Закономерности развития стенки тонкой кишки и её эпителиальной ткани крупного рогатого скота в онтогенезе

У плодов 5-5,5-месячного возраста на дне крипт выявляются апикально-зернистые (панетовские) клетки. Они развиваются из молодых недифференцированных призматических клеток. Вначале развития в апикальном конце клеток в цитоплазме над ядром появляются мелкие зернышки. С дифференциацией клетки зерна увеличиваются в размерах и в количестве, а позднее заполняют весь апикальный полюс цитоплазмы. Ядра сдвигаются к базальному полюсу клетки и принимают сплюснутую или палочковидную форму. Меняется форма клеток. Клетки из призматических превращаются в конусобразные апикально-зернистые клетки, которые имеют хорошо выраженную щеточную каемку.

При изучении динамики нуклеопротеидного обмена эпителиальных клеток слизистой оболочки тонкой кишки в эмбриогенезе установлено, что становление нуклеопротеидного обмена происходит на раннеплодной стадии развития (2-5 мес.). В динамике нуклеопротеидного обмена выделяются стадии: первая ? до 90 суток ? стадия интенсивного содержания в ядре ДНК и накопление в цитоплазме РНК; вторая ? от 3 до 5 мес. ? стадия снижения содержания РНК в цитоплазме эпителиальных клеток. В этом возрасте происходит становление криптально-ворсиночного градиента содержания нуклеиновых кислот в энтероцитах кишечного эпителия (Тельцов, Столяров, Романова, 1994). Третья ? на среднеплодной стадии (5?7 мес.) развития плода отмечается повышение интенсивности реакции на РНК. В энтероцитах двенадцатиперстной кишки интенсивность реакции на РНК несколько выше, чем в аналогичных клетках тощей и подвздошной кишок, т.е. установлен проксимально-дистальный градиент распределения.

При анализе содержания углеводных компонентов в клеточных дифферонах эпителия тонкой кишки у плодов крупного рогатого скота установлены три стадии. Первая - до 2,5-3 мес., характеризуется наличием большого количества гликогена и малого - протеогликанов, включающих ГАГ типа ГК, структурных гликопротеинов в щеточной каемке и в области мембран. Слизистые гликопротеины интенсивно дают реакцию лишь в БК.

Вторая - от 3 до 5 мес. На этой стадии выявляются протеогликаны, кислые ГАГ типа X, ХС-4, ХС-6 в эпителиоцитах дуоденальных желез и происходит уменьшение количества гликогена, ГАГ типа ГК. В бокаловидных клетках крипт и ворсинок впервые в этом возрасте зафиксированы сиалогликопротеины. Таким образом, на этой стадии происходит закладка специфической дифференциации углеводного обмена эпителиоцитов ворсинок, крипт и дуоденальных желез.

Третья стадия ? от 5?5,5 мес. до 7 мес., стадия формирования дефинитивной дифференциации углеводного обмена всех клеточных дифферонов кишечного эпителия в зависимости от органотипического развития и их локализации. Содержание гликопротеинов в клетках и секрете БК, МЭ крипт, дуоденальных желез и в химусе тонкой кишки повышается. В эпителиоцитах ворсинок накапливаются протеогликаны типа кислых ГАГ, а именно - ГК. В эпителиоцитах крипт и дуоденальных желез происходит накопление сульфатированных ГАГ, типа X, ХС-4, ХС-6. В бокаловидных клетках ворсинок и крипт происходит также накопление сиалогликопротеинов. Значительно больше их выявляется в КЭ крипт. Гранулы БК содержат гликопротеины, гликоген, сульфатированные ГАГ. В остальных клетках гликоген не обнаружен (за исключением следов в эпителиоцитах вершины ворсинок тощей кишки). Дефинитивный углеводный обмен в энтероцитах тонкой кишки наблюдается у плодов в возрасте 7-9 мес.

При дифференцированном исследовании суммарных белков выявлено снижение интенсивности их реакции у 4-5-месячных плодов, что обусловлено снижением интенсивности реакции кислых белков при сохранении интенсивности реакции основных белков. У плодов 6 месяцев вновь идет накопление кислых белков в эпителиоцитах. К рождению соотношение кислых и основных белков выравнивается. Однако ворсиночно-криптальный градиент распределения суммарных белков в эпителиоцитах у плодов после 4,5-5 месяцев исчезает. Кишечные эндокриноциты имеют такую же реакцию на суммарные белки, что и эпителиоциты. Гранулы цитоплазмы панетовских клеток интенсивно реагируют на суммарные белки. Цитоплазма бокаловидных клеток содержит гораздо меньше суммарных белков, тогда как ядра бокаловидных клеток практически не отличаются от ядер эпителиоцитов. В динамике содержания суммарных белков в эпителиоцитах выявляются три возрастных стадии: первая - до 3?4 месяцев - накопление суммарных белков; вторая - от 3?4 мес. до 6 мес. - снижение кислых белков и постепенное накапливание основных белков; третья - от 6 мес. до рождения - накопление суммарных белков. Одновременно с образованием истинных кишечных ворсинок устанавливается ворсиночно-криптальный градиент распределения суммарных белков в цитоплазме МЭ. Около ядрышек и ядерной оболочки МЭ дают реакцию гистоновые группы белков. По мере продвижения эпителиоцитов от основания ворсинки к ее вершине интенсивность их реакции возрастает.

