Клинико-патогенетическое значение исследования аутоантител к ферментам антиоксидантной системы и пуринового метаболизма у больных ревматоидным артритом

Клинические проявления	Количество больных	Процентное соотношение
Двусторонний сакроилеит	8	88,9%
Поражение - печени	2	22,2%
- глаз	1	11,1%
- ЖКТ	1	11,1%
- сердца	2	22,2%
Лихорадка	3	33,3%
Лимфаденопатия	3	33,3%
Аллергические реакции	2	22,2%

Центральная форма заболевания диагностирована у 2 (22,2%), периферическая форма - у 7 (77,8%) больных. Медленно прогрессирующее течение заболевания отмечалось у 4 (44,4%), быстропрогрессирующее - у 5 (55,6%) больных. При рентгенологическом исследовании позвоночника и суставов установлены следующие стадии поражения: I стадия - 7 больных (77,8%); II стадия - 2 больных (22,2%).

Большинство жалоб обследованных нами больных сводилось к следующим: боли в позвоночнике, усиливающиеся после физических нагрузок и во второй половине ночи, утренняя скованность, ограничение движений в позвоночнике, боли в крестцово-подвздошных сочленениях, болезненность в грудинно-ключичных и ключично-реберных сочленениях, гипотрофия мышц, ригидность мышц спины, болезненность при пальпации паравертебральных точек, остистых отростков позвонков, сглаженность физиологических изгибов позвоночника.

Здоровые лица

В данную группу вошли 30 здоровых лиц - доноров областной станции переливания крови в возрасте от 24 до 46 лет (19 женщин и 11 мужчин), прошедших обычное медицинское обследование.

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОБИОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ИММОБИЛИЗИРОВАННЫХ ФЕРМЕНТОВ

Изучение влияния специфических иммуноглобулинов на ферментативную активность СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО

Источником специфических иммуноглобулинов служили сыворотки больных РА с заранее определенными высокими титрами антител к СОД (экстинкция > 0,14 Ед), ГР, ЦП, КАТ, АДА (экстинкция > 0,17 Ед), 5'-НТ, ПНФ, ГДА (экстинкция > 0,16 Ед), КО (экстинкция > 0,19 Ед). "Чистые" антитела к ферментам получали с помощью соответствующего антигенного иммуносорбента, с которым была проведена инкубация сывороток больных при 37С на магнитной мешалке в течение 1 часа, а затем диссоциация комплекса антиген-антитело с помощью 0,1М глицин-HCl буфера (pH=2,5). После соответствующего диализа против ЗФР и последующего концентрирования через полупроницаемую мембрану системы "Sartorius" до первоначального объема сыворотки, антитела к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО использовались в эксперименте по изучению их взаимодействия с соответствующим ферментом: была проведена инкубация антигенного иммуносорбента и растворимой формы фермента с полученными антителами в течение 1 часа при 37С на магнитной мешалке. Затем определена ферментативная активность. В качестве контроля применяли растворы СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО в физиологическом растворе (n=30, для каждого фермента) и сыворотки практически здоровых людей (n=30).

Таблица 7

Сравнительная характеристика активности растворимой и иммобилизированной форм СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО после взаимодействия с соответствующими антителами (МSD)

Фермент	Форма фермента	Исходная активность фермента	Активность фермента после взаимодействия
			с физиол. раствором (n=30)	с сывороткой доноров (n=30)	с чистыми антителами (n=30)
СОД (Ед)	Растворимая	38,06 0,72	37,54 0,44	32,53 0,57	13,50 0,49
	Иммобилизированная	37,64 0,12	37,32 0,33	33,42 1,04	0,34 0,01
ГР (Ед)	Растворимая	122,4 0,79	128,5 0,63	118,7 0,56	64,82 0,54
	Иммобилизированная	120,1 0,83	116,2 0,72	112,8 0,51	54,39 0,47
КАТ (мКАТ/л)	Растворимая	24,42 4,06	24,91 5,72	18,32 6,35	14,22 6,52
	Иммобилизированная	25,15 3,97	24,62 5,43	20,6 10,18	11,1 5,17
ЦП (Ед)	Растворимая	814 155,4	819 180,7	604 158,8	423 175,3
	Иммобилизированная	829 182,4	812 169,8	682 147,9	526 156,7
АДА (Ед/мл)	Растворимая	59,47 4,91	61,91 3,64	54,51 4,16	18,62 2,98
	Иммобилизированная	58,19 5,22	57,62 4,12	48,60 3,86	13,23 2,17
5'-НТ (Ед/л)	Растворимая	41,85 5,44	42,64 5,61	35,58 4,12	26,96 3,18
	Иммобилизированная	38,69 4,12	39,26 4,89	30,62 3,04	19,22 2,79
ПНФ (мкмоль/л/мин)	Растворимая	22,14 2,71	21,49 2,93	18,56 2,66	12,82 2,78
	Иммобилизированная	20,99 2,82	20,68 3,12	16,44 2,11	10,38 2,07
ГДА (МЕ/л)	Растворимая	28,17 3,46	27,51 3,94	16,52 2,46	12,62 1,02
	Иммобилизированная	27,55 3,67	27,68 4,01	10,38 1,86	2,28 0,17
КО (мкмоль/л/мин)	Растворимая	3,92 2,74	3,66 2,59	3,62 2,84	4,96 2,79
	Иммобилизированная	4,06 2,65	4,00 2,81	3,78 2,92	5,52 2,91

После взаимодействия каждого фермента с соответствующими чистыми антителами было выявлено снижение ферментативной активности СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА различной степени выраженности (см. таблицу 7). Следует отметить, что изменение ферментативной активности изучаемых энзимов было различным при использовании растворимой и иммобилизированной форм ферментов. Так, например, активность растворимой формы 5'-НТ после взаимодействия со специфическими («чистыми») Ат снизилась менее чем на 40%; различия с контрольной группой (физиологический раствор) и донорами достоверны (р=0,008 и р=0,046, соответственно). Уменьшение активности иммобилизированной формы 5'-НТ по сравнению с исходными значениями произошло почти в 2 раза; выявлены статистически достоверные различия с физиологическим раствором (р=0,0007) и донорами (p=0,0077). Сходная картина наблюдалась и при изучении влияния специфических Ат на активность растворимой и иммобилизированной форм СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА и ПНФ. Ферментативная активность иммобилизированной ГДА практически полностью ингибировалась специфическими Ат (p<0,0001), в отличие от растворимой формы фермента, при использовании которой хотя и наблюдалось снижение активности, но не столь существенное (p<0,0012).

Совершенно другая картина наблюдалась при изучении влияния специфических иммуноглобулинов на активность КО. Так активность растворимой формы КО после взаимодействия со специфическими («чистыми») Ат увеличилась незначительно (р=0,151); различия с контрольной группой (физиологический раствор) и донорами статистически не достоверны (р=0,067 и р=0,071, соответственно). Увеличение активности иммобилизированной формы КО по сравнению с исходными значениями произошло в среднем на 25-30% (р=0,047); выявлены статистически достоверные различия с физиологическим раствором (р=0,044) и донорами (p=0,024) (см. таблицу 7).

Включение фермента в пространственную решетку полиакриламидного геля, составляющего основу ИГАП, (иммобилизированная форма) придает антигену (ферменту) новые свойства, благодаря которым он приобретает определенные преимущества перед растворимой формой. Такой метод приводит к возникновению незначительных конформационных изменений, сохраняющих активность фермента, но, в то же время, способствующих, например, экспрессии гидрофобных участков молекулы энзима, содержащих «скрытые эпитопы».

