Как показано в табл. 1.5 аскорбиновая кислота является мощным водорастворимым антиоксидантом, способным удалять/нейтрализовать ряд реактивных видов кислорода, таких как гидроксил, алкоксил, пероксид, супероксид-анион, гидроксильный радикал и реакционных азотных радикалов, таких как диоксид азота, нитроксид, пероксонитрит в очень низких концентрациях [6].

Таблица 1.5

Активные частицы удаляемые аксорбиновой кислотой

Химические частицы	Реакционная активность (M-1·с-1)
Реакционные кислородные частицы
Гидроксил-радикал	1.1 · 1010
Алкоксил-радикал	1.6 · 109
Пероксил-радикал	1.2 · 106
Супероксид-анион/ гидроперокси-радикал	1.0 · 105
Реакционные азотные частицы
Оксид азота (III)/Оксид азота (IV)	1.2 · 109
Пероксинитрид/Пероксиазотная кислота	235

Кроме того аскорбиновая кислота регенерирует другие антиоксиданты, такие как альфа-токофероксил, урат и ?-каротин катион-радикал из их радикальных видов [66]. Таким.образом, аскорбиновая кислота действует как ко-антиоксидант для ?-токоферола, превращая ?-токофероксил радикал в ?-токоферол и помогая предотвратить получение ?-токофероксил-радикала в промежуточных реакциях образования пероксидов [67].

Эти виды радикалов высоко реактивны и могут запускать реакции окисления липидов. Возникает вопрос, может ли витамин С действовать как прооксидант в условиях in vivo? Ответ очевиден - "нет". Как считается, эти реакции легко протекают in vitro, их течение in vivo служит предметом споров, связанных с доступностью каталитически активных свободных ионов металлов in vivo [66]. В биологических системах железо не является свободно доступным, оно связано с белками такими как: трансферрин, гемоглобин и ферритин. Мобилизация железа из этих биомолекул необходима прежде чем они смогут катализировать окисление липидов. Далее, концентрации ионов свободных металлов in vivo , как полагают, очень низки как в отношени железа, так и др. маталлов, т.к. они секвестрированы метал связывающими белками [66]. Другой фактор, который может влиять на прооксидантные или антиоксидантные свойства аскорбиновой кислоты - это её концентрациях. Данные in vitro подтвержают, что низкие концентрации аскорбиновой кислоты действуют как прокисдант, и как антиоксидант при высоких концентрация [67]. Более того, показано, что большие дозы экзогенного железа (200 мг) и аскорбиновой кислоты (75 мг) способствуют высвобождению железа от связывающих его белков, а также усиливают in vitro окисление липидов в сыворотке морских свинок. Эти данные подтверждают гипотезу, согласно которой высокое потребление железа и аскорбиновой увеличивает in vivo окисление липидов из LDL23, а следовательно, может увеличивать риск атеросклероза [65]. Однако в другом исследовании продемонстрировано, что в плазме перегруженной железом, аскорбиновая кислота действует как антиоксидант и предупреждает оксидативное повреждение липидов in vivo [68].

1.2. Экспериментальная часть

1.2.1 Получение комплексов (общая методика)

Ацетат меди (СН3СОО)2Сu·Н2О (0,01 моль) и органическое вещество - потенциальный лиганд (0,02 моль), растворяют в минимальном количестве метанола и нагревают. Затем горячие растворы сливают. Выделившийся комплекс отфильтровывают, промывают (порциями по 10 мл) спиртом и 2 раза гексаном и сушат при температуре 50-55 оС.



1.2.2 Оценка восстановительных свойств аскорбиновой кислоты

С целью визуальной оценки восстановительной способности аскорбиновой кислоты были проведены пробирочные опыты.

В качестве объектов исследования были использованы хелатные комплексы меди (II), полученные на основе ацетилацетона - 1 и ацетоуксусного эфира - 2, салицилового альдегида - 3 и его оксима - 4, аминоуксусной кислоты (глицина) - 5 и диметилглиоксима - 6, относящиеся по характеру координационного узла к трём типам: CuO4 (1 - 3), CuN2O2 (4, 5). CuN4 (6). А также комплексы меди с природными ?-аминокислотами: ?-аланином (7) и аспарагином (8), и соли меди: CuSO4•5H2O, Cu(NO3)2•3H2O, (CH3COO)2Cu•H2O и аммиакат гидроксида меди [Cu(NH3)4](OH)2.

В результате реакций комплексов 1 - 6 в метаноле выделяется металлическая медь в виде зеркала или мелкодисперсного порошка коричневого цвета, что в последнем случае подтверждается индифферентностью порошка к раствору НCl и растворением его в концентрированной НNO3 с выделением бурого газа.

Взаимодействие аминокислотных комплексов с H2Asс. Реакционную смесь, полученную сливанием раствора 1 ммоль комплекса в 5 мл воды и 5 мл раствора H2Asc (С = 0,1 моль/л) нагревают до кипения, затем охлаждают и центрифугированием отделяют выделившийся практически с количественным выходом мелкодисперсный порошок меди.

При проведении этих реакций при комнатной температуре выделение металлической меди происходит только в случае комплекса 8.

Взаимодействие солей меди с H2Asc. Водные растворы соли (С = 0,5 моль/л) и аскорбиновой кислоты (С = 0,1 моль/л) в объёмном соотношении 1 : 1; 1 : 2 и 1 : 4 выдерживали при комнатной температуре до обесцвечивания и выделения металлической меди, которую отделяют центрифугированием (таблица 1.7).

Аналогично осуществлено взаимодействие H2Asc с аммиачным раствором гидроксида меди.

1.2.3 Потенциометрическое исследование аскорбиновой кислоты

Для проведения измерений собирают трехэлектродную ячейку, состоящую из рабочего и вспомогательного электродов и электрода сравнения. В качестве вспомогательного электрода обычно используют платиновую проволоку. Электрод сравнения - хлорсеребряный, вспомогательный электрод - медная проволока.

Перед экспериментом все электроды и ячейку необходимо тщательно промыть.

Исследуемый электрод может иметь разную форму: флажка, стержня. Нерабочую часть его поверхности изолируют полистиролом (используют раствор полистирола в химически чистом толуоле) или другим полимером. Часто для этих целей применяют эпоксидный клей. Стержневые электроды можно запрессовывать в тефлоновую оправку, оставляя открытым торец - рабочую поверхность.

При выборе изолирующего полимера необходимо проявлять определенную осторожность и предварительно убедиться в том, что он не растворяется в исследуемом растворе.

Видимую поверхность рабочего электрода (площадь) определяют с помощью штангенциркуля; более грубо она может быть определена с помощью линейки.

Перед опытами электрод аккуратно зачищают тонкой наждачной бумагой, обезжиривают этиловым спиртом и многократно промывают дистиллированной водой.

Собранную ячейку заполняют исследуемым раствором, выводы электродов просоединяют к соответствующим клеммам потенциостата, который предварительно (за 30 минут до начала) включают в сеть.

