Исследование влияния "трансфер-фактора" на процессы старения и репаративной регенерации в эксперименте и клинике

Считается, что заболеваемость населения в крупных городах до 40% (а на территориях вблизи мощных источников выбросов - до 60%) связана с загрязнением среды, в то время как в небольших - не более чем на 10%.

С точки зрения здоровья горожан ведущую роль играет загрязнение атмосферного воздух, так как через него контакты человека с окружающей средой более интенсивны и продолжительны, чем через воду и продукты питания. Кроме того, многие химические вещества воздействуют на организм более активно, если поступают в него через органы дыхания. Атмосферные осадки, поглощая газообразные, жидкие и твердые компоненты загрязненного воздуха, приобретают новый химический состав и физико-химические свойства.

Большинство исследований посвящено изучению влияния на здоровье городского населения отдельных компонентов окружающей среды. Наиболее полно изучено атмосферное загрязнение. Статическая достоверная зависимость заболеваемости населения от загрязнения атмосферного воздуха установлена для бронхитов, пневмонии, эмфиземы легких (расширение легочных пузырьков - альвеол, приводящее к сдавливанию мелких кровеносных сосудов и ухудшение процессов газообмена), острых респираторных заболеваний. Установлено достоверное влияние загрязнение воздуха на продолжительность заболеваний.

Опасность загрязнения воздуха для организма человека определяется во многом тем, что даже при незначительных концентрациях поллютантов благодаря круглосуточной фильтрации легкими загрязненного воздуха может происходить значительное по объему поступление вредных веществ в организм. Кроме того, в легких происходит непосредственный контакт поллютантов с кровью, которая затем поступает в большой круг кровообращения, минуя важный детоксикационный барьер - печень. Именно поэтому яды, поступающие в организм человека в процессе его дыхания, нередко действуют в 80 - 100 раз сильнее, чем в случая попадания их через желудочно-кишечный тракт. Степень воздействия загрязненной атмосферы на организм человека зависит от возраста людей. Наиболее чувствительны 3-6 летние дети и пожилые люди старше 60 лет.

Для городской среды типичным поллютантом являются оксиды азота. Они образуются при сгорании любых видов топлива, причем в городах на долю автотранспорта приходится до 75% их суммарного выброса. Важно подчеркнуть, что даже если в топливе отсутствует азот, при его сгорании за счет взаимодействия кислорода и атмосферного азота все равно образуются оксиды азота.

При вдыхании человеком воздуха, содержащего оксиды азота, происходит их взаимодействие с влажной поверхностью органов дыхания и образование азотной и азотистой кислот, поражающих альвеолярную ткань легких. Это приводит к их отеку и рефлекторным расстройствам. В дыхательных путях они соединяются со щелочами тканей и образуют нитраты и нитриты. Нарушение деятельности органов дыхания постепенно, но неуклонно приводит к увеличению нагрузки на сердце и кровеносные сосуды, что, в конечном счете, может стать причиной летального исхода. Этим обстоятельством объясняется отчетливо выраженная тенденция резкого роста смертельных случаев среди больных указанными нозологическими формами заболеваний в период резкого подъема концентрации токсических веществ в воздухе. Также на сердечно-сосудистую систему могут неблагоприятно влиять многие другие атмосферные загрязнители. В частности оксид углерода вызывает тканевую гипоксию, что, в свою очередь, способствует возникновению отрицательных сдвигов в сердечно-сосудистой системе.

Образующиеся в результате вдыхания воздуха, содержащего оксид азота, нитриты и нитраты отрицательно влияют на деятельность практически всех ферментов, гормонов и других белков, регулирующих обмен веществ, рост, развитие, размножение организма. При концентрации диоксида азота менее 205 мкг/м3 у человека наблюдаются изменения на клеточном уровне. При концентрации от 205 до 512 мкг/м3 нарушаются адаптационные механизмы сенсорных систем, а при концентрациях от 512 до 1025 мкг/м3 происходят изменения в биохимических процессах и структурной организации легких. Концентрации диоксида азота в диапазоне 1025-3075 мкг/м3 вызывают увеличение сопротивления дыхательных путей у больных с заболеваниями бронхов, а в диапазоне 3075-5125 мкг/м3 - такие же изменения, но у здоровых людей.

Двуокись серы раздражает дыхательные пути, приводит к спазмам бронхов, в результате её взаимодействия со слизистой оболочкой образуются сернистая и серная кислоты. Общее действие диоксида серы проявляется в нарушении углеводного и белкового обменов, угнетении окислительных процессов в головном мозге, печени, селезенке, мышцах. Он раздражает кроветворные органы, способствует образованию метгемоглобина, вызывает изменения в эндокринных органах, костной ткани, нарушает генеративную функцию организма, эмбриотоксическими и гонадотоксическими действиями.

Серьезные проблемы у городского населения возникает при повышении концентрации в приземном слое воздуха озона. Он является очень мощным окислителем, а его токсичность увеличивается при повышении температуры воздуха. К воздействию озона более чувствительны больные астмой и аллергическим ренитом (насморком) [20].

Велика роль продуктов сгорания автомобильного топлива как загрязнителей окружающей среды. В выхлопных газах автомобилей находится, причем в значительных количествах, окись углерода - угарный газ. Окись углерода, связываясь в крови ч гемоглобином эритроцитов, превращается в карбоксигемоглобин, который в отличии от гемоглобина, не обладает способностью переносить кислород к тканям организма.

Таким образом ухудшается тканевое дыхание, оказывая отрицательное влияние на деятельность сердечно-сосудистой системы, функциональное состояние центральной нервной системы. Поэтому у людей находящихся в зонах высоких концентраций газов, нередко наблюдаются признаки хронического отравления угарным газом: быстрая утомляемость, головные боли, шум в ушах, боли в области сердца [6].