Параллельно в иммуноферментном методе были исследованы сыворотки крови больных РА (n=30 для каждой серии опытов) на наличие антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО после взаимодействия со специфическим магнитоуправляемым сорбентом, в результате которого исходная концентрация антител к ГР, КАТ, ЦП, 5'-НТ и ПНФ уменьшилась в 2,5 ? 2,8 раза, а уровень Ат к СОД, АДА, ГДА снизился почти в 3,2 - 4 раза (см. рисунок 4).

Рисунок 4. Содержание антител к 5'-НТ, ПНФ, ГДА в сыворотке крови больных РА после взаимодействия со специфическим магнитоуправляемым сорбентом

ЦИК, осажденные из сывороток больных РА были ресуспензированы до 1 мг/мл. Выделенные ЦИК вызывали торможение реакции супероксидзависимого восстановления нитросинего тетразолия. Выявляемая СОД-активность ЦИК составила 32 9,6 Ед/мл. Было проведено исследование СОД-активности ЦИК в плазме больных РА. При воздействии на плазму смесью этанола, хлороформа и KH₂PO₄ c целью осаждения компонентов крови, препятствующих определению СОД, было получено, что исходный уровень ЦИК уменьшился в 2 раза. После осаждения ЦИК в супернатанте плазмы 7% ПЭГ концентрация белка составила 85221,1 мкг/мл, а СОД-активность - 2,40,35 Ед/мл. Это активность циркулирующих иммунных комплексов, состав которых может быть различен у больных РЗ, в том числе и СОД-Ат. Сохранение значительной активности растворимой формы СОД можно связать с проявлением СОД-активности образовавшихся иммунных комплексов (СОДраст.-Ат).

Полученные результаты демонстрируют в основном ингибирующее влияние специфических иммуноглобулинов на ферментативную активность изучаемых энзимов. Тем не менее, антиферментные Ат, как правило, специфичны не по отношению к активному центру энзима, а по отношению к белку в целом. Если антигенные детерминанты фермента расположены вне его активного центра, то последний и в фермент-антиферментном комплексе может оставаться доступным для субстрата (например, 5'-НТ и ПНФ). В случае, когда участки фермента, от которых зависят его антигенные свойства, частично захватывают и область активного центра (например, КАТ и ГДА), антифермент может выступать в качестве ингибитора, конкурирующего с субстратом.

СОДЕРЖАНИЕ АНТИТЕЛ К СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО В КОНТРОЛЬНЫХ ГРУППАХ

Содержание антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у здоровых лиц

Содержание Ат к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО определялось в сыворотке 30 практически здоровых людей и анализировалось в зависимости от пола и возраста. Дескриптивные статистики исходных показателей уровня антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у здоровых лиц представлены в таблице 8.

Таблица 8.

Уровни антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у здоровых лиц

Показатель	M	SD	m	95% ДИ для М	Me	Mo	IQR
Ат к СОД	0,060	0,022	0,004	0,052…0,068	0,064	0,064	0,033
Ат к ГР	0,055	0,020	0,004	0,048…0,062	0,054	Multiple	0,026
Ат к КАТ	0,067	0,019	0,004	0,060…0,074	0,072	0,075	0,031
Ат к ЦП	0,022	0,014	0,003	0,017…0,027	0,017	0,017	0,019
Ат к АДА	0,026	0,014	0,003	0,021…0,032	0,023	0,022	0,017
Ат к 5'-НТ	0,027	0,011	0,002	0,023…0,032	0,025	0,022	0,014
Ат к ПНФ	0,032	0,013	0,002	0,027…0,036	0,032	Multiple	0,015
Ат к ГДА	0,023	0,011	0,002	0,019…0,027	0,022	Multiple	0,017
Ат к КО	0,032	0,013	0,002	0,027…0,036	0,032	0,038	0,015

Примечание: М - среднее значение, SD - стандартное отклонение, m ? ошибка репрезентативности, ДИ - доверительные интервалы, Ме - медиана, Мо ? мода, IQR - межквартильный размах

Установив среднюю концентрацию антител к изучаемым ферментам в донорских сыворотках, вычислили уровень нормальных показателей оптической плотности (для Ат к СОД, ГР и КАТ - M 2; для Ат к АДА - M 3 и для Ат к ЦП, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО - M 5). Таким образом, значения оптической плотности 0,104 ед. для Ат к СОД, 0,095 ед. для Ат к ГР, 0,105 ед. для Ат к КАТ, 0,092 ед. для Ат к ЦП, 0,068 ед. для Ат к АДА, 0,082 ед. для Ат к 5'-НТ, 0,097 ед. для Ат к ПНФ, 0,078 ед. для Ат к ГДА и 0,097 ед. для Ат к КО (в ELISA-тесте с использованием ИГАП) были приняты за верхнюю границу нормы (показатели, превышающие эти значения, считались положительными по соответствующим антителам).

Таблица 9

Содержание антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у здоровых людей в зависимости от пола и возраста

Изучаемый показатель (ед.)	Стат. показа-тели	Группа в целом (n=30)	Муж-чины (n=18)	Жен-щины (n=12)	До 30 лет (n=14)	От 31 до 40 лет (n=8)	Свыше 40 лет (n=8)
Ат к СОД	M m	0,060 0,022 0,004	0,065 0,017 0,004	0,050 0,024 0,007	0,053 0,015 0,004	0,057 0,017 0,006	0,062 0,014 0,005
Ат к ГР	M m	0,055 0,020 0,004	0,055 0,021 0,005	0,055 0,019 0,007	0,058 0,019 0,005	0,051 0,016 0,006	0,054 0,016 0,006
Ат к КАТ	M m	0,067 0,019 0,004	0,064 0,017 0,004	0,069 0,014 0,004	0,063 0,019 0,005	0,071 0,014 0,005	0,065 0,014 0,005
Ат к ЦП	M m	0,022 0,014 0,003	0,018 0,013 0,003	0,024 0,014 0,004	0,018 0,015 0,004	0,021 0,016 0,006	0,026 0,014 0,005
Ат к АДА	M m	0,026 0,014 0,003	0,028 0,012 0,003	0,023 0,007 0,002	0,026 0,015 0,004	0,023 0,005 0,002	0,029 0,008 0,003
Ат к 5'-НТ	M m	0,027 0,011 0,002	0,024 0,012 0,003	0,032 0,013 0,004	0,023 0,014 0,004	0,031 0,012 0,003	0,029 0,009 0,003
Ат к ПНФ	M m	0,032 0,013 0,002	0,029 0,012 0,003	0,036 0,011 0,003	0,027 0,014 0,004	0,038 0,013 0,005	0,034 0,010 0,004
Ат к ГДА	M m	0,023 0,011 0,002	0,026 0,012 0,003	0,019 0,010 0,003	0,020 0,011 0,003	0,024 0,011 0,004	0,028 0,011 0,004
Ат к КО	M m	0,032 0,013 0,002	0,029 0,012 0,003	0,036 0,017 0,005	0,027 0,014 0,004	0,038 0,006 0,002	0,034 0,013 0,005

Проведенные исследования существенных различий в содержании Ат к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО в зависимости от пола и возраста не выявили (см. таблицу 9). Отмечена лишь незначительная тенденция увеличения антител к ЦП в старшей возрастной группе и среди лиц женского пола (p>0,05), а также антител к СОД у мужчин (p>0,05) и антител к КО у женщин (p>0,05). Повышенный уровень антител к изучаемым ферментам не был зафиксирован ни у одного человека из данной группы (у одного обследуемого отмечен уровень Ат к АДА на верхней границе нормы - 0,068 ед.).

Содержание антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО в группе сравнения

В группу сравнения были включены 100 больных различными РЗ (ПА, ПсА, РеА, ББ, СКВ), находившихся на стационарном лечении в клинических больницах г. Волгограда и Волжского. Дескриптивные статистики изучаемых показателей у больных группы сравнения представлены в таблице 10.