Обычно значение стационарного потенциала устанавливается примерно через 5-10 минут после погружения электрода в раствор. Это значение фиксируется.

Для снятия зависимости тока от потенциала (тумблер "ПОТЕНЦИАЛ - ТОК" - в положении "ПОТЕНЦИАЛ") в режиме поддержания постоянной величины тока поляризации (гальваностатический режим).

На блоке задатчика потенциала (БЗП) потенциостата П-5827М перед подачей напряжения на ячейку необходимо установить заданное значение тока поляризации и потенциостат приводится в режим "ЯЧЕЙКА ВКЛ.".

Задаваемая величина тока поляризации в мА определяется произведением установленного начального напряжения в вольтах (U1 или U2 блока БЗН) на величину множителя тока, установленную переключателем "МНОЖ. ТОКА, мА/V на блоке БПУ. Требуемая полярность ("+" или "-") выставляется на источнике начального напряжения.

Подача напряжения на ячейку производится установкой переключателя "РОД РАБОТЫ" на блоке БПУ в положение "ТОК" и "ЯЧЕЙКА ВКЛ.".

Для регистрации и измерения потенциала рабочего электрода необходимо подключить вход высокоомного вольтметра (БВВ-1) к рабочему электроду и электроду сравнения электрохимической ячейки установкой переключателя "РОД РАБОТЫ" БВВ-1 в положение "U раб.".

По окончании измерений поляризация отключается и в течение примерно 10 минут можно наблюдать смещение потенциала в обратную сторону до достижения стационарного значения. Полученное значение может на 5-10 мВ отличаться от начального для анодной кривой, что обычно является следствием появления в растворе некоторого количества ионов металла. Поэтому перед проведением последующих измерений необходимо сменить раствор. Катодную кривую получают перед анодной.

Полученные результаты обрабатывают таким образом, чтобы получилась поляризационная кривая в координатах: Е - lg i (мА/см2).

1.3 Результаты и их обсуждение

1.3.1 Результаты и обсуждение визуального исследования

При взаимодействии с H2Asc соли меди (II) восстанавливаются до соединений меди (I). Однако, вследствие изменения окислительно-восстановительного потенциала ионов меди (II) за счёт хелатирования, Н2Asc способна восстанавливать их до металлической меди [73].

Таблица 1.6

Результаты реакций H2Asc с хелатными комплексами

Растворитель	Комплекс
	1	2	3	4	5	6	7	8
H2O	+		+	+	+		+	+
CH3OH	+	+	+	+	+	+	+	+
C2H5OH	+	+			+	+	+	+
"+" медь выделяется, " " медь не выделяется

В воде образование меди происходит при восстановлении комплексов 1, 3 - 5, 7, 8, а в этаноле - 1, 2, 5 8.

Различие в восстановлении Сu (II) до Сu (I) или Сu0, по-видимому, связано с изменением электродных потенциалов Сu2+/Сu и H2Asc/DАsc, а также обусловлено природой растворителя и лиганда, а, возможно, и с различной растворимостью комплексов в воде, метиловом и этиловом спиртах.

При проведении этих реакций при комнатной температуре выделение металлической меди происходит только в случае комплекса 8 (аспарагин).

Таблица 1.7

Взаимодействие H2Asc с солями и аммиакатом гидроксида меди

Соединение меди	Объём раствора H2Asc, мл
	2,5	5	10
	Продолжительность реакции, ч
CuSO4•5H2O	3	2	1
Cu(NO3)2•3H2O	4	2	1
(CH3COO)2Cu•H2O	20	5	3
[Cu(NH3)4](OH)2	20	10	8

Таким образом, показана возможность восстановления аскорбиновой кислотой соединений меди (II) различной природы до меди металлической.

H2Asc в процессе биохимических реакций обратимо окисляется до дегидроаскорбиновой кислоты (DАsc). В растениях и животных тканях катализ этой реакции осуществляется соответственно медьсодержащими оксидазой и цитохромами. При этом, как установлено при изучении реакции окисления H2Asc ионами Cu2+, происходит промежуточное образование малоустойчивого аскорбинатного комплекса хелатного типа CuHAsc+ (lg K = 1,57), который в процессе диспропорционирования разрушается с образованием соединений меди (I) и DАsc [71].

H2Asc способна восстанавливать многие ионы до более низких степеней окисления, а ионы металлов (Hg2+, Ag+, Pd2+, Au3+ [72-74]) с положительными значениями электродных потенциалов - до нульвалентного состояния. Что и было продемонстрировано в данном опыте.

1.3.2 Результаты и обсуждение потенциометрических исследований

По окончании исследования поведения аскорбиновой кислоты на потенциостате в гальваностатическом режиме при варьировании концентрации и рН следующие данные (таблица 1.7- 1.9).

По этим данным были построены поляризационные кривые в координатах Е - lg i.

Перейдем к их анализу.

Для лучшего описания характера кривых рассмотрим два типа графиков:

1) зависимость величины потенциала от концентрации аскорбиновой кислоты при одном значении рН;

2) зависимость величины потенциала от рН при одном значении концентрации.

Рассмотрим первый тип графиков.

При значении рН = 1 и рН = 2 (рис 1.4, 1.5) и в катодном и в анодном режимах, поляризационные кривые расположены близко друг к другу, так что практически сливаются (особенно при значении рН = 1). Окислительные процессы протекают без поляризации и имеют тенденцию выхода на предельный ток. В анодном режиме эта зависимость строже, чем в катодном, где некоторые отклонения всё-таки наблюдаются.

При значении рН = 3,2 (рис. 1.6) - естественная кислотность аскорбиновой кислоты - наблюдаются выходы на предельный ток при всех значениях концентраций. С повышением концентрации возрастает значение предельного тока. Прогнозируемая величина предельного тока зависит от концентрации. Наличие предельного тока свидетельствует о затруднениях в диффузионных процессах. Наблюдая за характером кривых можно увидеть следующую закономерность. При минимальной из исследуемых концентрации (0,01 М) поляризации нет, т. е. кривая идёт резко вверх и выходит на предельный ток. При концентрации 0,05М на кривой можно наблюдать поляризацию, об этом свидетельствует лёгкий изгиб в начале кривой. При концентрации 0,01 М наблюдается явная волна, свидетельствующая о смене природы восстанавливающейся частицы.

При рН = 4 (рис. 1.7) в анодном и катодном режимах кривые имеют зависимость, в целом напоминающую экспоненциальную, однако в катодном режиме появились некоторые изгибы. В катодном режиме наблюдается сначала резкое возрастание значения тока, затем изгиб, символизирующий, вероятно, выход на предельный ток, а затем вновь наблюдается резкое возрастание плотности тока. Явно прослеживается следующая закономерность: с увеличением концентрации возрастает значение предельного тока.

Та же закономерность прослеживается и для других кривых (рН = 5, 7, 9, 11).

