Вивчення результативності корекції природними речовинами зумовлених свинцем порушень пiзнавальної діяльності дошкiльників та дослідження впливу лікувально-профілактичного застосування цих препаратів на рівні свинцю та дельта-амінолевулінової кислоти в сечі обстежуваних дітей дозволило дати клініко-лабораторне пiдтвердження виявленного in vitro захисного впливу бджолиного обнiжжя та ехiнацеї пурпурової стосовно цитотоксичного впливу сполук кадмію і свинцю та встановленої in vivo на лабораторних тваринах за умов експериментальної свинцевої та кадмієвої інтоксикацій їх протективної активності стосовно токсичного впливу металів та їх сполук. Воно також засвідчило можливість та ефективнiсть застосування цих препаратів природного походження з лiкувально-профiлактичною метою при iнтоксикацiях металами рiзного генезу.

Отримані in vitro та in vivo дані дозволили нам сформулювати концепцію використання методу культур клітин при комплексному токсиколого-гігієнічному вивченні сполук металів та оцінці засобів цитопротекції, основними складовими якої є наступні.

1. Застосування в токсиколого-гігієнічній практиці альтернативних методів дослідження in vitro є необхідним та таким, що надає переваги, зумовлені:

- можливістю досягнення оперативності та інформативності токсиколого-гігієнічного вивчення зростаючої кількості нових потенційно небезпечних для здоров'я людини хімічних факторів навколишнього середовища та пошуку засобів, які проявляють протективні властивості стосовно токсичної дії на клітини та організм в цілому вказаних факторів довкілля;

- можливістю обгрунтованого скорочення використання в токсикологічних експериментах лабораторних тварин, що є актуальним за умов зростаючих вимог до раціонального, гуманного та економного їх застосування в медико-біологічних експериментах;

- можливістю (за умов використання еталонних культур клітин, які широко використовуються в багатьох лабораторіях світу, та стандартних лабораторних процедур) проведення співставлення, відтворень та використання отриманих у різних лабораторіях результатів, що часто неможливо зробити стосовно результатів досліджень з використанням лабораторних тварин.

2. Клiтинний рiвень дiї сполук металiв, уявлення про клiтиннi мембрани як унiкальне мiсце прояву токсичних ефектiв цих ксенобіотиків обгрунтовують можливість використання культур клітин як тест-об'єктів при токсиколого-гігієнічній оцінці сполук металів та пошуку засобів цитопротекції.

3. Дослідження in vitro на культурах клітин цитотоксичних властивостей сполук металів та ефективності засобів цитопротекції повинні включати:

Обгрунтування вибору тест-об'єктів досліджень:

- використання первинно-трипсинизованих чи перещеплюваних культур клітин (останні мають перевагу в плані більшої стандартизації умов постановки експериментів та кращої можливості відтворення результатів як в часі, так і місці проведення досліджень);

- використання однієї чи декількох культур клітин (при застосуванні нової культури клітин чи культури клітин, дані про ступінь чутливості якої відсутні, обов'язковим є проведення досліджень на декількох культурах клітин, що пов'язано зі збереженням у культур клітин значного ступеня індивідуальності, який визначає і різну їх чутливість до дії токсичних агентів);

- використання культур клітин, які отримано з матеріалу безпосередньо від людини чи інших біологічних об'єктів (застосування культур людських клітин дозволяє полегшити екстраполяцію на людину результатів, отриманих з використанням цих культур клітин).

Постановку експерименту на обраних тест-об'єктах у стандартних умовах згідно з діючими методичними рекомендаціями по роботі з культурами клітин та середовищами.

Облік отриманих результатів на основі комплексу цитоморфологічних (мінімальні цитолітична та цитостатична концентрації, середньотоксична концентрація, мітотичний індекс, індекс альтерації, тест з нейтральним червоним і /або/ інші) та біохімічних (активність у культуральній рідині ряду ключових ферментів обміну вуглеводів - лактатдегідрогенази та амінокислот аланінамінотрансферази, концентрації головних метаболітів азотистого обміну - сечовини та креатиніну, а також вміст середньомолекулярних пептидів - чутливих індикаторів наявності патологічних процесів) показників.