Повышенный уровень антител к СОД отмечался у 12%, Ат к ГР - у 16%, Ат к КАТ - у 19%, Ат к ЦП - у 18%, Ат к АДА - у 14%, Ат к 5'-НТ - у 10%, Ат к ПНФ - у 10%, Ат к ГДА - у 15%, Ат к КО - у 21% больных данной группы.

Таблица 10

Исходные показатели уровней антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у больных из группы сравнения

Показатель	M	SD	m	95% ДИ для М	Me	Mo	IQR
Ат к СОД	0,074	0,030	0,003	0,068…0,080	0,078	Multiple	0,043
Ат к ГР	0,074	0,031	0,003	0,067…0,079	0,075	0,088	0,038
Ат к КАТ	0,082	0,027	0,003	0,077…0,088	0,085	0,087	0,033
Ат к ЦП	0,062	0,028	0,003	0,056…0,067	0,062	0,066	0,041
Ат к АДА	0,052	0,026	0,003	0,047…0,058	0,053	Multiple	0,030
Ат к 5'-НТ	0,055	0,024	0,002	0,050…0,059	0,052	0,051	0,026
Ат к ПНФ	0,065	0,028	0,003	0,059…0,070	0,068	0,069	0,038
Ат к ГДА	0,061	0,030	0,003	0,055…0,067	0,060	0,075	0,035
Ат к КО	0,072	0,034	0,003	0,065…0,079	0,066	0,038	0,049

Примечание: М - среднее значение, SD - стандартное отклонение, m ? ошибка репрезентативности, ДИ - доверительные интервалы, Ме - медиана, Мо ? мода, IQR - межквартильный размах

Детальное рассмотрение частоты обнаружения положительных результатов определения антител к изучаемым ферментам непосредственно по нозологиям, составившим группу сравнения, показало следующее (см. рисунок 5):

Ш у больных ПсА Ат к СОД были выявлены у 5 (27,8%) человек, Ат к ГР, ЦП, АДА, 5ґ-НТ - по 2 (11,1%) человека, Ат к ПНФ и КО - по 3 (16,7%) человека, Ат к КАТ - у 6 (33,3%) человек и Ат к ГДА - у одного человека (1,8%);

Рисунок 5. Количество положительных случаев определения антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5ґ-НТ, ПНФ, ГДА и КО у больных из группы сравнения

Ш у больных ПА Ат к ЦП были выявлены у 5 (14,7%) человек, Ат к ГР и КАТ - по 6 (17,6%) человек, Ат к АДА и 5ґ-НТ - по 4 (11,8%) человека, Ат к ПНФ - у 3 (8,8%) человек, Ат к ГДА - у 9 (26,5%) человек, Ат к КО - у 11 (32,4%) человек и Ат к СОД не были выявлены ни у одного больного данной группы;

Ш у больных РеА Ат к КАТ были выявлены у 3 (13%) человек, Ат к ГР и ЦП - по 5 (21,7%) человек, Ат к СОД, 5ґ-НТ и КО - по 1 (4,3%) человеку и Ат к АДА, ПНФ и ГДА не были выявлены ни у одного больного данной группы;

Ш у больных ББ Ат к СОД, ЦП, 5ґ-НТ и ПНФ были выявлены по 1 (11,1%) случаю, Ат к ГР, КАТ, АДА и КО не были выявлены ни у одного больного данной группы;

Ш у больных СКВ Ат к АДА были выявлены у 8 (50%) человек, Ат к КО - у 6 (37,5%), Ат к СОД и ЦП - по 5 (31,3%) человек, Ат к КАТ и ГДА - по 4 (25%) человека, Ат к ГР и ПНФ - по 3 (18,8%) человека и Ат к 5ґ-НТ - у 2 (12,5%) человек.

Следует отметить, что если при РеА, ББ и ПсА у отдельного больного наблюдалось в основном изолированное повышение уровня антител к какому-либо одному ферменту, то у больных СКВ и ПА наблюдали сочетание высоких уровней антител к двум, трем, а иногда и к четырем ферментам одновременно. Нам не удалось установить статистически достоверных зависимостей между содержанием антител к представленным энзимам и клинико-лабораторными проявлениями ПсА, РеА, ББ и СКВ, ввиду либо низкого процента выявления положительных результатов в каждой конкретной группе, либо из-за малого числа больных, вошедших в исследование.

Ниже в качестве примера приводим данные по определению содержания Ат к ферментам у больных ПА (наиболее многочисленная подгруппа) в зависимости от клинико-лабораторных особенностей заболевания. Статистически значимые результаты были получены только для Ат к ГДА и КО (см. таблицу 10). Корреляционный анализ показал прямую зависимость Ат к ГДА от возраста больных ПА (r=0,35, р=0,042) и наличия у них нефропатии (r=0,53, р=0,001). Прямая корреляционная связь отмечена также между уровнем Ат к КО и выраженностью нефропатии у больных ПА (r=0,38, р=0,027).

Таблица 11

Содержание Ат к ГДА и КО у больных с подагрическим артритом (MSD)

Контингент обследуемых	N	Ат к ГДА	Ат к КО
Здоровые	30	0,023 0,011	0,032 0,013
Больные ПА (группа в целом)	34	0,069 0,037	0,073 0,042
Хроническая форма	13	0,068 0,031	0,075 0,033
Интермиттирующая форма	21	0,065 0,031	0,071 0,040
Легкое течение	12	0,061 0,024	0,065 0,037
Течение средней тяжести	22	0,069 0,029	0,076 0,042
Больные с нефропатией	12	0,078 0,033	0,088 0,039
Больные без нефропатии	22	0,056 0,028	0,061 0,035
Без рентгенологических изменений	13	0,059 0,025	0,074 0,034
Стадия I	12	0,067 0,028	0,076 0,036
Стадия II	9	0,068 0,035	0,072 0,029
Наличие тофусов	14	0,068 0,033	0,070 0,036
Отсутствие тофусов	20	0,067 0,028	0,074 0,041

При дальнейшем сравнении групп между собой были выявлены статистически значимые различия в содержании Ат к ГДА и КО между группой больных ПА с нефропатией и больными без поражения почек (р=0,048 и р=0,047, соответственно) (см. таблицу 11). Статистически достоверной зависимости между уровнем изучаемых антител и другими показателями обнаружено не было (р0,05).

СОДЕРЖАНИЕ АНТИТЕЛ К СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО У БОЛЬНЫХ ОСТЕОАРТРОЗОМ

Под наблюдением находились 48 больных ОА. Дескриптивные статистики исходных показателей уровня антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у больных ОА представлены в таблице 12. Повышенный уровень Ат к СОД отмечался у 20,8% (10 человек) больных ОА, к ГР - у 14,6% (7 человек), к КАТ - у 18,8% (9 человек), к ЦП - у 16,7% (8 человек), к АДА - у 12,5% (6 человек), к 5'-НТ - у 16,7% (8 человек), к ПНФ - у 18,8% (9 человек), к ГДА - у 4,2% (2 человека), к КО - у 18,8% (9 человек) больных ОА. При анализе зависимостей уровней Ат к изучаемым ферментам (за исключением Ат к АДА и ГДА) была выявлена прямая связь (от слабой до умеренной силы) с возрастом больных ОА и длительностью патологического процесса (р<0,05).

