Механизмы экологической пластичности табака

Таблица 10

Кластерный состав годичных популяций сорта Дюбек 33

Примечание: №№ 1-6 (1989 г.), 7-12 (1990 г.), 13-18 (1991 г.), 19-24 (1992 г.).

Таблица 11

Структура «годичных» популяций сорта Дюбек 33 в частотах генотипических классов растений, выявленных системном анализе комплекса морфологических признаков

Примечание: в скобках после абсолютной численности кластеров приведена его частота, %.

Материалом для исследования динамики комплекса морфологических признаков линий табака в зависимости от условий выращивания послужили 10 линий, полученных как потомство индивидуальных растений сорта Дюбек Никитский 580. Эти линии описаны за два года выращивания. В каждой линии оценено от 12 до 20 растений. Описание и сравнение линий проведено с использованием метода главных компонент (табл. 12).

Таблица 12

Евклидовы расстояния между центрами линий (Дюбек Никитский 580), установленные по данным описания растений в различные годы выращивания

Линии явно разделились на 2 группы: 1 - с высокой пластичностью (4 шт.), 2 - с низкой (6 шт.).

Средние значения евклидовых расстояний для двух выделенных групп линий составили: 1,46 ± 0,155 и 3,11± 0,115, соответственно. Различия между средними статистически достоверны (t=8,5; р<0,01).

Возможность выделить в пределах даже небольшого числа линий две достоверно различающиеся группы свидетельствует о высокой разрешающей способности использованного метода.

Исследование линейного материала Дюбек Никитский 580 в двух различных регионах показало аналогичные результаты. Все это является прямым доказательство того, что выделяемые внутри сортов генотипически различные морфы по-разному реагируют на изменение условий среды.

Предлагаемый метод выявления генетически обусловленной структуры сортов включает следующие статистические процедуры: построение ортогонального пространства главных компонент, измерение евклидовых расстояний между растениями сортовой выборки, кластерный анализ методом Уорда.

Для определения биологического статуса выделенных внутри сорта групп растений принципиально важны следующие их характеристики: число таких групп невелико; ни одна из них не представлена единичным экземпляром; морфологические различия групп распространяются как на средние значения, так и корреляционную структуру признаков. Но особенно важно, что выявленная структура сорта воспроизводится при свойственном табаку размножении самоопылением.

Сравнительный анализ данных экологического испытания сортов показал, что, по крайней мере, некоторые, а иногда и все морфы, найденные в сортовой выборке одного региона выращивания, обнаруживаются и выборке из другого региона (или другого года). Гомологию морф установили по результатам их кластерного анализа, где в качестве характеристик выступали векторы средних значений комплекса признаков (табл. 13 и 14). Для количественной оценки экологически обусловленных преобразований структуры сортов использован «показатель сходства популяций».

Таблица 13

Частота морф в сортах табака, выращенных в различные годы в условиях г. Краснодара

Примечания:

1) Здесь и в табл. 13, в скобках после абсолютного числа растений приведена частота морфы (%);

2) первым приведен показатель сходства сортовых популяций 1994 и 1995 гг., третьим - 1995 и 1996 гг.;

3) рНо - вероятность нуль-гипотезы об отсутствии различий между распределениями частот морф в выборках разных лет выращивания;

4) индексы 1 и 2 при обозначении морф отражают различие сортов.

Таблица 14

Частота различных морф в сортах табака, выращенных в различных по условиям регионах

Примечание. Первым приведено значение показателя сходства при сравнении выборок из Ялты и Лагодехи; вторым - Ялты и Краснодара; третьим - Лагодехи и Краснодара.

Из результатов вычисления показателя сходства популяции и его оценки по критерию ч² видно, что у сорта Крымский Степной достоверно различаются по частотам морф две из трех сопоставленных сортовых выборок. У сорта Подольский 23 - все три. У сортов Остролист 215 и Трапезонд 219 - две из трех. Из сорта Крупнолистный Б-3 достоверные различия в структуре обнаружены между сортовыми выборками из Ялты и Краснодара. Только сорт Дюбек Никитский 580 показал отсутствие различий между распределениями частот морф в выборках различных лет выращивания.

