрохлорида, различными галогеналкилпроизводными в среде ацетона при нагревании получали соответствующие четвертичные производные по схеме 2:

Схема 2

II(б-н)

R = СН3-(IIб); С2Н5-(IIв, IIг); н-С3Н7-(IIд ); -СН2-СН=СН2 (IIе, IIж); н-С4Н9- (IIз); н-С5Н11-( IIи); н-С6Н13-( IIк); бензил (Iл); н-С9Н19-(IIм); (IIн);

X- = I -( IIб, IIг, IIд, IIж, ); Вr-( IIв, IIе, IIз, IIк, IIи, IIм); Сl-(IIн).

С целью продолжения поиска соединений, проявляющих антиаритмическую активность, были синтезированы четвертичные производные 2-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты по следующей схеме:

Схема 3

I (а-р)

R = СН3-(IIIа); С2Н5-(IIIб, IIIв); н-С3Н7-(IIIг); -СН(СН)3(IIIд); -СН2-СН=СН2 (Iз, Iи); н-С4Н9- (IIIе,IIIж); н-С5Н11-( Iк); н-С6Н13-( IIIл, IIIм); бензил (IIIн);

(IIIо); (IIIр); (IIIп). X- = I -(IIIа, IIIв, IIIг,IIIд, IIIж, IIIи, IIIм); Вr-( IIIб, IIIе, IIIз, III к,IIIл ); Сl-(IIIн, IIIо, IIIп, IIIр).

Синтезированные вещества представляют собой бесцветные кристаллические соединения, растворимые в воде (соединения III избирательно), этаноле, ацетонитриле, ДМФА, не растворимые в гексане, бензоле, ацетоне. Структура соединений подтверждена с помощью ЯМР Н1-спектров.

С целью исследования влияния аниона кислоты на биологическую активность 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой, 2-метилфениламида морфолиноэтановой, 2-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислот были получены соли хлороводородной, бромоводородной, йодоводородной, хлорной, азотной и фосфорной кислотами, а также соли некоторых органических кислот по схеме 4:

Схема 4

n=1, R= о-СН3, R1= -N(C2H5)2: Х- = Cl- (I а), Br-(I у) , I -(I ф), NO3-( I х), H2PO4-( I ц),ClO4-( I ч) C7H5O3-( I ш).

n=1, R= о-СН3, R1= -N(CН2 СH2 )2О: Х- = Cl-( II а),Br-(II н) , I -(II о), NO3-( II п), H2PO4-( II р), ClO4- (IIс), C7 H5O3- (II т), C6H7O7-(IIу), C6H7O7- (IIф).

n=2, R= о-Br, R1= -N(C2H5)2: Х- = Cl- (IIIс), H2PO4- ( IIIт) , I - (IIIу), Br- (IIIф); ClO4- ( IIIх ), NO3-( IIIц ), C7H5O3- (IIIч),C6H7O7- ( IIIш).

В спектре ЯМР 1Н (BS-567А,(100 МГц) в СDCl3, DМSO, внутренний стандарт - гексаметилдисилоксан (ГМДС)) 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты наблюдаются полосы: триплет шести протонов этильного радикала в области 1,1-1,3 м.д., синглет трех протонов метильной группы ароматического кольца при 2,3 м.д., квадруплет четырех протонов СН2-группы этильного радикала при 2,5-2,8 м.д., синглет двух протонов СН2-группы углеродной цепочки при 3,1 м.д., мультиплет четырех протонов ароматического кольца ариламида в области 6,9-7,4 м.д., уширенный синглет протона -NH-группы при 9,3 м.д.

В спектре ЯМР 1Н 2-метиланилида морфолиноэтановой кислоты имеются: синглет трех протонов метильной группы ароматического кольца при 2,263 м.д., мультиплет четырех протонов двух метиленовых групп при атоме азота морфолинового фрагмента N(CH2CH2)2О при 2,671-2,755м.д., синглет двух протонов СН2- группы углеродной цепочки при 3,265 м.д., мультиплет четырех протонов двух метиленовых групп при атоме кислорода морфолинового фрагмента N(CH2CH2)2О в области 3,728-3,812 м.д., мультиплет четырех протонов ароматического кольца ариламида в области 6,808-7,986 м.д., синглет протона -NH-группы при 9,210 м.д.

В спектре ЯМР 1Н 2?-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты имеются: триплет шести протонов двух СН3-групп этильного радикала при 1,05-1,30 м.д., в области 2,6- 3,1 м.д. прописывается квадруплет четырех протонов двух СН2-групп этильного радикала и синглет четырех протонов двух СН2-групп углеродной цепи, мультиплет четырех протонов ароматического кольца при 6,9-7,6 м.д., синглет протона NH-группы при 10,1 м.д.

Наличие в структуре соединений анионов кислот было доказано с помощью качественных реакций по Государственной фармакопее 11 издания.

С целью дальнейшего изучения влияния аниона на биологическую активность были получены соли минеральных и органических кислот 2,4,6- триметилфениламида N,N- диэтиламиноэтановой кислоты, 2,6- диметилфениламида N,N- диэтиламиноэтановой кислоты по схеме 5:

Схема 5

R = 2,4,6- триметил- : Х- = Cl- (IVа), Br-(IVб), I - (IVв), NO3- (IVг), H2PO4-(IVд), ClO4- (IVе),C7 H5O3-(IVж), C6 H7O7-(IVз).

R = 2,6- диметил- : Х- = Cl- (Vа), Br-(Vб), I - (Vв), NO3- (Vг), H2PO4-(Vд), ClO4- (Vе),

C7 H5O3-(Vж), C6 H7O7-(Vз).