Возрастная динамика содержания сульфгидрильных (?SH?) групп белков аналогична динамике кислых белков, а дисульфидных (?S?S?) и аминогрупп (?NH₂) - динамике основных белков. Интенсивность реакции карбоксильных (?COOH?) групп белков в эпителиоцитах повышается. БК эпителия стенки двенадцатиперстной кишки окрашиваются интенсивно на ?SH? группы белков с 4,5-5-мес. возраста плода, в то время как они в тощей и подвздошной имеют слабую реакцию. Очевидно, БК разных отделов тонкой кишки несут. иную функциональную нагрузку. Гранулы цитоплазмы ПК интенсивно дают реакцию на и -SH? и ?S?S?группы белков.

Проведенные комплексные исследования эпителия тонкой кишки в плодном этапе позволяют сделать следующие обобщения.

Первое. Закладка ткани протекает без видимых изменений, поэтому граница между зачатковым и тканевым периодами развития, между этапом закладки и формирования не выражена. Этап формирования ткани совпадает во времени с формированием истинных кишечных ворсинок, крипт, дуоденальных желез и продолжается у плодов от 2,5-3 до 5-5,5 мес. Гистохимическими методами исследования этапы закладки и формирования хорошо различаются как стадии (первая и вторая) нуклеопротеидного, белкового и углеводного обмена эпителиоцитов.

Второе. Этапу формирования эпителиальной ткани свойственно: а) становление ЦЯО отношения и стабильности площади ядра, цитоплазмы МЭ; б) формирование репродуктивной зоны эпителия, специфичности МИ и ИА эпителиоцитов различных участков ворсинок, крипт и дуоденальных желез; в) формирование относительной стабилизации «скорости обновления» эпителия системы «крипта-ворсинка»; г) становление локальной дифференцировки и интеграции МЭ, БК различных участков ворсинки (вершины, боковых поверхностей, основания), крипт (шейки и дна) и дуоденальных желез (протоков, концевых отделов); д) формирование специфического нуклеопротеидного, нуклеинового (2 стадии), белкового (2 стадии) и углеводного (2 стадии) обмена дифференцирующихся МЭ, БК, КЭ, ПК; е) формирование специфического строения эпителия двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок.

Период дефинитивного развития эпителия начинается у плодов от 5?5,5 мес. и продолжается до рождения. Он характеризуется: а) полным набором клеточных дифферонов эпителия (МЭ, БК, ПК, КЭ) и интегрирующей связи между ними; б) специфическим строением и дифференцировкой близкой к дефинитивной эпителия различных участков кишечной стенки и отделов тонкой кишки; в) близкому к дефинитивному нуклеопротеидному, белковому, белковому, углеводному обмену МЭ, БК, КЭ, ПК в различных участках кишечной стенки и отделах тонкой кишки; г) специфическим строением близкому к дефинитивному эпителиоцитов, их органоидов, стабильностью ЦЯО в связи с выполняемой функцией; д) дефинитивным отношением МИ и ИА эпителиоцитов эпителия, «скоростью обновления» эпителия в системе: «крипта > ворсинка», взаимосвязью смены старых ворсинок и экструзией эпителиального пласта. Поэтому в дефинитивном периоде выделен начальный, или ранний дефинитивный этап (от 5,5-6 мес. до рождения), поскольку ткань еще не является истинной дефинитивной. Равномерность распределения ДНК ядра совпадает во времени с высокой митотической активностью клетки и сохраняется в МЭ крипт и основания ворсинок. ГХИ свидетельствуют о стабильности ДНК ядер МЭ в эмбриогенезе, лишь ЛМИ выявляют снижение флюоресценции ДНК у плодов 5-мес. возраста. Накоплению РНП в цитоплазме предшествует увеличение РНК в ядрышках ядра МЭ. Возрастная специализация МЭ сопровождается появлением различных взаимосвязей РНК с белковыми группами и обуславливает криптально-ворсиночный градиент распределения РНК и ворсиночно-криптальный - белков и белковых групп. Градиент распределения РНК в МЭ эпителия формируется одновременно с образованием истинных кишечных ворсинок и сохраняется в течение всего плодного этапа. Градиент распределения белков и белковых групп в МЭ эпителия также образуется одновременно с формированием ворсинок, но после 4,5-5-мес. возраста исчезает.

Третье. В ходе исследования эпителия тонкой кишки плодов коров выявлено ряд закономерностей, имеющих общебиологическое значение. 1. Установлено наличие прямой и обратной коррелятивной связи между МИ и ИА эпителиоцитов различных участков ворсинок, крипт и дуоденальных желез в эмбриогенезе. 2. Установлен биологический ритм периодичности смены ворсинок. Доказана связь процессов смены ворсинок с экструзией эпителиального пласта. 3. Обоснована «скорость обновления» МЭ различных участков ворсинок и крипт. 4. Выявлено, что репродуктивную функцию кишечного эпителия выполняет зона основания ворсинки и крипты. 5. Найден критерий (по расположению ядер в эпителиоцитах вершины ворсинки) определения «зрелости» ворсинок в эмбриогенезе. 6. Установлена стадийность динамики НК, углеводных компонентов и белков эпителиоцитов и выделены критические фазы нуклеопротеидного обмена (у плодов 5 мес. и за 5?7 сут. перед рождением). 7. Установлены сроки формирования криптально-ворсиночного градиента распределения РНК, а также формирования ворсиночно-криптального градиента распределения белков и белковых групп.