Проведення співставлень та розрахунків ступеня цитотоксичності досліджуваних сполук металів в адекватно обраних рядах (при токсикологічному вивченні нових сполук металів) та проведення співставлень ступенів цитотоксичності еталонних сполук металів без використання досліджуваних засобів цитопротекції та з їх застосуванням (при оцінці нових засобів цитопротекції).

4. Eфективність та надійність токсиколого-гігієнічного вивчення сполук металів та оцінки засобів цитопротекції можуть бути досягнуті лише за умов комплексного проведення та використання результатів досліджень як in vitro, так і досліджень in vivo на лабораторних тваринах.

5. При проведенні комплексного токсиколого-гігієнічного вивчення нових сполук металів на першому етапі досліджень доцільно проводити встановлення їх токсичності стосовно культур клітин, надалі прогнозування за параметрами цитотоксичності дозволить на значно меншій кількості лабораторних тварин визначити основні параметри токсикометрії досліджуваних сполук. На основі останніх та даних про цитотоксичність слід проводити розрахунок гігієнічних нормативів для нових сполук металів.

6. При проведенні прискореного вивчення засобів цитопротекції з використанням методу культур клітин слід дотримуватись наступної послідовності у використанні методів дослідження in vitro та in vivo. Спочатку доцільно проводити скринінгове вивчення in vitro ефективності широкого кола речовин та факторів з можливими протективними властивостями, що досягається за рахунок встановлення ступенів зменшення цитотоксичності еталонних солей металів під впливом цих досліджуваних засобів. Вказане дозволить оперативно відібрати найбільш ефективні засоби-цитопротектори, захисні властивості яких надалі на значно меншій кількості лабораторних тварин можуть бути більш детально досліджені в умовах цілісного організму.

ВИСНОВКИ

1. Eфективність та надійність токсиколого-гігієнічного вивчення сполук металів та оцінки засобів цитопротекції можуть бути досягнуті лише за умов комплексного проведення та використання результатів досліджень in vitro та in vivo на лабораторних тваринах. Для полютантів з цитотоксичною і мембранотоксичною активністю пошук ефективних протективних засобів повинен включати скринінг на культурах клітин в моделях з відтвореним ефектом цитотоксичної дії.

2. Застосування в токсиколого-гігієнічній практиці методу дослідження in vitro на культурах клітин дозволяє забезпечити своєчасне та прискорене токсикологічне вивчення потенційно небезпечних для здоров'я людини сполук металів та швидкий пошук засобів, які проявляють протективні властивості стосовно токсичної дії на клітини та організм в цілому вказаних ксенобіотиків, та сприяє скороченню використання в експериментах лабораторних тварин, що є актуальним за умов зростаючих вимог до раціонального, гуманного та економного їх застосування в медико-біологічних дослідженнях.

3. Перещеплювані культури клітин Hep-2, Rh та HeLa проявляють високу чутливість до токсичної дії неорганічних та органічних сполук металів. При вивченні нових сполук металів співставлення та розрахунки ступеня цитотоксичності досліджуваних ксенобіотиків потрібно проводити в адекватно обраних рядах.

4. Оцінку цитотоксичної активності сполук металів стосовно культур клітин потрібно проводити з врахуванням критеріального значення обраних цитоморфологічних і біохімічних показників та беручи до уваги різні типи ураження культур клітин - порушення адгезії клітин до скла, незворотні зміни ядра, зміни мітотичної активності клітин та порушення накопичення вітального барвника.

5. Екстракт обнiжжя бджолиного, настоянки кореневищ ехінацеї пурпурової, сухого листя, квiтiв болиголову плямистого і суцвіть арнiки гiрської, нова біологічно активна речовина Eрсол-1 та низькоінтенсивне лазерне опромінення призводять з різним ступенем вираженності до зменшення цитотоксичного впливу сполук металів на iзольованi клiтини в культурi. Вказаний протективний вплив досліджених засобів має чіткий дозозалежний характер.

6. Профілактичне введення на фоні експериментальної свинцевої інтоксикації бджолиного обніжжя, ехінацеї пурпурової та проведення низькоінтенсивного лазерного опромінення спричиняє захисний вплив на центральну нервову систему, що проявляється відновленням пригнічених при токсичній дії свинцю поведінкових реакцій та сумації центральною нервовою системою підпорогових імпульсів, а також сприяє нормалiзацiї змiнених пiд впливом цього металу показників лімфо-лейкоцитарної формули, факторів і механізмiв неспецифiчного та специфiчного iмунного протиiнфекцiйного захисту та м'язевої працездатності.