В спектре ЯМР 1Н 2,4,6-триметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты и 2,6-диметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты имеются: триплет шести протонов этильного радикала в области 1,1-1,3 м.д., синглет девяти протонов метильных групп ароматического кольца при 2,3 м.д. (2,4,6-триметилфениламид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты) или синглет шести протонов метильных групп ароматического кольца при 2,3 м.д.(2,6-диметилфениламид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты), квадруплет четырех протонов СН2-группы этильного радикала при 2,5-2,8 м.д., синглет двух протонов СН2-группы при 3,1 м.д., мультиплет четырех протонов ароматического кольца ариламида в области 6,9-7,4 м.д., уширенный синглет протона -NH-группы при 9,3 м.д., синглет протона кислоты при 10,3 м.д.

Наличие в структуре соединений анионов кислот было доказано с помощью качественных реакций.

Материалы и методы фармакологических исследований

производный ариламид аминокарбоновый кислота

Острую токсичность (кафедра физиологии и патологии ПГФА, доц. Рудакова И.П.)синтезированных соединений определяли на белых нелинейных мышах обоего пола массой 18-24 г при внутривенном введении. Вещества вводили растворенными в изотоническом растворе хлорида натрия из расчета 0,1 мл на 10 г живого веса. Результаты обрабатывали по Прозоровскому с вычислением средней смертельной дозы (LD50) при Р <0,05.

Антиаритмическую активность (доц. Рудакова И.П.) изучали на модели аритмии, вызванной внутривенным введением 2,8%-ного раствора хлорида кальция в дозе 280 мг/кг. Испытуемые вещества вводили за 2 мин до воспроизведения аритмии. Эффект оценивали по способности предупреждать смертельные нарушения сердечного ритма (ED50) при Р <0,05.

Местноанестезирующая активность (зав. кафедрой физиологии и патологии ПГФА, проф. Сыропятов Б.Я.).Активность соединений при поверхностной анестезии определяли на роговице глаза кролика по методу Ренье. Индекс Ренье-показатель глубины анестезии. Подопытных животных обоего пола массой 3,0-3,8 кг помещали в специальный ящик с отверстием, фиксирующим голову, затем в конъюнктивальный мешок вводили по 2 капли 1% или 2% раствора исследуемого вещества и определяли время начала анестезии по исчезновению роговичного рефлекса. В качестве эталонов сравнения использовали 1% и 2% водные растворы тримекаина и лидокаина.

Влияние соединений на гемостаз (зав. кафедрой, проф. Сыропятов Б.Я.). Исследование влияния соединений на свертывающую систему крови проводили in vitro с помощью коагулометра "Минилаб 701". В опытах использовали цитратную (3,8%) кровь (9:1) собаки. Влияние на свертываемость крови определяли по времени рекальцификации. Активность соединений изучали в одинаковой концентрации 1 мг/мл. В качестве эталона сравнения антикоагулянтной активности использовали раствор гепарина в концентрации 1 ЕД/мл крови; эталон сравнения гемостатической активности -- этамзилат в концентрации 1 мг/мл.

Гипогликемическая акивность (зав. каф. фармакологии ПГФА Котегов В.П.). Опыты проведены на интактных (здоровых) нелинейных белых крысах самках весом 180-220 г. Сахароснижающее действие веществ изучали при их внутрибрюшинном введении в скрининговой дозе, равной 0,2 LD50. В контрольной серии экспериментов инъецировали в эквиобъемном количестве 1% крахмальную слизь. Пробы крови забирали из кончика хвоста, уровень гликемии определяли глюкозооксидазным методом до, а также через 3 и 5 часов после начала опыта. В качестве препаратов сравнения использовали пероральные гипогликемические средства: гликлазид («Диабетон», Servier) и метформин («Сиофор», Berlin-Chemie).

Противомикробная активность. Бактериостатическую активность определяли на кафедре микробиологии ПГФА (зав. кафедрой, проф. Одегова Т.Ф.) методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде по отношению к двум штаммам: S. aureus ATCC 6538-P, E. coli ATCC 25922. Исходная исследуемая концентрация соединений -- 1000 мкг/мл. В качестве эталонов сравнения использовали фурацилин и диоксидин.

Результаты фармакологических исследований

Острая токсичность. Результаты определения средней смертельной дозы (LD50) приведены в таблицах 1,2,3.

Таблица 1

Острая токсичность ЧП, минеральных и органических солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой и 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислот

Соеди нение	R	X-	LD50, мг/кг	Соединение	R	X-	LD50, мг/кг
Iб	СН3-	I -	29,3(21,0-40,0)	IIб	СН3-	I -	32,5(28,0-38,0)
Iв	С2Н5-	Вr -	12,9(10,.0-16,0)	IIв	С2Н5-	Вr -	32,5(28,0-38,0)
Iг	С2Н5-	I -	14,1(11,0-17,0)	IIг	С2Н5-	I -	103,0(88,0-118,0)
Iд	н-С3Н7-	I -	12,9(11,0-15,0)	IIд	н-С3Н7-	I -	65,0(53,0-80,0)
Iе	-СН2-СН=СН2	Вr -	12,0(10,0-15,0)	IIе	-СН2-СН=СН2	Вr -	30,0(24,0-38,0)
Iж	-СН2-СН=СН2	I -	20,5(17,0-25,0)	IIж	-СН2-СН=СН2	I -	28,2(23,0-34,0)
Iз	н-С4Н9-	Вr -	6,5(5,6-7,5)	IIз	н-С4Н9-	Вr -	73(53,0-100,0)
Iи	н-С5Н11-	Вr -	16,3(14,0-19,0)	IIи	н-С5Н11-	Вr -	12,9(11,0-15,0)
Iй	н-С6Н13-	Вr -	6,84(5,6-6,5)	IIк	н-С6Н13-	Вr -	34,6(25,0-48,0)
Iк	н-С6Н13-	I-	4,6(3,3-6,3)	IIл		Сl -	12,9(11,0-15,0)
Iл		Сl-	6,5(5,6-7,5)	IIм	н-С9Н19-	Вr-	69,0(50,0-95,0)
Iм	н-С9Н19-	Вr-	17,8(15,0-21,0)	IIн		Сl-	65,0(53,0-80,0)
Iн	н-С10Н21-	Вr-	32,5(28,0-38,0)	IIа	Н	Сl -	232,0(213,0-254,0)
Iо		Сl-	32,5(28,0-38,0)	IIо	Н	Вr -	129,0(100,0-160,0)
Iп		Сl-	32,5(28,0-38,0)	IIп	Н	I -	129,0 (110,0-150,0)
Iа	Н	Сl -	46,0(33,0-60,0)	IIр	Н	NO3-	103,0(88,0-118,0)
Iу	Н	Вr -	81,5(71,0-84,0)	IIс	Н	H2PO4-	178,0(150,0-210,0)
Iф	Н	I -	60,0(48,0-74,0)	IIт	Н	СlO4-	258,0(210,0-320,0)
Iх	Н	NO3-	65,0(56,0-75,0)	IIу	Н	C7H5O3-	146,0(110,0-200,0)
Iц	Н	H2PO4-	44,7(37,0-59,0)	IIф	Н	C6H7O7-	65,0 (56,0-75,0)
Iч	Н	ClO4-	89,0(75,0-106,0)	ЛИДОКАИН	39,3(34,2-44,7)
Iш	Н	C6H7O7-	65,0(53-80)	ТРИМЕКАИН	35,5(29,0-42,0)