3.4 Развитие стенки тонкой кишки и ее эпителиальной ткани на этапе новорожденности (от рождения до 10-15 суток)

Морфометрические исследования показали, что толщина кишечной стенки двенадцатиперстной кишки у новорожденных телят, по сравнению с толщиной кишечной стенки у плодов 9 мес., увеличивается в 1,9 раза, как в области складок, так и между складок. Это увеличение связано с формированием и ростом складок и толщины слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки. Толщина кишечной стенки между складок постепенно увеличивается и у 15-сут. телят составляет 90,1 % от толщины взрослых животных. В области складок толщина кишечной стенки уменьшается на 5 сутки и затем возрастает (рис. 4). У телят 15 суток толщина кишечной стенки двенадцатиперстной кишки в области складок составляет 84,5 % от толщины стенки у взрослых животных.

Слизистая оболочка вне складок стенки двенадцатиперстной кишки после рождения теленка (до 1 сут.) возрастает, затем снижается на 5-сут. и вновь возрастает до конца этапа новорожденности. У 15-сут. телят толщина слизистой оболочки вне складок составляет 93,9 % от толщины стенки взрослого животного. Толщина слизистой оболочки в области складок возрастает до 1-сут. возраста теленка, затем снижается на 5 сут. и постепенно возрастает до 15 сут. У 15-сут. телят толщина слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки (в области складок) составляет 83,5 % от толщины этой оболочки у взрослых животных.

Возраст телят от рождения до 10?15 суток, по данным Л. П. Тельцова (1998), является критической фазой. Он характеризуется сменой питания, дыхания и терморегуляции., активным приспособлением к условиям гравитации и адаптационной перестройкой органов и систем организма (Чегина, 1993, Антошина, 1996). Работами С. П. Сорокового (1976), доказано, что формирование гистоструктур органов новорожденных телят зависит от уровня кормления коров-матерей. Содержание коров-матерей на недостаточных и неполноценных кормовых рационах приводит к значительной задержке дифференциации тканевых структур ряда органов новорожденных телят, в том числе эпителия слизистой оболочки сычуга, тонкого отдела кишечника и т.д.

У новорожденных телят структура эпителиоцитов вершин ворсинок усложняется. ЭМИ показали, что апикальная поверхность покрыта высокими микроворсинками. Эндоплазматическая сеть сосредоточена, в основном, в апикальной части клеток. Митохондрии локализуются между ядром и терминальной сетью, принимая различную форму. Комплекс Гольджи размещается над ядром и занимает основную площадь цитоплазмы. 0б аналогичных изменениях митохондриального аппарата в эпителиальных клетках слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки крысы в ходе эмбриогенеза указано в работах Л. И. Растегаевой и В. М. Чучкова (1995), Е. Г. Морозовой (2006), Е. Е. Чучковой (2006).

На этапе новорожденности гистохимическими исследованиями установлено, что ядра эпителиоцитов вершин и боковых поверхностей ворсинок теряют равномерность распределения в кариоплазме ДНК. Прежним распределением ДНК в ядрах эпителиоцитов остаются клетки основания ворсинок и шейки крипт, в целом отмечается незначительное снижение интенсивности реакции на ДНК в ядрах эпителиоцитов от основания до вершины ворсинки. Неравномерность распределения ДНК в кариоплазме свидетельствует о снижении митотической способности клеток. На основании наших данных о динамике цитоплазменно-ядерных отношений, митотического индекса, индекса апоптоза, их соотношения в эпителиоцитах тонкой кишки новорожденных телят, можно заключить, что репродуктивной зоной эпителия в тонкой кишке у новорожденных телят являются кроме крипт и основание ворсинок. В цитоплазме эпителиоцитов разных участков ворсинки и крипт выявляются три фракции РНК (по локализации, интенсивности реакции и цветности): диффузная, зернистая и перинуклеарная. Из 3-х фракций РНК цитоплазмы наиболее интенсивная реакция отмечается в перинуклеарной РНК, в ядре - ядрышковая. Накопление РНК в ядрышках эпителиоцитов опережает их накопление в цитоплазме. Реакция на РНК в энтероцитах стенки двенадцатиперстной кишки у новорожденных телят выше, чем в тощей и подвздошной (Романова, 1998). Об аналогичных изменениях содержания нуклеиновых кислот в слизистой оболочке двенадцатиперстной и тощей кишок новорожденных животных от 1 до 24-суточного возраста описано в физиологических работах З.П. Скородинского, В.П. Романишина, М.Д. Ганина (1970), В.П. Романишина, З.П. Скородинского и др. (1970), С.В. Стояновского, В.П. Фрич (1997). На фоне морфологических возрастных сдвигов установлены общие закономерности локализации нуклеиновых кислот и динамика их содержания в эпителиоцитах по этапам развития в двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишках крупного рогатого скота. Впервые установлены специфические особенности в разных отделах тонкой кишки.

В эпителиальных клетках тонкой кишки телят новорожденного этапа развития отмечено повышенное содержание протеогликанов, гликозаминогликанов типа гиалуроновой кислоты, сульфатированных гликозаминогликанов типа хондроитин-4-сульфат и хондроитин-6-сульфат. К 15-суточному возрасту в эпителиальных клетках отмечено повышенное содержание сиалогликопротеинов. Особенно много их содержится в бокаловидных клетках ворсинок и крипт, что связано с их специфическими функциями.