Таким образом, природа пластичности табака заключается в динамике частот генотипически различных морф в связи с изменением условий выращивания сорта. Однако новизна полученного результата не ограничивается доказательством этого фундаментального положения. Примененный метод позволил количественно оценить преобразование структуры сорта и, тем самым, создать основу оценки роли популяционного гомеостаза как механизма экологической пластичности.

Пластичность табака есть свойство сортов линий, характеризуемой сравнительной оценкой изменчивости комплексов селекционно-значимых признаков в различных условиях выращивания, природой которого является динамика частот генотипически различных морф.

3. Метод оценки экологической пластичности табака

Метод оценки экологической пластичности табака разработан и реализован на материале четырех сортов табака, относящихся к различным сортотипам: Дюбек Никитский 580, Крымский Степной, Остролист 450, Шегиновац и девяти линий (потомств индивидуальных растений) сортообразца №108, выделенного из потомства гибридной комбинации (Venki Hercegovac Ч Басма) Ч Дюбек. Экспериментальная часть работы проведена в период с 1995 по 1997 гг. на полевых участках ВНИИТТИ г. Краснодара (Россия), института сахарной свеклы г. Алексинац (Югославия), опытно селекционной станции г. Бачко Петровац (Югославия).

Приступая к анализу данных экологических испытаний, надлежит, прежде всего, убедиться в наличии генетически детерминированных различий по каждому из признаков в изученных сортовых популяциях.

Необходимым этапом оценки экологической пластичности табака является анализ внутрисортовой и внутрилинейной изменчивости по комплексу селекционно-ценных признаков, поскольку основной механизм экологической пластичности представляет собой динамика генотипической структуры сортов в различных условиях выращивания. Анализ генетической гетерогенности сортовых популяций самоопылителей, в том числе и табака, открывает перспективу обогащения исходного материала за счёт выявления его генетического разнообразия при разложении сорта на линии.

Последним главным этапом анализа результатов экологических испытаний сортов и линий табака является их сравнительная оценка по экологической пластичности. Метод оценки пластичности табака основан на использовании процедур многомерного шкалирования. Использование многомерного шкалирования для оценки экологической пластичности табака в сравнении с другими методами многомерной статистики даёт рядом преимуществ. Использованные до сих пор в нашей работе методы, например, метод главных компонент и дискриминантный анализ основаны на получении линейных комбинаций признаков. В отличие от них многомерное шкалирование позволяет работать непосредственно с признаками в любом их сочетании, в том числе и с отдельными селекционными характеристиками.

Метод многомерного шкалирования проще иных многомерных статистических методов, поскольку предполагает меньшее число этапов статистического анализа и меньшее число предварительно налагаемых ограничений. Методы, основанные на получении линейных комбинаций признаков, показали свою эффективность в системном анализе изменчивости комплекса коррелированных признаков, в частности, в решении задачи определения механизма экологической пластичности табака, что означает выявление внутрисортовой и внутрилинейной изменчивости по комплексу признаков и анализ ее динамики в зависимости от условий среды. Применение многомерного шкалирования в методическом единстве с оценкой внутрисортовой генотипической структуры табака и ее динамики в различных условиях выращивания составляет генетически обоснованный и эффективный метод сравнительной оценки пластичности.

Достоверность различий средних значений морфологических и фенологических признаков между сортами и линиями оценена в дисперсионном анализе (факторы: сорт, условия выращивания, линия). По всем данным установлено достоверное влияние каждого из факторов (сорт, условия выращивания, линия).

В целом сорта и линии составленной выборки достаточно разнообразны по средним значениям морфологических и фенологических признаков, по уровню их внутрисортовой изменчивости, чтобы служить объектом изучения экологической пластичности табака.

Кластеризация сортов и линий табака проведена по методу Уорда. Корректность проведённой внутрисортовой и внутрилинейной кластерзации растений проверена и оценена в дискриминантном анализе выделенных кластеров.

В табл. 15 представлены число выделенных кластеров растений и оценка корректности кластеризации (в процентах) для каждого исследованного сорта и каждой линии табака.