Широко распространены в окружающей горожан воздушной среде полиядерные ароматические углеводороды - вещества, обладающие токсическими свойствами. Воздействие этих веществ на организм человека часто связывают с появлением злокачественных новообразований. К этой группе относятся бенз(а)пирен, отличающийся наиболее выраженной мутагенной и канцерогенной активностью, хотя, по оценке экспертов Международного агентства изучения рака, прямые доказательства его канцерогенности по отношению к человеку отсутствуют. К этой же группе веществ относятся диоксины. Главным источником их выбросов являются автомашины, работающие на бензине с противонагарными присадками, агрегаты по сжиганию мусора и даже обычные печи. Источником диоксинов являются сталелитейные предприятия и целлюлозно-бумажные комбинаты, следы диоксинов обнаружены в продуктах, образующихся при участии хлора. Они переносятся в атмосфере на большие расстояния (в основном сорбированными на твердых частицах) и потому распространяются глобально. Считается, что многие хлорорганические соединения (в том числе диоксины) понижают эффективность функционирования иммунной системы. В результате этого повышается вероятность вирусных заболеваний и увеличивается тяжесть их течения, замедляются процессы регенерации (заживления) тканей, что является определяющим при старении самообновляющихся тканей.

В целом можно сказать, что различные химические вещества, загрязняющие атмосферу городов, характеризуются некоторой однотипичностью действия на организм человека. Так, многие из них раздражают слизистые оболочки, что приводит к увеличению числа воспалительных заболеваний органов дыхания, ЛОР-органов, глаз. Даже в небольших количествах они ослабляют защитные свойства организма человека, влияя на его иммунологическую реактивность, повышают уровень заболеваемости сердечно-сосудистой системы и бронхиальной астмой. Выявлена положительная связь между уровнем загрязнения ими атмосферного воздуха городов и ростом заболеваний генетической природы, повышением количества злокачественных новообразований, ростом аллергических заболеваний, увеличением случаев нарушения обмена веществ. На основании исследований, проведенных в японском городе Осако, показана зависимость между уровнем загрязнения атмосферного воздуха и уровнем смертности жителей города.

Особенно ярко проявляется эта связь с сердечно-сосудистыми, респираторными заболеваниями, хроническими ревматическими болезнями сердца.

Специфической проблемой для населения многих городов являются последствия хлорирования питьевой воды. При ее хлорировании наблюдается трансформирование хлор- и фосфорорганических пестицидов в вещества, которые оказываются в 2 раза более токсичными, чем исходные компоненты.

Химическое загрязнение питьевой воды вызывает прежде всего болезни органов пищеварения и выделительной системы. К ним относятся гастриты, язвы желудка, желчекаменная и мочекаменная болезни, нефриты. Так, при повышении в 3-5 раз содержания хлоридов и сульфатов в воде растет заболеваемость населения желче- и мочекаменной болезнями, при этом наблюдается увеличение и сосудистой патологии. Загрязнение воды органическими и неорганическими отходами промышленности приводит к поражению печени, кроветворного аппарата, к отложению солей кальция [20].

Проблема влияния загрязнения воды на здоровье человека приобретает все большую актуальность в связи с принципиальными изменениями самого характера сточных вод. Как промышленные, так и бытовые сточные воды содержат отходы синтетических моющих веществ, основой которых являются поверхностно-активные вещества - детергенты. Очистные сооружения, используемые на современных водопроводных станциях, не обеспечивают необходимую эффективность очистки воды от ПАВ, что является причиной их появления в питьевой воде. При попадании детергентов в желудочно-кишечный тракт повреждаются стенки пищевода и желудка, тем самым нарушается их проницаемость. Оказывая длительное хроническое воздействие на организм человека, эти вещества могут вызывать резкое ухудшение течения многих заболеваний внутренних органов.

Проблема загрязнения воды и его последствий для человеческого организма самым тесным образом связана с санитарно-гигиеническим состоянием почвы. В настоящее время в сельском хозяйстве в огромных количествах применяются минеральные удобрения и химические средства защиты растений - пестициды. Относящиеся у группе пестицидов хлорорганические соединения, такие как ДДТ и гексохлоран, обладают относительной устойчивостью во внешней среде и способны кумулирвоаться в тканях и жире животных организмов. Высокие концентрации ДДТ и его метаболитов, поражая в основном паренхимозные органы и центральную нервную систему, способствуют развитию цирроза, злокачественных опухолей, гипертонии.

К числу факторов окружающей среды, неблагоприятно влияющих на здоровье городского населения, следует помимо химических и биологических веществ отнести также загрязнители физической природы: шум, вибрацию, электромагнитные колебания, радиоактивное излучение.

Одним из важнейших физических видов загрязнения окружающей природной среды является акустический шум. Исследованиями установлено, что по степени вредности воздействия шуму принадлежит второе место после химического загрязнения окружающей среды [5]. Ежедневное воздействие слабого шума ухудшает самочувствие, снижает остроту внимания, способствует возникновению неврозов, расстройств нервной системы и утрате остроты слуха. При действии шума происходят сдвиги обмена веществ в нервной ткани, развитие гипоксии, нейрогуморальные сдвиги в организме. Шум может вызвать активацию системы органов внутренней секреции в виде увеличения содержания в крови активирующих гормонов и усиления обменных процессов, угнетение естественного иммунитета, что может способствовать формированию патологических процессов. иммунитет геропрофилактика изопротеренол

По данным австралийских исследователей, шум в городах приводит к сокращению жизни на 8-12 лет. Считается, что при повышении уровня уличного шума до 50-60 дБ SL происходит увеличение числа сердечно-сосудистых заболеваний у населения. Городской шум вызывает ишемическую болезнь сердца, гипертоническую болезнь. У людей проживающих в шумном районе, повышенное содержание холестерина в крови встречается чаще, чем у жителей тихих кварталов [20]. Совокупность всех расстройств и нарушений функций, возникающих под воздействием промышленных шумов, получило по предложению Е.Ц. Андреевой-Галаниной и соавторов обобщающее наименование «шумовая болезнь» [3].

Много проблем возникает и в связи с воздействием на человека магнитных и электромагнитных полей техногенного характера. Они отрицательно влияют на нервную систему, а наиболее значительную роль в ответных реакциях на этот мощный антропогенный фактор играют сердечно-сосудистая и эндокринная системы. Ю.А. Думанский и соавторы (1975) обнаружили воздействие коротких волн на сердечно-сосудистую систему, характеризующееся урежением пульса, сосудистой гипотензией, ухудшением проводимости сердца.