Как видно из таблицы, природа аминного фрагмента существенно сказывается на биологической активности. При сравнении показателей острой токсичности производных 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты с производными 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты следует, что замена диэтиламиногруппы на морфолиновый фрагмент ведет к снижению токсичности.

Таблица 2

Острая токсичность ЧП, минеральных и органических солей 2-бромфениламида

3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты

Соединение	R	X-	LD50, мг/кг
IIIа	СН3-	I -	16,3(14,0-19,0)
IIIв	С2Н5-	I -	32,5(26,0-40,0)
IIIд	(СН3)2СН-	I -	36,8(26,0-50,0)
IIIе	н-С4Н9-	Вr -	32,8(24,0-56,0)
IIIж	н-С4Н9-	I -	32,5(28,0-38,0)
IIIз	-СН2СН=СН2	Вr -	16,3(14,0-19,0)
IIIи	-СН2-СН=СН2	I -	17,8(16,0-20,0)
IIIк	н-С5Н11-	Вr -	70,8(62,0-80,0)
IIIл	н-С6Н13-	Вr -	70,8(59,0-84,0)
IIIм	н-С6Н13-	I-	65,0(56,0-75,0)
IIIн		Сl-	30,0(24,0-38,0)
IIIс	Н	Сl -	65,0(53,0-80,0)
IIIт	Н	H2PO4-	73,0(53,0-100,0)
IIIу	Н	I -	70,8(62,0-80,0)
IIIф	Н	Вr -	60,0 (48,0-74,0)
IIIх	Н	ClO4-	65,0(53,0-80,0)
IIIц	Н	NO3-	36,8(26,0-50,0)
IIIч	Н	C7H5O3-	62,0(51,0-79,0)
IIIш	Н	C6H7O7-	70,8(59,0-84,0)
ЛИДОКАИН	39,3(34,2-44,7)
ТРИМЕКАИН	35,5(29,0-42,0)

Как следует из таблицы 2, наименее токсичны по сравнению с лидокаином соли минеральных и органических кислот (IIIс-IIIш). Исключение представляет нитрат (IIIц), токсичность которого находится на уровне эталона сравнения.

Таблица 3

Острая токсичность минеральных и органических солей 2,4,6-триметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой и 2,6-диметифениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислот

R = 2,4,6- триметил- IV; R = 2,6- диметил- V

	X-	LD50, мг/кг
IVб	Вr -	65,0(53,0-80,0)
IVв	I -	35,5(31,0-40,0)
IVг	NO3-	35,5(31,0-40,0)
IVд	H2PO4-	65,0(53,0-80,0)
IVе	СlO4-	60,0(48,0-74,0)
IVж	C7H5O3-	32,5(26,0-40,0)
IVз	C6H7O7-	70,8(62,0-80,0)
Vб	Вr -	47,7(38,0-60,0)
Vв	I -	60,0(48,0-74,0)
Vг	NO3-	35,5(31,0-40,0)
Vд	H2PO4-	56,4(49,0-64,0)
Vе	СlO4-	35,5(31,0-40,0)
Vж	C7H5O3-	51,5(45,0-69,0)
Vз	C6H7O7-	44,7(37,0-59,0)
ЛИДОКАИН	39,3(34,2-44,7)
ТРИМЕКАИН	35,5(29,0-42,0)

Исходя из данных таблицы 3, следует, что соли минеральных и органических кислот 2,4,6 -триметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой и 2,6-диметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислот обладают меньшей токсичностью, чем лидокаин и тримекаин или находятся на уровне эталонов сравнения.

Антиаритмическая активность. Противоаритмическая активность исследовалась у 85 соединений. Результаты исследований соединений, проявляющих выраженную антиаритмическую активность, представлены в таблицах 4,5,6,7,8.

Таблица 4

Антиаритмическая активность, антиаритмический индекс ЧП, минеральных солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты

Соединение	R	X-	ЕD50, мг/кг	Антиаритмический индекс LD50/ED50
Iб	СН3-	I -	4,5(3,9-5,0)	6,5
Iв	С2Н5-	Вr -	2,9(2,1-4,0)	4,4
Iг	С2Н5-	I -	2,2(1,6-3,0)	6,4
Iд	н-С3Н7-	I -	3,5(2,5-4,8)	3,6
Iе	-СН2-СН=СН2	Вr -	2,3(1,7-3,2)	5,2
Iж	-СН2-СН=СН2	I -	3,3(2,8-3,8)	6,2
Iз	н-С4Н9-	Вr -	2,2(1,8-2,7)	2,9
Iи	н-С5Н11-	Вr -	10,3(8,4-12,6)	1,6
Iй	н-С6Н13-	Вr -	1,8(1,6-2,0)	3,8
Iл		Сl-	2,2(1,8-2,7)	2,9
Iм	н-С9Н19-	Вr-	1,8(1,5-2,1)	9,9
Iо		Сl-	1,4(1,2-1,7)	23,2
Iп		Сl-	1,4(1,2-1,7)	23,2
Iр		Сl-	10,8(7,3-16,0)	1,5
Iс		Сl-	6,8(4,6-10)	3,5
Iт		Сl-	27,4(20,0-38,0)	3,8
Iа	Н	Сl -	1,4(1,1-1,7)	32,8
Iу	Н	Вr -	17,8(15,0-21,0)	4,6
Iф	Н	I -	35,5(29,0-42,0)	1,7
Iх	Н	NO3-	1,4(1,2-1,7)	46,4
Iц	Н	H2PO4-	20,5(18,0-24,0)	2,2
Iч	Н	ClO4-	5,6(4,9-6,4)	15,9
ЛИДОКАИН	7,7(5,9-9,4)	5,1
ТРИМЕКАИН	8,1(7,1-8,4)	4,4

Антиаритмическую активность проявляют все исследуемые соединения, но в разной степени. Так, ЧП 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты (соед. Iб-Iм) проявляют высокую антиаритмическую активность, которая варьирует от 1,8 до 10,3 мг/кг. Более выраженную антиаритмическую активность, равную 1,4 мг/кг, проявляют соединения Iх, Iо,Iп. Их активность значительно превышает активность эталонов сравнения.

Таблица 5

Антиаритмическая активность, антиаритмический индекс ЧП, минеральных и органических солей 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты

Соединение	R	X-	ED50, мг/кг	Антиаритмический индекс LD50/ED50
IIг	С2Н5-	I -	44,7(37-59)	2,3
IIе	-СН2-СН=СН2	Вr -	4,6(3,3-6,3)	6,5
IIж	-СН2-СН=СН2	I -	5,5(4,0-7,5)	5,1
IIи	н-С5Н11-	Вr -	6,0(4,8-7,4)	2,2
IIк	н-С6Н13-	Вr -	4,4(3,2-6,0)	8,2
IIл		Сl -	5,5(4,0-7,5)	2,3
IIм	н-С9Н19-	Вr-	12,0(10,0-19,0)	5,4
IIн		Сl-	13,7(10,0-19,0)	4,7
IIа	Н	Сl -	6,4(4,1-9,9)	36,2
IIо	Н	Вr -	44,7(37,0-59,0)	2,9
IIп	Н	I -	89,0(75,0-106,0)	1,4
IIр	Н	NO3-	29,3(22,0-30,0)	3,5
IIс	Н	H2PO4-	54,7(40,0-75,0)	3,3
IIт	Н	СlO4-	35,5(31,0-40,0)	7,2
IIу	Н	C7H5O3-	11,2(9,2-13,4)	13,0
ЛИДОКАИН	7,7(5,9-9,4)	5,1
ТРИМЕКАИН	8,1(7,1-8,4)	4,4

Исходя из данных таблицы 5, можно сделать вывод о том, что четвертичные производные и соли 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты проявили антиаритмическую активность, но в разной степени.

Таблица 6

Антиаритмическая активность, антиаритмический индекс ЧП и минеральных солей 2-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты

Соединение	R	X-	ED50, мг/кг	Антиаритмический индекс LD50/ED50,
IIIв	С2Н5-	I -	4,5(3,9-5,0)	7,2
IIIл	н-С6Н13-	Вr -	35,5(29,0-42,0)	1,9
IIIс	Н	Сl -	17,2(13,0-24,0)	3,8
IIIу	Н	I -	22,4(19,0-25,0)	3,2
IIIх	Н	ClO4-	34,6(25,0-48,0)	1,9
IIIц	Н	NO3-	6,5(5,8-8,0)	5,7
IIIш	Н	C6H7O7-	12,0(10,0-15,0)	5,9
ЛИДОКАИН	7,7(5,9-9,4)	5,1
ТРИМЕКАИН	8,1(7,1-8,4)	4,4

Четвертичные производные и соли 2-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты уступают по антиаритмической активности эталонам сравнения за исключением соединений IIIв, IIIц.

Таблица 7

Антиаритмическая активность, антиаритмический индекс минеральных и органических солей 2,4,6-триметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой и

2,6-диметиламиноэтановой кислоты

R = 2,4,6- триметил- IV; R = 2,6- диметил- V

Соединение	X-	ED50, мг/кг	Антиаритмический индекс LD50/ED50,
IVг	NO3-	7,1(5,9-8,4)	5,0
IVд	H2PO4-	8,7(6,3-12,0)	7,5
IVз	C6H7O7-	27,4(20,0-38,0)	2,6
Vб	Вr -	6,9(5,0-9,5)	6,9
Vв	I -	17,2(13,0-24,0)	3,5
Vг	NO3-	6,9(5,0-9,5)	5,1
Vд	H2PO4-	8,9(7,5-12,0)	6,3
Vе	СlO4-	6,9(5,0-9,5)	5,1
ЛИДОКАИН	7,7(5,9-9,4)	5,1
ТРИМЕКАИН	8,1(7,1-8,4)	4,4

Из группы соединений, приведенных в таблице 7, более выраженную антиаритмическую активность проявили соединения IVг, Vб, Vг, Vе, активность которых превышает эффективность лидокаина и тримекаина.

Местноанестезирующая активность. Результаты исследования активности веществ при поверхностной анестезии представлены в таблице 8.