7. Проведене при експериментальній свинцевій інтоксикації атомно-абсорбцiйне визначення вмiсту свинцю в бiологiчних середовищах бiлих щурiв виявило майже чотирикратне збiльшення рiвня цього металу в кровi та трикратне - у сечi дослідних тварин. Введення на фонi свинцевої iнтоксикацiї бджолиного обнiжжя, ехiнацеї пурпурової і проведення низькоінтенсивного лазерного опромінення вiрогiдно зменшує вказані рiвнi свинцю в кровi i сприяє збiльшенню його виведення з сечею.

8. Підгостра експериментальна кадмієва інтоксикація призводить до зменшення приросту маси тiла дослiдних тварин, вірогідних змін коефіцієнтів мас їх внутрішніх органів та cпричиняє пригнічення поведінкової активності білих щурів та їх м'язевої працездатностi. Профiлактичне введення на фоні цієї інтоксикації суспензії обнiжжя бджолиного в дозі 250 мг/кг та настоянки ехiнацеї пурпурової в дозi 0,25 мл/кг сприяє відновленню змінених при ізольованому введенні хлориду кадмію вказаних інтегральних та специфічних показників.

9. Профілактичне введення при підгострій кадмієвій інтоксикації обнiжжя бджолиного та ехінацеї пурпурової попереджує ниркові пошкодження на рівні судинно-клубочкового апарату нефрону і канальцевих структур нирок, що проявляється високим рівнем швидкості клубочкової фільтрації, канальцевої реабсорбції натрію, нормальною інтенсивністю тканинного фібринолізу і протеолізу в кортикальній тканині нирок та вказує на перспективи використання цих препаратів природного походження для профілактики пошкоджень нирок при тривалій дії на організм малих доз важких металів, зокрема, кадмію.

10. Виявлений вірогідний кореляційний зв'язок між рівнями дельта-амінолевулінової кислоти в сечі дітей та концентраціями свинцю в їх крові вказує на тісну пряму залежність рівнів дельта-амінолевулінової кислоти в сечі від концентрацій свинцю в крові.

11. Призначення дошкiльникам, у крові яких виявляються підвищенні рівні свинцю, поряд з традиційними заходами і препаратiв ехiнацеї пурпурової та обнiжжя бджолиного спричиняє позитивний коригуючий вплив на розвиток пізнавальної діяльності дiтей, збільшує екскрецію з сечею свинцю та зменшує рівень дельта-амінолевулінової кислоти в цьому біологічному середовищі.

12. Досвід лiкувально-профiлактичного застосування цитопротективних засобів природного походження пiдтвердив виявлені in vitro на культурах клітин та in vivo на лабораторних тваринах захисні властивості ехiнацеї пурпурової і бджолиного обнiжжя проти токсичного впливу сполук металів та засвідчив про їх ефективність при корекції та індивідуальній профілактиці спричинюваної металами екозалежної патології, зокрема про зменшення ризику порушень психологічного розвитку дітей, які проживають на забруднених металами територіях, та прискорене виведення з їх організму свинцю.

ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

1. При комплексному токсиколого-гігієнічному вивченні солей металів та оцінці засобів цитопротекції рекомендується застосування методу культур клітин, що дозволить забезпечити оперативність та інформативність вивчення цих потенційно небезпечних для здоров'я людини ксенобіотиків і пошуку засобів, які проявляють протективну активність стосовно їх патогенної дії, та сприятиме обгрунтованому скороченню використання в експериментах лабораторних тварин.

2. Препарати природного походження - суспензія обнiжжя бджолиного та настоянка ехінацеї пурпурової рекомендуються до застосовування з метою підвищення ефективності корекції та профілактики спричинюваної металами професійної та екозалежної патології, у тому числі і в дітей дошкільного віку.

3. Виявлена висока протективна активність низькоінтенсивного лазерного імпульсного опромінення в інфрачервоній області спектру з довжиною хвилі 0,89 мкм, імпульсною потужністю 6-8 Вт, частотою імпульсів 80 Гц, часом впливу 64-128 с є основою для клінічної апробації застосування лазеротерапії при металотоксикозах.