Таблица 12

Уровни антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у больных ОА

Показатель	M	SD	m	95% ДИ для М	Me	Mo	IQR
Ат к СОД	0,071	0,032	0,005	0,062…0,080	0,073	0,073	0,042
Ат к ГР	0,073	0,029	0,004	0,064…0,081	0,075	0,073	0,038
Ат к КАТ	0,072	0,031	0,004	0,063…0,081	0,073	0,072	0,041
Ат к ЦП	0,051	0,028	0,004	0,043…0,059	0,043	0,042	0,034
Ат к АДА	0,037	0,028	0,004	0,031…0,047	0,033	0,039	0,034
Ат к 5'-НТ	0,052	0,020	0,003	0,046…0,058	0,051	0,051	0,029
Ат к ПНФ	0,062	0,027	0,004	0,054…0,070	0,062	0,082	0,040
Ат к ГДА	0,034	0,017	0,002	0,029…0,039	0,032	0,043	0,021
Ат к КО	0,062	0,028	0,004	0,054…0,070	0,061	0,082	0,039

Примечание: М - среднее значение, SD - стандартное отклонение, m ? ошибка репрезентативности, ДИ - доверительные интервалы, Ме - медиана, Мо ? мода, IQR - межквартильный размах

При поступлении на лечение больных ОА (группа в целом) по сравнению со здоровыми лицами отмечен рост уровней Ат к ГР (р=0,004), АДА (р=0,006), ГДА (р=0,002), ЦП, 5'-НТ, ПНФ и КО (p<0,001); достоверно значимых различий в содержании Ат к СОД и КАТ выявлено не было (p>0,05) (см. таблицы 13, 14). Проведенное лечение оказывало определенное влияние на содержание изучаемых антител. При выписке из стационара все изучаемые показатели не отличались от уровня здоровых лиц (р0,05), кроме Ат к ЦП (р=0,014), ПНФ (р=0,047) и КО (р<0,001).

При изучении влияния формы ОА на содержание Ат к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО не было получено достоверных различий как в группе больных с узелковой формой ОА, так и в группе больных с безузелковой формой заболевания (p>0,05) (см. таблицы 13, 14). У больных ОА с полиостеоартрозом по сравнению с больными с моно- и олигоартрозом отмечались достоверный рост уровней Ат к 5'-НТ (р=0,033), ПНФ (p=0,039) и тенденция к росту уровней Ат к СОД (р=0,095) и ЦП (р=0,092). Для антител к ГР, КАТ, АДА, ГДА и КО достоверных различий в рассматриваемых группах больных ОА отмечено не было (p>0,05).

Статистически достоверной зависимости между уровнем антител к изучаемым ферментам и такими показателями, как длительность заболевания, рентгенологическая стадия, течение ОА и ФНС, нами не обнаружено (р0,05).

Особую клиническую картину имеет ОА, сопровождающийся явлениями синовита. В обследуемой группе больных синовит чаще всего возникал в коленных и межфаланговых суставах кисти (особенно при наличии узелков Гебердена и Бушара) и сопровождался усилением боли в пораженных суставах, локальным повышением кожной температуры, нарастанием ограничения объема движений.

Было проведено изучение содержания Ат к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО в зависимости от наличия явлений синовита (см. таблицу 14), учитывая, что таковые диагностированы у 56% больных ОА. Статистически достоверной зависимости в содержании всех изучаемых антител (кроме Ат к КО) у больных ОА с наличием или отсутствием явлений синовита не выявлено (p>0,05), хотя имеется тенденция к увеличению количества Ат к СОД (р=0,062), КАТ (р=0,073), ЦП (р=0,064), ПНФ (р=0,065) при наличии синовита (см. таблицу 15).

Таблица 13

Содержание антител к ферментам (СОД, ГР, КАТ и ЦП) у больных ОА, M±SD

Контингент обследуемых	N	Ат к СОД	Ат к ГР	Ат к КАТ	Ат к ЦП
		А	Б	А	Б	А	Б	А	Б
Здоровые	30	0,060 (0,022)	0,055 (0,020)	0,067 (0,019)	0,022 (0,014)
Больные ОА (группа в целом)	48	0,071 (0,032)	0,062 (0,028)	0,073 (0,029)	0,058 (0,032)	0,072 (0,031)	0,064 (0,035)	0,051 (0,028)	0,033 (0,026)
Больные ОА, узелковая форма	12	0,078 (0,041)	0,054 (0,029)	0,076 (0,037)	0,048 (0,029)	0,063 (0,032)	0,058 (0,026)	0,046 (0,023)	0,034 (0,019)
Больные ОА, безузелковая форма	36	0,069 (0,034)	0,056 (0,032)	0,072 (0,040)	0,055 (0,034)	0,071 (0,038)	0,066 (0,033)	0,054 (0,028)	0,039 (0,016)
Больные ОА, моно- и олигоартроз	11	0,059 (0,028)	0,041 (0,022)	0,062 (0,025)	0,054 (0,022)	0,066 (0,028)	0,061 (0,034)	0,042 (0,018)	0,038 (0,034)
Больные ОА, полиостеоартроз	37	0,084 (0,046)	0,063 (0,036)	0,077 (0,034)	0,059 (0,026)	0,068 (0,043)	0,058 (0,049)	0,055 (0,023)	0,040 (0,036)

Таблица 14

Содержание антител к ферментам (АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО) у больных ОА, M±SD

Контингент обследуемых	N	Ат к АДА	Ат к 5'-НТ	Ат к ПНФ	Ат к ГДА
		А	Б	А	Б	А	Б	А	Б
Здоровые	30	0,026 (0,014)	0,027 (0,011)	0,032 (0,013)	0,023 (0,011)
Больные ОА (группа в целом)	48	0,037 (0,028)	0,032 (0,021)	0,052 (0,020)	0,036 (0,024)	0,062 (0,027)	0,042 (0,025)	0,034 (0,017)	0,029 (0,016)
Больные ОА, узелковая форма	12	0,040 (0,019)	0,038 (0,023)	0,047 (0,026)	0,033 (0,019)	0,066 (0,029)	0,048 (0,019)	0,040 (0,022)	0,038 (0,024)
Больные ОА, безузелковая форма	36	0,035 (0,020)	0,029 (0,014)	0,052 (0,038)	0,039 (0,016)	0,058 (0,022)	0,043 (0,020)	0,031 (0,018)	0,026 (0,017)
Больные ОА, моно- и олигоартроз	11	0,029 (0,015)	0,027 (0,022)	0,041 (0,018)	0,037 (0,024)	0,046 (0,025)	0,034 (0,032)	0,030 (0,018)	0,036 (0,024)
Больные ОА, полиостеоартроз	37	0,040 (0,022)	0,033 (0,021)	0,057 (0,022)	0,039 (0,026)	0,069 (0,033)	0,045 (0,036)	0,035 (0,020)	0,026 (0,015)

Таблица 15

Встречаемость патологических показателей содержания антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у больных ОА в зависимости от наличия (n=27) или отсутствия (n=21) синовита

Показатель	Группы больных ОА	M (SD)	Встречаемость патологически измененных (повышенных) показателей
			при поступлении	при выписке
			N	%	N	%
Ат к СОД	с синовитом	0,085 (0,040)	5	18,5	4	14,8
	без синовита	0,063 (0,039)	5	23,8	2	9,5
Ат к ГР	с синовитом	0,075 (0,031)	5	18,5	4	14,8
	без синовита	0,071 (0,035)	2	9,5	1	4,8
Ат к КАТ	с синовитом	0,078 (0,032)	4	14,8	3	11,1
	без синовита	0,063 (0,022)	5	23,8	3	14,3
Ат к ЦП	с синовитом	0,056 (0,027)	5	18,5	3	11,1
	без синовита	0,042 (0,023)	3	14,3	2	9,5
Ат к АДА	с синовитом	0,036 (0,025)	4	14,8	3	11,1
	без синовита	0,035 (0,021)	2	19,1	-	-
Ат к 5'-НТ	с синовитом	0,038 (0,027)	5	18,5	4	14,8
	без синовита	0,057 (0,029)	3	14,3	2	9,5
Ат к ПНФ	с синовитом	0,070 (0,032)	7	25,9	4	14,8
	без синовита	0,044 (0,029)	2	9,5	1	4,8
Ат к ГДА	с синовитом	0,033 (0,025)	1	3,7	1	3,7
	без синовита	0,032 (0,021)	1	4,8	-	-
Ат к КО	с синовитом	0,069 (0,029)	6	22,2	2	7,4
	без синовита	0,053 (0,023)	3	14,3	2	9,5

Уровень антител к СОД при отсутствии у больных синовита не отличался статистически от показателей доноров (p>0,01), а при наличии - достоверно выше, чем у здоровых лиц (р=0,005). У ровень антител к ГР и ЦП по сравнению с донорами достоверно выше, как в группе больных ОА с явлениями синовита (р=0,005 и р<0,001, соответственно), так и без данных проявлений (р=0,044 и р<0,001, соответственно). Уровень антител к КАТ, АДА и ГДА у больных ОА как при отсутствии, так и с наличием синовита не отличался статистически от показаний доноров (p>0,05).

