Субодиничний склад нікотинових холінорецепторів нейронів нижнього брижового ганглія морської свинки

Структурні та функціональні властивості нікотинових холінорецепторів різного субодиничного складу. Аналіз особливостей експресії таких рецепторів на різних вегетативних гангліях ссавців. Морфометричні характеристики препаратів нижнього брижового ганглія.

Рубрика Биология и естествознание
Вид автореферат
Язык украинский
Дата добавления 12.07.2014
Размер файла 53,3 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Тези доповідей.

1. Koval O.M., Voitenko L.P., Skok V.I. The 7-subunit nicotnic acetylcholine receptors blockers facilitate synaptic transmission through guinea pig inferior mesenteric ganglion. The first Bogomoletz-Nencki Meeting, 2001, Аbstracts, P17.

2. Koval O.M., Voitenko L.P., Skok M.V. The alpha-subunit composition of nicotinic acetylcholine receptors in guinea pig inferior mesenteric ganglion: electrophysiological and imunohistochemical study. Second Bogomoletz-Nencki Meeting, 2002, Аbstracts, P17.

3. Коваль О.М., Войтенко Л.П. Участь 7- вмісних нікотинових холінорецепторів у синаптичній передачі нижнього брижового ганглія морської свинки Фізіол. Журн., 2002, т.48, № 2, с. 6-7.

4. Коваль О.М., Войтенко Л.П., Скок М.В. Альфа-субодиничний склад нікотинових холінорецепторів нейронів нижнього брижового ганглія морської свинки. У кн. “Психофізіологічні та вісцеральні функції в нормі і патології” Київський національний університет імені Тараса Шевченка. Київ, 2002, с. 58.

5. Koval O.M., Voitenko L.P., Skok M.V., Skok V.I. 2- and 4- Subunit Composition of Nicotinic Acetylcholine Receptors in the Guinea Pig Inferior Mesenteric Ganglion: Immunohistochemical and Electrophysiologycal Studies.// Нейрофизиология/ Neurophysiology.- 2003.- Т.35, №3/4. - р.355.

Анотації

Коваль О. М. Субодиничний склад нікотинових холінорецепторів нейронів нижнього брижового ганглія морської свинки. - Рукопис.

Дисертація на здобуття вченого ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.13 - фізіологія людини та тварин. - Інститут фізіології ім. О. О. Богомольця НАН України, Київ, 2003.

Дисертація присвячена дослідженню субодиничного складу нікотинових холінорецепторів (НХР), які локалізуються на нейронах нижнього брижового ганглія (НБГ) морської свинки. Для цього використовували антитіла проти 3-, 4-, 5-, 7-, а також 2- та 4-субодиниць НХР.

Дослідження проведені із використанням методу внутрішньоклітинного відведення потенціалів від нейронів НБГ при подразненні прегангліонарного нерва (міжбрижового тракту). При цьому аналізували зміни амплітуди збуджуючих постсинаптичних потенціалів (ЗПСП), застосовуючи різні підтипи антитіл у якості специфічних блокаторів. Також був використаний метод імуногістохімічного забарвлення препаратів НБГ, де згадані антитіла виступали у якості імунореактивних міток.

На нейронах досліджуваного ганглія встановлено наявність нікотинових холінорецепторів, які містять у своєму складі 3-, 5-, та 4-субодиниці. Також показано, що такі НХР відіграють головну роль у реалізації синаптичної передачі у нервовому шляху прегангліонарний нерв (міжбрижовий тракт) - нейрони НБГ. Нами не виявлено присутності 4- та 2- вмісних НХР на нейронах НБГ, та не показано їх участі у здійсненні синаптичної передачі.

На основі того, що блокатори 7-вмісних НХР викликали збільшення амлітуди ЗПСП, зроблено припущення про позасинаптичну локалізацію 7- вмісних НХР та їх модулюючий вплив на синаптичну передачу в НБГ морської свинки. Ключові слова: нижній брижовий ганглій, нікотинові холінорецептори (НХР), субодичний склад, специфічні антитіла.

Коваль О.М. Cубъединичный состав никотиновых холинорецепторов нейронов нижнего брыжеечного ганглия морской свинки. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.13 - физиология человека и животных. - Институт физиологии им. А. А. Богомольца НАН Украины. Киев - 2003.

Диссертация посвящена исследованию субъединичного состава никотиновых холинорецепторов (НХР), локализующихся на нейронах нижнего брыжеечного ганглия (НБГ) морской свинки. Для этого были использованы антитела против 3-, 4-, 5-, 7-, а также 2- и 4-субъединиц НХР (аминокислотные остатки 181-192 и 183-193 соответственно).