На этапе новорожденности наблюдается повышение содержания суммарных белков. Одновременно отмечается снижение содержания кислых белков и увеличение содержания основных белков к 15-суточному возрасту. Кислые белки окрашиваются в темно-синий или темно-фиолетовый цвет. Основные белки формируют остов клетки и выявляются в виде равномерной сети синего или розового цвета. Эпителий тонкой кишки на этапе новорожденности подвергается адаптационной перестройке. Ему свойственна перестройка белкового обмена веществ микроворсинчатых эпителиоцитов. Об этом свидетельствует динамика накопления белковых фракций.

3.5 Развитие стенки тонкой кишки и ее эпителиальной ткани на молочном и переходном этапах развития

Проведенные исследования кишечной стенки двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок крупного рогатого скота черно-пестрой породы на молочном и переходном этапах развития показали, что в строении ее имеются специфические отличия: по динамике развития толщины слоев кишечной стенки; по высоте складок и их направлению; по высоте и ширине ворсинок слизистой оболочки этих кишок; по длине и ширине кишечных крипт; по возрастной динамике и плотности расположения дуоденальных желез.

Толщина кишечной стенки вне складок двенадцатиперстной кишки увеличивается на молочном этапе на 144,8 мкм, на переходном - на 133,9 мкм и достигает толщины взрослых животных. Толщина слизистой оболочки стенки двенадцатиперстной кишки достигает толщины взрослых животных также к 6-месячному возрасту телят, как высота и ширина ворсинок. Об этом свидетельствуют показатели относительного роста толщины стенки 6-месячных телят в процентах к толщине взрослых животных. Стенка вне складок составляет 98,6 %, слизистая оболочка - 98,3 %, мышечная - 98,9 %, серозная - 97,9 % (рис. 5).

Аналогичная закономерность устанавливается и для развития кишечной стенки и ее оболочек для тощей и подвздошной кишок. Применяя метод относительного роста в процентах по Броди впервые выявлены повышенный и пониженный темп роста стенки вне складок, слизистой, мышечной и серозной оболочек двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок. Темп относительного прироста (интенсивность роста) по Броди во внутриутробном периоде для двенадцатиперстной кишки повышен: для слизистой оболочки - у телят на 1 и 2 мес., для мышечной - на 2 и 5 мес., для серозной - на 1 мес., 3 и 6 мес.; понижен соответственно: на 5 и 6 мес., на 3 и 6 мес., на 4 и 5 мес. Пониженный темп роста толщины всей стенки двенадцатиперстной кишки у телят на молочном и переходном этапах установлен на 15 сут., на 4 мес., 5 и 6 мес. Относительный прирост по Броди оболочек стенки тощей кишки повышен: для слизистой оболочки у телят на 15 сут., мышечной - на 1-ом, 2-ом, 5-ом мес., серозной - на 15 сут., 1-ом, 5-ом и 6-ом мес.; пониженный темп роста для слизистой оболочки установлен на 1-ом, 6-ом мес., мышечной - на 15 сут., 3-ем и 6-ом мес., серозной - на 2-ом и 4-ом мес. В то время как темп развития всей кишечной стенки тощей кишки повышен на 15 сут., понижен - на 1-ом и 6-ом мес. Темп интенсивности прироста в процентах по Броди повышен для подвздошной кишки: слизистой оболочки у телят 15 сут., мышечной - на 6-ом мес., серозной - на 15 сут., 4-ом, 6-ом мес.; понижен: для слизистой оболочки - на 1-ом и 6-ом мес., мышечной - на 15 сут. и 1-ом и 4-ом мес., серозной - на 1-ом и 3-ем мес. Для всей стенки подвздошной кишки повышенный темп роста выявляется на 15 сут. и 5-ом мес., пониженный - на 1-ом, 3-ем и 6-ом мес. Следовательно, каждая оболочка кишечной стенки двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок имеет свои темпы развития.

Изучение развития крипт и ворсинок слизистой оболочки двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок на молочном и переходном этапах развития крупного рогатого скота черно-пестрой породы показало, что соотношение количества крипт к количеству ворсинок на 550 мкм слизистой оболочки в двенадцатиперстной кишке увеличивается от 2,45 до 2,83, в тощей - от 2,68 до 2,99, а для подвздошной уменьшается - от 2,91 до 2,86. Причем количество крипт в двенадцатиперстной кишке у телят от 1 до 6 месяцев уменьшается от 11,6 до 10,6, как и количество ворсинок - от 4,75 до 3,74. В тощей кишке количество крипт снижается от 15,6 до 14,6, а ворсинок - от 5,8 до 4,36, в подвздошной соответственно - от 14,8 до 12,2 и от 5,07 до 4,26. Эти сведения, по нашему мнению, найдут применение при постановке диагноза различных заболеваний, как "норма". Полученные данные по возрастной архитектонике стенки отделов тонкой кишки являются морфофункциональным статусом, который необходим ветеринарным врачам при постановке диагноза при желудочно-кишечных заболеваниях. Установлена специфичность формирования складок, ворсинок, крипт слизистой оболочкой разных отделов тонкой кишки. По мнению А. М. Уголева (1985), за счет циркулярных и продольных складок площадь всасывания в тонкой кишке увеличивается в 3 раза, за счет ворсинок - в 10 раз и за счет микроворсинок каемчатых клеток - в 20 раз. Суммарно складки, ворсинки, крипты и микроворсинки обеспечивают увеличение площади всасывания в 600 раз.