Уровень антител к 5'-НТ в группе больных без явлений синовита и уровень Ат к ПНФ у больных ОА с синовитом достоверно отличались от показаний доноров (р<0,001). Уровень антител к КО в группе больных без явлений синовита и у больных ОА с синовитом достоверно отличались от показаний доноров (р=0,002 и р<0,001, соответственно) и между собой (р=0,044). Процент больных с патологически высоким уровнем Ат после проведенного лечения снизился (наиболее выраженные изменения затронули содержание Ат к ПНФ и КО, наименее ? Ат к ГДА) (см. таблицу 15).

СОДЕРЖАНИЕ АНТИТЕЛ К СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО У БОЛЬНЫХ РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ

Содержание антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ ГДА и КО у больных РА (группа в целом)

Под наблюдением находились 178 больных РА. Количество больных РА с повышенным уровнем Ат к СОД составило 88,7% (158 человек), к ГР - 77,5% (138 человек), к КАТ - 73% (130 человек), к ЦП - 73% (130 человек), к АДА - 55% (98 человек), к 5'-НТ - 54% (96 человек), к ПНФ - 59,5% (106 человека), к ГДА - 45% (80 человек), к КО - 59,5% (106 человека). Дескриптивные статистики исходных показателей уровня антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО представлены в таблице 16.

Таблица 16

Уровни антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ и ГДА у больных РА

Показатель	M	SD	m	95% ДИ для М	Me	Mo	IQR
Ат к СОД	0,137	0,054	0,0041	0,129…0,145	0,136	0,095	0,095
Ат к ГР	0,144	0,038	0,0042	0,131…0,159	0,142	0,092	0,089
Ат к КАТ	0,135	0,058	0,0054	0,128…0,146	0,133	0,098	0,84
Ат к ЦП	0,136	0,052	0,0043	0,126…0,148	0,129	0,088	0,081
Ат к АДА	0,118	0,095	0,0082	0,109…0,137	0,106	0,064	0,055
Ат к 5'-НТ	0,123	0,051	0,0054	0,112…0,134	0,113	0,079	0,085
Ат к ПНФ	0,137	0,052	0,0055	0,126…0,148	0,136	0,078	0,089
Ат к ГДА	0,075	0,029	0,0034	0,069…0,081	0,067	Multiple	0,034
Ат к КО	0,137	0,051	0,0039	0,129…0,145	0,136	0,079	0,089

Примечание: М - среднее значение, SD - стандартное отклонение, m ? ошибка репрезентативности, ДИ - доверительные интервалы, Ме - медиана, Мо ? мода, IQR - межквартильный размах

При поступлении на лечение (см. таблицу 17) по сравнению со здоровыми лицами обнаружено увеличение содержания всех исследуемых антител различной степени выраженности (p0,001). Активность ферментов показала разнонаправленные тенденции: снижение активности СОД, ГР, КАТ, 5'-НТ, ПНФ (p0,001); увеличение активности ЦП, КО (p0,05) и практически неизмененная активность АДА и ГДА (p>0,05).

Таблица 17

Показатели антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО в сыворотке крови больных РА до и после лечения, M(SD)

	Здоровые, n=30	Больные ОА (группа в целом), n=48	Больные РА (группа в целом), n=178
		А	Б	А	Б
Ат к СОД	0,060 (0,022)	0,071 (0,032)	0,062 (0,028)	0,137 (0,054)	0,114 (0,049)
Ат к ГР	0,055 (0,020)	0,073 (0,029)	0,058 (0,032)	0,144 (0,038)	0,135 (0,059)
Ат к КАТ	0,067 (0,019)	0,072 (0,031)	0,064 (0,035)	0,135 (0,058)	0,123 (0,062)
Ат к ЦП	0,022 (0,014)	0,051 (0,028)	0,033 (0,026)	0,136 (0,052)	0,123 (0,051)
Ат к АДА	0,026 (0,014)	0,037 (0,028)	0,032 (0,021)	0,118 (0,095)	0,087 (0,042)
Ат к 5'-НТ	0,027 (0,0164)	0,051 (0,048)	0,038 (0,035)	0,123 (0,051)	0,076 (0,032)
Ат к ПНФ	0,032 (0,0219)	0,061 (0,042)	0,042 (0,035)	0,137 (0,052)	0,082 (0,034)
Ат к ГДА	0,023 (0,0164)	0,033 (0,028)	0,029 (0,028)	0,075 (0,029)	0,069 (0,035)
Ат к КО	0,032 (0,013)	0,062 (0,028)	0,068 (0,023)	0,137 (0,051)	0,088 (0,037)

Примечание: n - число наблюдений; А - до лечения; Б - после лечения

По окончании курса стационарного лечения, в стадии начинающейся ремиссии (см. таблицу 17), содержание Ат к ЦП (p0,02), СОД, АДА, 5'-НТ, ПНФ и КО уменьшилось (p0,001), но оставалось выше показателей здоровых лиц (p0,001). Также была отмечена тенденция к снижению уровня Ат к ГР, КАТ и ГДА (р0,05).

При изучении содержания антител к ферментам антиоксидантной системы была выявлена корреляция различной силы:

Ш между Ат к СОД с одной стороны и отдельными лабораторными показателями с другой: скоростью оседания эритроцитов (r=0,31, р=0,029), количеством эритроцитов (r= -0,39, р=0,011), уровнем ЦИК (r=0,45, р=0,032), уровнем IgG (r=0,52, р=0,008);

Ш между Ат к ГР с одной стороны и отдельными лабораторными показателями с другой: количеством эритроцитов (r= -0,29, р=0,018), уровнем ЦИК (r=0,33, р=0,048), уровнем IgА (r=0,36, р=0,041);

Ш между Ат к КАТ с одной стороны и отдельными лабораторными показателями с другой: скоростью оседания эритроцитов (r=0,48, р=0,026), уровнем лейкоцитоза крови (r=0,42, р=0,035), количеством эритроцитов (r= -0,31, р=0,012), уровнем ЦИК (r=0,43, р=0,039), уровнем IgG (r=0,71, р=0,009) и IgM (r=0,56, р=0,018);

Ш между уровнем Ат к ЦП с одной стороны и со следующими лабораторными показателями с другой: содержанием С-реактивного белка (r=0,55, p=0,016), серомукоида (r=0,38, p=0,044), сиаловых кислот (r=0,34, p=0,045), скоростью оседания эритроцитов (r=0,43, p=0,022), уровнем гемоглобина крови (r= -0,39, p=0,028), лейкоцитов крови (r=0,38, p=0,045), ЦИК (r=0,47, p=0,007), IgG (r=0,75, p=0,004), IgM (r=0,52, p=0,025), оксидазной активностью ЦП (r=0,82, p<0,001);

Ш между антителами к СОД и ГР отмечена прямая корреляционная зависимость (r = 0,3, p = 0,04).