Исследования проведены с использованием метода внутриклеточного отведения потенциалов от нейронов НБГ при раздражении преганглионарного нерва (межбрыжеечного тракта). При этом анализировали изменения амплитуды возбуждающих постсинаптических потенциалов (ВПСП), используя различные подтипы антител в качестве специфических блокаторов. Также был использован метод иммуногистохимического окрашивания препаратов НБГ, где упомянутые антитела применяли в качестве иммунореактивной метки.

Для того чтобы проверить специфичность связывания антител с соответствующими подтипами субъединиц НХР, предварительно были проведены контрольные эксперименты (и електрофизиологические, и иммуно-гистохимические), в которых использовали неспецифические иммуноглобулины, не содержащие антител против различных б- и в- субъединиц НХР. Нами не зарегистрировано какого либо их влияния на синаптическую передачу в НБГ, а также нейроны исследуемого ганглия не приобретали специфической окраски после обработки препарата неспецифическими иммуноглобулинами.

При морфометрическом анализе препаратов НБГ было показано, что исследуемый ганглий состоит из двух узлов - рострального и каудального, которые соединены между собой межузловыми комиссуральными трактами. Ганглионарные узлы содержали два типа клеток, которые принципиально отличались размерами их сом. Диаметр сом больших (релейных) нейронов составил 53.8 1.8 мкм (n=20), а мелких ганглионарных клеток - 14.1 0.5 мкм (n=50).

На релейных нейронах исследуемого ганглия установлено наличие никотиновых холинорецепторов, которые содержат в своем составе 3-, 5-, а также 4-субъединици НХР. Численность популяций (58.3 10.2 %, 63.4 5.1 % и 59.8 7.5 %, соответственно) и топография 3-, 5-, 4-иммунореактивных нейронов были очень близкими. Эти клетки преимущественно располагались в участках формирования основных нервных трактовых систем: в основании межбрыжеечного тракта, ободочного и обоих подчревных нервов.

Также показано, что такие НХР играют решающую роль в реализации синаптической передачи в нервном пути преганглионарный нерв (межбрыжеечный тракт) - нейроны ганглия. Перфузирующий раствор, содержащий 3- и 5- специфические антитела, вызывал 100 % угнетение синаптических ответов нейронов НБГ (n=3). Действие 4- специфических антител также выражалось в уменьшении амплитуды ВПСП всех исследованных нейронов (n=10).

На препаратах, меченых 4- и 2- специфическими антителами, не было обнаружено крупных нейронов, содержащих специфическую окраску. В то же время, указанные антитела не вызвали каких либо изменений амплитуды ВПСП и мембранного потенциала покоя (МПП) нейронов в электрофизиологических экспериментах (n=10). Вследствие полученных данных был сделан вывод об отсутствии 4- и 2- содержащих НХР на нейронах НБГ, а также о том, что они не принимают участия в осуществлении синаптической передачи через ганглий.

Блокаторы 7- содержащих НХР - метилликаконитин (МЛА) и 7- специфические антитела, вызывали увеличение амплитуды ВПСП нейронов НБГ в электрофизиологических опытах. Однако установлено, что крупные (релейные) нейроны не были иммунореактивными к 7- специфическим антителам, но находились в тесном контакте (визуально) с четко окрашенными сомами и отростками мелких ганглионарных клеток. На основании вышеизложенного сделано предположение о внесинаптической локализации 7- содержащих НХР и их модулирующем влиянии на синаптическую передачу в НБГ морской свинки.

Что касается мелких ганглионарных клеток, то при использовании 3- и 4- специфических антител, были окрашены только их сомы. Иммунореактивность к 4- и 5- специфическим антителам выражалась и на сомах, и на отростках. Однако мелкие клетки, иммунопозитивные к антителам против 4- субъединицы НХР, располагались преимущественно в тканях, окружающих ганглий. Таким образом, мелкие клетки могут располагать более широким набором различных субъединиц НХР, чем релейные нейроны.

Ключевые слова: нижний брыжеечный ганглий, никотиновые холинорецепторы, субъединичный состав, специфические антитела.

Koval O. M. Subunit composition of nicotinic acetylcholine receptors of inferior mesenteric ganglion neurons of guinea pig. - Manuscript.

Thesis for a Candidate Biology degree by specialty 03.00.13 - human and animal physiology. - O. O. Bogomoletz Institute of Physiology National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv, 2003.

