Вплив стрептокінази на активаційну ланку системи фібринолізу

Проведені дослідження показали, що активність та концентрація тканинного активатора плазміногена значно підвищується, майже в 3,5 рази, через 1 годину після введення стрептокінази у всіх модельних системах in vivo. Надалі цей показник наближається до норми. Після введення стрептокінази активність інгібітора активаторів плазміногена - ПАІ-1 знижується, проте концентрація ПАІ-1 зростає у 2 рази. Оскільки 90% ПАІ-1 накопичується в б-гранулах тромбоцитів, можна зробити висновок, що стрептокіназа, активуючи тромбоцити, призводить до підвищеної секреції ПАІ-1. Отримані дані свідчать про активацію системи фібринолізу, пов'язану зі зростанням концентрації тканинного активатора плазміногена у руслі крові і відповідно компенсаторним підсиленням його інгібування.

Таким чином показано, що стрептокіназа здатна впливати на судинно-тромбоцитарну ланку системи гемостазу без участі плазміногена, внаслідок чого відбувається значне вивільнення тканинного активатора плазміногена та інгібітора активаторів плазміногена І типу.

Аннотация

Краснобрижая Е.Н. Влияние стрептокиназы на активационное звено системы фибринолиза. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.04 - биохимия. Институт биохимии им. О.В. Палладина НАН Украины, Киев, 2004.

Диссертация посвящена исследованию влияния стрептокиназы на механизмы регуляции активности и взаимодействия компонентов системы фибринолиза. Исследование проводили с использованием модельных систем in vitro и in vivo (кроли и свиньи). Система гемостаза свиней интересна тем, что её плазминоген не активируется стрептокиназой, таким образом, исключается возможное опосредованное влияние плазмина и продуктов деградации фибрина/фибриногена. Также было проанализировано состояние системы фибринолиза людей, заболевших острым инфарктом миокарда, которым проводили лечение препаратами стрептокиназы. Особое внимание уделялось исследованию параметров тканевого активатора плазминогена, ингибитора активаторов плазминогена І типа (ПАИ-1) и их взаимодействия.

Проведенные исследования показали, что активность и концентрация тканевого активатора плазминогена значительно повышается, почти в 3,5 раза, через 1 час после введения стрептокиназы во всех модельных системах in vivo. На следующих этапах этот показатель приближается к норме. После введения стрептокиназы активность ингибитора активаторов плазминогена - ПАИ-1 снижается. Тем не менее, концентрация ПАИ-1 после введения стрептокиназы возрастает в 2 раза. Поскольку 90% ПАИ-1 накапливается в б-гранулах тромбоцитов, то можно сделать вывод, что стрептокиназа, активируя тромбоциты, приводит к секреции ПАИ-1. Отличие между активностью и концентрацией ПАИ-1, согласно нашим предположениям, объясняется тем, что изначально ПАИ-1 высвобождается из тромбоцитов в неактивной форме, вследствие нефизиологического влияния стрептокиназы либо происходит интенсивное образование комплексов с тканевым активатором, в котором ПАИ-1 неактивный. Полученные данные могут свидетельствовать об активации системы фибринолиза вследствие возрастания концентрации тканевого активатора плазминогена в русле крови, и, соответственно, компенсаторным усилением его ингибирования.

Анализ данных энзим-електрофореграмм эуглобулиновой фракции плазмы крови показал, что через 1 час после введения стрептокиназы отмечается повышение активности тканевого активатора плазминогена относительно контрольной группы. Исследование параметров системы свертывания крови выявило снижение уровня протромбина in vivo. В то же время в опытах in vitro показано, что стрептокиназа активирует протромбин разных видов млекопитающих (человека, кролика, свиньи). Выявлен дисбаланс в системе гемостаза, о чем свидетельствует появление растворимого фибрина после введения стрептокиназы, тогда как в норме он отсутствует.

Анализ фракции растворимых фибрин-мономерных комплексов, проведенный методом вестерн-блотинг с использованием антител к фибриногену и к фрагменту Е, показал накопление фибрина/фибриногена, фрагментов X, Y, Д и Е разной степени расщепления. Максимальное накопление продуктов деградации регистрируется на 7 день после введения стрептокиназы.

Полученный результат свидетельствует, что стрептокиназа непосредственно или опосредовано влияет на эндотелиальные клетки и тромбоциты, вызывая секрецию тканевого активатора плазминогена и ПАИ-1. Опосредствованное влияние стрептокиназы может происходить через действие плазмина, продуктов деградации фибрина/фибриногена и тромбина.

Таким образом, в опытах с использованием модельных систем in vivo, плазминоген которых не активируется стрептокиназой, было показано, что стрептокиназа способна влиять на сосудисто-тромбоцитарное звено системы гемостаза без участия плазминогена. Выявлено, что стрептокиназа вызывает значительное повышение концентрации и активности тканевого активатора плазминогена через 1 час после введения ее в русло крови, влияя на эндотелиальные клетки. Возможно, вследствие повреждения эндотелиальных клеток. Показано, что стрептокиназа вызывает секрецию ПАИ-1 из б-гранул тромбоцитов в русло крови.

Summary

Krasnobryzha I. M., Influence of streptokinase on the fibrinolytic system activation link. - Manuscript.

Thesis for a scientific degree of candidate of biological sciences by specialty 03.00.04 - Biochemistry. - Palladin Institute of Biochemistry of National Academy of Sciences of Ukraine. Kyiv, 2004.

The present study is dedicated to the investigation of the effect of thrombolytic agent - streptokinase (Sk) on the activity and interaction regulation mechanisms of fibrinolytic system components. The study of thrombolytic agent influence was carried out with use of in vitro and in vivo model systems. Especially we were interested in study of the changing fibrinolytic system parameters such as tissue type plasminogen activator, plasminogen activator inhibitor (PAI-1), plasminogen, б₂-antiplasmin activities. Also the main parameters of coagulation system such as fibrinogen, soluble fibrin, fibrin degradation products levels and thrombin activity were studied.

It was shown that activity and concentration of t-PA were significantly increased in 3,5 times in 1 hour after streptokinase injection in all model systems in vivo. On the next stages of investigation this parameters tend to norm. After streptokinase injection PAI-1 activity was decreased however PAI-1 quantity was increased in 2 times. PAI-1 activity and concentration are distinguished due to formation of complexes with t-PA in which PAI-1 is an inactive.

The injection of Sk causes the significant increase of t-PA activity and quantity possibly due to the direct effects on endothelial cells. We can conclude that streptokinase causes PAI-1 secretion due to effect on platelets as 90% of PAI-1 storage is in б granules of platelets. Thus analysis of the data displayed besides of well-known Sk function the influence of Sk on the changing of fibrinolytic system potential possibly due to its effect of it on endothelial cells and platelets.

Размещено на Allbest.ru