Біохімічні механізми регуляції стероїдогенезу в корі надниркових залоз іонами калію

13. Процеси, що стимулюються іонами К+ в тканині надниркових залоз (синтез альдостерону, мічення білків, РНК, ДНК, транспорт кальцію в адренокортикоцити) пригнічуються о,п'-ДДД. Стійкість тканини надниркових залоз морської свинки до хлодитану не проявляється на клітинному рівні. о,п'-ДДД прискорює фрагментацію ДНК у пухлинах кори надниркових залоз людини.

14. Іони літію здійснюють модулюючий вплив на залежні від К+ біохімічні процеси в корі надниркових залоз. При низьких концентраціях іонів калію, Li+ часто посилює ефекти К+, імітуючи його дію. За високих концентрацій К+, літій пригнічує його ефект.

15. Інгібіторний вплив ДГП на К+-залежні процеси в адренокортикоцитах опосередковується через зміни транспорту Са2+ в клітини.

Список опублікованих праць за темою дисертації

1. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д., Микоша А.С., Комиссаренко В.П Влияние ионов калия на синтез быстрометящихся белков в срезах надпочечников морских свинок // Докл. АН УССР. 1987. Сер. Б, №2. C. 61-63.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, участь у написанні статті.

2. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д., Микоша А.С. Влияние концентрации К+ на скорость синтеза быстрометящихся белков в коре надпочечников // Биохимия. 1987. Т.52, №7. С. 1174-1179.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, участь у написанні статті.

3. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д., Микоша А.С. Фосфорилирование цитоплазматических рибонуклеопротеидов в клетках надпочечников морских свинок. Эффект АКТГ // Укр. биохим. журн. 1987. T.59, №5. C .75-77.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, участь у написанні статті.

4. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д., Микоша А.С. Биохимические механизмы регуляции минералокортикоидной функции надпочечников ионами калия // Пробл. эндокринологии. 1988. Т.34, № 5. С. 78-83.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, узагальнення літературних та власних даних, участь у написанні статті.

5. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д., Микоша А.С. Участие сАМР в регуляции минералокортикоидной функции надпочечников ионами калия // Биохимия. 1989. T.54, №2. C. 323-327.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, участь у написанні статті.

6. Тронько Н.Д., Пушкарев В.М., Богданова Т.И., Саутин Ю.Ю., Микоша А.С. Получение и фракционирование в градиенте перколла клеток коры надпочечников морских свинок и характеристика их функционального состояния // Физиол. журн. 1989. T.35, №4. C. 52-61.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, участь у планування дослідів, проведенні досліджень, узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

7. Тронько Н.Д., Пушкарев В.М., Ременников Г. Бальон Я.Г. Микоша А.С. 1,4-Дигидропиридины - возможные модуляторы секреции альдостерона корой надпочечных желез // Докл. АН УССР. 1989. Сер. Б, №11. C. 77-80.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, участь у плануванні дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, участь у написанні статті.

8. Челнакова И.С., Пушкарев В.М., Тронько Н.Д., Микоша А.С. Участие белкового синтеза в К+-зависимой активации биосинтеза гормонов в коре надпочечников морских свинок // Пробл. эндокринологии. 1990. Т.36, №6. С. 64-68.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, участь у плануванні дослідів, проведенні досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, участь у написанні статті.

9. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д. Стимуляция ионами калия биосинтеза РНК в диспергированных клетках коры надпочечных желез // Докл. АН СССР. 1990. Т.311, №2. С. 504-505.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написання статті.

10. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д., Микоша А.С. Зависимость регуляторного воздействия ионов К+ на образование альдостерона в коре надпочечников от белкового синтеза // Докл. АН СССР. 1991. Т.318, №1. С. 241- 244.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, участь у написанні статті.

11. Pushkarev V.M., Mikosha A.S. The participation of cAMP and protein kinase C in the regulation of aldosterone biosynthesis by potassium // Biomed. Sci. 1991. V.2. P. 135-139.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

12. Тронько Н.Д., Пушкарев В.М., Челнакова И.С., Яровая Л.В., Микоша А.С. Регуляция биосинтеза гормонов в надпочечных железах морских свинок иона-ми калия при действии дигидропиридинов. 1. Анализ изменений стероидогенеза, вызываемых дигидропиридинами //Физиол. журн. 1991. Т.37, №6. С. 55-60.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

13. Микоша А.С., Пушкарев В.М., Челнакова И.С., Ременников Г. Регуляция биосинтеза гормонов в надпочечных железах морских свинок ионами калия при действии дигидропиридинов. 2. Возможные механизмы изменений стероидогенеза, вызываемых 1,4-дигидроридинами, в диспергированных адренокортикоцитах // Физиол. журн. 1991. Т.37, №6, С. 60-65.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

14. Pushkarev V.M., Tronko N.D., Mikosha A.S. Inhibition of K+-dependent stimulation of aldosterone production by lithium // Lithium. 1991. V. 2. P. 235-239.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

15. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д. Роль внутриклеточного связанного кальция и протеинкиназы С в К+-зависимой регуляции биосинтеза альдостерона // Биол. мембраны. 1992. Т.9, №6, C. 56-61.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написання статті.