The dissertation is devoted to investigation of subunit composition of nicotinic acetylcholine receptors (nAChR) of inferior mesenteric ganglion (IMG) neurons of guinea pig. The specific antibodies against 3-, 4-, 5-, 7-, and 2-, 4- subunits of nAChR were used. Our experiments were carried out by intracellular recording techniques and by method of immunohistochemical staining. In electrophysiological experiments amplitude EPSP changes were analyzed, when specific antibodies were applied. Synaptic responses (EPSP) of principal ganglionic neurons were evoked by stimulation of intermesenteric nervous trunk. In the immunohistochemical investigations the antibodies played role of immunoreactive labels. The presence of 3-, 5-, and 4-subunits of nAChR was shown on the IMG neurons and the nAChR containing mentioned subunits play critical role in realization of synaptic transmission. The presence of 4- and 2- subunits nAChR on the neurons of IMG was not determined. The 4- and 2- containing nAChR were not involved to synaptic transmission mechanism.

It was found in electrophysiological experiments that the blockers of 7- subunits increased the EPSP amplitude; 7- specific labeling was found on the somata and processes of small ganglionic cells surrounding non-stained principal ganglionic neurons. It allowed us to propose that 7- containing nAChRs were localized non-synapticaly and could be involved in modulation of synaptic transmission.

Key words: inferior mesenteric ganglion, nicotinic acetylcholine receptor, subunit composition, specific antibodies.

Размещено на Allbest.ru


Подобные документы

  • Характеристика компонентів адгезивної міжклітинної комунікації олігодендроцитів та нейронів. Класифікація неоплазій, що виникають у головному мозку ссавців. Патологія міжклітинних контактів гліоцитів і нейронів при дисембріогенетичних новоутвореннях.

    курсовая работа [2,3 M], добавлен 31.01.2015

  • Формування уявлень про фауну черепашкових амеб в водоймах різного типу. Вивчення видового складу та структурних показників корененіжок (Testacea, Rhizopoda), в різних типах водойм верхів’я річки Ріки та порівняння їх з угрупованнями мезозообентосу.

    курсовая работа [957,4 K], добавлен 12.09.2013

  • Вектор pREP4 - розроблений для конститутивної експресії високого рівня, завдяки промотору CMV або RSV. Схема, яка використовується для клонування. Структура полілінкера. Вектор pBudCE4.1, який служить для експресії двох генів у клітинних ліній ссавців.

    реферат [768,7 K], добавлен 15.12.2011

  • Поняття і рівні регуляції експресії генів. Їх склад і будова, механізм формування і трансформування. Транскрипційний рівень регуляції. Приклад індукції і репресії. Регуляція експресії генів прокаріот, будова оперону. Огляд цього процесу у еукаріот.

    презентация [1,7 M], добавлен 28.12.2013

  • Нервова тканина, нейрон, класифікація нейронів та їх функції. Нейронна теорія будови нервової системи. Рефлекторна теорія діяльності нервової системи. Рефлекторне кільце, типи рецепторів. Нервові центри та їхні властивості. Гальмування умовних рефлексів.

    контрольная работа [22,2 K], добавлен 16.07.2010

  • Аналіз природних умов Чернігівщини. Видовий склад ссавців в Чернігівській області. Відомості про чисельність і біологію основних видів ссавців. Звірі лісових масивів і зелених насаджень, відкритих просторів, водойм. Дикі звірі, акліматизовані в Україні.

    курсовая работа [65,0 K], добавлен 21.09.2010

  • Розгляд структурної та функціональної організації центральної нервової системи комах. Фізіологія центральних нейронів, основні структурні їх особливості. Рецепція й поведінка комах. Визначення субмікроскопічної організації клітинних тіл нейронів.

    курсовая работа [65,2 K], добавлен 19.11.2015

  • Характеристика нижнього та верхнього відділів крейдяного періоду Землі, його тривалість та особливості, зміни клімату, розвиток рослин та їх поширення. Поява нових видів черевоногих молюсків, плезіозаврів і пліозаврів. Причини вимирання динозаврів.

    реферат [20,1 K], добавлен 23.06.2010

  • Аналіз генетичних особливостей мікроорганізмів. Нуклеоїд як бактеріальна хромосома. Плазміди та епісоми як позахромосомні фактори спадковості. Практичне використання знань з генетики бактерій. Способи генетичної рекомбінації. Регуляція експресії генів.

    курсовая работа [1,8 M], добавлен 28.03.2014

  • Хагальна характеристика ряду "хижі" та їх значення в природі й житті людини. Дослідження особливостей та характеристика видового складу фауни хижих ссавців околиць м. Чернігова: родина Куницеві (рід видра, куниця, тхір), родина собачі (рід лисиця).

    курсовая работа [1,8 M], добавлен 21.09.2010

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.