Проведенные в конце 1980-х гг. исследования американских эпидемиологов выявили положительную связь между уровнем техногенных электромагнитных полей и ростом ряда заболеваний у населения: лейкемией, опухолями мозга, рассеянным склерозом, онкологическими болезнями. Наиболее чувствительна к воздействию полей нервная система. Существенно угнетается и иммунная система, а поэтому отягощается течение инфекционного процесса в организме, иммунная система начинает действовать против нормальных тканевых антигенов собственного организма.

Резюмируя анализ литературы о патофизиологических особенностях воздействия на организм различных антропогенных факторов окружающей среды, можно сделать вывод что, с одной стороны, каждый из них может избирательно влиять на функции отдельных органов и систем организма и, таким образом, оказывать специфическое действие. С другой стороны, эти факторы обладают также неспецифическим действием, поражая, прежде всего, центральную и вегетативную нервную систему, в связи с чем могут наблюдаться неблагоприятные сдвиги в различных органах и системах.

Как видно из представленного выше материала, к факторам, влияющим на здоровье населения урбанизированных территорий, относятся многие физические и химические особенности среды. Однако этот список будет неполным, если в него не включить социальные условия. Из последних наибольшее значение имеют насыщенность контактами и информационная избыточность среды. Стремительное развитие массовых коммуникаций, по мнению многих исследователей, стало причиной экопсихологического стресса. Перегрузка психики огромным потоком противоречий, как правило, негативной информации привела к развитию, в частности, информационных стрессов. Длительные стрессы вызывают нарушение иммунного и генетического аппарата, становятся причиной многих психических и соматических заболеваний, повышенной смертности [4].

Появление патологий в тех или иных органах и системах под влиянием негативных антропогенных факторов окружающей среды может стать непосредственной причиной преждевременного старения организма человека, и даже смерти.

Общая смертность населения и средняя продолжительность жизни являются в международной практике важнейшими показателями, отражающими общественное здоровье. Последние 15 лет в России наблюдается ухудшение практически всех демографических показателей. Специалисты говорят о депопуляции, т.е. практически о вымирании населения нашей страны. Действительно, начиная с 1992 года наблюдается отрицательный баланс прироста населения. Очень неблагоприятна динамика средней продолжительности жизни и смертности в нашей стране. На сегодняшний день средняя продолжительность жизни в России меньше, чем в развитых странах, где давно уже преодолен 70-летний рубеж. В нашей стране этот показатель составляет 67,66 лет.

Для того, чтобы определить, какие именно факторы определяют продолжительность жизни, следует познакомиться со структурой заболеваемости и смертности населения. Заболеваемость населения России в основном определяют пять классов болезней. Они составляют более 2/3 всех заболеваний. Наиболее распространены болезни органов дыхания - более 1/3 всех заболеваний. Второе место занимают болезни нервной системы и органов чувств. Далее следуют болезни сердечно-сосудистой системы, болезни органов пищеварения, а также несчастные случаи, травмы и отравления. Растет и число вирусных заболеваний.

Структура смертности в России имеет определенные отличия от других стран мира. Как в развитых странах, так ив России большинство людей умирают от сердечно-сосудистых заболеваний (в настоящее время это причина смерти почти 56% россиян). При этом следует заметить, что в нашей стране смертность от этой причины за последние годы выросла вдвое и приобрела характер эпидемии. На втором месте среди причин смертности несчастные случаи, травмы и отравления, самоубийства и убийства. Скажем, на дорогах гибнут ежегодно более 30 тыс. человек, а от самоубийств - около 60 тыс. далее среди причин, вызывающих смерть, идут онкологические заболевания и болезни органов дыхания.

Качество окружающей среды в сочетании с образом жизни в 77% случаев служат причиной болезни, а в 55% - причиной преждевременной смерти [15]. Тем не менее, в реальной жизни этим крайним проявлениям (болезнь и смерть) подвержен небольшой процент населения. У основной же массы населения, проживающих в условиях той или иной степени загрязнения окружающей среды, формируются так называемые предпотологические состояния: изиологические, биохимические и другие изменения в организме или же происходит накопление в органах и тканях тех или иных загрязнителей без видимых признаков нарушения здоровья. Такое «загрязнение» организма во времени наряду со снижением количества любых необновляющихся структур и ухудшение качества регуляции и взаимосогласования процессов жизнедеятельности в организме является одной из основных причин старения организма, в том числе и преждевременного [9]. Под преждевременным старением понимается любое частичное или более общее ускорение темпа старения, приводящее к тому, что данное лицо опережает средний уровень старения своей возрастной группы [31].

В социально-экономическом и медицинском плане наибольшее значение имеет преждевременное старение в сочетании с возрастными болезнями, которые развиваются быстро, приводят к одряхлению и инвалидности. В непосредственной зависимости от снижения жизненного потенциала населения находится сокращение трудовых ресурсов. Таким образом, существеннейшей потребностью современного общества является разработка новых медицинских профилактических и лечебно-оздоровительных технологий, направленных на существенное повышение потенциала здоровья и замедление самого процесса старения.

2.3 Значение трансфер фактора в организме млекопитающих

У жителей крупных городов в результате воздействия отрицательных факторов окружающей среды наблюдается высокая степень распространения экологически зависимых вторичных иммунодефицитов. Не компенсируемые изменения в иммунной системе приводят к истощению резервных возможностей, развитию патологии, нарушению процессов регенерации и к связанным с ними процессам старения [12].

Известна тесная связь снижения функциональной активности иммунной системы с процессом старения (Ф. Бернет). При старении функция иммунной системы снижена, она теряет свою эффективность в выполнении ряда специфических задач. С этим связано повышении восприимчивости организма к ряду заболеваний, особенно к так называемым аутоиммунным болезням, в основе которых потеря способности организма отличать «свои» белки от «чужих». У пожилых людей процент различных аутоантител, вырабатывающихся против собственных белков, значительно повышен. В период от 40 до 80 лет он может увеличиваться в 6 - 8 раз. Все это ведет к саморазрушению и старению организма, его «иммунологическому разоружению» [31]. В связи с чем, представляется актуальным изучение влияния новых, перспективных иммуномодуляторов иммунной системы на показатели биологического возраста.

