16

Академия Ветеринарной Медицины и Биотехнологии

им. К. И. Скрябина

Кафедра птицеводства

Реферат

Оспа птиц

Выполнила студентка

4 курса 4 группы

Акиншина М.А.

Москва 2009г.

План

1. Характеристика возбудителя

2. Эпизоотологические особенности

3. Диагностика

4. Серологическая идентификация

5. Иммунитет и специфическая профилактика

6. Лечение

Оспа птиц (ОП)-контагиозная болезнь кур, голубей, канареек, скворцов, индюков, фазанов. У кур проявляется в 2-х формах: оспенной и дифтеритической. Возможно смешанное течение болезни

Болезнь распространяется повсеместно, проявляется во все времена года, но чаще весной и осенью. Экономический ущерб заключается в резком и продолжительным снижении яйценоскости, вынужденном убое больных и переболевших птиц.

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Инкубационный период длится 15-20 дней, при экспериментальном заражении-10-14 дней. Общее состояние больной птицы ухудшается, аппетит исчезает, появляется вялость; у кур-несушек резко снижается яйценоскость. В дальнейшем на коже гребня, бородок, углов рта, век, иногда на оперённых частях головы, шеи, затылка, живота, конечностей, окружности клоаки, появляются бледно-жёлтые пятнышки. Вскоре оспинки покрываются жёлто-серым или красно-бурым кровянистым струпом, становятся очерченными и твёрдыми. Рядом расположенные оспины сливаются друг с другом, образуя небольшие бугры-бородавки. Процесс высыхания и образования струпа длится 2-3 недели. Больные куры часто склёвывают друг у друга оспинки, способствуя распространению инфекции.

Дифтеритическая форма ОП проявляется поражением слизистых оболочек ротовой и носовой полости, подглазничной ямки. На слизистой рта вначале возникают мелкие, ясно очерченные округлые желтовато-белые возвышающиеся пятна величиной от чечевицы до 10-копеечной монеты, которые, разрастаясь, сливаются в ложные перепонки-мягкие, иногда кашицеобразные (особенно у голубей), легко снимающиеся или сухие плотные творожистые, трудно снимающиеся. Дифтерические плёнки появляются главным образом под языком или по краям его, на щеках, в углах рта, вдоль нёбной щели, в зеве, окружности гортани и даже трахее. Для плёнок оспенного характера типично глубокое врастание их в слизистую оболочку. Гортань поражается наиболее часто. Дыхание сильно затруднено, больные птицы часто вытягивают шею, дышат с открытым клювом. Приём пищи затруднён, рот часто открыт. При распространении дифтеритического процесса у птиц появляется насморк. Из ноздрей вытекает серозная или слизистая, впоследствии гнойная жидкость грязно-жёлтого цвета, которая, подсыхая, заклеивает носовые ходы. При поражении носоглотки в процесс вовлекается слёзный канал, и подглазничная ямка. Последняя заполняется воспалительным экссудатом и выпячивается под глазом в виде горячей болезненной припухлости плотной консистенции величиной с лесной орех.

Часто отмечается поражение глаз. Появляется светобоязнь, покраснение и отёчность их. Слизисто-гнойный экссудат высыхает у краёв век и склеивает их. При искусственном раскрывании глазной щели на роговице видно гнойно-творожистое наложение, а на поздних стадиях процесса обнаруживается засохший беловатый гной. Чаще поражаются оба глаза («совиная голова»). Воспаление может распространяться на склеру и роговицу.

При кожной форме оспы обычно обнаруживают бородавчатые образования, покрытые бурым кровянистым струпом, чаще на гребне, бородках, серёжках, у основания клюва, на щеках, иногда на коже по всему туловищу. Течение болезни преимущественно хроническое. Оспа протекающая без осложнений, заканчивается в течении 5-6 недель. Кожная форма чаще протекает доброкачественно. Нередко отмечают стёртые формы ОП. Переболевшие куры становятся истощёнными, многие слепнут на один или оба глаза. Летальность у взрослых кур достигает 10-20%, среди молодняка, особенно в холодное время года-50-70%.