Таблица 1.8

Значения потенциалов меди в 0,01 М аскорбиновой кислоте

lg i	pH 1	pH 2	pH 3,2	pH 4	pH 5	pH 7	pH 9	pH 11
	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод
0	60	40	80	30	20	30	10	-9	-10	-10	10	30	30	40	-70	-90
0,6626	-30	80	60	80	-800	560	-390	365	-140	170	-910	150	-110	160	-1230	160
0,9637	-240	90	40	110	-1260	1000	-1450	590	-270	260	-1380	270	-220	250	-1340	270
1,2647	-670	105	-30	130	-2320	1410	-1730	930	-450	400	-1580	440	-390	400	-1440	420
1,4408	-700	120	-750	160	-4100	1740	-1850	1330	-570	560	-1720	650	-600	600	-1530	600
1,5657	-720	130	-780	180		2260	-1970	1630	-600	720	-1830	880	-1250	780	-1590	770
1,6627	-740	140	-810	190		2750	-2050	1940	-660	880	-1930	1050	-1530	970	-1650	940
1,7416	-750	145	-830	200		3420	-2160	2270	-870	1040	-2010	1250	-1690	1140	-1700	1070
1,8667	-770	160	-880	230		4040	-2210	2880	-980	1350	-2231	1630	-1880	1500	-1800	1400
1,9636	-790	170	-920	260			-2300	3420	-1100	1660	-2420	2010	-2050	1950	-1890	1600
2,0776	-810	190	-980	290			-2550		-1150	2120	-2700	2540	-2220	2210	-2010	2050
2,1678	-820	205	-1040	320					-1560	2530	-3080	3070	-2440	2940	-2130	2580
2,2647	-850	225	-1130	370					-1850	3130	-3480	3800	-2700	3620	-2270	3270
2,3786	-870	250	-1300	430					-2340	3960			-3140		-2450	4440
2,4687	-900	280	-1500	500					-2950	4820			-3220		-2670	5480
2,5657	-920	320	-1720	590					-3590	5970			-4000		-2940

Таблица 1.9

Значения потенциалов меди в 0,05 М аскорбиновой кислоте

lg i	pH 1	pH 2	pH 3,2	pH 4	pH 5	pH 7	pH 9	pH 11
	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод
0	70	60	90	20	50	-60	20	20	20	10	-10	-50	-60	-80	-30	-180
0,6626	-600	90	50	80	-850	140	-40	180	-30	60	-140	30	-770	70	-720	90
0,9637	-650	100	5	120	-1090	210	-140	260	-90	90	-780	80	-1050	110	-1220	120
1,2647	-690	110	-730	160	-1470	350	-980	390	-270	135	-1110	130	-1310	170	-1390	170
1,4408	-720	120	-780	200	-1880	570	-1200	530	-1370	170	-1210	170	-1380	230	-1450	240
1,5657	-740	130	-820	220	-2250	610	-1340	650	-1460	200	-1370	200	-1430	290	-1500	290
1,6627	-750	135	-860	250	-2570	730	-1490	770	-1510	220	-1470	230	-1470	350	-1550	350
1,7416	-760	140	-890	270	-2830	850	-1560	880	-1550	260	-1520	260	-1510	400	-1590	410
1,8667	-780	150	-960	320	-3480	1100	-1670	1110	-1630	310	-1590	310	-1570	490	-1660	520
1,9636	-800	160	-1050	360	-4090	1330	-1770	1330	-1700	370	-1650	360	-1620	590	-1720	640
2,0776	-820	180	-1090	430		1670	-1900	1660	-1790	440	-1720	440	-1690	730	-1810	800
2,1678	-840	190	-1350	490		2030	-2015	1980	-1880	515	-1790	510	-1760	860	-1890	980
2,2647	-860	210	-1620	590		2460	-2180	2410	-1990	620	-1880	770	-1830	1020	-1980	1240
2,3786	-880	230	-1900	730		3120	-2360	3030	-2130	870	-1990	830	-1920	1310	-2110	1590
2,4687	-900	250	-2070	880		3810	-2540	3650	-2260	930	-2090	920	-2010	1580	-2230	1960
2,5657	-930	280	-2240	1090		4720	-2710	4470	-2430	1130	-2220	1130	-2120	1920	-2390	2440

Таблица 1.10

Значения потенциалов меди в 0,1 М аскорбиновой кислоте

lg i	pH 1	pH 2	pH 3,2	pH 4	pH 5	pH 7	pH 9	pH 11
	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод	Катод	Анод
0	80	80	20	20	90	40	40	70	-10	-70	-40	-60	-20	-110	-100	-100
0,6626	-600	100	-710	90	-60	120	-10	90	-870	40	-730	40	-890	50	-1160	50
0,9637	-640	110	-770	120	-180	170	-120	130	-1000	90	-800	80	-1200	110	-1250	120
1,2647	-690	120	-830	160	-1240	230	-340	190	-1280	140	-990	120	-1270	150	-1380	170
1,4408	-720	130	-910	200	-1600	295	-1140	240	-1340	170	-1240	150	-1340	180	-1440	210
1,5657	-740	145	-970	230	-1850	360	-1360	295	-1380	190	-1280	160	-1380	200	-1480	240
1,6627	-750	150	-1090	260	-2220	420	-1430	345	-1420	220	-1310	190	-1420	225	-1510	270
1,7416	-770	160	-1140	280	-2590	480	-1490	395	-1450	230	-1340	205	-1450	245	-1530	300
1,8667	-790	170	-1280	330	-2970	600	-1560	490	-1500	270	-1380	240	-1500	290	-1590	350
1,9636	-800	190	-1440	370	-3320	710	-1620	580	-1560	310	-1420	280	-1550	340	-1640	410
2,0776	-830	200	-1590	440	-3840	870	-1700	720	-1620	380	-1470	340	-1600	410	-1700	490
2,1678	-845	210	-1710	490	-4370	1030	-1770	860	-1680	420	-1510	395	-1650	480	-1750	570
2,2647	-860	220	-2030	590	-4880	1240	-1870	1040	-1750	500	-1560	470	-1710	580	-1810	670
2,3786	-890	230	-2410	960	-5670	1530	-2010	1320	-1850	610	-1640	580	-1790	720	-1890	830
2,4687	-910	250	-2700	1290		1850	-2140	1600	-1940	730	-1700	690	-1850	860	-1960	980
2,5657	-940	270	-2940	1610		2250	-2290	1955	-2050	880	-1780	850	-1940	1040	-2060	1180

Но при сравнении этих графиков между собой прослеживается следующая зависимость: с ростом рН от 1 до 3,2 кривые всё более явно отличимы друг от друга, т. е. если при рН = 1 они практически сливаются, то при рН = 3,2 они расположены на самом широком расстоянии друг от друга и имеют самые явные выходы на предельный ток. При дальнейшем подщелачивании от 3,2 до 7 (включительно) значения предельных токов растёт, а поляризация уменьшается, причём выход на предельный ток наблюдается уже только при минимальной из исследуемых концентраций (0,01 М). После значения рН = 7 закономерность меняется вновь, т. е. значение предельного тока вновь падает, а расстояние между кривыми и поляризация растёт. Хотя явный выход на предельный ток всё также наблюдается только при минимальной из исследуемых концентраций.