Список опублікованих автором праць за темою дисертації

1. Дейнека С.Є. Зменшення цитотоксичної дії ряду солей металів під впливом лазерного випромінювання низької інтенсивності // Журнал АМН України. - 1998, т. 4, № 2. - С. 370-376.

2. Дейнека С.Є. Протективний ефект біологічно активного препарату Ерсол-1 стосовно токсичного впливу in vitro ряду солей свинцю та кадмію // Одеський медичний журнал. - 1999. - № 1 (51). - С. 15-17.

3. Дейнека С.Є. Вплив обнiжжя бджолиного на функціональний стан центральної нервової системи за умов експериментальної свинцевої інтоксикації // Буковинський медичний вісник. - 1999. - T. 3, № 1. - С. 147 - 153.

4. Дейнека С.Є. Свинцeва інтоксикація в eкспeримeнті: модeлювання та отримані eфeкти (огляд вітчизняної літeратури) // Вісник гігієни та епідеміології. - 1999. - Т. 3, № 2. - С. 25 - 29.

5. Дейнека С.Е. Сравнительная экспресс-оценка in vitro степени токсичности и опасности ряда солей металлов // Гигиена населенных мест. - К., 1999. - Вып. 35. - С. 549 - 555.

6. Дейнека С.Є. Цитопротективні властивості обнiжжя бджолиного за токсичного впливу in vitro ряду солей металів // Буковинський медичний вісник. - 1999. - T. 3, № 2. - С. 149-153.

7. Дейнека С.Є. Динаміка змін поведінкових реакцій у білих щурів при експериментальній свинцевій інтоксикації // Современные проблемы токсикологии. - 1999. - № 2. - С. 27 - 29.

8. Дейнека С.Є. Протeктивна роль eкстракту eхінацeї пурпурової при токсичному впливі свинцю на цeнтральну нeрвову систeму // Фармакологічний вісник. - 1999. - № 3. - С. 31 - 33.

9. Дейнека С.Є Поєднана дія ацeтату свинцю та низькоінтeнсивного лазeрного опромінeння на ряд показників систeми імунітeту // Вісник проблем біології та медицини. - 1999. - № 13. - С. 100-114.

10. Дейнека С.Є. Коригуючий вплив ехінацеї пурпурової на функціональний стан центральної нервової системи за умов експериментальної кадмієвої інтоксикації // Вісник проблем біології та медицини. - 1999. - № . 15. - С. 19-22.

11. Дейнека С.Є. Цитопротективний ефект eхінацeї пурпурової стосовно токсичного впливу свинцю та кадмію // Современные проблемы токсикологии. - 2000. - № 1. - С. 47 - 49.

12. Дейнека С.Є. Захисний вплив низькоінтенсивного лазерного поромінення при експериментальній свинцевій інтоксикації // Журн. АМН України. - 2000. - т. 6, № 1. - С. 193-199.

13. Дейнека С.Є. Коригувальний вплив пилку квіткового, ехінацеї пурпурової та низькоінтенсивного лазерного опромінення на динаміку зміни маси тіла лабораторних тварин за умов свинцевої інтоксикації // Буковинський медичний вісник. - 2000. - T. 4, № 2. - С. 169-172.

14. Дейнека С.Є., Волошин О.І., Власик Л.І., Тураш М.М. До питання про гостру токсичність пилку квіткового та вміст у ньому основних важких мeталів // Буковинський медичний вісник. - 1999. - T. 3, № 3. - С. 180 - 182.

15. Дейнека С.Є., Давиденко І.С., Пpоданчук М.Г. Порівняльне значeння деяких цитоморфологічних показників при вивчeнні ступeня цитотоксичності солeй мeталів // Український науково-медичний молодіжний журнал. - 1998. - № 2-3. - С. 7-10.

16. Дейнека С.Є., Мещишен І.Ф., Хавич О.О. Особливості комбінованого впливу на культуру клітин HeLa настоянок болиголову плямистого та оксалату калію // Буковинський медичний вісник. - 1998. - № 1. - С. 99 - 103.

17. Дейнека С.Є., Мусурівська М.М., Наконечний Й.Й. Результати атомно-абсорбційного визначення рівнів свинцю в крові та сечі після впливу ацетату свинцю // Буковинський медичний вісник. - 1999. - T. 3, № 4. - С. 157 - 161.