Установлено, что эпителий слизистой оболочки во всех отделах тонкой кишки однослойный призматический (цилиндрический) каемчатый. Он имеет следующий клеточный дифферонный состав: каемчатые (МЭ), бокаловидные (БК), энтероэндокринные (ЭК), панетовские (ПК) и камбиальные клетки. Каемчатые клетки (МЭ) образуют щеточную каемку на оптимальной поверхности. ЭМИ установлено, что каждый энтероцит имеет более 1000 микроворсинок. По данным Уголева (1978), Кушак (1987); Морозова, Лисенкова и др., (1988), они участвуют в мембранном пищеварении и всасывают продукты распада белков, жиров и углеводов. Кроме энтероцитов, в каемчатом эпителии присутствуют бокаловидные клетки (БК), вырабатывающие слизь. Количество их нарастает от двенадцатиперстной кишки к подвздошной. В криптах, особенно в области дна их, расположены энтероэндокринные клетки (ЭК). Они, по данным В.В. Яглова (1989), вырабатывают гастрин, холецистокинин, желудочный ингибирующий пептид, мотилин и др. гормоны. Клетки Панета содержат гранулы в апикальной части. Чаще всего эти клетки выявляются на дне крипт. Цитометрические исследования показали, что энтероциты тонкой кишки разных отделов (вершины, боковых поверхностей и основания ворсинок, крипт, дуоденальных желез) у телят на молочном и переходном этапах изменяются незначительно, как и их ЦЯО. В структурном отношении во все сроки индивидуального развития можно выделить два типа эндокриноцитов. Некоторые из них не сообщаются с полостью тонкой кишки (это клетки «закрытого» типа) и очевидно способны реагировать на изменения местного гомеостаза. Другие клетки своим апикальным концом, снабженным микроворсинками, достигают просвета кишечника (клетки «открытого» типа). Они выполняют роль своеобразных хеморецепторов и способны реагировать на изменения рН и химического состава его содержимого. Аналогичные результаты получены О. В. Ивановой (1995), при изучении эпителия прямой кишки кур в онтогенезе. На раннюю дифференцировку эндокринного аппарата отмечают в своих работах Г. Н. Рассолько (1978) при исследовании эндокриноцитов в поджелудочной железе и желудке, О. Н. Матвеева (1991) и B. C. Alison (1990) - при изучении эпителия тонкой кишки белых крыс в онтогенезе. Выявленная закономерность для МЭ тонкой кишки телят прослеживается для бокаловидных клеток, кишечных эндокриноцитов и панетовских клеток. Общепризнанным является факт прямой зависимости цитоплазменно-ядерного отношения от уровня дифференцированности клеток (Клишов, 1996; Gabella, 2001) и его увеличения при гипертрофии ткани (Хесин, 1967).

Смена эпителия во все отделах тонкой кишки у телят черно-пестрой породы происходит быстро. Об этом свидетельствуют показатели митотического индекса (МИ) и индекса апоптоза (ИА) эпителия тонкой кишки. Отношение МИ и ИА особенно высокая в области крипт - от 24,6 до 30,6 и основания ворсинок - от 12,7 до 14,4. Это дает основание, наряду с наличием фигур деления, сделать вывод, что репродуктивной зоной эпителия тонкой кишки у телят молочного и переходного этапов являются не только крипты, но и основания ворсинок. Согласно данным К. А. Зуфарова (1976), органам с высоким исходным уровнем клеточного обновления свойственна преимущественно пролиферативная форма восстановления. Установлено (Тельцов, Романова , Музыка, 2009), что ускорение пролиферации кишечного эпителия обуславливает несколько вариантов возможных структурных и функциональных последствий в зависимости от продолжительности жизни эпителиоцитов. В частности, увеличение скорости миграции эпителиоцитов при сокращении продолжительности их жизни может не привести к существенному изменению структурных параметров слизистой оболочки кишечника. При увеличении скорости миграции эпителиоцитов, задержке развития стромальных элементов собственной пластинки слизистой оболочки и стабильной продолжительности жизни клеток толщина слизистой оболочки может также не увеличиваться. Избыточная клеточная масса может начать формировать микрополиповидные образования - неорганизованные выросты эпителиального пласта, лишенные стромы (Jankowski et al., 1994). Следовательно, гиперплазия слизистой оболочки предполагает наряду с высокой скоростью пролиферативной активности и увеличением продолжительности жизни эпителиоцитов, соответствующий рост стромальных элементов собственной пластинки слизистой оболочки. Дифференциация клеток разных систем тканей необратима и в каждой системе тканей имеет свои особенности. Основой клеточной дифференцировки, по данным С.И. Щелкунова (1977), является синтез нуклеиновых кислот и белков, что и составляет основу ядерно-цитоплазменных взаимоотношений.

Гистохимические исследования эпителия тонкой кишки свидетельствуют о высоком содержании РНК и РНП в клетках. По содержанию РНК и РНП в клетках эпителия тонкой кишки установлен криптально-ворсиночный градиент, а по длине тонкой кишки - проксимально-дистальный.