Таблица 8

Местноанестезирующая активность 1% и 2% водных растворов ЧП и минеральных солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты

Соедин.	R	X-	1%	2%
			Индекс Ренье	Продол. анестезии	Индекс Ренье	Продол. анестезии
Iд	н-С3Н7-	I -			1208±30,5	85,0±2,9
Iз	н-С4Н9-	Вr -			1300,0±0,0	86,3±3,2
Iи	н-С5Н11-	Вr-	355,0±31,8	31,7±2,3	1300,0±0,0	115,0±2,3
Iй	н-С6Н13-	Вr-	1155,1±55,2	78,1±3,5	1300,0±0,0	130±0,0
Iл		Сl-	1044,2±57,3	62,5±1,9	1300,0±0,0	111,3±2,7
Iа	Н	Сl -	344,5±20,6	27,8±1,8	795,6±45,1	50,0±3,8
Iу	Н	Вr -	207,8±11,8	26,7±1,3	874,8±69,4	62,5±2,8
Iх	Н	NO3-	н/а	0	123,5±5,8	17,0±2,1
Тримекаин	559,0±26,1	31,8±4,4	616,0±20,2	41,25±1,4
Лидокаин	831,7±55,6	37,8±3,7	980,0±91,5	53,8±2,7

Как видно из таблицы 8, среди ЧП выявлены 4 вещества, индекс Ренье и продолжительность анестезии которых превышают соответствующие показатели лидокаина и тримекаина. Удлинение вводимого алкильного фрагмента способствует возрастанию местноанестезирующей активности и продолжительности анестезии (Iз, Iи, Iй, Iл). На проявление активности солей влияет также природа аниона. Вещества, содержащие в качестве аниона бромид-ион и хлорид-ион, проявляют высокую анестезирующую активность.

На проявление местноанестезирующей активности влияет и природа аминного фрагмента. Так, замена диэтиламиногруппы на морфолиновый фрагмент приводит к потере у ариламидов аминоуксусных кислот местноанестезирующей активности.

Влияние соединений не гемостаз. Исследованию подверглось 33 соединения. Четвертичные производные и минеральные соли 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты не проявляют данного вида активности. Результаты влияния на свертывающую систему крови представлены в таблице 9.

Таблица 9

Влияние на гемостаз ЧП и минеральных солей 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты

Соединение	R	X-	Время свертывания, сек	Изменение свертывае-мости крови, %	Р
			контроль	опыт
IIб	С2Н5-	Вr -	27,4±1,71	27,5±0,98	-0,4	0,05
IIв	С2Н5-	I -	23,3±0,56	27,3±1,69	-17,2	<0,05
IIд	н-С3Н7-	I -	28,4±2,62	30,2±3,29	-6,3	0,05
IIе	-СН2-СН=СН2	Вr -	70,7±4,48	74,1±4,74	-4,8	0,05
IIж	-СН2-СН=СН2	I -	76,2±4,50	71,4±2,53	6,3	0,05
IIз	н-С4Н9-	Вr -	25,0±1,48	25,6±1,98	-2,4	0,05
IIи	н-С5Н11-	Вr -	29,1±2,18	30,6±1,43	-5,1	0,05
IIк	н-С6Н13-	Вr -	19,2±1,41	18,2±0,18	5,2	0,05
IIл		Сl -	22,0±1,26	22,5±1,00	-2,2	0,05
IIм	н-С9Н19-	Вr-	62,4±3,09	57,6±1,43	7,7	0,05
IIн		Сl-	25,8±1,66	29,1±1,97	-12,8	0,05
IIа	Н	Сl -	33,2±1,18	28,0±1,43	15,7	<0,02
IIо	Н	Вr -	39,8±1,00	37,3±1,55	6,3	0,05
IIп	Н	I -	35,7±2,47	31,5±1,56	11,8	0,05
IIр	Н	NO3-	93,4±5,16	88,8±4,64	4,9	0,05
IIс	Н	H2PO4-	79,7±4,52	78,8±1,55	1,1	0,05
IIу	Н	C7H5O3-	40,4±1,87	36,1±1,12	10,6	0,05
Гепарин	29,9±0,48	36,6±1,82	-22,4	<0,01
Этамзилат	28,9±1,11	24,5±0,94	15,2	<0,01

Исследования влияния на гемостаз четвертичных производных и минеральных солей 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты показывают, что соединение IIв снижает свертываемость крови на 17,2%, но это влияние меньше, чем действие гепарина, соединение IIа увеличивает свертываемость крови на 15,7%, проявляя эффект близкий к эталону сравнения этамзилату.

Гипогликемическая активность Результаты изучения гипогликемической активности ЧП и солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты представлены таблице 10.

Таблица 10

Влияние ЧП и минеральных солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты на содержание сахара в крови

Серия опытов	Уровень гликемии, ммоль/л	Изменение гликемии, % от исх.
Соеди- нение	R (X-)	исходн.	3 час	5 час	3 час	5 час
Iа	Н (Сl -)	5,250,18	5,100,10	5,070,18	- 2,91,7	- 3,41,9
Iб	СН3- (I -)	5,150,24	5,750,31	6,030,27	+ 11,72,7	+ 17,12,4
Контроль1		4,720,15	4,700,19	4,420,21	- 0,43,2	- 6,43,6
Iг	С2Н5- (I -)	5,080,18	5,730,29	6,100,19	+ 12,81,7	+ 20,12,5
Iд	н-С3Н7-(I -)	4,980,23	5,250,23	4,650,19	+ 5,44,2	- 6,64,3
Контроль 2		5,070,21	4,870,10	4,800,27	- 3,92,7	- 5,32,6
Iе	-СН2 СН=СН2 (Br-)	5,120,16	5,180,44	5,500,19	+ 1,27,1	+ 7,41,1
Iй	н-С6Н13- (Br-)	4,880,15	4,770,21	4,630,16	- 2,33,7	- 5,13,8
Контроль 2		5,070,21	4,870,10	4,800,27	- 3,92,7	- 5,32,6
Iч	Н (ClO4-)	5,270,18	5,430,15	5,580,11	+ 3,02,0	+ 5,92,6
Iц	Н (H2PO4-)	5,120,11	5,220,13	4,750,15	+ 2,03,5	- 7,23,4
Контроль 1		4,720,15	4,700,19	4,420,21	- 0,43,2	- 6,43,6
Iх	Н (NO3-)	5,300,16	5,300,13	4,970,16	04,6	- 6,22,6
Iф	Н (I -)	5,130,16	4,780,15	4,350,23	- 6,81,3	- 15,22,1
Контроль 2		5,070,21	4,870,10	4,800,27	- 3,92,7	- 5,32,6
Гликлазид		4,640,17	4,060,17	3,480,29	-12,54,7	-25,05,4
Метформин		4,920,12	5,060,10	5,160,15	+2,81,5	+4,90,8
Контроль 2		5,070,21	4,870,10	4,800,27	- 3,92,7	- 5,32,6

Примечание: достоверность отличий по сравнению с контролем

при р0,05 - , р0,01 - , р0,001 - .