Трахеальную форму ОП наблюдали в Новой Зеландии, Южной Америке. Ею поражались только куры-несушки, содержащиеся в клетках.

Описаны атипичные случаи ОП у молодых несушек в зимний период. Процесс протекал атипично и характеризовался незначительным снижением яйценоскости, ломкостью печени и казеозными наложениями в верхней части трахеи.

Патологоанатомические изменения. Помимо характерных оспенных поражений, обнаруживаемых при жизни животных, в трупах находят картину геморрагического диатеза. Серозные покровы усеяны множественными кровоизлияниями. Слизистые оболочки пищеварительной и респираторной систем геморрагически воспалены, с наличием эрозий, а иногда и язв. В легких нередко находят крупозную пневмонию и гангренозные участки. Лимфоузлы увеличены и гиперемированы. Печень, сердце и почки с признаками паренхиматозной дегенерации.

На коже трупа птицы заметны эпителиомы в виде струпа, слизистые оболочки трахеи, пищевода, зоба дифтеритически воспалены. При поражении слезного канала и подглазного синуса находят катарально-фибринозный экссудат и атрофию глазного яблока. В тяжелых случаях желудок, кишечник и паренхиматозные органы воспалены. При осложнениях отмечаются поражения воздухоносных мешков. В гистопрепаратах, окрашенных 10 %-ным р-ром азотнокислого серебра с последующей дифференциацией 25 %-ным р-ром нашатырного спирта, выявляют скопления вирусных частиц в виде темно-коричневых зерен. Тельца-включения можно также обнаружить в мазках-отпечатках из оспин.

1. Характеристика возбудителя

Формы болезни известны давно. Вначале их считали разными инфекциями. После того как Маркс и Штиккер в 1902 г. доказали, что кожная форма вызывается вирусом, а в 1907 г. Карноут показал, что вирусосодержащими эпителиомами можно вызвать оспенное поражение слизистых оболочек, у становилось единое представление о возбудителе оспы и дифтерита птиц. За последние 10-15 лет в отечественной и зарубежной литературе опубликован ряд сообщений о биологических свойствах полевых и вакцинных штаммов вируса оспы кур, диагностики инфекции и её эпизоотологических особенностях.

Устойчивость. Вирус чувствителен к высокой температуре. Высушивание и холод консервируют его. В оспенных корочках при температуре -15⁰С он выживает до 2 лет и более. В лиофилизированном виде при хранении под вакуумом оспенный материал остаётся вирулентным до 8 лет. Чувствителен к этиловому спирту, быстро погибает в гниющем субстрате.

АГ структура. В составе очищенного вируса ОП обнаружено 29 полипептидов с мол.м 14-138 кД. Наивысшей антигенной и иммуногенной активностью обладают полипептиды с мол.м 35 и37 кД. За индукцию ВНА вируса ОП ответственны АГ, расположенные на поверхности наружной оболочки вириона и прежде всего белок 58 кД (VP4c), являющийся основным структурным компонентом трубочек (ворсинок). Антисыворотка к этому белку нейтрализует инфекционность вируса и предотвращает образование синцития в культуре клеток. Этот белок ответственен за выработку иммунитета. Выделен 21 белок кодирующий вирус ОП. Эти белки можно разделить на пререпликативные и пострепликативные по аналогии с вирусом осповакцины. В первую группу входит белок 70 кД.

Внеклеточные вирионы вируса ОП покрыты дополнительной наружной оболочкой, отсутствующей у внутриклеточных вирионов. Она играет важную роль в индукции синтеза ВНА. Используют рекомбинантные вакцины на основе вируса ОП. Размер генома вируса допускает встраивание нескольких генов, позволяет получать мультивалентные вакцины. Эффективными вакцинами показали себя экспрессируемые с рекомбинантным вирусом ОП антигены вируса НБ, гриппа птиц, ИББ, БМ. Приведены данные разных лабораторий по получению и испытанию этих препаратов. Пока не ясно можно ли с их помощью решить проблему вакцинации в 1-й день жизни, при наличии у вылупляющихся птенцов высокого уровня материнских АТ.