Анализ развития кишечной стенки и ее эпителиального слоя на данном этапе развития в связи с переходом животных на кормление грубыми кормами, свидетельствует о том, что происходит адаптационная перестройка, связанная с усилением функциональной нагрузки, с активацией внутриполостного, пристеночного и внутриклеточного пищеварения. В этом периоде наблюдается окончательная дифференцировка кишечной стенки с развитием всех ее слоев и функционирующих энтероцитов на всех уровнях ворсинок, которые являются высокодифференцированными всасывающими клетками. Эпителиальный слой во всех отделах тонко кишки отличается выраженным клеточным полиморфизмом.

3.6 Развитие стенки тонкой кишки и ее эпителиальной ткани на этапе половой зрелости

При проведении гистологических исследований кишечной стенки тонкой кишки телят крупного рогатого скота черно-пестрой породы на этапе полового созревания отмечено, что в строении кишечной стенки имеются специфические отличия. Стенка двенадцатиперстной кишки отличается от строения тощей и подвздошной кишок: по развитию толщины слоев кишечной стенки; по высоте складок и их направлению; по высоте и ширине ворсинок слизистой оболочки этих кишок; по длине и ширине кишечных крипт; по возрастной архитектонике кишечной стенки; по возрастному расположению дуоденальных желез. Толщина кишечной стенки вне складок двенадцатиперстной кишки у животных на этапе формирования половой зрелости увеличивается незначительно от 3038,7 ± 230,4 до 3168,5 ± 230,0 мкм - на 129,8 мкм и достигает толщины 94-95% от взрослых животных, практически уже к 6-9- месячному возрасту (рис. 6). Толщина стенки тощей кишки увеличивается от 2488,3 ± 224,0 до 2638,4 ± 228,0 мкм, подвздошной кишки - от 2703,8 ± 224,0 до 2859,6 ± 224,6 мкм. Толщина слизистой (в области складок и вне складок), мышечной и серозной оболочек стенки двенадцатиперстной кишки достигают толщины, близкой к толщине у взрослых животных, также в 6-8-месячном возрасте. Об этом свидетельствуют абсолютные показатели динамики роста толщины этих структур и динамика относительного роста толщины стенки в процентах к толщине взрослых животных: толщина стенки вне складок у 6-месячных животных составляет 93,7 %; толщина слизистой оболочки (в области складок) - 98,8 %; мышечной - 97,7 %; серозной - 92,6 %. Аналогичная закономерность установлена и для развития кишечной стенки тощей кишки (вне складок) и ее слизистой оболочки (в области складок), мышечной и серозной, а также для подвздошной. Эти исследования свидетельствуют о том, что стенка двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок у животных достигает структурно-функциональной зрелости на этапе полового созревания.

На формирование дефинитивности строения структур кишечной стенки показывают и данные по развитию ворсинок и крипт слизистой оболочки двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок. Соотношение количества крипт к количеству ворсинок на величину (длину) 550 мкм слизистой оболочки в двенадцатиперстной кишке снижается от 2,83 до 2,60; в тощей также снижается - от 3,34 до 2,90; а для подвздошной - наоборот повышается от 2,86 до 3,34. Для взрослых животных это соотношение равно: в двенадцатиперстной - 2,57; в тощей - 2,99; в подвздошной - 3,04. Причем количество крипт в двенадцатиперстной кишке у животных в возрасте от 6 до 12 месяцев на определенной длине слизистой оболочки (550 мкм) уменьшается от 10,6 до 9,6, как и количество ворсинок - от 3,74 до 3,69. В тощей кишке количество крипт также уменьшается от 14,6 до 12,8, ворсинок - от 4,36 до 4,3; и в подвздошной кишке количество крипт и ворсинок соответственно уменьшается - от 12,6 до 11,8 и от 4,26 до 3,90. Высота ворсинок в двенадцатиперстной кишке колеблется от 600,9 ± 55,0 до 608,4 ± 61,0 мкм, глубина крипт - от 420,0 ± 38,4 до 458,2 ± 45,0 мкм. Соотношение высоты ворсинки к глубине крипт - 1,4 : 1. В тощей кишке высота ворсинок выше - от 918,6 ± 9,4 до 930,5 ± 9,6 мкм, глубина крипт - от 250,0 ± 24,5 до 318,4 ± 31,2 мкм, соотношение - 2,9 : 1. В подвздошной кишке соответственно - от 928,2 ± 18,6 до 968,0 ± 49,7; от 232,0 ± 20,4 до 370,0 ± 36,4, соотношение - 2,6 : 1.Эти данные по черно-пестрой породе крупного рогатого скота получены впервые. Генетически обусловленную перестройку кишечной стенки в постнатальном онтогенезе необходимо учитывать при постановке диагноза различных заболеваний, как «норму». Полученные данные по возрастной архитектонике стенки тонкой кишки и ее составляющих отделов являются морфофункциональным статусом.