16. Пушкарев В.М., Тронько Н.Д. Влияние хлорпромазина на К+ -зависимую регуляцию биосинтеза альдостерона в коре надпочечников морских свинок // Пробл. эндокринологии. 1992. Т. 38. С. 45-49.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, проведення досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написання статті.

17. Тронько Н.Д., Пушкарев В.М., Челнакова И.С., Саутин Ю.Ю. Микоша А.С. Некоторые итоги и перспективы изучения механизмов регуляции биосинтеза кортикостероидных гормонов // Эндокринология. Киев: "Здоров'я", 1991. С. 3-9.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, узагальнення літературних та власних даних, участь у написанні розділу статті.

18. Pushkarev V.M., Mikosha A.S., Tronko N.D., Yarovaya L.V. Lithium ions effect in vitro on K+-dependent stimulation of RNA and protein biosynthesis in adrenal cortex of guinea pig // Lithium. 1994. V.5. P. 47-52.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

19. Pushkarev V.M., Mikosha A.S., Prudiev D.P., Tronko N.D. Effect of K+ on the phosphorylation of ribonucleoproteins in the adrenocortical tissue // Endocrine regulations. 1996. V. 30. P. 73-81.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

20. Тронько Н.Д., Саутин Ю.Ю., Пушкарев В.М., Челнакова І.С, Ковзун О.І. Мїкоша О.С. Шляхи внутрішньоклітинного перенесення регуляторних сигналів пролактину та іонів калію у клітинах кори надниркових залоз // Ендокринологія. 1996. Т.1, №1, C. 5-13.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, узагальнення літературних та власних даних, участь у написанні розділу статті.

21. Mikosha A.S.,Kostyuchenko N.N., Pushkarev V.M. In vitro effects of adrenocorticolytic drug, mitotane on the responses of guinea pig adrenal tissue to different K+ concentrations // Эксп. онкология. 1999. Т.21. C. 64-69.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

22. Пушкарьов В.М. Вплив різних концентрацій К+ на синтез білка та РНК у корі надниркових залоз морських свинок. Ефект низьких концентрацій // Ендокринологія. 1999. Т.4, №1, С. 55-60.

23. Пушкарьов В.М., Тронько М.Д., Костюченко Н.М., Микоша О.С. Залежність мічення альдостерону та фосфорилювання білків в корі надниркових залоз морських свинок від концентрації К+ у середовищі. Ефект низьких концентрацій // Ендокринологія. 2000. Т.5, №1. С. 123-126.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

24. Pushkarev V.M., Tronko N.D., Kostiuchenko N.N., Kovalenko A.E., Mikosha A.S. Modulation by N-stearoylethanolamine of K+ and Mitotane Effects on Steroid Hormones Labeling in Human Adrenocortical Tissue // Biomedical Res. 2001. V.22, №4. Р. 191-195.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

25. Пушкарьов В.М., Костюченко Н.М.. Вплив деяких антимітотичних агентів на залежну від калію стимуляцію мічення альдостерону // Ендокринологія. 2003. 8, №2. С. 286-290.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та узагальнення отриманих результатів, написання статті.

26. Пушкарьов В.М.. Вплив К+ на апоптичні процеси в умовно нормальній та пухлинній тканині надниркових залоз людини // Ендокринологія. 2005. Т.10, №1. С. 57-62.

27. Пушкарьов В.М., Ковзун О.І., Тронько М.Д., Костюченко Н.М., Микоша О.С. Шляхи передачі регуляторного сигналу К+ в адренокортикальних клітинах людини // Укр. біохім. журн. 2005. Т.77, №1. С .61-67.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

28. Kostyuchenko N., Pushkarev V., Kashevarov G., Tronko M., Komisarenko I., Mikosha O. Effects of N-acylethanolamines and various antimitotic agents on apoptotic DNA fragmentation in conventionally normal and tumor tissue of human adrenals // Exp. Oncol. 2005. V. 27, N 3. P. 215-219.

Автором самостійно здійснювався аналіз літератури, планування дослідів, участь у проведенні досліджень, статистична обробка та участь в узагальненні отриманих результатів, написанні статті.

Анотація

Пушкарьов В.М. Біохімічні механізми регуляції стероїдогенезу в корі надниркових залоз іонами калію. Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальністю 14.01.14 - ендокринологія. - Інститут ендокринології та обміну речовин ім. В.П.Комісаренка, АМН України, Київ, 2005.

Ключові слова: кора надниркових залоз, іони К+, альдостерон, стероїдогенез, біосинтез білку, Са2+, цАМФ, кальмодулін, фосфоліпіди, протеїнкінази.