Антигенная вариабельность и родство. Между вирусами оспы кур, голубей ииндеек имеется родство. Вирус ОП канареек в иммунологическом отношении отличается от возбудителей оспы кур и голубей.

АГ вариабельность у вируса оспы кур не установлена. Штаммы существенно различаются по спектру патогенности и степени вирулентности. С помощью РСК, РН и РДП установлено антигенное родство вируса ОП кур с вирусами оспы овец и коз. Антигены ВОП, миксоматоза кроликов, эктромелии мышей и оспы КРС идентичны. Вирус оспы перепелов иммунологически отличен от вирусов оспы голубей и кур и защищает цыплят , голубей и индеек только против себя. Также иммунологичен вирус оспы попугаев.

Локализация вируса. В естественных условиях вирус больной птицы локализуется в оспинах. В период предшествующей генерализации оспенного процесса (на 17-20 день после инфицирования), вирус можно обнаружить в крови, почках, яичниках, селезёнке, головном мозге и других органах. Однако он чаще обнаруживается в бесперьевых участках кожи, головы и на слизистой оболочке гортани, трахеи. В органах и тканях переболевших кур вирус выживает до 487 дней (срок наблюдения). Наружу вирус выделяется с вируссодержащим корочковым материалом больных птиц.

АГ активность. В сыворотках крови больных и экспериментально заражённых кур с 4-7 дня появляются анти-ГА в титре 1:10-1:80 и достигающие к 22-30 дн. титра 1:160-1640, далее идёт снижение титра. РЗГА специфична, её можно использовать для диагностики оспы. У гипериммунизированных вирусом оспы кур выявляются специфические тела преципитаты. Преципитирующая сыворотка при 4⁰С сохраняет активность до 300 дн. АТ в сыворотке крови кур после 1-кратного введения им оспенного вируса реагирует только с полипептидом мол.м.37 и 35 кД, тогда как АТ после вторичной инокуляциикурам вируса оспы реагируют ещё с 6-ю другими структурными белками вируса ОП. Иногда полевые вирулентные изоляты вызывают образование анти-ГА в высоком титре, но ВНА в низком.

Экспериментальная инфекция. Легко производится ВОК у неиммунных цыплят и кур при заражении в скарифицированную кожу гребня, бородки, серёжек и обнажённые перьевые фолликулы. Вирусом оспы голубей удаётся получить оспенный фолликулит у голубей (на груди) и доброкачественный (без некроза) фолликулит у цыплят.

Культивирование. Вирусы оспы кур и голубей хорошо размножаются на ХАО КЭ, различаясь между собой по характеру поражения мембраны и степени генерализации. Штаммы, относящиеся к куриному вирусу оспы, как правило поражают ХАО и обнаруживаются в тканях и органах зародыша., а голубиный вирус оспы обычно не вызывает генерализованного процесса в эмбрионе и размножается преимущественно в зоне отслоенного ХАО.

Кроме эмбрионов вирус оспы культивируется в клетках фибробластов КЭ, вызывая ЦПИ (округление и вакуолизацию клеток, образование гигантских клеток с 5-7 ядрами). Максимум инфекционной активности наблюдается к 72 часам. Вирус хорошо репродуцируется в перевиваемой линии клеток QT-35. Вирус оспы перепёлок (шт. QP-241) размножается в культуре фибробласторв. В первых пассажах он не вызывает ЦПД.