Исследования показали, что дифферонный клеточный состав эпителия слизистой оболочки тонкой кишки у животных на этапе полового созревания меняется незначительно. Среди эпителия выявляются клетки «мигранты», количество которых увеличивается на 10 клеток энтероцитов от 2,23 до 2,50. Из «мигрантов» чаще всего выявляются лимфоциты, эозинофилы, базофилы. На наличие клеток «мигрантов» у экспериментальных животных и у человека указывают О. Н. Сурвилло, А. Я. Должанов и др. (1974), Н. Оtto et а1. (1972), Л. В. Давлетова (1974), К. А. Зуфаров и др. (1974), Д. С. Саркисов (1977), Л. И. Аруин (1982), Л. П. Тельцов (1984), А. Ю. Цибулевский, Ю. К. Елецкий (1991). Роль клеток «мигрантов» в эпителии тонкой кишки животных и человека велика. Процесс миграции лимфоцитов обусловлен не только завершением жизненного цикла и избавлением от них организма, но и защитной функцией внутренней среды организма (Зуфаров и др., 1974; Панченко и др., 1993). Как показали исследования В. А. Труфакина, А. Н. Шмакова (1990), введение микробов в просвет кишки крыс вызывает усиленную миграцию клеток в эпителиальный пласт. Экструзия эпителия вершин ворсинок и клеток «мигрантов» в кишечную полость сопровождается обогащением содержимого нуклеопротеидами, белками, а также внутриклеточными ферментами. Цитометрические исследования энтероцитов тонкой кишки разных отделов (вершина, боковые поверхности и основания ворсинок, крипт, дуоденальных желез) у животных на этапе формирования половой зрелости изменяются незначительно, как и их ЦЯО. Эта закономерность прослеживается также для бокаловидных клеток, кишечных эндокриноцитов и панетовских клеток.

Смена эпителия в тонкой кишке у животных на этапе половой зрелости происходит быстро. Об этом свидетельствуют показатели митотического индекса (МИ) и индекса апоптоза (ИА) эпителия тонкой кишки. Отношение МИ к ИА особенно высокое в области крипт - от 22,4 до 24,6 и основания ворсинок - от 12,7 до 9,8; низкое - в области боковых поверхностей ворсинки - от 0,36 до 0,37. Это дало основание сделать вывод, что репродуктивной зоной эпителия тонкой кишки у животных на этапе половой зрелости, как и на предшествующем этапе, являются не только крипты, но и основание ворсинок. Высокий уровень камбиальных возможностей эпителия кишечных крипт в зрелом возрасте подтверждается данными, полученными Д.Б. Никитюк (1994) при изучении кишечника человека - увеличение с возрастом относительного содержания недифференцированных эпителиоцитов в криптах толстой кишки. Интенсивное утолщение слизистой оболочки и увеличение глубины крипт в ранние сроки постнатального онтогенеза обусловлено, вероятно, длительным существованием клеток в стадии дифференцировки (Зуфаров, 1974) и десквамацией их с поверхности ворсинок слизистой оболочки. Вместе с тем существует мнение о снижении скорости пролиферации с возрастом и замедлении обновления эпителиоцитов пищеварительного тракта (Walton, 1982; Аруин, 1986). Подобные расхождения мнений исследователей о возрастных изменениях пролиферативных возможностей эпителия слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта во многом обусловлены существенными различиями применяемых методов, а также спецификой видов экспериментальных животных, исследуемых отделов кишечника, диеты, а также сезона года (Sprinz, 1971).

Гистохимические исследования эпителия тонкой кишки по Браше свидетельствуют о высоком содержании РНК в клетках различных дифферонов. По содержанию РНК в клетках эпителия в двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок установлен криптально-ворсиночный градиент (то есть в эпителиоцитах крипт РНК больше, чем в МЭ вершины ворсинок), а по длине тонкой кишки - проксимально-дистальный (то есть в эпителии двенадцатиперстной кишки содержание РНК выше, чем в эпителии тощей и подвздошной кишок). Как свидетельствуют полученные результаты, в эпителии слизистой оболочки тонкой кишки у животных 6-12 мес. наблюдается относительная стабильность ДНК в ядрах клеток. Исследования по содержанию и расположению ДНК и РНК в ядре и в цитоплазме эпителоцитов тонкой кишки у животных на этапе половой зрелости подтверждают цитохимические исследования Л. П. Тельцова (1984), биохимические - De Luka Flaherty (1990), J. F. Medrano, L. Sharrow (1989). Нами впервые в динамике нуклеопротеидного обмена на этом этапе выделено три стадии: первая от 6 до 12 мес. - стадия снижения содержания нуклеиновых кислот в цитоплазме эпителиальных клеток; вторая от 12 до 15 мес. - стадия накопления РНК; третья от 15 до 18 мес. - стадия снижения содержания РНК.

Изучение распределения углеводсодержащих компонентов в эпителиальных клетках слизистой оболочки тонкой кишки показало, что каемчатые энтероциты содержат в зоне исчерченной каемки нейтральные и кислые гликопротеины. Преобладающим компонентом секрета в данной зоне являются нейтральные гликопротеины. Секрет бокаловидных клеток ворсинок и крипт интенсивно ШИК-позитивен. При гистохимическом исследовании в них обнаружено наличие нейтральных, кислых гликопротеинов и сиалогликопротеинов. Выявленные цитохимические свойства эпителиоцитов слизистой оболочки позволяют предположить, что в процессе онтогенеза устанавливается защитный барьер, предохраняющий слизистую оболочку от агрессивного содержимого желудка, особенно в двенадцатиперстной кишке. По данным Г. М. Могильной и Е. Н. Еременко (1995), такой барьер следует рассматривать, как резистентный и адаптированный к агрессивному желудочному содержимому и детерминирован филогенетически.