Таблица 15

Число внутрисортовых и внутрилинейных кластеров, корректность кластеризации исходного материала для селекции табака

Из девяти изученных линий кластеризация растений проведена только для семи из них. Две линии L96 и L99 не имели достаточной выборки растений для проведения кластеризации.

Таким образом, в сортах и линиях табака выделено по несколько различных кластеров. Число таких кластеров невелико (от 2-х до 7-ми). Эти кластеры различаются средними значениями признаков, а также их корреляционной структурой.

Оценка экологической пластичности сортов и линий проведена, с использованием процедур многомерного шкалирования. Цель процедур, составляющих многомерное шкалирование, состоит в том, чтобы отобразить информацию о конфигурации точек, заданную матрицей различий (близостей), в виде геометрической конфигурации из «n» точек в многомерном ортогональном пространстве. Это отображение достигается путем приписывания каждому из объектов наблюдения q-мерного вектора, характеризующего его количественные показатели.

Компоненты этих векторов определяются таким образом, чтобы расстояния между точками в пространстве отображения в среднем мало отличались от исходной матрицы порядковой близости в смысле некоторого критерия. При этом важно отметить, что метод многомерного шкалирования может быть использован практически для любого типа меры близости (различия). В нашем случае в качестве матриц близости использовались общие матрицы парных корреляций морфологических признаков анализируемых сортов и линий. При этом исходная информация о близости исследуемых объектов (в данном случае о корреляции признаков), в результате применения процедуры многомерного шкалирования, была представлена в виде множества точек в пространстве небольшой размерности, что позволило получить наглядное представление о структуре признаков. Особенно важно, что порядок близости (корреляции) между признаками был представлен теми же порядками расстояний между ними в метрическом пространстве. Это позволило вычислить меру экологической пластичности сортов в виде суммы расстояний соответствующих признаков в разных условиях выращивания. Для каждого сорта (линии) вычислялось расстояние в полученном метрическом пространстве между одинаковыми признаками в разных условиях выращивания. Полученные расстояния суммировались. Это сумма и рассматривалась как мера экологической пластичности сорта (линии).

В таблицах 16 и 17 приведены расстояния и их суммы, вычисленные по результатам шкалирования для сортов и линий табака, выращенных в разных условиях. Сопоставление полученных сумм позволяет сделать вывод о том, что сорта и линии различаются по пластичности: из сортов наиболее пластичным оказался сорт Остролист 450, из линий - L53.

Таблица 16

Расстояния между одинаковыми признаками и их суммы, вычисленные по результатам многомерного шкалирования сортов табака

Таблица 17

Расстояния между одинаковыми признаками и их суммы, вычисленные по результатам многомерного шкалирования линий табака

В целом метод оценки экологической пластичности табака состоит из трех основных этапов. Во-первых, анализ генетически детерминированных различий по каждому из признаков в изученных сортовых популяциях. Этот этап предполагает ответ на вопрос о соответствии конкретного списка интересующих признаков задаче по оценке экологической пластичности и самой логике системного подхода. В нашем случае изученные четыре сорта и девять линий достаточно разнообразны по средним значениям морфологических и фенологических признаков, чтобы служить объектом изучения пластичности. Во-вторых, системный анализ внутрисортовой или внутрилинейной изменчивости по комплексу селекционно-значимых признаков, поскольку основным механизмом пластичности табака является динамика генотипической структуры в различных условиях выращивания. Этот этап открывает перспективу обогащения исходного материала за счет разложения его на линии. В данном конкретном случае, системный анализ комплекса морфологических признаков в сортах и линиях выявил от 2-х до 7-ми четко различимых кластеров. В-третьих, сравнительная оценка сортовых популяций табака по экологической пластичности с использованием методики многомерного шкалирования.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Прежде чем перейти к основным выводам, следует в самом общем виде изложить логику всего проведённого исследования, ещё раз обратить внимание на его методологическую основу.