ГА свойства. Вирус способен АГ эритроциты кур пород белой русской и леггорн. Оптимальными условиями реакции ГА являются: 0,5%-ная взвесь эритроцитов, ph физиологического раствора 7,2-7,4 и температура 37⁰С. Адсорбированные ГА с эритроцитов не элюируют, их удаётсяотделить специфической имунной сывороткой. Суспензия вируса оспы, консервированная 0,5%-ным формалином, при хранении в тёмном месте при 4⁰С сохраняет свою ГА активность более 8 мес и может быть использована в РГА и РЗГА. Все штаммы вируса проявляют одинаковую ГА-активность. За ГА-активность вируса ОП ответственен полипептед 85 кД и гликопептид 41 кД. Внутриклеточные вирионы не содержат полипептида 85 кД. Неструктурный ГА формируется на цитоплазматических мембранах. С его образованием инфицированные клетки приобретают способность адсорбировать эритроциты.

ГАд свойства не изучены.

2. Эпизоотологические особенности

Источники и пути передачи инфекции. Основной источник-больная птица. Переносчиками могут быть насекомые. Доказана передача вируса оспы кур посредством Guliceides arakawae. Механические носители ВОП-клещи A. persicus, D. gallina, S. Bipectinatus и клопы Cimex lectularius. ВОП в организме заражённых в естественных условиях клещей A. persicus сохраняет активность до 730 дн, передаётся в последующее поколение трансовариально, в организме клещей D. gallinae-соответственно до 300 и 240 дн. Однако птицы чаще заражаются при контакте с больной птицей, через загрязнённые вирусом корма, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. В организм вирус проникает через повреждённые кижу и слизистые оболочки.

Спектр патогенности в естественных условиях. Большинство выделяемых полевых штаммов ВОП патогенны для птиц этого вида. Однако в экспериментальных условиях некоторые штаммы могут вызывать заражение норок, уток, ястребов и канареек. Встречаются так называемые бипотогенные и трипатогенные штаммы ОП; они заражают кур и голубей или кур, голубей и индеек. Штаммы Никано и Хоккей обладают широким спектром патогенной активности; вызывают оспенную реакцию у цыплят, голубей и кроликов. По спектру патогенности ВОП могут быть расположены в таком порядке: голуби, индейки, куры и канарейки. Вирус оспы перепелов (шт. QP-241) вызывает гибель перепелов-цыплят. При кожном заражении у голубей развивается слабовыраженная фолликулярная реакция. Вирус оспы выделен у из бородавкоподобных поражений у 3-х видов австралийских диких птиц: сороки Gumnrhina tibicen, белоглазки Zosterops laterals и сорочьего жаворонка Grallina cyanoleuca. Все 3 вируса не вызывали ЦПД в культуре фибробластов КЭ. В РН, РДП показана АГ близость этих вирусов с вирусами оспы кур и голубей,но они не давали антигенных перекрёстов с вирусом осповакцины.

3. Диагностика

Диагноз на ОП ставят на основании эпизоотологических данных, результатов клинического обследования птиц, вирусологических и серологических исследований. Если имеются типичные оспенные поражения кожи, гребня, серёжек и лицевой части головы, диагноз поставить нетрудно. Если же поражения локализуются только в ротовой и носовой полостях, диагностировать болезнь значительно труднее.

Выделение вируса.

Выделение вируса на КЭ. Из 10%-ной суспензии, свободной от микрофлоры, готовят разведения 10^-2 и 10^-3 на физрастворе. Каждым разведением (по 0,2мл) заражают на ХАО по 4 10-12-дн КЭ, которые инкубируют в течении 6 дн. КЭ, погибшие на 3-и сут и позже, а так же оставшиеся на 6-е сут после заражения охлаждают и вскрывают. В положительных случаях на ХАО обнаруживают отдельно расположенные или слившиеся оспины. Под влиянием вируса оспы голубей возникают наиболее крупные, толстые, компактные, с выпуклой серединой очаги оспенных поражений диаметром 5-6 мм, не имеющие признаков некроза. При высокой заражающей дозе наблюдается значительное утолщение и железообразный отёк всей оболочки (вид медузы).