Достоверное сахароснижающее действие отмечено у соединения Iф, уменьшавшего уровень гликемии в конце 5-часового эксперимента на 15,2%. Выраженным гипергликемическим эффектом обладали соединения Iб и Iг, повышавшие содержание сахара в крови животных через 3 часа после введения на 11,7-12,8%, а спустя 5 часов опыта - на 17,1-20,1%. Умеренное гипергликемическое действие отмечено у соединений Iе и Iч, вызывавших увеличение уровня гликемии на 5,9-7,4% лишь в конце 5-часового наблюдения. В этих условиях препарат сравнения из группы препаратов сульфонилмочевины гликлазид снижал уровень сахара крови за 5 часов опыта на 25,0%, тогда как бигуанидный антидиабетический препарат метформин на протяжении всего исследования действовал гипергликемически, повышая содержание глюкозы в крови интактных животных на 2,8-4,9%.

Противомикробная активность. Исследованию на наличие противомикробной активности в отношении S. aureus, E. coli подверглось 16 соединений из ряда 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты. Из них в отношении S. аureus и E. coli все 16 соединений являются неактивными.

Анализ результатов изучения биологической активности исследуемых соединений

Структуры соединений четвертичных производных в каждом ряду отличаются структурой заместителя при аммонийном атоме азота. Учитывая проявляемое различие биологической активности и, в частности, острой токсичности соединений, можно было полагать, что природа заместителя, в частности, его липофильность скажется на результатах токсичности.

С этой целью была исследована корреляционная зависимость значений lg 1/С (LD50) от липофильных констант (р) заместителей четвертичных производных 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты. Экспериментальные точки удовлетворительно располагаются вблизи линии регрессии. Корреляционное уравнение

lg 1/С LD50 = 0,393 р - 1,617; r = 0,873; s = 0,109 ; n = 7 подтверждает зависимость lg 1/С (LD50) - р. Данные корреляционной зависимости свидетельствуют о том, что при возрастании значений р заместителя возрастает токсичность четвертичных производных.

Учитывая коррелируемые параметры (биологический отклик, структура) и полученный коэффициент корреляции (r = 0,873) можно сказать, что липофильность алкильного заместителя при аммонийном атоме азота является определяющей при проявлении соединением острой токсичности. Природа аниона в ЧП практически не сказывается (соед. Iв, Iг) или сказывается минимально (соед. Iе, Iж) на проявлении токсичности.

Аналогичная зависимость данных острой токсичности и липофильных констант заместителей при аммонийном атоме азота согласно уравнению lg 1/С LD50 = 0,219 р + 1,107; r = 0,714; s = 0,125; n = 7 проявляется и для ЧП орто-броманилидов в-диэтиламинопропионовой кислоты.

Соли 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты являются менее токсичными по сравнению с токсичностью солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты и ряда 2-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты, а также с эталонами сравнения. Одной из возможных причин этого может быть образование внутримолекулярной водородной связи между водородом при аминном атоме и кислородом морфолинового цикла, вследствие чего водород (тоже возможный центр связывания) с рецептором блокируется.

В качестве предположения для объяснения различия в токсичности солей 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты можно выдвинуть следующее. Для проявления биологической активности веществом важны ряд факторов, определяющим из которых является соответствующее распределение электронной плотности в молекуле. Одним из центров связывания молекулы с рецептором в структуре данных соединений может выступать кислород карбонильной группы и, соответственно, величина на нем электронной плотности. Косвенно об этой величине можно судить по химсдвигу рядом расположенной метиленовой группы. Смещение химсдвига метиленовой группы в более сильное поле свидетельствует о возрастании на ней и, соответственно, кислороде карбонила электронной плотности, что усиливает связь вещества с рецептором и, соответственно, возрастанию их токсичности. Исследование графика корреляционной зависимости lg 1/С - дСН2 для солей 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты показывает, что при возрастании значений СН2, то есть при уменьшении электронной плотности на метиленовой группе и, соответственно, можно полагать на кислороде карбонила, происходит уменьшение токсичности.Это подтверждается уравнением lg 1/С LD50 = - 1,355 + 3,553; r = -0,991; s = 0,024; n = 4.

В минеральных солях, производных галогеноводородных кислот, природа аниона - галогена сказывается на распределении электронной плотности в молекуле, в частности, на химсдвиге протонов метиленовой группы ( СН2) и, соответственно, на проявлении соединением острой токсичности.

Анализ результатов изучения антиаритмической активности синтезированных соединений свидетельствует о том, что большинство из них проявили антиаритмическую активность. Что касается исследования зависимости антиаритмической активности от липофильных констант заместителей при аммонийном атоме азота 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты, то данная зависимость имеет менее выраженный характер по сравнению с токсичностью. Можно сказать, что имеется определенная тенденция к проявлению зависимости структура - липофильность, однако не только, видимо, липофильность заместителя влияет на проявление антиаритмической активности.

Заключение

Алкилированием 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты, 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты, 2- бромфениламида N,N-диэтиламинопропановой кислоты различными галогенопроизводными при нагревании в среде ацетона получены их четвертичные производные.

Проведен синтез солей 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты, 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты, 2-бромфениламида 3-N,N - диэтиламинопропановой кислоты с некоторыми неорганическими и органическими кислотами, а также осуществлен синтез солей 2,6-диметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты, 2,4,6-триметилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты с некоторыми неорганическими и органическими кислотами. Структура синтезированных соединений подтверждена с помощью ЯМР 1Н спектроскопии.