У больных РА (группа в целом) был выявлен ряд статистически значимых корреляций уровней Ат к ферментам ПМ (АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО) с клиническими и лабораторными показателями (см. таблицу 18). Также была выявлена зависимость между уровнем Ат к ГДА и полом (р=0,004); у мужчин, страдающих РА, Ат к ГДА определялись чаще и в более высоком титре, чем у женщин с данным заболеванием.

Клинико-лабораторное многообразие РА обусловили целесообразность более детального рассмотрения изучаемых показателей в зависимости от различных клинических форм заболевания, включая активность и характер течения ревматоидного процесса, наличие внесуставных проявлений.

Таблица 18

Корреляции уровней антител к АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО с клиническими и лабораторными показателями у больных РА

Показатель	Ат к 5'-НТ	Ат к ПНФ	Ат к ГДА	Ат к КО
	r	p	r	p	r	p	r	p
Активность РА (индекс DAS28)	0,7614 *	0,000	0,6952 *	0,000	0,3075 *	0,003	0,693 *	0,001
Концентрация IgM	0,0914	0,394	0,1943	0,068	0,3696 *	0,000	0,1132	0,681
Концентрация IgA	0,8081 *	0,000	0,4634 *	0,000	0,4139 *	0,000	0,2248	0,079
Геометрич. титр РФ	0,4396 *	0,000	0,7029 *	0,000	0,1577	0,139	0,0753 *	0,000
СОЭ	0,2807 *	0,011	0,2537 *	0,022	0,0446	0,692	0,0244	0,074
ЦИК	0,2651 *	0,012	0,4501 *	0,000	0,2076	0,051	0,6112 *	0,001

Примечание: звездочкой (*) отмечены корреляции с достоверностью р<0,05.

Всестороннее изучение всевозможных связей изучаемых антител не позволило выявить каких-либо закономерностей между содержанием Ат к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА, КО и стадиями поражения при РА. Что касается изучения влияния функционального класса на выраженность аутоантителогенеза к данным ферментам, то нами были обнаружены связи слабой силы с уровнем Ат к СОД (р=0,042), Ат к ПНФ (р=0,019) и уровнем Ат к ГДА (р=0,049).

Содержание антител к СОД, ГР, ЦП, КАТ, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у больных ревматоидным артритом в зависимости от активности патологического процесса

Учитывая, что активность РА оказывает значительное влияние на содержание изучаемых антител, нами также был проведен анализ зависимостей уровней данных антител с индексом активности Европейской противоревматической лиги (DAS 28).

Коэффициенты корреляции уровней Ат к СОД, Ат к 5'-НТ, Ат к ПНФ, Ат к ГДА и Ат к КО с индексом активности DAS 28 составили соответственно 0,594 (р=0,012), 0,761 (р<0,001), 0,695 (р<0,001), 0,307 (р=0,003) и 0,693 (р=0,001). Следует подчеркнуть, что индекс DAS 28 хорошо коррелировал с методом оценки активности РА по диагностическим критериям и рабочей классификации (r=0,7998; р<0,001). При сравнении групп больных РА с различной степенью активности патологического процесса и контрольной группы (доноры) методом дисперсионного анализа были выявлены статистически значимые различиядля всех изучаемых антител (р<0,001). При дальнейшем сравнении групп больных РА между собой (критерий Даннета) были выявлены статистически значимые различия между группами в уровнях антител к СОД (_{АКТ I-II} p=0,0001; _{АКТ II-III} p=0,0002), Ат к ГР (_{АКТ I-II} p=0,0004; _{АКТ II-III} p=0,0047), Ат к КАТ (_{АКТ I-II} p=0,0058); Ат к ЦП (_{АКТ I-II} p=0,007), Ат к АДА (_{АКТ I-II} p=0,012; _{АКТ II-III} p=0,004), Ат к 5'-НТ (_{АКТ I-II} p=0,0008; _{АКТ II-III} p=0,002), Ат к ПНФ (_{АКТ I-II} p=0,001; _{АКТ II-III} p=0,0007), Ат к ГДА (_{АКТ I-III} p=0,0494) и Ат к КО (_{АКТ I-II} p=0,0001; _{АКТ II-III} p=0,0005).

При поступлении на стационарное лечение у больных РА с I степенью активности заболевания (n=34) отмечалось достоверное увеличение уровней всех исследуемых антител по сравнению, как со здоровыми лицами (р0,001), так и с больными ОА (р0,05), кроме значений Ат к СОД (р=0,179) и 5?-НТ (р=0,0658) (см. таблицу 19).

Таблица 19

Показатели содержания Ат к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО у больных РА в зависимости от активности патологического процесса, M(SD)

Контингент обследуемых	N	Ат к СОД	Ат к ГР	Ат к КАТ	Ат к ЦП	Ат к АДА	Ат к 5?-НТ	Ат к ПНФ	Ат к ГДА	Ат к КО
Здоровые	30	0,060 0,022	0,073 0,029	0,072 0,031	0,022 0,014	0,026 0,014	0,027 0,011	0,032 0,013	0,023 0,011	0,032 0,013
Больные ОА	48	0,071 0,032	0,076 0,037	0,063 0,032	0,051 0,028	0,037 0,028	0,052 0,020	0,062 0,027	0,034 0,017	0,062 0,028
Больные РА, активность I	34	0,079 0,015	0,101 0,048	0,089 0,040	0,098 0,052	0,082 0,029	0,069 0,009	0,082 0,015	0,062 0,032	0,081 0,014
Больные РА, активность II	128	0,143 0,049	0,150 0,064	0,119 0,048	0,138 0,061	0,119 0,065	0,127 0,042	0,142 0,046	0,078 0,045	0,142 0,045
Больные РА, активность III	16	0,209 0,016	0,210 0,47	0,145 0,088	0,182 0,037	0,186 0,048	0,204 0,045	0,210 0,016	0,079 0,019	0,211 0,015

Повышенные уровни Ат к СОД определялись у 27 (79,4%), Ат к ГР - у 25 (73,5%), Ат к КАТ - у 23 (67,6%), Ат к ЦП - у 12 (35,3%), Ат к АДА - у 10 (29,4%), Ат к 5?-НТ - у 4 (11,8%), Ат к ПНФ ? у 10 (29,4%), Ат к ГДА ? у 6 (17,6%), Ат к КО - у 10 (29,4%) пациентов данной группы. Перед выпиской из стационара содержание Ат к ферментам заметно снизилось (р<0,05), кроме Ат к СОД (р=0,814) и ГДА (р=0,781), но, тем не менее, оставалось достоверно выше уровня здоровых лиц (р0,05).

Анализ корреляционных связей изучаемых параметров с лабораторными показателями больных РА с минимальной активностью показал достоверную связь умеренной силы Ат к СОД, 5'-НТ и ПНФ с общепризнанным индикатором воспаления - СОЭ. Корреляцию между тимоловой пробой и Ат к ЦП (r=0,337, р=0,014) легко объяснить исходя из того, что тимоловая проба отражает содержание белка с высокой молекулярной массой в плазме - глобулинов, а церулоплазмин, принадлежит к -2-глобулиновой фракции. Соответственно увеличение количества ЦП, а также других остро-фазовых реактантов глобулиновой фракции, может приводить к повышению тимоловой пробы.

У больных со II степенью активности РА (см. таблицу 19) по сравнению с минимальной активностью патологического процесса обнаружено увеличение уровней всех изучаемых антител (р<0,001), кроме Ат к ГДА (р=0,054). Повышенные уровни Ат к СОД определялись у 112 (87,5%), Ат к ГР - у 100 (78,1%), Ат к КАТ - у 94 (73,4%), Ат к ЦП - у 92 (71,9%), Ат к АДА - у 73 (57%), Ат к 5?-НТ - у 92 (71,8%), Ат к ПНФ ? у 86 (67,2%), Ат к ГДА ? у 64 (50%) и Ат к КО - у 85 (66,4%) пациентов из данной группы. После проведенного в условиях стационара лечения у больных РА отмечена существенная динамика показателей содержания Ат к СОД, ГР, КАТ, АДА, 5?-НТ, ПНФ и КО (р0,001). Уровень Ат к ЦП и ГДА в процессе терапии не претерпел значимых изменений (р=0,058 и р=0,303, соответственно). Содержание всех изучаемых Ат в сыворотке крови больных РА данной группы после лечения оставалось достоверно высоким по сравнению с группой доноров (р0,0001).