Первоначально, в соответствии с темой исследования и его основной целью, определено понятие «экологическая пластичность», рассмотрены основные предпосылки изучения её механизмов и создания новых методов оценки. У табака, как и у других культурных растений, под экологической пластичностью принято понимать способность сортов и гибридов сохранять стабильность заданных хозяйственно ценных характеристик в изменяющихся условиях выращивания.

Выявлены три основные группы предпосылок к работе.

Во-первых, с самого начала популяционных исследований создавались и создаются различные методы оценки экологической пластичности культурных растений.

Во-вторых, известно два механизма, обеспечивающих стабильность популяций в меняющихся условиях среды:

- реакция отдельных генотипов или групп особей одного генотипа (гомеостаз развития);

- изменение генотипического состава популяции в различных условиях (генетический гомеостаз).

В-третьих, системный анализ комплекса коррелированных признаков растительных популяций, в том числе и сортов табака, уже показал себя эффективным инструментом вскрытия структуры изменчивости конституциональных признаков без анализа потомства.

Рассмотрение методов оценки экологической пластичности сортов выявило недостаточность разработки этой проблемы, прежде всего в теоретическом аспекте. Например, ни один из известных методов не содержит даже в неявном виде каких-либо генетических знаний о природе пластичности. Оценка пластичности ранее известными методами с применением различных модификаций дисперсионного и регрессионного анализа оперируют изменениями средних значений хозяйственно ценных признаков, которые в свою очередь, являются лишь опосредованным отражением механизмов экологической пластичности.

Применение системного подхода позволило определить природу пластичности табака и перейти от констатации следствий к анализу причины изучаемого явления. Системный анализ комплекса признаков с заведомо различным уровнем генетической детерминации - путь к характеристике генотипа как целого и, далее, к решению задач различения генотипов по фенотипу.

Основной целью работы явилось выявление механизмов экологической пластичности табака; сравнительная оценка экологической пластичности сортов и линий табака, учитывающая природу этого свойства и ориентированного на решение практических задач по изучению, сохранению и эффективному использованию внутрисортового разнообразия табака.

Основу системного подхода составляет дедуктивная логика, в соответствии с которой выстроено всё исследование. По рассмотрению основных предпосылок и определения цели работы, была сформулирована рабочая гипотеза. Из гипотезы выведены следствия, предполагающие ясную экспериментальную проверку.

Рабочая гипотеза заключалась в том, что пластичность табака есть свойство сортов и линий, характеризуемое сравнительной оценкой изменчивости комплексов селекционно-ценных признаков в различных условиях выращивания, природой которого является динамика частот генетически различных морф. Вслед за Дж. Гексли понятием «морфа» обозначины генетические варианты, встречающиеся в популяции и находящиеся во временном или постоянном равновесии. Как механизм пластичности, интерес представлял, прежде всего, генетический гомеостаз, поскольку именно внутрисортовая генотипическая является важнейшим предметом эколого-генетического мониторинга, направленного на эффективное использование, сохранение и изучение растительных ресурсов.

Сформулировано два основных следствия из рабочей гипотезы:

- системный анализ есть эффективный метод оценки внутрисортовой изменчивости по комплексу селекционно-ценных признаков и её динамики в различных условиях выращивания;

- преобразование генотипической структуры сорта выражается в динамике частот морф.

Экспериментальная часть работы была направлена на проверку всей системы следствий рабочей гипотезы. Проверки в полной мере показали справедливость всех исходных предположений.

Достоверность и универсальность выводов обеспечены выбором исходного материала, ориентированного на достаточно полное отражение внутривидового разнообразия табака, представленного в имевшейся Мировой коллекции, по трём основным группам конституционных признаков, характеризующих размеры табачных растений, темп и тип их развития.

На завершающем этапе анализа результатов экологических испытаний сортов и линий табака проведена их сравнительная оценка по экологической пластичности. Метод сравнительной оценки должен был позволить работать непосредственно с признаками в любом их сочетании, в том числе и с отдельными селекционными характеристиками. Это тем более важно, поскольку понятие «экологическая пластичность» характеризует не сорт вообще, а комплекс тех или иных его селекционно-ценных признаков и отдельных показателей.