Просмотрев все графики, улавливается следующая закономерность: с ростом концентрации растёт предельный ток. Однако для кислой среды, т. е. рН 1 и 2 наблюдается обратный характер зависимости. При подкислении аскорбиновой кислоты до рН 2 в катодном режиме можно увидеть следующее: при максимальной исследуемой концентрации наблюдается лишь лёгкий изгиб, символизирующий поляризацию. При концентрации 0,05 М наблюдается своеобразная волна, характеризующая смену природы восстанавливающейся частицы, а при концентрации 0, 01 М, эта волна располагается ещё выше. Как уже говорилось ранее, эти волны, вероятно, символизируют выход на предельный ток, и в данном случае с увеличением концентрации предельный ток в отличие от предыдущих случаев наоборот снижается.

При рН = 1 наблюдается аналогичная картина, однако кривые концентраций 0,1 М и 0,05 М практически сливаются друг с другом, а кривая с концентрацией 0,01 М имеет явную волну.

Интересной особенностью графиков при рН = 7 является то, что на кривой соответствующей концентрации аскорбиновой кислоты 0,1 М наблюдается сначала лёгкий изгиб, соответствующий поляризации, а затем волна, характеризующая выход на предельный ток. Обычно на всех остальных кривых присутствует либо то, либо другое. Т. е. график кривых при рН, соответствующем рН = 7 опять же является изображением смены зависимостей.

На всех графиках анодного процесса кривые идут плавно без изгибов и волн. Это свидетельствует лишь о том, что отсутствует поляризация, и все процессы идут без затруднений. Наличие этих кривых свидетельствует о способность аскорбиновой кислоты окисляться.



а б

Рис. 1.4. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 1 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М



а б

Рис. 1.5. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 2 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М



а б

Рис. 1.6. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 3,2 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М



а б

Рис. 1.7. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 4 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М



а б

Рис. 1.8. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 5 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М



а б

Рис. 1.9. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 7 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М



а б

Рис. 1.10. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 9 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М



а б

Рис. 1.11. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые, полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при рН 11 с концентрациями: 1 - 0,01 М, 2 - 0,05 М, 3 - 0,1 М

Рассмотрим графики зависимости характера поляризационных кривых от значений рН раствора при одной концентрации.

Выше показано, что переломными значениями рН (в которых меняется закономерность) стали рН = 3,2 и рН = 7. Ту же закономерность можно проследить и на графиках зависимости величины потенциала от различных рН при одном значении концентрации. А именно, при значении рН от 1 до 3,2 с ростом значения lg i, растёт и электродный потенциал (графически увидно, чем больше значение рН, тем больше поляризация). Причём на кривой, полученной при рН = 3,2 наблюдается максимальная поляризация. После значения рН = 3,2 потенциалы кривых уменьшаются, т. е. уменьшается и поляризация. И при значении рН = 7 закономерность вновь меняется в первоначальную сторону, хотя и с меньшей интенсивностью.

При концентрации равной 0,01 М, т. е. при минимальной из исследуемых концентраций, в большинстве случаев (преимущественно в анодном режиме) наблюдается явный выход на предельный ток, и эти кривые имеют наибольшую поляризацию.

При значении концентрации равной 0,05 М, поляризация кривых несколько меньше, чем в первом случае, а выходы на предельный ток зафиксированы только у кривой с pH = 3,2, т. е. у кривой с наибольшим наклоном. Причём в катодном режиме этот выход выражен более явно.

При значении концентрации, равной 0,1 М, кривые расположены близко друг к другу, поляризация наименьшая, и наименьшие потенциалы, а выход на предельный ток зафиксирован в одном случае: при рН = 3,2 в катодном режиме.

Из литературных данных [76] известно, что в щелочной среде при значениях рН = 7,6 и выше происходит самоокисление аскорбиновой кислоты. В проведенном эксперименте значение рН = 7,6 не было проанализировано, но оно находится в промежутке исследуемых значений 7 - 9. рН = 7 последнее из исследуемых значений меньшее 7,6, и возможно, поэтому на графиках, после значения pH = 7 происходит смена закономерностей.

При исследовании кривых в катодном режиме наблюдается несколько участков кривой: 1 - резкое возрастание предельного тока; 2 - волна; 3 - резкое увеличение предельного тока. Предположительно, на первом - прямолинейном - участке восстанавливается одна из форм аскорбиновой кислоты; практически прямолинейный участок кривой, составляющий последний отрезок после скачка электродного потенциала соответствует тафелевской прямой и представляет собой восстановление ионов водорода.

Практически на всех изученных катодных кривых имеют место волны, хотя их закономерность и меняется в зависимости от рН среды. Как уже упоминалось выше, наличие волны, предположительно свидетельствует о предельном токе и его величина зависит от концентрации. Однако в кислой среде при увеличении концентрации предельный ток падает, а в щелочной среде растёт.

Водные растворы аскорбиновой кислоты обладают сильным восстановительным действием. Важнейшим свойством её является способность к обратимым окислительно-восстановительным превращениям в живых организмах, в результате которых аскорбиновая кислота (H2Asc) переходит в дегидроаскорбиновую (DAsc) по схеме:

Предположительно, исходя из указанных выше равновесий, в щелочной среде будет накапливаться дегидроаскорбиновая кислота (DAsc), т. к. добавление щёлочи будет смещать равновесие в сторону продуктов реакции. В кислой среде будет накапливаться аскорбиновая кислота, т. к. при дополнительном введении количества ионов водорода равновесие смещается в сторону исходных веществ.

При рН < 3,2 в растворе находятся в избытке ионы водорода, а при рН >3,2 - избыток ионов ОН?, т. к. значение рН аскорбиновой кислоты корректировалось введением щёлочи. При рН = 3,2 естественный фон раствора аскорбиновой кислоты. В проведённых исследованиях отмечена явная зависимость предельного тока от рН среды. А именно: предельный ток максимален в кислой среде (рН = 1 и рН = 2), а минимален при рН = 3,2, т. е. при естественном фоне. Несмотря на то, что концентрация ионов ОН? сильно различается (10?4 - 10?9), предельный ток остается неизменным, т. е. ионы ОН? не являются частицами, обусловливающими предельный ток.

Аналогично в кислой среде концентрация ионов водорода Н+ хотя и отличается только на один порядок (10?1 - 10?2), но поляризационные кривые буквально сливаются друг с другом, а значит и в этом случае, ионы Н+ не влияют на величину предельного тока.

Таким образом, на величину предельного тока может влиять лишь то вещество, которое накапливается в ходе окислительно-восстановительных процессов.