У больных РА с III степенью активности по сравнению со II степенью выше содержание Ат к СОД, ГР, ЦП, АДА, 5?-НТ, ПНФ, КО (р0,0001) и практически неизменные уровни Ат к КАТ (р=0,07) и ГДА (р=0,93). По окончании курса стационарного лечения по сравнению с поступлением отмечено достоверное снижение показателей содержания Ат к СОД, ГР, АДА, 5?-НТ, ПНФ и КО (р0,001), изменение уровней Ат к ЦП, КАТ и ГДА было не столь выраженным, что вполне объяснимо существенными иммунологическими сдвигами у больных данной группы (р=0,066, р=0,118, р=0,134, соответственно). Таким образом, у больных РА с низкой активностью патологического процесса антитела к ферментам АОС и ПМ выявлялись в низком проценте случаев, в то время как у больных с умеренной активностью заболевания частота положительных результатов не опускалась ниже 50%, а при высокой активности достигала в ряде случаев 100% отметки (Ат к СОД, 5?-НТ, ПНФ и КО). Повышенные уровни Ат к ГР определялись у 13 (81,3%), Ат к КАТ - у 14 (87,5%), Ат к ЦП - у 12 (75%), Ат к АДА - у 15 (93,8%), Ат к ГДА ? у 15 (93,8%) пациентов из данной группы.

Содержание антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО в зависимости от характера течения ревматоидного артрита

Неоднородность группы больных РА в значительной мере определяется особенностями характера течения заболевания. При анализе показателей уровня Ат к ГР, КАТ, ЦП, АДА в зависимости от характера течения РА статистически значимых различий выявлено не было.

Таблица 20

Показатели содержания Ат к СОД, ПНФ, ГДА и КО в сыворотке крови больных РА в зависимости от характера течения заболевания

Антитела	Статистические показатели	Медленно прогрессирующее течение (n=112)	Быстро прогрессирующее течение (n=66)
Ат к СОД	M (SD) 95% ДИ	0,125 (0,052) 0,115…0,135	0,157 (0,051) ** 0,144…0,170
Ат к ПНФ	M (SD) 95% ДИ	0,127 (0,052) 0,113…0,141	0,153 (0,047) ** 0,136…0,169
Ат к ГДА	M (SD) 95% ДИ	0,070 (0,027) 0,063…0,077	0,083 (0,031) * 0,072…0,094
Ат к КО	M (SD) 95% ДИ	0,128 (0,053) 0,118…0,138	0,153 (0,046) * 0,141…0,164

Примечание: ДИ ? доверительные интервалы; (*) - р<0,01; (**) - р<0,001.

Учитывая наличие выраженных связей между уровнем антител к СОД, ПНФ, ГДА, КО и характером течения РА, нами была проведена попытка анализа особенностей иммунологических нарушений, связанных с антиоксидантной системой (Ат к СОД), гуаниновой ветвью пуринового метаболизма (Ат к ПНФ и ГДА) и прооксидантной системой (Ат к КО), в зависимости от вариантов быстро и медленно прогрессирующего течения заболевания (см. таблицу 20).

При поступлении на стационарное лечение у больных РА с медленно прогрессирующим течением заболевания уровни антител к 5'-НТ, ПНФ и ГДА достоверно отличались от уровня здоровых лиц (p<0,001). Содержание Ат к СОД, ПНФ, ГДА и КО у больных с быстро прогрессирующим течением РА было выше, чем у больных с медленно прогрессирующим течением заболевания (р=0,0001, р=0,001, р=0,0038, р=0,0017, соответственно). После проведенного в условиях стационара лечения у больных РА отмечена существенная динамика показателей содержания Ат к СОД, ПНФ и КО как в группе больных с медленно прогрессирующим течением заболевания (р<0,0001), так и с быстро прогрессирующим характером течения РА (р<0,0001). Уровень Ат к ГДА в процессе терапии не претерпел значимых изменений ни в одной из исследуемых групп (р>0,05).

Содержание антител к СОД, ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5'-НТ, ПНФ, ГДА и КО в различных клинических группах больных РА

Содержание антител к ферментам антиоксидантной системы организма (СОД, ГР, КАТ и ЦП)

В группе больных РА, находившихся под нашим наблюдением, 61,8% (110 человек) составили больные с суставной формой заболевания. Повышенные значения антител к СОД обнаружены у 82 (74,5%) больных данной группы, антител к ГР - у 75 (68,2%), антител к КАТ - 77 (70%), антител к ЦП - 78 (70,9%) человек. РА с системными проявлениями зафиксирован у 68 (38,2%). Повышенные значения Ат к СОД обнаружены у 63 (92,6%), Ат к ГР - у 59 (86,7%), Ат к КАТ - 60 (88,2%), Ат к ЦП - 59 (86,7%) больных данной группы.

Таблица 21

Уровень Ат к СОД, ГР, КАТ и ЦП у больных РА с различной формой заболевания, M(SD)

Контингент обследуемых	N	Антитела к СОД	Антитела к ГР	Антитела к КАТ	Антитела к ЦП
Здоровые	30	0,060 (0,022)	0,055 (0,020)	0,067 (0,019)	0,022 (0,014)
Больные ОА	48	0,071 (0,032)	0,073 (0,029)	0,072 0,031	0,051 (0,028)
Суставная форма РА	110	0,127 (0,035)	0,134 (0,038)	0,103 (0,029)	0,104 (0,040)
РА с системными проявлениями	68	0,142 (0,014)	0,176 (0,023)	0,164 (0,018)	0,178 (0,025)

У больных с суставной формой РА выявлены более низкие показатели антител по сравнению с пациентами, имеющими системные проявления заболевания (Ат к СОД, Ат к ГР, Ат к КАТ, Ат к ЦП - p < 0,001) (см. таблицу 21).

Анализ связей уровня антител к ферментам АОС с лабораторными и иммунологическими параметрами позволил выделить ряд статистически значимых корреляций между изучаемыми показателями. Уровень антител к СОД у больных с наличием системных проявлений РА имел достоверные связи слабой и средней силы с уровнем гемоглобина (r= -0,24, p = 0,015) и ЦИК (r= 0,35, p = 0,023); антител к КАТ - с уровнем гемоглобина (r= -0,44, p = 0,003), иммуноглобулинов класса М (r=0,56, p=0,025) и уровнем РФ (r=0,38, p=0,019); антител к ЦП и количеством эритроцитов в крови (r= -0,32, p=0,033). Исследование корреляционных связей лабораторных признаков между собой показало связь количества лейкоцитов и лимфоцитов крови (r= 0,37, p = 0,012), количеством гемоглобина и циркулирующими иммунными комплексами (r= -0,22, p = 0,017, коэффициент корреляции между количеством эритроцитов и уровнем гемоглобина имел почти линейную зависимость (r=0,904, p = 0,0001).