18. Дейнека С.Є., Наконечний Й.Й., Мусурівська М.М. Вплив низькоінтенсивного лазерного опромінення на рівні свинцю у крові та сeчі за умов eкспeримeнтальної свинцeвої інтоксикації // Современные проблемы токсикологии. - 1999. - № 4. - С. 53 - 55.

19. Дейнека С.Є., Проданчук М.Г., Власик Л.І., Дячишена Л.В. Гостра токсичність ряду органічних та неорганічних солей металів та видова чутливість до них // Вісник проблем біології та медицини. - 1999. - № 9. - С. 109-113.

20. Дейнека С.Е., Фишко Н.Н. Неспецифические изменения белой крови при экспериментальной свинцовой интоксикации и результаты профилактического применения при этом препаратов природного происхождения // Сборник “Гигиена Труда”. - 1999. - Выпуск № 30. - С. 203 209.

21. Дейнека С.Є, Халаїм Є.А., Халаїм К.В. Зменшення цитотоксичної дії різних доз оксалату калію під впливом біологічно активного препарату ЕРСОЛ-1 // Вісник проблем біології та медицини. - 1999. - № 3. - С. 131-134.

22. Дейнека С.Є., Хлус К.М. Вплив ряду органічних солей металів на деякі біохімічні показники в культурі клітин // Буковинський медичний вісник. - 1998. - № 1. - С. 104 - 108.

23. Дейнека С.Є., Хлус К.М., Пpоданчук М.Г., Толстюк С.М. Зміни ряду біохімічних показників культуральної рідини при дії in vitro оксалатів металів на культуру клітин Hep-2 // Архів клінічної та експериментальної медицини. - 1999. -Т. 8, № 2, Додаток. - С. 38 - 41.

24. Дейнека С.Є., Хлус К.М., Ященко Ю.Б. Вплив лікувально-профілактичного застосування обнiжжя бджолиного та ехінацеї пурпурової на рівні -амінолевулінової кислоти у сечі дошкільників // Буковинський медичний вісник. - 2000. - T. 4, № 1-2. - С. 34-35.

25. Безруков Л.О., Ященко Ю.Б., Дeйнeка С.Є. Корекція ехінацеєю пурпуровою та пилком квітковим порушень пізнавальної діяльності у дошкільників // Вісник проблем біології та медицини. - 2000. - № 1. - С. 38 - 41.

26. Dejneka S.Ye. Protective action of low-intensive laser radiation relative to the toxic effect of metals (experimental study in vitro) // Correlation Optics: Proceeding of SPIE. - 1997. - V. 3317. - P. 414-417.

27. Dejneka S.Ye. The results of using low-intensive laser radiation in case of plumbum intoxication // Correlation Optics: Proceeding of SPIE. - 1999. - V. 3904. - P. 613-616.

28. Дейнека С.Є. Альтернативні методи дослідження in vitro - невирішені питання та перспективи // Хист. - 1994. - № 1-2. - С. 56-62.

29. Дейнека С.Є. Ступiнь коррeляції між показниками цитотоксичності солeй мeталів для культури клітин Rh і Hep-2 та парамeтрами токсикомeтрії, отриманими в eкспeримeнтах на лабораторних тваринах // Хист. - 1997. - № 1. - С. 78 - 84.

30. Дейнека C.Є. Порівняльна характeристика токсичної дії ряду солeй металів по відношeнню до пeрeщeплюваної культури клітин Hep-2 // Актуальні питання медичної допомоги населенню: Матеріали Міжнародного симпозіуму. - Чернівці-Ангельхольм (Швеція), 1996. - С.34-36.

31. Дейнека С.Є., Давиденко І.С. Особливості цитоморфологічного вивчeння культур клітин, які зазнали впливу солeй мeталів // Актуальні питання медичної допомоги населенню: Матеріали Міжнародного симпозіуму. -Чернівці-Ангельхольм (Швеція),1996. - С. - 36-39.

32. Проданчук Н.Г., Дейнека С.Е. Экспериментальные токсиколого-гигиенические исследования на лабораторных животных и альтернативные методы: настоящее и перспективы // Матеріали науково-практичної конференції "Актуальні питання використання лабораторних тварин в медико-біологічних дослідженнях". -Чернівці, 1992. - С. 111 - 113.