Остаётся неразрешённым вопрос: что именно окисляется и что восстанавливается на электродах. На аноде явно окисляется аскорбиновая кислота, т. к. её стандартный электродный потенциал (0,18 В) меньше стандартного потенциала меди (0,34 В). А на катоде можно предположить, что в начале восстанавливается аскорбиновая кислота, а затем восстанавливаются ионы водорода Н+. Хотя достоверных данных, подтверждающих это, в литературе не найдено.



а б

Рис. 1.12. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые,

полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при концентрациии 0,01 М:

1 - рН 1; 2 - рН 2; 3 - рН 3,2; 4 - рН 4; 5 - рН 5; 6 - рН 7; 7 - рН 9; 8 - рН 11.



а б

Рис. 1.13. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые,

полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при концентрации 0,01 М:

1 - рН 1; 2 - рН 2; 3 - рН 3,2; 4 - рН 4; 5 - рН 5; 6 - рН 7; 7 - рН 9; 8 - рН 11.



а б

Рис. 1.14. Гальваностатические поляризационные катодные (а) и анодные (б) кривые,

полученные на медном электроде в растворе аскорбиновой кислоты при концентрации 0,01 М:

1 - рН 1; 2 - рН 2; 3 - рН 3,2; 4 - рН 4; 5 - рН 5; 6 - рН 7; 7 - рН 9; 8 - рН 11.

витамин аскорбиновый кислота фермент

2. БЕЗОПАСНОСТЬ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ

При выполнении исследовательских работ в лабораторных условиях используется значительное количество материалов, характеризующихся горючими свойствами и токсичным действием на организм. Поэтому необходимо предусмотреть оптимальные условия работы: освещённость, вентиляцию и т. д., так как именно они определяют микроклимат в лаборатории, что позволяет значительно повысить производительность труда.

Также следует учесть, что при работе с электроприборами и газовыми горелками всегда существует вероятность возникновения пожара, поэтому нужно предусмотреть меры по предотвращению пожароопасных ситуаций, а в случае их возникновения - наиболее рациональные действия по ликвидации чрезвычайных ситуаций.

Хотя исследуемые вещества достаточно безопасны (а аскорбиновая кислота даже полезна), тем не менее в ходе эксперимента были использованы и другие вещества, которые достаточно токсичны (концентрированные кислоты и щёлочи)

2.1 Анализ документации по безопасности жизнедеятельности

Эффективный и безопасный труд возможен только в том случае, если производственные условия на рабочем месте отвечают всем требованиям международных стандартов в области охраны труда.

В системе обеспечения безопасности жизни и здоровья работников в процессе их трудовой деятельности основная роль принадлежит нормативным правовым актам по охране труда. Нормативные требования по охране труда и их соблюдение по существу являются фундаментом в создании здоровых и безопасных условий труда. Обеспечение единства таких требований -- важная государственная задача. Поэтому статьей 3 Основ законодательства РФ об охране труда одним из основных направлений государственной политики в области охраны труда предусмотрено установление единых нормативных требований для предприятий, учреждений и организаций всех форм собственности независимо от сферы хозяйственной деятельности и ведомственной подчиненности.

Министерство труда РФ - это координационный центр нормативного обеспечения по охране труда, а созданная при этом Министерстве Федеральная инспекция труда (Рострудинспекция) обязана обеспечить надзор и контроль за соблюдением нормативных требований по охране труда и за реализацией в целом постановления Правительства РФ, используя предоставленные инспекции полномочия.

Согласно постановлению Правительства РФ от 12 августа 1994 г. № 937 «О государственных нормативных требованиях по охране труда в РФ» нормативные правовые акты по охране труда подразделяются на следующие виды (табл.2.1).

Таблица 2.1

Правовые акты по охране труда

Наименование нормативного правового акта	Органы, утверждающие нормативные правовые акты
полное	Сокра-щённое
1	2	3
Государственные стандарты системы стандартов безопасности труда	ГОСТ Р ССБТ	Госстандарт России, Минстрой России
1	2	3
Отраслевые стандарты системы стандартов безопасности	ОСТ ССБТ	Федеральные органы исполнительной власти
Гигиенические нормативы	ГН
Санитарные правила и нормы	СаНПиН
Строительные нормы и правила	СНиП	Минстрой РФ
Правила безопасности	ПБ	Федеральные органы надзора в соответствии с их компетенцией
Правила устройства и безопасной эксплуатации	ПУБЭ
Инструкции по безопасности	ИБ
Правила по охране труда межотраслевые	ПОТ М	Минтруд РФ
Межотраслевые организационно-методические документы (положения, методические указания, рекомендации)		Минтруд РФ, Федеральные органы надзора
Правила по охране труда отраслевые	ПОТ О	Федеральные органы исполнительной власти
Типовые отраслевые инструкции по охране труда	ТОИ	Федеральные органы исполнительной власти
Отраслевые организационно-методические документы (положения, методические указания, рекомендации)

В ГОСТ 1.26--77 установлен порядок разработки и согласования требований безопасности со стандартами в технических условиях. Задачей ССБТ является стандартизация требований безопасности труда и включение требований безопасности труда в стандарты и технические условия.

Структура ССБТ включает пять подсистем стандартов (12.0--12.4).0. Организационно-методические стандарты основ построения систем.

Системы устанавливают структуру, задачи, цели и области распространения ССБТ, терминологию в области безопасности труда, классификацию опасных и вредных производственных факторов, методы оценки безопасности труда.

1. Стандарты требований и норм по видам опасных и вредных производственных факторов устанавливают предельно допустимые значения нормируемых параметров (вид, характер действия, предельно допустимые значения, методы контроля), а также требования безопасности при работе с вредными веществами. Они содержат также стандарты на общие требования по обеспечению пожаро- и взрывобезопасности, электробезопасности, радиационной, вибрационной и биологической безопасности, а также требования к защите от шума, инфра- и ультразвука, электромагнитных полей, вредных веществ. В этих стандартах рассмотрены требования к освещению и воздушной среде.

2. Стандарты требований безопасности к производственному оборудованию устанавливают общие требования безопасности по всем группам производственного оборудования, а также к отдельным группам оборудования, обладающим повышенной опасностью (разрабатываются в первую очередь). В них определены требования безопасности к конструкции оборудования в целом и его компонентам в отдельности, а также методы контроля выполнения требований безопасности.

3. Стандарты требований безопасности к производственным процессам устанавливают общие требования к производственным процессам и конкретные к отдельным группам технологических процессов, к размещению оборудования и организации рабочих мест, режимам работы технологического оборудования, рабочим местам и режимам труда, системам управления, требования к применению защитных средств, а также к методам контроля за выполнением требований безопасности.

4. Стандарты на требования к средствам защиты работающих классифицируют все средства защиты и устанавливают требования безопасности к эксплуатационным, конструктивным и гигиеническим показателям отдельных классов и видов защитных устройств, а также методам их контроля и оценки защиты. В эти стандарты входят требования к вспомогательным устройствам, защитным и предохранительным ограждениям, блокировке, сигнализации, надежности и прочности, к средствам защиты рук, головы, органов дыхания и слуха и т. д., к цветам и знакам сигнализации и др.