Разработаны представления о роли специальной субпопуляции Т-лимфоцитов в поддержании уровня клеточного роста в организме, и значение снижения ее функции для старения [10]]. Повышение функции таких клеток - путь к «терапии старения» - возможно с применением трансфер фактора (ТФ) фирмы 4Life Research™ (USA).

ТФ является новейшим, жизненно-необходимым средством для поддержания иммунной системы и защиты организма от многочисленных повреждающих факторов [37, 40].

Трансфер факторы впервые были открыты в 1949 году доктором Шервурдом Лоуренсом [21, 22, 39]. В процессе изучения туберкулеза, который был главной угрозой здоровья в то время, он обнаружил, что иммунный ответ мог быть передан от донора получателю через введение изолированных лейкоцитов. Дальнейшее исследование привело его к заключению, что этот иммунный изолят должен содержать "факторы", которые сделали возможным передачу устойчивости от донора к получателю. Он назвал эти молекулы "трансфер факторы". Данное революционное открытие стало возможным только благодаря развитию науки и новейшей технологии. Позднее ученые обнаружили, что ТФ обладают универсальной эффективностью, независимо от биологического вида донора и реципиента. Это свойство ТФ объясняется одним из фундаментальных научных принципов - чем более важными для жизнеобеспечения являются тот или иной материал или структура, тем более универсальными они являются для большинства живых систем [43].

По сведениям С.Н. Kirkpatrick и соавт. [38, 46], трансфер факторы представляют собой пептид, состоящий из 44 аминокислот. В отличие от антител, которые имеют большую молекулярную массу, молекулы трансфер факторов имеют достаточно малый размер и представляют собой фракцию молекулярного веса от 3500 до 10000 дальтонов. Именно этим объясняют факт отсутствия у них аллергенных свойств. Если антитела реализуют свое действие, присоединяясь к антигенам (чужеродным белкам), то ТФ представляют собой сигнальные молекулы, которые «обучают» и «тренируют» незрелые иммунные клетки, подготавливая их к отражению еще только предстоящей угрозы.

Имеющиеся литературные данные позволяют отметить, что ТФ оказывает многоплановое воздействие на иммунную систему, регулируя функцию клеток: Т-супрессоров, Т-киллеров и макрофагов [19].

Являясь универсальным иммунокорректором, ТФ индуцирует или ослабляет, или нормализует иммунный ответ. В зависимости от вида нарушений он стимулирует сниженный иммунитет или же нормализует чрезмерно затянувшиеся иммунные реакции, предотвращая наступление патологических процессов. Это происходит в связи с тем, что ТФ имеет три основные фракции, названные в соответствии с их основным действием на иммунную систем: индукторы, антиген-специфичные трансфер факторы и супрессоры. Индукторы обеспечивают общую готовность иммунной системы к отражению чужой агрессии, антиген-специфичные трансфер факторы представляют собой набор определенных антигенов и цитокинов, с помощью которых иммунная система может заранее научиться распознавать многие микроорганизмы и антигены. И, наконец, супрессоры не позволяют иммунной системе сосредотачивать всю свою мощь на уж побежденной инфекции, игнорируя при этом другие угрозы. Кроме того, супрессоры регулируют интенсивность иммунного ответа и тем самым предотвращают аутоиммунные реакции [13].

Цитокины, входящие в его состав, регулируют функцию клеток-супрессоров, адекватную иммунную реакцию и степень активации патологического процесса, т.е. реакция организма может быть предсказуемой и управляемой. Эта функция является крайне важной в современном понимании иммунной гипотезы старения, основной критикой которой является вероятность усиления иммуномодуляторами аутоиммунных процессов организма.

К трансфер факторам относятся цитокины, бета-глюкан, ацемананы некоторых лекарственных растений, фитиновая кислота, инозитол-гексофосфат и другие соединения животного и растительного происхождения. Высокая эффективность ТФ многократно доказана как в экспериментальных исследованиях, так и в клинических условиях в качестве элемента нутритивной поддержки при самых различных заболеваниях [43, 44].

Первоначально считалось, что источником ТФ может быть только кровь человека. Для приготовления инъекционных препаратов, содержащих ТФ, используется донорская кровь, культуры лейкоцитов и животные материалы, такие как кровь, селезенка и лимфатические узлы. Однако вышеуказанные источники получения ТФ имеют ряд существенных негативных сторон, важнейшим из которых является риск заражения ВИЧ-инфекцией или вирусным гепатитом. Помимо этого, донорская кровь и кровь из банков крови не может удовлетворить потребности промышленного производства. Для потребителя немаловажен также такой факт, как неудобство их применения. Дальнейшие исследования показали, что ТФ эффективны не только при инъекционном введении, но они сохраняют свою активность также при приеме внутрь. В 1980 году исследователи обнаружили, что ТФ присутствуют также в молозиве. Сегодня многие полагают, что коровье молозиво является одним из самых лучших источников их получения. К основным преимуществам использования молозива для получения ТФ относятся безопасность источника, обилие ресурсов, простота и удобство использования конечного продукта [44].

В 1989 году из молозиво впервые был выделен концентрат ТФ, что стало возможным благодаря использованию высокотехнологического запатентованногопроцесса ультрафильрации (патент є 4816563 от 18 Марта 1989 года) [41]. Концентрат, ставший эксклюзивным продуктом, получил фирменное название Трансфер Фактор XF™.

Компания 4Life Research™ владеет Лицензией на исключительное право использования концентрата, имеющего фирменное название Трансфер Фактор XF™, для изготовления своих фирменных продуктов Трансфер Фактор™ и Трансфер Фактор Плюс™ и др. Качество производства является одним из важнейших приоритетов Компании 4Life Research. Высшее качество молозива гарантировано тем, что на всех этапах, начиная от сбора молозива до окончательной стадии производства, к нему предъявляются те же требования, что и к молочным продуктам высшего качества "Grade A" по стандартам FDA, США. Производство соответствует требованиям Департамента сельского хозяйства США и утверждено Департаментом штата. Таким образом, осуществляется двойной Контроль Качества - Федеральный контроль и контроль штата.