От вируса оспы кур появляются более мелкие (3-5 мм в диаметре) плоские поражения, иногда с неровными краями. При большой заражающей дозе наблюдаются обширные утолщения оболочки, которая имеет беловатую окраску. Вирус оспы индеек даёт беловатые слабо выраженные очаги поражения диаметром 2-3 мм, часто окружённые кольцеобразной зоной. Вирус оспы канареек образует дифференцированные очаги. Первичные очаги средней величины, разлитые и напоминают поражения, вызываемые оспой голубей. Вторичные очаги имеют вид беловатых точек. О вируса осповакцины появляются хорошо видимые очаги уже на 3-й день после инфицирования. Они плоские, диаметром 2-3 мм, с отчётливо видимым центральным некрозом в первичных очагах. ИЗ оспенных поражений ХАО делают тонкие мазки или отпечатки на предметных стёклах и окрашивают по Морозову или Пашену для выявления элементарных оспенных телец (вирионов). Выделение вируса на КЭ проводят до 3-х пассажей.

Биопроба. Её проводят на неиммунных к вирусу оспы цыплятах 3-4 мес возраста. Для этого используют 10%-ную суспензию материала, полученного от естественно больной птицы, или суспензию ХАО заражённых КЭ. В том и другом случаях испытуемый материал осторожно втирают стеклянной палочкой или зубной щёткой в скарифицированную поверхность гребня, бородок, а так же в освобождённые от перьев фолликулы голени. При наличии в материале вируса оспы на месте втирания на 5-6-й дн развиваются оспенные поражения: припухание и покраснение фолликулов, появление на поверхности их гнойных пробочек, затем струпьев, которые в дальнейшем сливаясь, дают общий струп коричневого цвета. Специфичность оспенных поражений у экспериментально заражённой птицы в каждом случае может быть подтверждена при помощи вирусоскопии мазков. У кур, заражённых вирусом оспы голубей в перьевые фолликулы, развивается доброкачественный фолликулит (без некроза), который к 10-12-му дню исчезает. Вирус оспы кур после нескольких пассажей на индейках может вызывать оспенный процесс у голубей, а после нескольких пассажей через них ослабить свою вирулентность по отношению к курам и индейкам.

Индикация вируса.

Вирусоскопия. Готовят мазки из воспалённых фолликулов голени экспериментально заражённых кур или голубей или из свежих оспенных бородавок естественно больной птицы. Окрашивают их методом серебрения по Морозову, на присутствие элементарных телец можно окрашивать также по методу Герцберга или Пашена.

При иммерсионной микроскопии элементарные тельца Борреля просматриваются в виде мелких (200-300 нм) округлых образований тёмно-коричневого или чёрного цвета, расположенных поодиночке, парами, короткими цепочками, в виде скоплений. Присутствие оспенного вируса считается подтверждением только при обнаружении характерных телец в массовом количестве. Достоинством метода вирусоскопии следует считать быстроту ответа (0,5-1 ч после доставки материала в лабораторию), простоту и доступность. Однако есть и некоторые недостатки: наиболее чёткие результаты при вирусоскопии можно получить при использовании срезов от свежих везикул (до нагноения) или везикулярной жидкости; при исследовании пустулёзной жидкости, особенно корок, возможность обнаружения элементарных телец и достоверность полученных результатов значительно снижается. Вирусоскопические исследования могут быть проведены также с использованием техники фазовоконтрастной микроскопии.

ЭМ. В эпителии оспин можно найти вирус ЭМ методом после адсорбции на коллодиевую плёнку. При этом выявляются как незрелые пузырьковидные частицы размером от 60 до 200 нм, так и типичные кирпичеобразные и овальные зрелые вирионы. При негативном контрастировании видны филаментозные структуры вирионов. Диагноз считают установленным при наличии в препаратах одиночных или расположенных группами оспенных вирионов. Метод позволяет определить не только размеры исследуемых вирусов, но и форму и структуру их.