Аннотация

Пушкарев В.М. Биохимические механизмы регуляции стероидогенеза в коре надпочечних желез ионами калия. Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук по специальности 14.01.14 - эндокринология. - Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П.Комиссаренко, АМН Украины, Киев, 2005.

Диссертация посвящена исследованию биохимических механизмов регуляции стероидогенеза в коре надпочечных желез наименее изученным агонистом - ионами калия.

Показано, что повышение концентрации ионов калия в среде приводит к существенной перестройке метаболизма адренокортикоцитов. Происходит стимуляция синтеза и мечения альдостерона, усиливаются фундаментальные метаболические процессы - синтез белка, РНК, ДНК. Активируются различные киназные системы, результатом чего является фосфорилирование белков в различных компартментах адренокортикальной клетки.

При помощи ряда ингибиторов ионных каналов и ионофоров продемонстрировано участие различных калиевых и кальциевых каналов в регуляции биосинтеза альдостерона ионами калия.

Исследована роль белкового синтеза в зависимой от ионов калия регуляции стероидогенеза. Доказана зависимость регулируемых калием стероидогенных процессов от трансляции, а также показано усиление мечения белков при отклонении концентрации иона в большую или меньшую сторону от физиологического уровня. Предложен возможный механизм модуляции калием трансляции путем фосфорилирования и дефосфорилирования белков, связанных с рибонуклеопротеидами и ассоциированными с ними мембранами. Стимуляция мечения РНК и ДНК при повышении содержания калия в инкубационной среде может свидетельствовать о пролиферативных эффектах иона в коре надпочечных желез.

Изучены основные мессенджерные системы, участвующие в опосредовании эфектов К+ в адренокортикоцитах. Доказано участие фосфолипидов, внутриклеточных кальциевых депо и протеинкиназы С в К+-зависимой регуляции биосинтеза альдостерона. Показана стимуляция ионами калия цАМФ/ПКА мессенджерной системы. Исследовано фосфорилирование белков в различных компартментах адренокортикоцитов.

Доказано участие Са2+ та Са2+/кальмодулин-зависимой протеинкиназы в фосфорилировании белка близкого по массе к белку-регулятору острой фазы стероидогенеза (StAR).

Опыты с колхицином и цитохалазином В показали, что в регуляции стероидогенеза ионами калия принимают участие такие элементы цитоскелета, как микротрубочки и микрофиламенты.

Продемонстрирована возможность торможения стероидогенеза в коре надпочечников при снижении концентрации калия в среде и установлены основные факторы, опосредующие такое торможение.

Показан стимулирующий эффект ионов калия на мечение основных глюкокортикоидных гормонов надпочечников, что свидетельствует о влиянии калия на начальные стадии стероидогенеза, общие для всех кортикостероидов.

Изучено влияние ряда естественных и синтетических модуляторов на стероидогенную функцию надпоченых желез в условиях ее стимуляции ионами калия - ионов лития, о,п'-ДДД, производных 1,4-дигидропиридина, N-ацилэтаноламинов. Полученные результати могут быть использованы в дальнейших доклиничных испытаниях, направленных на поиск гипотензивних и антиаритмических препаратов. Особый интерес в этом плане вызывает протестированный автором новосинтезированный препарат ДГП-51, заметно снижающий биосинтез альдостерона в коре надпочечных желез в условиях ее стимуляции ионами калия.

Показано влияние ионов калия и других соединений (ионы лития, о,п'-ДДД) на интенсивность апоптических процессов в условно нормальной и опухолевой ткани коры надпочечников человека. Оказалось, что ионы калия усиливают фрагментацию ДНК в условно нормальной ткани, соседствующей с опухолью, и не влияют или даже ослабляют апоптоз в опухолевой ткани.

Сформулирована концепция, согласно которой регуляция стероидогенеза ионами К+ занимает важнейшее, центральное место в общей системе регуляции стероидогенеза в коре надпочечников, а поддержание на физиологическом уровне концентрации К+ в плазме крови регулируются, главным образом, самим калием. Предполагается, что в механизмах регуляции стероидогенеза ионами К+, АКТГ и АІІ принимают участия все три основных мессенджерные системы - цАМФ-зависимая, Са2+/кальмодулин- зависимая и Са2+/фосфолипид- зависимая.

Ключевые слова: кора надпочечников, ионы К+, альдостерон, стероидогенез, биосинтез белка, Са2+, цАМФ, кальмодулин, фосфолипиды, протеинкиназы.

Summary

Pushkarev V.M. Biochemical mechanisms of steroidogenesis regulation by potassium ions in the adrenal cortex. Manuscript.

Thesis for the degree of Doctor of Biological Sciences in Endocrinology - 14.01.14. V.P.Komisarenko Institute of Endocrinology and Metabolism of Academy of Medical Sciences of Ukraine, Kyiv, 2005.

Key words: adrenal cortex, К+ ions, aldosterone, steroidogenesis, protein biosynthesis, Са2+, cAMP, calmodulin, phospholipids, protein kinases.

Размещено на Allbest.ru