Молочные фермы, поставляющие молозиво, находятся в штатах Вашингтон и Калифорния, США. Корм животных обеспечивается путем выпаса и на ферме. У этих животных исключается использование антибиотиков и гормонов. Молозиво собирается в первые дни после отела, причем телята получают его в изобилии.

Далее молозиво замораживается на ферме и отправляется на фабрику, где подвергается процессу обезжиривания и пастеризации (LTLT) при низкой температуре (145 F или 81°С) в течение длительного времени (45 мин). Трансфер факторы извлекаются из молозива методом ультрафильтрации [42].

Трансфер Фактор XF™ имеет огромные преимущества перед сухим молозивом, что существенно повышает эффективность его использования:

1. Концентрат имеет более высокое содержание ТФ по сравнению с молозивом. Чтобы представить себе разницу в содержании основного активного компонента, следует сказать, что для получения 1 кг концентрата ТФ требуется 50 кг сухого молозиво.

2. Высокая эффективность ТФ создается за счет использования специального процесса стабилизации Трансфер Фактора XF™ с целью сохранения эффективности ТФ.

3. Очищенность Трансфер Фактор XF™ от крупных молочных белков, иммуноглобулинов и казеинов позволяет его использование даже у людей с аллергией к молоку и непереносимостью лактозы.

Все материалы и используемые в процессе производства (GMP) ингредиенты соответствуют качеству, предъявляемому к пищевым продуктам. Ингредиенты специфицируются и анализируются согласно тому, как указано в Сертификате анализа, представленного с этим документом. Микробиологические анализы производятся на сырье, в процессе производства и на законченном продукте. Сертификаты микробиологических анализов имеются в протоколе для каждой партии.

О высокой эффективности препарата американской фирмы «4Life Research» ТФ на нормальные Т-киллеры свидетельствуют сравнительные данные, полученные при лабораторных испытаниях. Было установлено, что ТФ значительно активнее, чем широко известные иммуномодуляторы, так как ТФ усиливал активность нормальных Т-киллеров на 103%. Исследования, проведенные Киселевским М.В., Халтуриной Е.О. в Российском онкологическом научном центре, показали, что в лабораторных условиях ТФ обладают стимулирующим действием на противоопухолевую и цитоксическую активность мононуклеарных клеток крови здоровых доноров [13].

Большинство продуктов на основе Трансфер Фактор XF™ в России зарегистрировано Министерством Здравоохранения РФ в качестве биологически активных добавок к пище.

Перед определением влияния ТФ на показатели биологического возраста человека, в лабораторных условиях были выявлены эффекты ТФ у старых мышей. В основу эксперимента было положено представление о том, что определяющим для старения самообновляющих тканей с возрастом является резкое снижение скорости их самообновления. Мышам Balb/c, самкам, в возрасте 12 месяцев, вводили ТФ, растворенный в физиологическом растворе, 1 раз в день в течение 1 недели. В дозе, аналогичной используемой у человека. В качестве теста на потенциал клеточного роста использовали гиперпластическую реакцию ткани слюнных желез на изопротеренол (увеличение массы через 24 часа). Исследовали также: массу тимуса и селезенки, количество выделяемых мононуклеаров из селезенки в градиенте плотности фиколла 1,09 (лимфоциты + А-клетки) и плотности 1,065 (активированные клетки селезенки с пониженной плотностью), а также количество А-клеток в селезенке (прилипающих к поверхности пластиковых чашек Петри).

Было показано, что если у молодых мышей введение изопротеренола вызывает увеличение массы слюнных желез в 1,6-1,8 раза, то у старых животных наблюдается снижение массы слюнных желез на введение изопротеренола. Введение ТФ восстанавливало потенциал клеточного роста у старых мышей - на изопротеренол наблюдалось увеличение массы слюнных желез в 1,5-1,7 раза. Одновременно резко (в несколько раз) увеличивалось количество активированных клеток селезенки, а также снижалась реакция тимуса (снижение массы) на стресс - на введение адреномиметика - изопротеренола [10]. Таким образом, представляется очень перспективным подробное изучение влияния ТФ как «антивозрастного фактора».

Материалы и методы исследования.

2.4 Описание метода оценки показателей биологического возраста с помощью программы «Диагностика старения: Биовозраст»

Определение степени развития (старения) и уровня жизнеспособности организма является одной из ключевых задач профилактической геронтологии. Такая оценка позволяет объективно зарегистрировать темп старения и его изменения при лечебно-профилактических воздействиях.

Биологический возраст в периоде старения и методы его оценки.

Для оценки индивидуальных темпов развития, в том числе определения преждевременного старения, используется категория биологического возраста.

Многие физиологические показатели организма человека выражено изменяются с возрастом, что, с одной стороны, ставит вопрос о возрастной норме, с другой стороны, позволяет по измеренным показателям говорить о реальном возрасте организма. Из последнего выросло понятие "биологического возраста". Т.М. Смирновский и соавторы предлагают следующее определение биологического возраста. Биологический возраст - это показатель уровня износа структуры и функции определенного элемента организма, группы элементов и организма в целом, выраженный в единицах времени путем соотнесения значений замеренных индивидуальных биомаркеров с эталонными среднепопуляционными кривыми зависимостей изменений этих биомаркеров от календарного возраста.

Биологический возраст, помимо наследственности, в большой степени зависит от условий среды и образа жизни. Поэтому во второй половине жизни люди одного хронологического возраста могут особенно сильно различаться по морфофункциональному статусу.

Основные проявления биологического возраста при старении - нарушения важнейших жизненных функций и сужение диапазона адаптаций, возникновение болезней и увеличение вероятности смерти или снижение продолжительности предстоящей жизни. Каждое из них отражает течение биологичесокго времени и связанное с ним увеличение биологического возраста [8].