Всем поставленным задачам и требованиям соответствовал метод многомерного шкалирования, с помощью которого мы провели сравнительную количественную оценку сортов и линий табака по экологической пластичности.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что эффективным методом, позволяющим выявить генотипическую структуру сортовых популяций табака без анализа по потомству, является системный анализ биологически обоснованно подобранных комплексов коррелированных селекционно-ценных признаков.

2. Впервые для табака, на примере фенологического типа разработан метод выявления растений с генетически обусловленными различиями, состоящий из трёх этапов:

- учёт комплекса фенологических признаков, объединение фенологических признаков в линейные комбинации - главные компоненты;

- вычисление значений главных компонент для каждого из изученных объектов (сорта, линии, индивидуальные растения);

- исследование распределения (ординации) объектов в пространстве главных компонент, значения которых являются координатами объектов, с последующей их кластеризацией на основе оценки расстояний между соответствующими точками.

3. Определено, что растения с генетически обусловленными различиями составляют морфы - элементы структуры сортовых популяций. Морфы различаются темпом прохождения фенологических фаз, то есть по фенологическому типу. Во всех изученных сортах и линиях (потомства индивидуальных растений) число выявленных морф варьирует от 3-х до 7-ми.

4. Установлено, что морфы, выявляемые в сортовых популяциях табака по фенологическому типу, различаются по своим морфологическим характеристикам. Эти различия формируются в онтогенезе растений постепенно и затрагивают в большей степени не линейные размеры органов, а их пропорции. Морфологические различия между морфами отчётливо проявляются при вычислении морфологических индексов - соотношений различных морфологических характеристик, что отражает связь фенологического типа с морфогенетическими корреляциями.

5. Установлено, что для описания генотипической изменчивости сортовых популяций табака и дальнейшего их сравнения по экологической пластичности достаточен учёт морфологических признаков, поскольку выявлена их связь, как с фенологическим типом, так и морфогенетическими корреляциями.

6. Выявлено, что линии, полученные от разных морф сортовых популяций табака, как потомства индивидуальных растений, достоверно различаются между собой по комплексам селекционно-ценных признаков. Этот факт является прямым доказательством генетической обусловленности различий между морфами, выделяемыми в системном анализе внутрипопуляционной изменчивости табака.

7. Определено, что описание изменчивости табака по отдельным морфологическим признакам недостаточно для выявления генетической гетерогенности сортовых популяций даже в сочетании с, обладающим высокой разрешающей способностью методом разложения сортов на линии. Вклад межлинейной изменчивости в общую дисперсию признака не превышает 20%, а для ряда признаков - близок к нулю. Напротив, описание внутрисортовой изменчивости в рамках системного подхода, использование конструкции линейных комбинаций признаков, как интегральной характеристики растений, существенно увеличивает разрешающую способность анализа фенотипической изменчивости как основы выявления генотипической структуры сортовых популяций. В этом случае вклад межлинейных различий в общую дисперсию возрастает до 40%.

8. Установлено, что генетически обусловленная внутрисортовая изменчивость (подразделённость на морфы) представляет собой универсальное свойство табака. Она установлена по всем основным группам конституциональных признаков (фенологический тип, морфологический тип, морфогенетические корреляции) на материале 13-ти сортотипов, представляющих большую часть всего внутривидового разнообразия Nicotiana tabacum. L. Преобразование генотипической структуры является источником морфологической изменчивости сортовых популяций табака.

9. Установлено, что выделяемые внутри сортовых популяций генотипически различные морфы по-разному реагируют на изменения условий внешней среды, то есть различаются по экологической пластичности. Линии, полученные из одной сортовой популяции, различаются по величине смещения вектора средних значений комплекса морфологических признаков при выращивании в различных экологических условиях. По евклидовым расстояниям между центрами выборок из различных регионов или лет выращивания, линии табак образуют достоверно различающиеся группы.

10. Выявлены два механизма экологической пластичности табака - реакция отдельных генотипов на изменяющиеся условия внешней среды (гомеостаз развития), и динамика генотипической структуры сортовых популяций в различных условиях выращивания (генетический гомеостаз). Фенотипически это выражается в изменении частот морф при выращивании в различных регионах и в различные годы.