33. Хлус К.Н., Цыганова А.А., Дейнека С.Е., Толстюк С.И. Использование количественных показателей процессов мочеобразования у лабораторных животных при изучении нефротоксического эффекта действия оксалатов металлов // Матеріали науково-практичної конференції "Актуальні питання використання лабораторних тварин в медико-біологічних дослідженнях".-Чернівці, 1992. - С. 127-129.

34. Дейнека С.Е., Шелифост А.В. Компьютерное обеспечение токсикологических исследований // Тезисы докладов Украинской научно-практической конференции "Метагигиена-93". - Киев, 1993.- С.107-108.

35. Дейнека С.Є., Хлус К.Н., Макоганчук М.В. Особенности токсикодинамики химических соединений и выбор тест-обьекта для ускоренного прогнозирования параметров их токсичности // Загрязнение окружающей среды. Проблемы токсикологии и эпидемиологии: Тез. докл. международн. конф., Москва - Пермь, 1993. - С. 171.

36. Хлус К.Н., Дейнека С.Є. Оксалати як системнi токсини // Системно-антисистемная регуляция в живой и неживой природе: Сб.науч. трудов III-го Международного симпозиума "Системно-антисистемная регуляция в живой и неживой природе". - Киев, 1993. - С. 72-73.

37. Prodanchuk N.G., Dejneka S.Ye. Usage of cell culture as an alternative method for investigation of organic metal salt's toxicity // Balt-LASA III Conference. - Abstracts. - Vilnius, 1993. - P.81-82.

38. Дейнека С.Є. Цитотоксикологія солей металів та її місце в токсиколого-гігієнічних дослідженнях // Матеріали міжнародного симпозіуму "Медико-екологічні проблеми охорони здоров'я в Україні".- м.Чернівці, 1994. - С. 23-25.

39. Проданчук М.Г., Хлус К.М., Дейнека С.Є. Вивчення цитотоксичності органічних сполук металів з використанням біохімічних показників клітинного метаболізму Матеріали міжнародного симпозіму "Медико-екологічні проблеми охорони здоров'я в Україні".- м.Чернівці, 1994. - С. 49-50.

40. Dejneka S. Ye.The choice of test objects for accelerated forecasting of toxicometric parameters for a number of metal salts // Матеріали міжнародного симпозіуму "Медико-екологічні проблеми охорони здоров'я в Україні".- м.Чернівці, 1994. - С. 25-26.

41. Проданчук М.Г., Дейнека С.Є., Петруник І.О. Використання альтернативного методу досліджень in vitro на культурах клітин при комплексному вивченні ступеня токсичності та шкідливості потенційно небезпечних для здоров'я хімічних факторів // Матеріали конференції "Вчені Буковини - народній охороні здоров'я". - Чернівці, 1994. - С. 200-201.

42. Хлус К.М., Толстюк С.М., Дейнека С.Є. Біохімічні показники стану культури клітин Hep-2 як тест-об'єкту в токсиколого-гігієнічних дослідженнях оксалатів // "Метагигиена-94": Тезисы докладов научно-практической конференции.-Киев, 1994.- С. 46-47.

43. Дейнека С.Є., Проданчук М.Г., Давиденко І.С., Хлус К.М. Методологічні підходи до використання методу культур клітин при комплексному токсиколого-гігієнічному вивченні солей металів // Інформаційний лист N 157.95/ Київ, РЦНМІ, 1995. - Вип. 4, 2 c.

44. Дейнека С.Є., Давиденко І.С. Критeріальна значущість цитоморфологічних показників при вивчeнні ступeня цитотоксичності солeй мeталів // Актуальні питання морфогенезу: Матеріали наук. конф.-Чернівці, 1996.-C. 104 - 105.

45. Deineka S.Y. Cytotoxicity relationships of a series of metal salts in terms of their anionic and cationic character // Second World Congress on Alternatives and Animal Use in the Life Sciences. 20-24 October 1996, Utrecht, The Netherlands. - 1996. - P. 244.

46. Дейнека С.Є. Скринiнговий пошук in vitro сполук, що проявляють протeктивну дiю стосовно токсичного впливу мeталiв // Современные проблемы медицины труда в Украине: Конф. Молодых ученых, посвященная 70-летию Института медицины труда. - Київ, 1998. - С. 64-65.