Введение понятия «биологический возраст» объясняется тем, что календарный (хронологический) возраст не является достаточным критерием состояния здоровья и трудоспособности стареющего человека. Среди сверстников по хронологическому возрасту обычно существуют значительные различия по темпам возрастных изменений. Расхождения между календарным и биологическим возрастом, позволяющие оценить интенсивность старения и функциональные возможности индивида, неоднозначны в разные фазы процесса старения. Самые высокие скорости возрастных сдвигов отмечаются у долгожителей, в более молодых группах они незначительны. Поэтому определять биологический возраст имеет смысл лишь у лиц старше 30 лет или даже 35 лет [31].

Важнейшей проблемой при оценке степени старения или уровня жизнеспособности организма и его элементов является вопрос о биомаркерах старения - физиологических показателях, выражено коррелирующих с возрастом для человеческой популяции.

Наиболее простой формой представления биовозраста (БВ) в виде явной функции от некоторого конечного набора показателей состояния организма M1, M2, ..., Mn, рассматриваемых в качестве биомаркеров старения, является линейная регрессионная зависимость:

БВ=A+B1M1+B2M2+...+BnM,

где А, B1, B2 , .., Bn - постоянные коэффициенты.

В настоящее время разработано огромное количество методов определения БВ с помощью моделей множественной линейной регрессии. Эти методы основаны на различных панелях тестов, отражающих возрастную физиологию, возрастную хроническую патологию, пределы адаптации и функциональные резервы, физическую и умственную работоспособность, характеристики жизненно-важных систем организма, объективные и субъективные оценки уровня здоровья и др. [36]. До конца не решенными проблемами остаются классификация и стандартизация тестов, а также проблема адекватности результатов, полученных на различных популяциях.

В России до настоящего времени наиболее широко применяется так называемая "киевская" методика определения БВ [1, 34], которая представляет собой типичную линейную регрессионную модель БВ и включает следующий набор показателей:

1. Систолическое, диастолическое и пульсовое артериальное давление (АДс, АДд и АДп) в мм рт.ст.

2. Скорость распространения пульсовой волны по сосудам эластического типа (СПВэ) на участке сонная - бедренная артерии в м/сек.

3. Скорость распространения пульсовой волны по сосудам мышечного типа (СПВм) на участке сонная - лучевая артерии в м/сек.

4. Жизненная емкость легких (ЖЕЛ) в мл.

5. Время задержки дыхания (ЗД) на выдохе в сек.

6. Аккомодация хрусталика по расстоянию ближней точки зрения (А) в диоптриях.

7. Слуховой порог (СП) при 4000 Гц в Дб.

8. Статическая балансировка (СБ) на левой ноге в сек.

9. Масса тела (МТ) в кг.

10. Самооценка здоровья (СОЗ) - количество неблагоприятных ответов на 29 вопросов стандартной анкеты.

11. Символьно-цифровой тест Векслера (ТВ) - число правильно заполненных ячеек за 90 сек.

Для количественного определения БВ в соответствии с методикой предложено применять следующие формулы.

Для мужчин:

БВ = 58.873 + 0.180 АДс - 0.073 АДд - 0.141 АДп - 0.262 СПВэ + 0.646 СПВм - 0.001 ЖЕЛ + 0.005 ЗД - 1.881 А + 0.189 СП - 0.026 СБ - 0.107 МТ + 0.320 СОЗ - 0.327 ТВ

Для женщин:

БВ = 16.271 + 0.280 АДс - 0.193 АДд - 0.105 АДп + 0.125 СПВэ + 1.202 СПВм - 0.003 ЖЕЛ - 0.065 ЗД - 0.621 А + 0.277 СП - 0.070 СБ + 0.207 МТ + 0.039 СОЗ - 0.152 ТВ

Описание компьютерной системы.

Компьютерная система "Диагностика старения: Биовозраст", разработанная Национальным Геронтологическим Центром (Москва,Россия), представляет собой экспертную систему помощи по диагностике старения методом вычисления биологического возраста, содержит методические рекомендации, руководство, учебник, файлы помощи, дополнительные программы диагностики и справки (возрастные стандарты и др.).

Система позволяет:

* проводить анкетирование и некоторые тесты в автоматическом режиме,

* обрабатывать введенные данные с вычислением - биовозраста в целом, возрастные стандарты ряда функций, отклонение от возрастных стандартов,

* строить по результатам таблицу и график Профиля старения органов и систем (как разницу биовозраста и календарного возраста в годах),

* выдавать в автоматическом режиме заключение о БВ, профиле старения органов и систем,

* вести базу данных клиентов,

* проводить распечатку графиков и текстов из Текстового редактора,

* система имеет несколько уровней помощи.

Общий порядок исследования с помощью программного комплекса «Диагностика старения: Биовозраст» проходит в несколько основных этапов:

1) сбор предварительной информации о пациенте. Включает в себя следующие данные: фамилия, имя, отчество, количество полных лет на момент проведения измерения, пол;

2) собственно исследование (измерения). Заключается в определении биомаркеров;

3) расчет значения БВ. Производится автоматически при заполнении всех полей панели биомаркеров;

4) анализ и оценка результатов измерения.

Методика определения биомаркеров для панели биомаркеров компьютерной программы НГЦ «Диагностика старения: Биовозраст».

1. Артериальное давление (АД - мм. рт. ст.): АДсистолическое (АДС), АДдиастолическое (АДД) - измеряются по общепринятой методике с помощью аппарата Рива-Роччи или аналогичных электронных и др. аппаратов, на правой руке, в положении сидя, дважды с интервалом 5 мин. Учитывается наименьший результат из двух измерений. Для выбранных значений АДС и АДД вычисляется АДпульсовое (АДП) по формуле: АДП=АДС-АДД. Тест измерения АД проводится всегда вначале всей батареи тестов.

2. Скорость пульсовой волны (СПВ - м/сек): скорость распространения пульсовой волны по артериальным сосудам эластического типа (СПВэ) на участке сонная артерия - бедренная артерия и мышечного типа (СПВм) на участке сонная артерия - лучевая артерия.

3. Жизненная емкость легких (ЖЕЛ) - измеряется (в мл) в положении сидя, через 2 часа после приема пищи, на любом спирометре. Проводится два замера, берется максимальный результат.