Вопросы безопасности обязательно входят в технические условия, в которых в разделе «Требования безопасности» необходимо регламентировать такие вопрос, как: требования безопасности к конструкции; требования по созданию санитарно-гигиенических условий; требования электро-, пожаро- и взрывобезопасности и другие.

2.2 Техника безопасности в лаборатории

При работе в химической лаборатории всегда нужно помнить, что химические соединения в той или иной мере ядовиты и огнеопасны. Поэтому при работе с ними необходимо соблюдать: чистоту, аккуратность и внимательность, избегать их попадания на руки, не трогать лицо и глаза руками, после работы перед едой тщательно мыть руки, избегать использования открытого огня. Все эти требования и ряд других закреплены в инструктаже по технике безопасности, и каждый работающий в лаборатории должен ознакомиться с правилами безопасности и обязан выполнять их.

Химические вещества категорически запрещается пробовать на вкус. Нюхать какие бы то ни было вещества нужно с осторожностью, не наклоняясь над сосудом и не вдыхая полной грудью, а направляя к себе пары или газ движением руки.

В силу того, что работа связана с необходимостью держать в лаборатории большое количество концентрированных кислот и щелочей, то следует помнить, что переливать эти вещества из больших бутылей в меньшие нужно через сифон и воронку в специальных помещениях. Проделывающий эту операцию сотрудник обязан пользоваться защитными очками, резиновыми перчатками и фартуком. При разбавлении концентрированной серной кислоты, при смешивании концентрированных серной и азотной кислот, и вообще при смешивании веществ, сопровождающихся выделением тепла, необходимо пользоваться тонкостенной химической или фарфоровой посудой во избежании трещин.

Работать одному в лаборатории категорически запрещается, так как в ситуации несчастного случая некому будет оказать помощь пострадавшему и ликвидировать последствия аварии. Во время работы в лаборатории необходимо соблюдать чистоту, тишину, порядок и правила техники безопасности, так как поспешность и небрежность часто приводят к несчастным случаям с тяжелыми последствиями. Категорически запрещается в лаборатории курить, принимать пищу, пить воду.

Опыты нужно проводить только в чистой химической посуде. После окончания эксперимента посуду сразу же следует мыть. В процессе работы необходимо соблюдать чистоту и аккуратность, следить, чтобы вещества не попадали на кожу лица и рук, так как многие вещества вызывают раздражение кожи и слизистых оболочек.

Никакие вещества в лаборатории нельзя пробовать на вкус. Нюхать вещества можно, лишь осторожно направляя на себя пары или газы легким движением руки, а не наклоняясь к сосуду и не вдыхая полной грудью. Сосуды с веществами или растворами необходимо брать одной рукой за горлышко, а другой снизу поддерживать за дно. Категорически запрещается затягивать ртом в пипетки органические вещества и их растворы.

По окончании работы нужно привести в порядок своё рабочее место, а при уходе - проверить водопроводные краны, которые должны быть закрыты, и выключить все электроприборы.

2.3 Промышленная санитария в лаборатории

Вентиляция и кондиционирование воздуха в лаборатории создают воздушную среду, которая соответствует нормам гигиены труда. С помощью вентиляции можно регулировать температуру, влажность, и чистоту воздуха в помещении. Кондиционирование воздуха создаёт оптимальный искусственный климат.

Необходимость вентиляции воздуха в административных, бытовых и других помещениях вызвана конструктивным устройством помещений, устройством естественного и искусственного освещения, технологическими процессами, количеством работников, санитарно - гигиеническими требованиями. К конструктивным элементам относятся высота и планировка помещения, площадь пола и окон, количество этажей, устройство входов и выходов и другое.

Солнечные лучи, система искусственного освещения - источник дополнительного поступления тепла в помещение.

При распаковке, фасовке и других операциях с реактивами происходит образование пыли, выделение газов, загрязняющих атмосферу. А постоянное нахождение значительного количества сотрудников в лаборатории требует более интенсивного воздухообмена, так как недостаточный воздухообмен в помещении ослабляет внимание и трудоспособность, вызывает нервную раздражительность и снижает качество труда.

Поэтому для обеспечения оптимальных условий работы, соответствующих нормам промышленной санитарии необходимо предусмотреть как естественную, так и искусственную вентиляцию. Кроме того, для предупреждения образования взрывоопасных концентраций в воздухе и необходимо укрытие и максимальная герметизация мест образования пыли, механизация процессов и устройств пылеотсасывающей вентиляции.

2.4 Пожарная безопасность

При работе с легковоспламеняющимися жидкостями никогда не исключена возможность возникновения пожара. Вследствие этого должны быть предприняты все возможные предупредительные меры.

Во всех лабораториях должны быть ящики с песком, огнетушители и противопожарные одеяла.

В случае возникновения пожара надо прежде всего загасить горелки и выключить плитки, унести все находящиеся поблизости горючие вещества, а затем тушить пламя засыпая его песком, закрывая мокрым полотенцем или одеялом.

Никоим образом нельзя заливать горящие не растворимые в воде жидкости водой, так как этим пожар только распространяется на большее пространство. В случае возникновения большого пожара следует тушить его огнетушителем и сообщить пожарной охране.

Если загорелась одежда на работающем, то нужно обернуть его одеялом, пальто, войлоком и т.п., но ни в коем случае не давая пострадавшему бежать, так как в этом случае горение станет более интенсивным.

Даже при появлении запаха гари, дыма в помещении сеть электропитания должна быть немедленно отключена и сразу приняты меры к тушению источника возгорания первичными средствами пожаротушения. Если загорятся электрические провода, следует обесточить электроустановку выключением рубильника и принять меры к тушению пожара.

Заключение

В данном разделе были рассмотрены наиболее важные аспекты безопасности работы в лаборатории, такие как пожарная безопасность, особенности работы электрическими приборами.

Реферат

В дипломной работе содержится 58 страниц, 11 таблиц.

Работа состоит из двух основных разделов:

- общетеоретическая и научная часть;

- безопасность жизнедеятельности

В общетеоретической и научной части приведен литературный, непосредственно экспериментальная часть, а также результаты экспериментов и их обсуждение. На основе полученных были предложены выдвинуты предположения по поводу механизма действия аскорбиновой кислоты.

В разделе "Безопасность жизнедеятельности" рассмотрены основные меры предупреждения чрезвычайных ситуаций, подержания оптимальных санитарных условий.

Заключение

Таким образом, витамины как низкомолекулярные биологически активные вещества, необходимые для жизнедеятельности организма, не являются ни пластическим материалом, ни источником энергии, но они участвуют в обмене веществ, выполняя роль стимуляторов и регуляторов биохимических процессов. Витамин С синтезируется в печени большинства животных, однако организм человека не обладает этой способностью из-за отсутствия фермента - L-гулонолактоноксидазы, который катализирует последнюю стадию синтеза аскорбиновой кислоты.