У полученных веществ исследованы острая токсичность, а также наличие антиаритмической, местноанестезирующей, гипо- и гипергликемической, противомикробной активности, влияние на гемостаз.

Исследования свидетельствуют, что более выраженную антиаритмическую активность проявляют четвертичные производные (ЧП) ариламидов диэтиламиноуксусной кислоты, менее активны ЧП ариламидов морфолиноуксусной кислоты.

Проведен анализ зависимости структура-активность полученных соединений. Для ЧП 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты выявлена корреляционная зависимость между данными острой токсичности и липофильными константами заместителей при аммонийном атоме азота. Увеличение липофильности заместителя способствует увеличению токсичности.

Аналогичная зависимость данных острой токсичности и липофильных констант заместителей при аммонийном атоме азота проявляется и для ЧП 2-бромфениламида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты.

Природа аниона кислоты сказывается на распределении электронной плотности в молекуле и, соответственно, на проявлении биологической активности. Так, для солей 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты выявлена корреляционная зависимость между хим. сдвигом СН2 и данными острой токсичности. При уменьшении абсолютной величины СН2, то есть при возрастании на метиленовой группе электронной плотности токсичность соединения увеличивается. Можно полагать, что аналогичное увеличение электронной плотности скажется и на кислороде карбонильной группы, который может выступать в качестве одного из центров связывания с рецептором.

Что касается корреляционной зависимости данных антиаритмической зависимости и липофильных констант заместителей ЧП 2-метилфениламида N,N-диэтиламинопропановой кислоты, эта зависимость менее выражена, можно отметить, что имеется лишь тенденция. Очевидно, кроме липофильных констант на активность влияют и другие факторы.

В ходе исследования выявлено 19 соединений, имеющих преимущество по антиаритмической активности перед аналогами сравнения лидокаином и тримекаином при большей безопасности их практического применения.

Для дальнейшего более широкого исследования рекомендуются 2-метилфениламид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты нитрат, N,N-бис-(2-метилфенилкарбамоил)-N,N-диэтиламмоний хлорид, N-(2-метилфенил-карбамоилметил)-N-(21-метоксифенилкарбамоилметил)-N,N-диэтиламмоний хлорид, проявляющие выраженную антиаритмическую активность при хлоридкальциевой аритмии. Они имеют большую широту терапевтического действия по сравнению с препаратами этого ряда, применяемыми в практике, и, таким образом, более безопасны при практическом применении.

Исследована местноанестезирующая активность некоторых синтезированных соединений. Выявлено 3 соединения из ряда 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты с максимальной поверхностноанестезирующей активностью и длительным сроком действия.

Изучено влияние на гемостаз ЧП и солей минеральных кислот некоторых синтезированных соединений. Выявлены два соединения из ряда 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты, одно из которых снижает свертываемость крови, другое увеличивает свертываемость крови, проявляя эффект близкий к эталону сравнения этамзилату.

Проведены исследования гипогликемической активности ЧП и солей минеральных кислот 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты. Результаты исследования показывают, что ЧП проявляют тенденцию к гипергликемии, тогда как соли минеральных кислот проявляют гипогликемическую активность.

Таким образом, исследование свидетельствует, что поиск новых соединений с выраженной биологической и, особенно, антиаритмической и анестезирующей активностью в ряду ариламидов аминокарбоновых кислот продолжает оставаться актуальным.

Выводы

1. Осуществлен синтез 85 четвертичных производных и солей ариламидов диэтиламиноэтановой, морфолиноэтановой, в-диэтиламинопропановой кислот, из которых 78 не описаны в литературе. Среди синтезированных соединений выявлены вещества, проявляющие выраженную антиаритмическую активность.

2. Природа аминного фрагмента влияет на проявления биологической активности исследуемых соединений. Более выраженную антиаритмическую активность проявляют четвертичные производные (ЧП) ариламидов диэтиламиноэтановой кислоты, менее активны ЧП ариламидов морфолиноэтановой кислоты.

3. Переход к четвертичным производным в-диэтиламинопропионовой кислоты приводит к увеличению водонерастворимых соединений, что может быть связано с возрастанием гидрофобных свойств соединений.

4. Структура аммонийного фрагмента существенно сказывается на проявлении острой токсичности и антиаритмической активности. Так, в ряду ЧП орто-толуидидов диэтиламиноэтановой кислоты выявлена корреляционная зависимость между данными острой токсичности и липофильными константами () заместителей при аммонийном атоме азота. Возрастание липофильности заместителя способствует возрастанию токсичности соединений. С меньшим коэффициентом корреляции проявляется зависимость липофильность - антиаритмическая активность соединений этого ряда.

5. Анион кислоты влияет на распределении электронной плотности в молекуле и, соответственно, на проявление биологической активности солей ариламидов аминокарбоновых кислот. Так, для солей орто-толуидидов морфолиноэтановой кислоты, а также солей аналогов лидокаина выявлена корреляционная зависимость между хим сдвигом СН2 и данными острой токсичности. При смещении СН2 в более слабое поле происходит уменьшение токсичности соли.

6. Соединения 2-метилфениламид N,N-диэтиламиноэтановой кислоты нитрат, N,N-бис-(2-метилфенилкарбамоил)-N,N-диэтиламмоний хлорид, N-(2-метилфенилкарбамоилметил)-N-(21-метоксифенилкарбамоилметил)-N,N-диэтиламмоний хлорид, проявившие значительную антиаритмическую активность, рекомендуются для углубленных фармакологических исследований.

Рекомендации

1. Поиск соединений, обладающих антиаритмической активностью, целесообразен в ряду четвертичных производных ариламидов аминокарбоновых кислот.

2. Для углубленных фармакологических исследований рекомендованы 3 соединения с выраженной антиаритмической активностью.

3. В ряду четвертичных производных 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты поиск веществ с местноанестезирующей активностью целесообразен.