4. Задержка дыхания (ЗД - сек) после глубокого выдоха (или вдоха) измеряется дважды с интервалом 5 мин. с помощью секундомера.

5. Аккомодация (А - диоптрии) определяется для ведущего глаза путем нахождения ближайшей точки ясного зрения при чтении шрифта из таблиц Сивцова в условиях коррекции аметропии и пресбиопии. Допустимо приближенное определение расстояния до ближайшей точки ясного зрения (в которой текст еще ясно различим) с помощью линейки или сантиметра, измеряя расстояние L (где L - расстояние в мм.) от нижнего края орбиты глаза до листа с текстом, отпечатанным на принтере шрифтом Times New Roman, размером 11 пикселей. Величина аккомодации вычисляется далее по формуле: А=1000/ L.

6. Статическая балансировка (СБ - сек) определяется при стоянии испытуемого на левой ноге, если он правша, (правая нога касается или находится около середины голени), без обуви, глаза закрыты, руки на бедрах (без предварительной тренировки). Левша стоит на правой ноге. Во время стояния допустима балансировка с изменением положения рук и ног, с последующим возвращением в исходное положение. Продолжительность СБ измеряется с помощью секундомера трижды с интервалом 3 мин. Учитывается максимальный результат.

7. Масса тела (МТ - кг) определяется в легкой одежде, без обуви с помощью медицинских весов.

8. Субъективная оценка здоровья (СОЗ) производится с помощью анкеты из 29 вопросов. Отпечатанная анкета дается испытуемому, который должен подчеркнуть ответ на каждый вопрос. Общее число неблагоприятных ответов может колебаться от 0 до 29 и эта величина входит в формулу для определения биологического возраста (Приложение 1).

9. Символьно-цифровой тест Векслера (ТВ) выполняется с помощью стандартного протокольного бланка. Ставится задача в течение 90 сек с максимальной скоростью вписать в пустые ячейки символы, соответствующие расположенным в каждой ячейке цифрам. Образец заполнения находится в верхнем ряду, к которому можно постоянно обращаться. Первые 3 ячейки заполняет в ходе инструктажа врач-исследователь, последующие 7 ячеек - испытуемый под контролем исследователя в качестве тренировки. После этого включается секундомер, и последующие ячейки заполняются подряд без пропусков слева направо. Учитывается число ячеек, правильно заполненных за 90 сек. Число правильно заполненных ячеек является результатом, входящим в формулу БВ (Приложение 2).

Дополнительные биомаркеры, используемые для вычисления профиля старения в программе НГЦ «Диагностика старения»:

1. Частотный порог слуха (ЧПС - Гц) - верхний предел частоты звука, который еще может слышать человек. Измеряется на любом типе аудиометров, имеющих верхнюю границу частотного диапазона не менее 20000 Гц. Для оценки ЧПС можно воспользоваться также специальной компьютерной программой для определения ЧПС, встроенной в программу НГЦ "Диагностика старения" (при этом компьютер должен иметь включенные звуковые колонки). Измерения проводятся в тихой комнате. Сначала грубо определяется ЧПС путем повышения частоты от 5000 Гц с шагом 1000 Гц. Затем производится уточнение ЧПС путем повышения частоты от ЧПС - 1000 Гц. с шагом 200 Гц.

2. Тест Шульте (ТШ - сек) - тест на внимание. Испытуемый указывает карандашом на цифры от 1 до 25, расположенные в случайном порядке на бланке (бланк теста Шульте прилагается). Определяется время нахождения 25 цифр. Берется средний результат из двух тестов. Интервал отдыха между тестами - 2 минуты (Приложение 3).

3. Сила кисти (СК - кг) - определяется в положении стоя, с помощью любого ручного динамометра для левой (у левшей для правой) руки. Рука располагается на уровне пояса. Тест проводится дважды с интервалом 2 минуты. Берется лучший результат.

4. Тест постукивания (ТП - количество ударов). Нажатие проводится указательным или средним пальцем правой (для левшей левой) руки с максимальной частотой в течение 30 сек., с упором в основание кисти. Сначала проводится тренировка в течение 10-20 сек, далее через 1-2 мин. отдыха сам тест.

Электропунктурная диагностика активности функциональных систем организма по методу Накатани с помощью аппаратно-программного комплекса «Диакомс»

В 1956 году японский ученый И. Накатани, проводя измерения во время обследования больных с заболеваниями внутренних органов, обнаружил последовательность кожных участков с высокой электропроводностью. Этот феномен получил название «ридороку» (от яп.: ryo - хорошо, do - (электро) проводимость, raku - линия). Дальнейшие исследования показали, что различные заболевания проявляются трансформацией электрокожного сопротивления в определенных точках, топографически совпадающих с ходом классических акупунктурных меридианов. Поэтому в диагностических целях стали использовать корреляции между изменением электропроводности в репрезентативных акупунктурных точках и (АТ) и состоянием классических акупунктурных меридианов, «определяющих» функциональное состояние соответствующих им внутренних органов и систем организма. Показатели проводимости могут быть, как патологическими, так и физиологическими. При этом показатель патологического «ридороку» выше или ниже физиологического [35].

Для определения «ридороку» каждого меридиана достаточно измерить электропроводность, так называемых, репрезентативных точек. В некоторых литературных источниках эти точки называются биологически активными (БАТ). БАТ в количестве 24-х (по 12-ти слева и справа) расположены на линиях, соответствующих 12-ти основным «китайским» меридианам, и изменение в них величины микротоков позволяет судить об активности всех органов и систем организма [17, 18].