В организме взрослого человека содержится около 100 мг меди-элемента. Ионы меди по сравнению с ионами других металлов жизни реакционно более активны и образуют более стабильные хелатные комплексы с аминокислотами и белками. Поэтому преимущественно медь существует в организме человека в виде внутрикомплексных соединений, в основном с аминокислотами или белками типа сывороточного альбумина и церулоплазмина. Медьсодержащие ферменты ответственны за многочисленные жизненно важные биохимические реакции.

Токсическое действие тяжёлых металлов обусловлено способностью их ионов участвовать в комплексообразовании. Для понимания механизмов некоторых реакций, протекающих в биологических системах, возникает необходимость изучения химизма окисления аскорбиновой кислоты в присутствии ионов меди (II).

В настоящей работе предпринята попытка оценить участие простых «модельных» соединений меди в реакциях с аскорбиновой кислотой. Взаимодействие аскорбиновой кислоты с природными соединениями меди, возможно, представляет интерес для того, чтобы посмотреть на роль аскорбиновой кислоты в живом организме.

Известно, что в организме человека аскорбиновая кислота восстанавливает двухвалентную медь из её соединений до одновалентного состояния. При изучении восстановительных свойств аскорбиновой кислоты был проведён ряд опытов с солями и комплексными соединениями меди (II), в которых обнаружилось, что медь может быть восстановлена до металлического состояния, причём, следует заметить, в окислительной среде кислорода.

При оценке возможности самопроизвольного протекания окислительно-восстановительных реакций пользуются понятием окислительно-восстановительного потенциала. До металлического состояния медь может восстанавливаться двумя способами:

Размещено на http://www.allbest.ru/

В роли окислителя выступает то вещество, чей окислительно-восстановительный потенциал больше.

1) Cu2+ + 2e - Cu0 +0,340 В

2) Cu+ + e - Cu0 +0,520 В

3) Cu2+ + e - Cu+ +0,159 В

Потенциал Asc варьируется от -0,12 до + 0,33 В.

Известно, что:

?G1 = ?G2 + ?G3,

где

?Gi = -Z F lg ?,

где Z - число отданных или принятых электронов

F - число Фарадея

? - окислительно-восстановительный потенциал

Так как между энергией Гиббса и окислительно-восстановительным потенциалом существует прямо пропорциональная связь, то можно воспользоваться сравнением значений окислительно-восстановительных потенциалов.

Таким образом, произвольно могут протекать процессы (1) и (2), т. к. их окислительно-восстановительный потенциал больше. Однако из литературы известно, что в организме протекает реакция (2). Это обусловлено тем, что в организме играют дополнительно другие факторы, которые трудно и учесть в предварительных лабораторных исследованиях, или идёт конпропорционирование ионов Cu2+ и образовавшейся металлической меди до ионов Cu+. Возможно она растворяется в кислотах организма и поэтому получается одновалентная медь. С другой стороны, известно, что аскорбиновая кислота обладает антиоксидантными свойствами, но известно и то, что в лабораторных условиях она может проявлять и оксидантные свойства. [67]

Список литературы:

1. Sauberlich HE: Ascorbic acid. In: Present knowledge in Nutrition (Edited by: Brown ML). Nutrition Foundation, Washington DC, 1990.

2. Hellman L, Burns JJ: Metabolism of L-ascorbic acid-1-C14 in man. J Biol Chem 1958, 230:923-930 [PubMed Abstract].

3. Kallner A, Horing D, Hartman D: Kinteics of ascorbic acid in humans. In: Ascorbic acid: Chemistry, metabolism and uses (Edited by: Seib PA, Tolbert BM). Advances in Chem. Ser. No. 200, Am. Chem. Soc., Washington, DC, 1982, 385-400.

4. Johnson CS: Biomarkers for establishing a tolerable upper intake level for vitamin C. Nutr Rev 1999, 57:71-77.

5. Olson RE: Water soluble vitamins. - In: Principles of Pharmacology (Edited by: Munson PL, Mueller RA, Bresse GR). Chapman and Hall, N. Y.. 1999, Ch 59.

6. Carr AC, Frei B: Does vitamin C act as pro-oxidant under physiological conditions? - FASEB J, 1999, 13:1007-1024.

7. Березовский В. М. Химия витаминов. - М.: Пищепром, 1959. - с. 40-80.

8. Бременер С. М. Витамины и их клиническое применение. - М.: Медицина, 1966.

9. Дьяченко Р.А. - Витамины в эксперименте и клинике, 1970, вып. 2. - с. 63-81.

10. Hvoself J. - Acta Crystallogr., 1968, В24, р. 23.

11. Flood E, Skanske P. N. - Acta Chem.Scand.,1973, 27, p. 3069.

12. Martin G., Ann N.Y. - Acad. Sci.,1961, 92, p.141.

13. Schneider W., Staudinger Hg. - Klin. Wocherschr., 1964., 42. s. 879.

14. Шамирай Е. Ф. - Витамины, 1970, вып 5. с.240

15. Hiitterranch R. - Deutsche Apotheker - Zeitung, 1965., 105., 46, s. 1621.

16. Ball E. - J. Biol.Chem.,1937, 118, p. 219.

17. Cox G., Goodwin T. - J. Chem. Soc., 1936, p. 769.

18. Cox G. -Nature, 1932, 130, p. 205.

19. Borsook H., Davenport H., Jeffreys., Warner R. - J. Biol. Chem., 1937, 117, p. 327.

20. Rao G.G., Rao V. N. - Z. Anal. Chem., 1955., 147, s. 338.

21. Слободин Я.М. Басова А. К., Гельмс А. Е.. - Журн. прикл. хим, 1946, 19, с. 170.

22. Эрдей Л. - Журнал анал. хим. - 1953, 8, с. 356.

23. McDonald. - Ind. Chem., 1956, p. 545.

24. Baczik S. - Chem. Analit., 1960, 5, p. 13.

25. Пилипенко А. Т., Кладницкая М.Б. - Завод. лаб., 1966, 32, с. 3-10.

26. Erdey L., Svehla G. - Chem. Analist., 1963, 52, p. 24.

27. Herbert R., Hirst E., Percival E. - J. Chem. Soc., 1933, p. 1270.

28. Энгельгарт В. А., Букин В. И. - Биохимия, М.: 1937, 2, с. 587.

29. Reihtel F, Wither R. - J. Am. Chem. Soc., 1949, 71, p. 1879.

30. Woker G, Antener J. - Helv. chim. acta, 1937, 20, p. 732.

31. Эльдерфильд Р., Дорд Т. - Гетероцикл. соед. В 2-х т. Т. 1. - М.: ИЛ, 1953, с. 96.