РА нередко сопровождается анемией, которая коррелирует не столько с длительностью болезни, сколько со степенью ее клинической активности (лихорадкой, количеством пораженных суставов, интенсивностью синовитов и другими проявлениями). Согласно данным ВОЗ, при содержании гемоглобина у женщин ниже 120 г/л и количества эритроцитов ниже 3,910¹²/л, а у мужчин - ниже 130 г/л и 4,010¹²/л соответственно, констатировали анемию. Все больные РА были разделены в зависимости от уровня гемоглобина и количества эритроцитов на три группы: I-ая группа - без анемии (115 человек); II-ая группа - с анемией, 90 г/л < Hb <115 г/л (39 человек); III-я группа - с выраженной анемией, Hb <90 г/л (24 человека) (см. таблицу 22). При поступлении в стационар у 63 (35,4%) человек диагностированы явления анемии различной степени. Эта группа больных имела достоверные различия в содержании Ат к СОД, КАТ и ЦП по сравнению с пациентами без анемии (p<0,001). В содержании Ат к ГР у больных РА с различным уровнем гемоглобина различий не выявлено (р>0,05).

Таблица 22

Уровени Ат к СОД, КАТ и ЦП у больных РА с различным содержанием гемоглобина

Контингент обследуемых	N	Антитела к СОД, M (SD)	Антитела к КАТ, M (SD)	Антитела к ЦП, M (SD)
Здоровые	30	0,060 (0,022)	0,067 (0,019)	0,022 (0,014)
Больные РА без анемии	115	0,119 (0,044)	104,2 (0,033)	0,120 (0,040)
Больные с 90 г/л < Hb < 115 г/л	39	0,151 (0,037)	138,6 (0,029)	0,158 (0,013)
Больные с Hb < 90 г/л	24	0,179 (0,028)	156,4 (0,014)	0,171 (0,025)

Учитывая, что иммунологические изменения, происходящие в организме, тесно связаны с биохимическим процессами, проведено изучение влияния выраженности антителогенеза к изучаемым ферментам на активность эритроцитарной СОД (эрСОД), КАТ и ЦП у больных РА с различным уровнем гемоглобина.

Рисунок 6. Зависимость между количеством антител к СОД, активностью фермента в эритроцитах и уровнем гемоглобина у больных РА

Ферментативная активность эрСОД была существенно снижена в III-ей группе и достоверно отличалась от показателей больных РА с уровнем Hb <115 г/л и >90 г/л (II-ая группа) (р=0,0002). Статистически значимых различий между I-ой и II-ой группой в определении активности эрСОД выявлено не было (р=0,320) (в I группе активность СОД - 4,761,71, во II группе - 4,441,79 и в III группе - 2,831,12) (см. рисунок 6).

Рисунок 7. Зависимость содержания Ат к КАТ и активности фермента у больных РА с различным уровнем гемоглобина

Отмечено угнетение ферментативной активности каталазы практически у всех больных РА, причем с нарастанием явлений анемии снижение активности фермента более выражено (в I группе активность КАТ - 9,622,71, во II группе - 6,471,78 и в III группе - 4,510,96) (см. рисунок 7).

Известная стимулирующая роль ЦП на кроветворение подтолкнула нас к изучению зависимости между интенсивностью антителогенеза, содержанием ЦП с одной стороны, и выраженностью анемии - с другой. Графическое отображение этой зависимости можно видеть на рисунке 8.

Рисунок 8. Активность, количество ЦП и уровень антител к нему у больных РА в зависимости от содержания гемоглобина.

У больных I и II групп найдены достоверные отличия по уровню Ат к ЦП (p = 0,006), содержанию ферментативно-активного (1021±329 и 1198±499, p = 0,013) и иммунореактивного ЦП (1405±492 и 1640±704, p = 0,023). Изучаемые показатели в III группе были выше, чем во второй, но эти различия недостоверны (p>0,05).

Таким образом, более высокий уровень антител к ферментам АОС наблюдается у больных с наличием внесуставных прявлений, особенно при развитии анемии, свидетельствуя о тяжести заболевания.

Проведение дисперсионного анализа позволило выявить зависимость уровня Ат к ЦП от тяжести поражения печени (р=0,002). Учитывая, что синтез сывороточного ЦП происходит именно в этом органе, представляло определенный интерес исследовать антителообразование к ЦП при поступлении в кровоток этого фермента из разрушенных гепатоцитов. Повышенные значения антител к ЦП выявлялись у всех больных с поражением печени (18 человек, 100%).

Перед началом лечения у больных суставно-висцеральной формой РА с вовлечением печени выявлено достоверное увеличение содержания исследуемых антител (p<0,001), активности (p<0,001) и количества ЦП (p<0,001) по сравнению с донорами (см. таблицу 23). Разность между содержанием ферментативно-активного и иммуно-реактивного ЦП составила 30,8%.

Таблица 23

Оксидазная активность, количество ЦП и уровень антител к нему у больных РА с поражением печени, MSD

Контингент обследуемых	N	Антитела к ЦП	Активность ЦП	Количество ЦП
Здоровые	30	0,0220,014	716260,3	921322,0
Больные РА с поражением печени	18	0,1890,061	1118670,2	1462650,8
Больные РА с системными проявлениями (без поражения печени)	50	0,1640,045	1381759,4	1865737,1

У пациентов с поражением печени по сравнению с больными РА с наличием других системных проявлений имелось некоторое превышение уровня Ат к ЦП, но оно не было достоверным (p = 0,071). Показатели активности и количества ЦП имели более низкие значения, чем у лиц с различными системными проявлениями заболевания, причем по количеству ЦП обнаружены достоверные (p = 0,0445), а по активности изучаемого фермента недостоверные различия (p = 0,199). В процессе лечения происходило снижение уровня антител к ЦП, содержания ферментативно-активного и иммунореактивного ЦП по сравнению с поступлением, однако это уменьшение было недостоверным (p>0,05). Таким образом, при поражении печени у больных РА отмечается активное антителообразование к ЦП в сочетании со сниженным содержанием биохимически неактивного ЦП, что отражает процесс разрушения гепатоцитов, выхода ЦП в циркуляцию, блокирования значительной доли ЦП антителами к нему и истощения резервных возможностей организма в плане стинтеза этого белка.

Содержание антител к ферментам пуринового метаболизма (АДА, 5ґ-НТ, ПНФ, ГДА и КО)

Повышенные уровни Ат АДА определялись у 62 (56,4%), Ат к 5?-НТ - у 58 (52,7%), Ат к ПНФ ? у 52 (47,3%), Ат к ГДА ? у 42 (38,2%) и Ат к КО - у 52 (47,3%) пациентов с суставной формой РА. Повышенные уровни Ат к АДА, 5?-НТ, ПНФ, ГДА и КО в группе больных с системными проявлениями РА определялись у 36 (54,5%), 38 (60%), 54 (79,4%), 38 (60%) и 54 (79,4%) человек, соответственно. При поступлении на стационарное лечение у больных с суставной формой РА (см таблицу 24) отмечалось значительное увеличение уровней всех исследуемых Ат по сравнению со здоровыми лицами (р0,001) и достоверно сниженное содержание Ат по сравнению с больными РА с наличием внесуставных проявлений (р_5?-НТ =0,011; р_ПНФ =0,0008;

р_ГДА =0,009; р_КО =0,008), за исключением Ат к АДА (р>0,05). Перед выпиской из стационара содержание Ат к 5?-НТ, ПНФ и КО у больных РА в обеих группах заметно снизилось (суставная форма РА: F_5?-НТ =42,17, F_ПНФ =45,22; р0,0001, F_КО =44,9,

р0,0001; РА с системными проявлениями: F_5?-НТ =22,08, F_ПНФ =44,78, F_КО =44,9;

р0,0001). Проведенное лечение не влияло на содержание антител к АДА и ГДА у больных РА независимо от формы заболевания (F_АДА =1,184, р=0,299 и F_АДА =0,607, р=0,518; F_ГДА =1,165, р=0,283 и F_ГДА =0,525, р=0,471, соответственно).

Таблица 24

Показатели содержания Ат к АДА, 5?-НТ, ПНФ и ГДА в сыворотке крови больных РА в зависимости от клинико-анатомической формы заболевания