4. Среди четвертичных производных 2-метилфениламида морфолиноэтановой кислоты является перспективным поиск соединений, замедляющих свертывание крови.

5. Не целесообразен поиск соединений, проявляющих гипогликемическую активность среди четвертичных производных и солей минеральных кислот 2-метилфениламида N,N-диэтиламиноэтановой кислоты.

6.Не перспективен поиск соединений с противомикробной активностью среди четвертичных производных ариламидов аминокарбоновых кислот.

Основное содержание диссертации изложено в следующих работах

1. Гашкова О.В. Синтез и антиаритмическая активность четвертичных производных и минеральных солей орто-толуидида диэтиламиноуксусной кислоты / О.В. Гашкова, В.И. Панцуркин, И.П. Рудакова, Б.Я Сыропятов, М.И. Вахрин // Хим.-фарм. журнал.- 2008.- № 12.- С.20 - 22.

2.Решение о выдачи патента на изобретение № 2008101073/04(001173) от 09.01.2008.

2-метилфениламид морфолиноэтановой кислоты салицилат, проявляющий антиаритмическую активность / Панцуркин В. И., Гашкова О.В., Рудакова И. П., Сыропятов Б. Я., Вахрин М. И.

3. Гашкова О.В. Синтез и острая токсичность солей минеральных и органических кислот орто-толуидида морфолиноуксусной кислоты/ О.В.Гашкова, В.И. Панцуркин, И.П. Рудакова, Б.Я. Сыропятов, М.И. Вахрин // Достижения и перспективы в области создания новых лекарственных средств: Материалы Российской научно-практической конференции, посвященной 70-летию ПГФА (27-28 ноября 2007г). - Пермь. - 2007.- С.22-24.

4.Гашкова О.В. Синтез, острая токсичность и антиаритмическая активность четвертичных производных и минеральных солей 2-броманилида 3-N,N-диэтиламинопропановой кислоты / О.В. Гашкова, В.И. Панцуркин, И.П. Рудакова, Б.Я. Сыропятов, М.И. Вахрин // Современное состояние и пути оптимизации лекарственного обеспечения населения: Материалы Российской научно-практической конференции ПГФА (14-я международная выставка « Медицина и здоровье», 13-15 ноября 2008г).- Пермь. - 2008. - С.218-221.

5. Гашкова О.В. Синтез, острая токсичность и антиаритмическая активность четвертичных производных орто-толуидида морфолиноуксусной кислоты / О.В. Гашкова, В.И. Панцуркин, И.П. Рудакова, Б.Я. Сыропятов, М.И. Вахрин // Современное состояние и пути оптимизации лекарственного обеспечения населения: Материалы Российской научно-практической конференции ПГФА (14-я международная выставка « Медицина и здоровье», 13-15 ноября 2008г). - Пермь. - 2008. - С.221-223.

6. Щербакова О.В. Сравнительная активность местных анестетиков и впервые синтезированных алифатических и гетероциклический аминов / О.В. Щербакова, Д.В. Калинин, С.А. Устинова, А.А. Краснова, О.В. Гашкова // Вестник ПГФА. - 2008.- № 4.-С.164-165.

7. Гашкова О.В. Синтез и биологическая активность четвертичных производных мономекаина / О.В. Гашкова, В.И. Панцуркин, И.П. Рудакова, Б.Я. Сыропятов, М.И. Вахрин // XIV российский национальных конгресс «Человек и лекарство» Сборник материалов конгресса. - Москва. - 2007.- С. 276.

8. Щербакова О.В. Местноанестезируюшая активность солей N,N-диэтил-N-алкил-N-(2-метилфенил)амида этановой кислоты с неорганическими кислотами./ О.В. Щербакова, Д.В. Калинин, С.А. Устинова, А.А. Краснова, О.В. Гашкова // «Молодежь и наука. Итоги и перспективы». Материалы межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием. - Изд-во Саратовского медицинского университета.- 2006. - С.151-152.

9. Щербакова О.В. Местноанестезирующая активность солей N,N-диэтил-N-алкил-N-(2-метилфенил)-амида этановой кислоты с неорганическими кислотами./ О.В. Щербакова, Д.В. Калинин, С.А.Устинова, А.А.Краснова, О.В. Гашкова //«Знанием объединимся» Материалы VII Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке ». - Москва.- 2006.- С.582-583.

10. Щербакова О.В. Местноанестезируюшая активность четвертичных солей аммония / О.В. Щербакова, Д.В. Калинин, С.А. Устинова, А.А. Краснова, О.В. Гашкова // Вестник РГМУ. - Москва. - 2007.- № 2.- С.334.

11. Щербакова О.В. Изучение местноанестезируюшей активности четвертичных солей аммония / О.В. Щербакова, Д.В. Калинин, С.А. Устинова, А.А. Краснова, О.В. Гашкова // Украинский научно-медицинский молодежный журнал. - Киев. -2007.- № 3. - С.259-260.

12. Гашкова О.В. Синтез и биологическая активность ариламидов аминокарбоновых кислот / О.В. Гашкова, В.И. Панцуркин, И.П. Рудакова, Б.Я. Сыропятов, М.И. Вахрин // «Проблемы синтеза биологически активных веществ и создание на их основе лекарственных субстанций». Сборник материалов Украинской научно-практической конференции. - Харьков. - 2009. - С.46.

Автор выражает благодарность зав. кафедрой физики и математики ПГФА, доц. Вахрину М.И. за запись ЯМР 1Н-спектров, доц. кафедры физики и математики ПГФА Данилову Ю.Л. за исследование корреляционной зависимости, доц. кафедры физиологии и патологии ПГФА Рудаковой И.П. за исследование острой токсичности и антиаритмической активности, зав. кафедрой фармакологии ПГФА, проф. Котегову В.П. за исследование гипогликемизирующей активности, зав. кафедрой микробиологии ПГФА, проф. Одеговой Т.Ф. за исследование противомикробной активности.

Размещено на Allbest.ru