47. Дейнека С.Є. Вивчення in vitro токсичного впливу оксалату алюмінію та зменшення його дії на ізольовані клітини за рахунок використання препарату з цитопротективними властивостями // Збірник наук.праць “Гігієнічні проблеми сучасного суспільства”. - Львів, 1999. - С. 138 - 139.

48. Дейнека С.Є. Протективні властивості ехінацеї пурпурової за токсичного впливу свинцю // Досягнення сучасної фармації: Матеріали V національного з'їзду фармацевтів України. - Харків, 1999. - С. 291.

49. Дейнека С.Є., Проданчук М.Г., Хлус К.М., Павлуник К.І. Eкспeримeнтальнe вивчeння захисних властивостeй eхінацeї пурпурної за токсичного впливу солeй свинцю та кадмію // Оздоровчі ресурси Карпат та прилеглих регіонів: Матеріали конференції з міжнародною участю. - Чернівці, 1999. - С. 138.

50. Dejneka S.Ye., Prodanchuk N.G. Protective action of low-intensive laser radiation relative to the toxic effect of lead (experimental study in vivo) // Factori de risc din mediul de viata in relatie cu sanatatea populatiei: Rezumatele lucrarilor a XXXIII-a Sesiune Stiintifica Anuala. - Iasi, 1999. - P. 80-81.

АНОТАЦІЯ

Дeйнeка С.Є. Токсиколого-гігієнічні аспeкти застосування мeтоду культур клітин при комплeксному вивчeнні сполук мeталів та оцінці засобів цитопротeкції. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора медичних наук за спеціальністю 14.02.01 - гігієна. - Інститут медицини праці АМН України, Київ, 2000.

Дисертацію присвячено питанням підвищення ефективності корекції та індивідуальної профілактики спричинюваної металами професійної та екозалежної патології шляхом наукового обгрунтування можливості, доцільності та ефективності використання поетапного скринінгового пошуку засобів, які проявляють протективну активність стосовно токсичної дії сполук металів. Науково обгрунтована та експериментально доведена можливість та ефективність застосування культури клітин як тест-об'єкту для скринінгового пошуку in vitro речовин та факторів, які проявляють цитопротективну дію стосовно токсичного впливу металів. Встановлено, що препарати природного походження - суспензія обнiжжя бджолиного та настоянка ехінацеї пурпурової, протективна активність яких стосовно токсичного впливу сполук металів вперше виявлена in vitro на культурах клітин та доведена як в експериментах на лабораторних тваринах, так і при корекції спричинених свинцем порушень у дошкільників, можуть застосовуватись з лiкувально-профiлактичною метою при iнтоксикацiях металами рiзного генезу. Метод впроваджений в практичну охорону здоров'я.

Ключові слова: сполуки металів, свинець, кадмій, культура клітин, цитопротекція, профілактика, препарати природного походження.

АННОТАЦИЯ

Дeйнeка С.Е. Токсиколого-гигиенические аспeкты использования мeтода культур клеток при комплeксном изучении соединений мeталлов и оценке способов цитопротeкции. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук по специальности 14.02.01 - гигиена. - Институт медицины труда АМН Украины, Киев, 2000.

Диссертация посвящена вопросам повышения эффективности коррекции и индивидуальной профилактики вызываемой металлами профессиональной и экозависимой патологии путем научного обоснования возможности, целесообразности и эффективности использования поэтапного скринингового поиска средств, которые проявляют протективную активность относительно токсического действия соединений металлов.

Научно обоснована и экспериментально подтверждена возможность и эффективность применения культуры клеток как тест-объекта для скринингового поиска in vitro веществ и факторов, которые проявляют цитопротективное действие относительно токсического влияния металлов. Показано, что эффективность и надежность токсиколого-гигиенического изучения соединений металлов и оценки средств цитопротекции могут быть достигнуты только при условии комплексного проведения и использования результатов исследований in vitro и in vivo на лабораторных животных. Для полютантов с цитотоксической и мембранотоксической активностью поиск эффективных протективных средств должен включать скрининг на культурах клеток в моделях с воспроизведенным эффектом цитотоксического действия. Показано, что использование в токсиколого-гигиенической практике метода исследования in vitro на культурах клеток позволяет обеспечить своевременное и ускоренное токсикологическое изучение потенциально опастных для здоровья человека соединений металлов и быстрый поиск средств, которые проявляют протективные свойства относительно токсического действия на клетки и организм в целом указанных ксенобиотиков, и способствует сокращению использования в экспериментах лабораторных животных, что есть актуальным в условиях возростающих требований к рациональному, гуманному и экономному их использованию в медико-биологических исследованиях.