11. Определено, что экологическая пластичность табака представляет собой свойство сортовых популяций, характеризуемое в сравнительной оценки изменчивости комплекса селекционно-ценных признаков в различных условиях выращивания. Природой экологической пластичности табака является динамика частот генотипически различных морф. Экологическая пластичность сорта тем выше, чем меньше изменчивость комплекса его селекционно-ценных признаков в различных условиях выращивания по сравнению с другими сортами исследуемой выборки.

12. Разработан метод сравнительной оценки экологической пластичности сортовых популяций табака, включающий три основных этапа исследований изменчивости комплексов признаков:

- анализ генетически детерминированных различий по каждому из признаков в изученном селекционном материале, с целью установления соответствия конкретного списка интересующих признаков задаче оценки пластичности и самой логике системного подхода;

- системный анализ внутрисортовой или внутрилинейной изменчивости по комплексу селекционно-значимых признаков, что, в том числе открывает перспективы обогащения исходного материала за счёт разложения его на линии;

- сравнительная оценка селекционного материала табака по экологической пластичности с использованием методики многомерного шкалирования.

Этот метод позволяет работать с селекционно-ценными признаками в любом их сочетании, в том числе, и с отдельными характеристиками.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

I. Статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ на соискание ученой степени доктора биологических наук

1. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А. Фенологический тип растений как предмет генетических исследований // Генетика. 1991. № 8. Т. 27. С. 1379-1387.

2. Соловьев В.А., Соловьева Л.П., Шпаков А.Э. Принципы организации геологических и биологических систем // Экологический вестник научных центров черноморского экономического сотрудничества (Приложение, ISSN 1729-5459). Краснодар, 2004. С. 120-128.

3. Шпаков А.Э. Экологически обусловленные преобразования структуры сортов растений-самоопылителей на примере Nicotiana tabacum L. // Проблемы региональной экологии. 2007. № 4. С. 55-58.

4. Шпаков А.Э. Системный анализ внутрисортовой изменчивости растений самоопылителей на примере Nicotiana tabacum L. // Проблемы региональной экологии. 2007. № 5. С. 57-60.

5. Шпаков А.Э. Экология, нравственность и проблема целостности современного естествознания // Проблемы региональной экологии. 2009. № 1. С. 162-169.

6. Шпаков А.Э., Климова К.Г. Тихонова А.И. Системный анализ структуры изменчивости природных популяций шалфея пустынного (Salvia deserta Schang) // Проблемы региональной экологии. 2009. № 3. С. 85-87.

7. Шпаков А.Э., Тихонова А.И. Климова К.Г. Динамика структуры популяций вида Дубровник обыкновенный (Teucrium chamaedrus L.) в различных экологических условиях // Проблемы региональной экологии. 2009. № 5. С. 72-75.

8. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А. Сравнительная оценка сортовых популяций табака по экологической пластичности // Юг России: экология, развитие. 2010. № 1. С. 48-52.

9. Шпаков А.Э. Генетическая изменчивость сортовых популяций табака и методы ее изучения//Проблемы региональной экологии. 2010. №3. С.48-59

10. Шпаков А.Э. Волчков Ю.А. Генотипическая изменчивость сортовых популяций табака по экологической пластичности//Юг России: экология, развитие. 2010. №2. С.36-41

11. Шпаков А.Э. Волчков Ю.А. Эколого-генетический мониторинг сортовых и природных растительных популяций//Юг России: экология, развитие. 2010. № 2. С.27-35

II. Прочие научные публикации

12. Шпаков А.Э., Миронов Е.К. Изменчивость длины вегетационного периода табака // Технические культуры. М.: «Агропромиздат», 1988. № 6. С. 40-41.

13. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А., Дробышев В.В. Природа пластичности табака // Ботаника, генетика и селекция технических культур: Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. ВИР, 1999. Т. 156. С. 111-116.

14. Мамотова Е.Л., Шпаков А. Э., Волчков Ю.А. Преобразование структуры сорта табака, обусловленное изменением условий выращивания // Актуальные вопросы экологии и охраны природы экосистем южных регионов России и сопредельных территорий. Краснодар: Кубан. гос. ун-т, 1997. С. 282-285.