4. Серологическая идентификация

РДП. При оспенной форме болезни для приготовления АГ ex tempore используют кусочки гребешка или кожи с оспенными поражениями, лёгкие, печень, а при дифтеритической форме - гортань, трахею, лёгкие и инфицированые вирусом ХАО КЭ. Положительная РДП подтверждает диагноз на оспу, но отрицательная не дает права её исключать.

Разработана методика постановки РНГА для диагностики оспы кур с использованием как нативных, так и формалинизированных эритроцитов барана.

Разработан ELSA для определения АТ к вирусу ОП.

Дифференциальная диагностика. ОП следует дифференциировать от авитаминоза А, ИЛТ, ИБК, пастереллёза, парши, аспиргеллёза и респираторного микоплазмоза.

5. Иммунитет и специфическая профилактика

Куры, переболевшие оспой в естественных условиях, приобретают иммунитет на 2-3 года. Поствакцинальный иммунитет менее продолжителен и зависит от характера вакцины. Для спец. профилактики ОП применяют живые вакцины 2-х типов: приготовленные из иммуногенных и ареактогенных штаммов гетерологического вируса оспы голубей или из аттенуированного или природно ослабленного ВОП 27-АШ. В СНГ применяют сухую вирусовакцину из вируса оспы голубей (шт.НД). Вирусовакцину из голубиного штамма рекомендуют для цыплят 1-1,5 мес возраста. Иммунитет у привитой птицы наступает через 3 недели и сохраняется около 3-х мес у цыплят и до 10 мес у кур. При использовании вакцины из вируса оспы голубей напряжённость и длительность иммунитета во многом зависит от числа воспалившихся после вакцинации перьевых фолликулов. Считают что для создания напряжённого иммунитета у птицы голубиной вакциной каждая доза последней должна иметь титр не менее 10⁵ ЭИД₅₀, а у птицы привитой вакциной в рабочем разведении , должно быть не менее 15 воспалившихся фолликулов. Проведены успешные опыты аэрозольного применения вирус-вакцины из голубиного штамма оспы Нью-Джерси. При таком методе вакцинации иммунитет у цыплят формируется к 11- тому дню и сохраняется не менее 190 дней. Ф.Б. Ширинов выделил природно ослабленный ВОП и, всесторонне изучив его, рекомендовал для широкого применения в качестве живой вакцины с профилактической целью. 5-летний срок использования этой вакцины дал основания оценить её положительно. Однако в настоящее время в РФ применяется сухая вакцина из шт. ВГНКИ из куриного вируса. Её готовят на основе аттенуированного культурального шт. К. Птицу иммунизируют методом укола в перепонку крыла. Реакция на введение вакцины наступает на 5-8-й день и характеризуется образованием на наружной и внутренней поверхностях перепонки крыла оспин, которые исчезают через 28-30 дней. По эффективности и иммунобиологическим показателям, технологии изготовления и применения эта вакцина превосходит все предыдущие.

6. Лечение

Лечение оспы птиц. Оспинки смазывают настойкой йода. Дифтеритические пленки снимают пинцетом, ранки смазывают йод-глицерином или 0,5% раствором марганцовокислого калия. В рацион включают простоквашу, творог, зелень, воду без ограничений.
Мероприятия. Больных и подозрительных на заболевание изолируют. Подозреваемых в заражении вакцинируют. Помещения дезинфицируют 2--3% раствором едкого натра, 20% свежегашеной известью; навоз обеззараживают биотермически или уничтожают. Карантин снимают через месяц после ликвидации болезни. Вновь завозимую птицу вакцинируют.

Список использованной литературы

1. Вирусные болезни животных. Сюрин В. Н., Самуйленко А, Я., Соловьёв Б. В., Фомина Н. В. Москва 1998 г.5 С.928.

2. Болезни кур. Бессарабов Б.Ф. Москва 1974 г. С.135.

3. Профилактика болезней животных аэрозолями вакцин. Бондаренко И. М., Бурцев В. И., Лагуткин Н. А. Москва 1975 г. С.270.