Таблица 1. Характеристики некоторых свойств БАТ (по В.В. Лакину, А.А. Курнакову, 2004):

Воздействие	Характеристика
1. Давление	У БАТ повышенная чувствительность к давлению, особенно при заболевании. Если нарушена функция внутреннего органа, точка-представитель на коже становится болезненной
2. Электричеством (электрическое сопротивление)	В БАТ самое низкое сопротивление, в среднем 794 кОм, а в радиусе до 25 мм - 1407 кОм. Между ними и прилегающими точками существует разность потенциалов. При заболевании электрический потенциал заметно повышается у тех точек, которые связаны с тем или иным страдающим органом
3. Теплом	Теплоотдача БАТ выше близлежащих точек
4. Кислородом	БАТ поглощают кислород больше других участков тела
5. Морфологические особенности	В области БАТ повышено содержание тучных клеток, которые выделяют активные вещества, энергично влияющие на обмен веществ в клетках

Аппаратно-программный комплекс «Диакомс».

Наиболее полно метод Накатани реализован в компьютерном комплексе электропунктурной экспресс-диагностики «Диакомс», в стандартную конфигурацию которого входит компьютер, датчики измерения микротоков, устройство согласования датчиков с компьютером и специализированное программное обеспечение. Использованный в работе комплекса оригинальный алгоритм обработки и анализа результатов обследований позволяет успешно использовать комплекс «Диакомс» для решения вопросов эко- и профпатологий, раннего выявления различных заболеваний, контроля за эффективностью проводимых мероприятий и др.

Комплекс разрешен к использованию Комитетом по новой технике Минздрава России (протокол №5 от 11 сентября 1992 г.), имеет Сертификат качества ПС, используемого в системе МЗ РФ №86 от 30.06.93. рекомендован к внедрению на всех уровнях системы здравоохранения и медицинской науки письмом МЗ РФ №5-16/10-16 от 23.03.93.

Электропунктурная диагностика показана для: интегральной оценки функционального состояния акупунктурных меридианов, органов и систем организма; динамического наблюдения за состоянием здоровья; определения электропунктурного профиля основного и сопутствующего заболеваний.

Проведение электропунктурной диагностики по Накатани противопоказано при наличии у пациента имплантированного кардиостимулятора; в состоянии острого психического возбуждения; алкогольного и норкатического опьянения.

Относительным противопоказанием можно считать повышенную чувствительность к электрическому току [18].

Процедура обследования пациента с использованием комплекса состоит из следующих этапов:

1) включение и подготовка к работе комплекса;

2) подготовка к работе электродов. Подготовка заключается в закладывании в изолирующую чашечку поискового (отрицательного0 электрода кусочка хлопчатобумажной ткани или ваты и ее смачивание изотоническим раствором хлорида натрия (физиологическим раствором);
3) подготовка пациента к обследованию. Перед обследованием пациент должен снять обувь и носки (чулки, колготки), а также все металлические с пальцев и запястий и часы с металлическим браслетом. Не рекомендуется проводить обследование срезу после физической нагрузки или приема пищи;
4) проведение обследования. Процедура обследования осуществляется путем касания поисковым электродом в области репрезентативных точек с соблюдением очередности измерений (таблица 2).

Таблица 2. Репрезентативные точки и порядок электропунктурной диагностики по Накатани.

Обозначение репрезентативной точки	Номер меридиана	Принадлежность меридиану	Обозначение в «Диакомс»
Ручные меридианы
Н1	I	Легкие	Л
Н2	IX	Сосудистая система	СС
Н3	V	Сердце	С
Н4	VI	Тонкая кишка	Тн
Н5	X	Лимфатическая система	ЛС
Н6	II	Толстая кишка	Тл
Ножные меридианы
F1	IV	Поджелудочная железа/селезёнка	ПС
F2	XII	Печень	Пн
F3	VIII	Почки	Пк
F4	VII	Мочевой пузырь	МП
F5	XI	Желчный пузырь	ЖП
F6	III	Желудок	Ж

Измерения осуществляются в следующей последовательности: Н1-Н6 левой руки, Н1-Н6 правой руки, F1-F6 левой ноги, F1-F6 правой ноги. При измерении электропроводности ручных меридианов пассивный электрод должен находиться в противоположной от измеряемой руке, плотно, но несильно сжатый. При измерении электропроводности ножных меридианов пассивный электрод может находиться в любой руке. Касание активным электродом поверхности кожи должно осуществляться под прямым углом с равномерным давлением на кожу, но без особых усилий. Длительность измерения в точке составляет 2-3 секунды с последующей регистрацией показаний электропроводности;
5) обработка и документирование результатов обследования.

Применение автоматизированной системы «Диакомс» позволяет оперативно, в течение 5-10 минут выполнять обследование пациента и выявлять вероятную патологию внутренних органов и систем организма. Кроме того, с помощью аппаратно-программного комплекса возможно представление результатов в максимально наглядном виде (шкалы измерения, таблицы, графики), а также осуществлять динамическую оценку состояния функциональных систем организма. В компьютере формируются базы данных, содержащие информацию о пациентах, все результаты обследования, другие дополнительные сведения, с использованием которых можно провести различные статистические расчеты.

Характеристика группы обследованных.

Было обследовано 12 мужчин в возрасте от 55 до 73 лет. Из них 11 человек обследовались по два раза - до и после приема трансфер фактора, 1 человек один раз - перед приемом транфер фактора.
Препарат принимался по следующей схеме: 3 раза в день по одной капсуле (300 мг Трансфер факторатм в сутки), пять дней в неделю в течение 6 недель.

Результаты собственных исследований.

Выявление влияния трансфер фактора на показатели биологического возраста.

Результаты обследования были обработаны с помощью пакета статистического анализа «StatPlus 2006 Professional». Для определения количественных связей использовались методы дисперсионного и дискриминантного анализов. Достоверность различия средних значений параметров оценена с помощью критерия Фишера. Так как этот критерий является параметрическим, распределение значений параметров в генеральной совокупности предварительно проверялось на подчинение нормальному закону. Вычисление среднеквадратической ошибки доверительных интервалов средних арифметических величин производился экспресс-методом статистической обработки данных с помощью таблиц Р.Б.Стрелкова.

Средний календарный возраст по группе составил 63,5 ± 0,7 года (от 55 до 73 лет).

Однофакторный дисперсионный анализ показал, что действительно существуют статически достоверные различия между средними значениями показателей биологического возраста до и после приема ТФ. Степень достоверности между сравниваемыми группами значений оказалась выше 99,9 %, то есть р<0,001.