Установлено, что экстракт пчелиной обножки, настойки эхинацеи пурпурной, болиголова и арники горной, новое биологически активное соединение Эрсол-1 и низкоинтенсивное лазерное облучение уменьшают цитотоксическое влияние соединений металлов на изолированные клетки.

С использованием моделей субхронической свинцовой и подгострой кадмиевой экспериментальных интоксикаций показана in vivo способность препаратов природного происхождения - суспензии пчелиной обножки и настойки эхинацеи пурпурной проявлять протективную активность относительно токсического влияния соединений металлов. Профилактическое введение на фоне экспериментальной свинцовой интоксикации пчелиной обножки, настойки эхинацеи пурпурной и проведение низкоинтенсивного лазерного облучения сопровождается защитным влиянием на центральную нервную систему, что проявляется востановлением угнетенных при токсическом воздействии свинца поведенческих реакций и суммации центральной нервной системой подпороговых импульсов, способствует нормализации измененных под влиянием этого металла показателей лимфо-лейкоцитарной формулы, факторов и механизмов неспецифической и специфической иммунной противоинфекционной защиты, мышечной трудоспособности, а также достоверно уменьшает уровни свинца в крови и способствует увеличению его выведения с мочой. Профилактическое введение при подгострой кадмиевой интоксикации пчелиной обножки и эхинацеи пурпурной предупреждает почечные нарушения на уровне сосудисто-клубочкового аппарата нефрона и канальцевых структур почек, что проявляется высоким уровнем скорости клубочковой фильтрации, канальциевой реабсорбции натрия, нормальной интенсивностью тканевого фибринолиза и протеолиза в кортикальной ткани почек и указывает на перспективы использования этих препаратов природного происхождения для профилактики поражений почек при длительном действии на организм малых доз тяжелых металлов.

Установлено, что препараты природного происхождения - суспензия пчелиной обножки и настойка эхинацеи пурпурной, протективная активность которых относительно токсического влияния соединений металлов впервые выявлена in vitro на культурах клеток и подтверждена как в экспериментах на лабораторных животных, так и при коррекции вызываемых свинцом нарушений у дошкольников, могут применятся с лечебно-профилактическою целью при интоксикациях металлами разного генеза. Назначение дошкольникам, в крови которых выявлены повышенные уровни свинца, наряду с традиционными мероприятиями и препаратов эхинацеи пурпурной и пчелиной обножки производит положительное корригирующее влияние на развитие познавательной деятельности детей, способствует увеличению экскреции с их мочой свинца и приводит к уменьшению уровня дельта-аминолевулиновой кислоты в этой биологической среде. Метод внедрен в практическую охрану здоровья.

Ключевые слова: соединения металлов, свинец, кадмий, культура клеток, цитопротекция, профилактика, препараты природного происхождення.

THE SUMMARY

Dejneka S. Ye. Toxicology-hygienic aspects of cells culture method application, in complex study of metal combinations and cytoprotective agents. - Manuscript.

Dissertation for a doctor's of medical sciences degree. Specialization 14.02.01-higiene. The institute of labour medicine AMS Ukraine, Kiyiv, 2000.

This dissertation is dedicated to the questions of increase of effective correction and individual protection against professional and ecodependent pathology caused by metals, by means of scientiffically grounded, expendient and effective usage of phased screening search of agents, that manifest protective activity, concerning the metal combinations toxic effect.

The scientifically grounded and experimentally proved possibility and effectiveness of cells culture usage, as test-object for screening search in vitro of substances and factors, that manifest citoprotective action, concerning the metal toxic influence. It was found, that preparations of natural origination - bee pollen suspension and echinocea purpurrea tincture, the protective activity of which, concerning to the toxic influence of metal combinations, was revealed for the first time - in vitro on cells culture and proved, both in experiments in laboratory animals and in children under school age breaches, caused by lead, can be used as preventive medicine and treament in metals intoxications of different genesis.

Key words: metals combinations, lead, cadmium, cells culture, cytoprotection, the preparations of natural origination.

Размещено на Allbest.ur