32. Birch Т., Harris L. - Biochem. J., 1933, 27, p. 595.

33. Khan M. M. T., Martell A. E. - J. Am. Chem. Soc., 1969, 91, p. 4668.

34. Крисе Е. Е., Курбатова Г.Т., Куц B.C. Прокопенко В.П. - Журн. неорг. химии, 1976, 21, № 11, 2978.

35. Sudmeier J.L., Relilley С. N. - Anal. Chem., 1964, 36, S. 1698.

36. Sobkowska A., Minczewski J. - Poczn/ chem., 1962, 36, s. 17.

37. Khan M.M.T., Martell A.E. - J. Am. Chem. Soc., 1967,89, p. 7104.

38. Weissberger A., LuValle J.E.L. - J. Am. Chem. Soc., 1944, 66, p. 700.

39. Silverblat E., Robinson A.L., King С G. - J. Am. Chem. Soc., 1943, 65, p. 137.

40. Dekker A.O., Dickinson R. G. - J. Am. Chem. Soc., 1940, 62, p. 2165.

41. Peterson R. W., Walton J. H. - J. Am. Chem. Soc., 1943, 65, p. 1212.

42. Grinstead R.R. - J. Am. Chem. Soc., 1960, 82, p. 3464.

43. Kremer M.L. - Trans. Farad. Soc, 1967, 63, p. 1208.

44. Куримура Иосими, Муреками Кэйго, Цутида Эйсеон. - J. Chem. Soc. Japan Industr. Chem. Soc., 1969, 72, № 8, p. 1698 (РЖХим. 1970, 6Б1240).

45. Dawson C.R., Tapley W.P., Simmer I.B., Myrback K. The Enzymes, 2. N.Y., Academic Press Inc., 1951, p. 454.

46. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты, М.: ИЛ, 1961.

47. Khan M.M.T., Martell A.E. - J. Am. Chem. Soc, 1967, 89, p. 4176.

48. Khan M.M.T., Martell A.E. - J. Am. Chem. Soc, 1968, 90, p. 3386.

49. Khan M.M.T., Martell A.E. - J. Am. Chem. Soc, 1968, 90, p. 6011.

50. Barron E.S.G., De-Meio R., Klemperer F.W. - J. Biol. Chem., 1936, 112, p. 625.

51. Weissberger A., LuValle J.E.L., Thomas D.S. - J. Am. Chem. Soc., 1943, 65, p. l934.

52. Sillen L.G., Martell A.E. - Stability Constants of metal-ion complexes, London, The Chemical Society, 1964.

53. Ogata Y., Kosugi Y., Morimoto T. - Tetrahedron, 1968, 94, p. 4057.

54. Ogata Y., Kosugi Y. - Tetrahedron, 1970, 26, p. 4711.

55. Haykawa K., Minami S., Nakamura S. - Bull. Soc. Japan, 1973, 46, p. 2788.

56. Bakardieva N.T. - Докл. Болг. АНБ 1970, 23, с. 591.

57. Martell A.E., Khan M.M.T. - In. Bioinorganic Chem., 2, N.Y. Acad. Press., 1966, p. 654.

58. Ogata Y., Kosugi Y. - Tetrahedron, 1969, 25, p. 4633.

59. Jos Lin M.A., Miller J. - Food Research, 1949, 14, p. 325.

60. Штамм Е.В., Скурлатов Ю.И. - Журн. физ. хим., 1974, 48, с. 1454.

61. Nord Н. - Acta Chem. Scand., 1955,9, p. 422.

62. Butt W.S., Hallaway M - Arch. Biochem. Biophys., 1961, 92, p. 24.

63. Штамм Е.В., Пурмаль А.П., Скурлатов Ю.И. - Журн. физ. хим., 1974, 48, с. 2229, 2233.

64. Jameson R.F., Blackburn N.Y. - J. Inorg. Nucl.Chem., 1975, 37, p 809.

65. Яблоков Ю.В., Гаврилов В.В., Романенко Л.Н. - В кн: Радиоспкетроскопия. М., 1973, с. 31.

66. Chen K, Suh J, Carr AC, Marrow JD, Zeind J, Frei B: Vitamin C suppresses lipid damage in vivo even in the presence of iron over-load. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 2000, 279 : E1406-1212.

67. Halliwell B, Gutteridge JMC: Free radicals in Biology and Medicine. - Oxford University Press, Oxford, 1999.

68. Halliwell B, Gutteridge JMC: Oxygen free radicals and iron in relation to biology and medicine: some problem and concepts. - Arch. Biochem. Biophys., 1986, 246 : 501-514.

69. Neuzil J, Thomas SR, Stocker R: Requirement for promotion or inhibition by ?-tocopheroxyl radical induced plasma lipoprotein lipid peroxidation. - Free Rad. Biol. Med., 1997, 22 : 57-71.

70. Buettner GR, Jurkiewicz BA: Catalytic metals, ascorbate and free radicals: combinations to avoid. - Rad. Res., 1996, 145:532-541.

71. Berger TM, Poldori MC, Dabbagh A, Evans PJ, Halliwell B, Morrow JD, Roberts II J, Frei B: Antioxidant activity of vitamin C in iron-overloaded human plasma. - J. Biol. Chem. 1997, 279 : 15636-15660.

72. Проблемы координационной химии / Под ред. К.Б. Яцимирского. - Киев: Наукова думка, 1977. - С. 79-144.

73. Аскорбиновая кислота - восстановитель координированных металлов до нульвалентных. Г.Н. Дорофеенко, Н.В. Шибаева, Ю.И. Рябухин. Тез. докл. VII Всесоюз. конф. "Химия и биохимия углеводов." Пущино, 1982. - С. 142-143.

74. Восстановление аскорбиновой кислотой - метод анализа координационных соединений меди, ртути и благородных металлов. Шибаева Н.В., Рябухин Ю.И., Гарновский А.Д. Тез. докл. "V Всесоюз. совещ. по химии неводных растворов неорган. и комплекс. соед." Ростов н/Д. - М.: Наука, 1985. - С. 261-262.

75. Пилипенко А. Т., Кладницкая М. Б. - Завод. лаб., 1966, 32. - С. 3-10.

76. Труфанов А.В. Биохимия витаминов и анти витаминов. - М.: Колос, 1972. - С. 200-220.

ПРИЛОЖЕНИЕ

1 Краска Тильманса (натрий 2,6-дихлорфенолизофенолят)

2 Индол

3 Сульфат аммония

4 НАД - никотинамидадениндинуклеотид

5 НАДН - дигидроникотинамид-адениндинуклеотид

6 Гранулёма - [лат. granulum зернышко + гр. …oma - окончание в назв. опухолей] - воспалительное разрастание ткани, имеющее вид узелка или бугорка.

7 Триптофан

8 Кинуренин (2-амино-4-(2-аминофенил)-4-оксобутановая кислота) - промежуточный продукт ферментативного распада триптофана и биосинтеза никотиновой кислоты в организме человека.

9 Антраниловая кислота, ортоаминобензойная кислота