15. Шпаков А. Э., Волчков Ю.А., Метод оценки экологической пластичности табака // Актуальные вопросы экологии и охраны природы экосистем южных регионов России и сопредельных территорий. Краснодар: Кубан. гос. ун-т, 2006. С. 19-25.

16. Соловьёв В.А., Соловьёва Л.П., Шпаков А.Э. Биостратиграфические модели осадочной оболочки земли и гипотеза Ч. Дарвина // Народное образование. 2008. № 2. С. 247.

17. Шпаков А.Э. Единство мира и целостность человека // В сб.: «Синергетика образования». М.; Ростов н/Д, 2005. Вып. V. С. 211-221.

18. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А., Иваницкий К.И. Сопряжённая изменчивость конституциональных признаков табака // Сб. науч. трудов института ГНУ ВНИИТТИ. Краснодар: «Просвещение-Юг», 2009. С. 193-199.

19. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А., Иваницкий К.И. Экологическая пластичность табака // Сб. науч. трудов института ГНУ ВНИИТТИ. Краснодар: «Просвещение-Юг», 2009. С. 199-210.

20. Шпаков А.Э. Метод сравнительной оценки экологической пластичности растений-самоопылителей на примере табака (Nicotiana tabacum L.). Краснодар: ГНУ ВНИИТТИ Россельхозакадемии, 2009. 22 с.

21. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А. Сопряжённая изменчивость фенологического типа и признаков - компонент продуктивности в коллекции табака. Деп. в ВИНИТИ. №1838-В88. 1988. 25 с.

22. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А. Системный анализ изменчивости фенологического типа растений на примере коллекции табака. Деп. в ВИНИТИ. №1839-В88. 1988. 17 с.

23. Мамотова Е.Л., Шпаков А.Э., Горшкова В.В., Волчков Ю.А. Экологически обусловленные преобразования структуры сортов табака. Деп. в ВИНИТИ. №1423-В97. 19 с.

24. Shpakov A., Pesic V., Radeckij V., Voltchkov J. Ecological stability aspects in evaluating genetic resources of tobacco varieties // 2^nd International Crop Science Congress (November 17-24). New Dehly - India, 1996. Р. 1150.

25. Shpakov A., Pesic V., Voltchkov J. Genetic heterogeneity and ecological stability of tobacco varieties // CORESTA - Oxford - England, 1995. Р.26.

26. Shpakov A., Pesic V., Voltchkov J. Cultivar variability of the phenologikol properties variability of tobacco // CORESTA - Yokohama - Japan (November 3-8), 1996. Р.34.

27. Shpakov A., Pesic V., Voltchkov J., Jovanovic B. Sortvariability of tobacco phenologikol characteristics // 18^th Symposium on tobacco (24-26 Septembra). Ohrid - Macedonia, 1997. Р. 41.

28. Шпаков А.Э., Пешич В.В., Волчков Ю.А. Генетичка хетерогеность и екологика пластичност сората дувана // I Югословенско советованье о производьи и преради дувана (Ниш, 19-20 септембра). 1995. С. 35.

29. Shpakov A., Pesic V., Sabovljevic R., Voltchkov J., Stancic J. Comporative variability of the phenotype and properties - components of productivity in a collection of tobacco // 17^th Symposium on tobacco. Ohrid - Macedonia (27-29 сентября). 1995, Р. 55.

30. Шпаков А.Э. Системный подход в анализе изменчивости фенологического типа растений (на примере коллекции табака) // V Всесоюзный съезд ВОГиС им. Н.И. Вавилова (24-28 ноября 1987 г., Москва). Тезисы докладов. Т. 4: Генетика и селекция растений. С. 307.

31. Шпаков А.Э., Волчков Ю.А. Выявление генетических систем типа сезонного развития на основе исследования коллекции сортов табака // Второе всесоюзное совещание «Генетика развития» (29-31 августа 1990 г., Ташкент). Тезисы докладов. Т. 1 (часть II): Генетика развития растений и животных. С. 194-195.