Исследования энтероцитов слизистой оболочки тонкой кишки на основные и кислые белки показали некоторые изменения. Отмечены активно функционирующие зоны, о чем свидетельствуют усиление интенсивности реакции на основные белки в криптах и в основании ворсинок, вследствие высокой репродуктивной деятельности данных участков. По всей цитоплазме энтероцитов основные белки проявляются в виде зерен темно-синего цвета. По мере продвижения эпителиального пласта от основания ворсинки до ее верхушки интенсивность реакции на основные белки снижается, а реакция на кислые белки усиливается. Это объясняется тем, что в верхней части ворсинки происходит экструзия эпителиальных клеток в просвет кишки. Вследствие физиологического «старения» в эпителиоцитах вершины ворсинок происходит нарушение окислительно-восстановительных реакций, что ведет к накоплению кислых белков. Цитоплазма клеток окрашивается в сине-фиолетовый цвет. Эпителиальные клетки крипт на гистологических препаратах имеют темно-синее окрашивание. В ядрах эпителиоцитов крипт основные белки выявляются в виде зерен, распределенных по всей кариоплазме, придающие ей синее окрашивание.

При изучении динамики содержания суммарных белков в энтероцитах слизистой оболочки тонкой кишки выявляются три последовательные стадии: первая - от 10 до 12 мес. - снижение основных и увеличение кислых белков; вторая - от 12 до 15 мес. - накопление основных и кислых белков; третья - от 15 до 18 мес. - снижение основных и увеличение кислых белков. Очевидно, это связано со сменой функций всего организма. До 6-7 месяцев у животных идет интенсивное становление пищеварительной функции, а с 8-10 -месячного возраста начинается интенсивное развитие половой системы и биологические ресурсы переключаются на нее. К 10-12 месяцам формирование половой функции завершается и биологические ресурсы опять переключаются на пищеварительную. В возрасте от 15 до 18 месяцев у животных наблюдается снижение интенсивности реакции в энтероцитах на суммарные и увеличение кислых белков. К этому возрасту животных развитие практически завершается и интенсивность белкового обмена в энтероцитах тонкой кишки снижается.

Полученные данные открывают новую проблему в биологии развития - периодизацию развития органов пищеварения (органогенез) и эпителиальной ткани (гистогенез) по этапам развития. Эти данные использованы в современной периодизации развития крупного рогатого скота в онтогенезе (Тельцов, Романова, 1997, 2001, 2005) и в практической деятельности при составлении рационов кормления по этапам развития организма.

ВЫВОДЫ

1. Развитие кишечной стенки двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок и их оболочек в эмбриогенезе протекает асинхронно и подчинено проксимально-дистальному и брыжеечно-дистальному градиентам развития. Динамика развития кишечной стенки на разных этапах эмбриогенеза неодинакова и сопровождается повышенными и пониженными темпами роста слизистой, мышечной и серозной оболочек, специфичной для каждого этапа развития организма.

2. Слизистая оболочка тонкой кишки в эмбриогенезе формирует вначале эпителиальные выпячивания, затем эпителиально-соединительные выросты (временные ворсинки), позднее - дефинитивную структуру с истинными ворсинками. В эмбриогенезе происходит смена 3-х генераций истинных ворсинок тонкой кишки. Смена генераций ворсинок в двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишках протекает неодновременно, но с одинаковым биологическим ритмом в 2-3 месяца. Найден критерий определения взрослой ворсинки от растущей - по расположению ядра в эпителиоцитах.

Специализация структур слизистой оболочки начинается на среднеплодной стадии развития плода (5-7 мес.), продолжается - на позднеплодной (7-9 мес.) и на этапе новорожденности (от рождения до 10-15 сут.). Она осуществляется по различным направлениям: по толщине кишечной стенки; по высоте и форме складок слизистой оболочки и их локализации и направлению; по высоте и ширине ворсинок; по динамике роста и развития оболочек; по различному дифферонному составу эпителия по этапам развития; по специфическому белковому, нуклеопротеидному и углеводному обменам.

Стенка тонкой кишки и ее слизистая оболочка на среднеплодной стадии (у плодов 5-7 мес.) и на этапе новорожденности (от рождения до 10-15 суток) находится в критической фазе развития и характеризуется: сменой имеющихся структур слизистой оболочки и формированием новых; резким увеличением количества клеток «мигрантов» в эпителии; асинхронностью развития оболочек; резким снижением и увеличением митотического индекса и индекса апоптоза энтероцитов; увеличением нуклеопротеидного обмена; десинхронизацией углеводного и белкового обмена.

3. Из клеточных дифферонов кишечного эпителия слизистой оболочки тонкой кишки вначале дифференцируются призматические, бокаловидные, базально-зернистые, а позднее - апикально-зернистые клетки. На позднеплодной стадии развития (у плодов 7-9 мес.) эпителий тонкой кишки животных содержит все клеточные диффероны и участвует в эмбриональном пищеварении. Камбиальными участками эпителия тонкой кишки являются не только крипты, но и основания ворсинок.

4. В динамике нуклеопротеидного обмена энтероцитов в эмбриогенезе и на этапе новорожденности установлены пять стадий: первая - до 90 суток, стадия интенсивного содержания в ядре ДНК и накопление в цитоплазме РНК; вторая - от 3 до 5 мес., стадия десинхронизации реакции на ДНК в энтероцитах разных участков ворсинок и крипт и снижения содержания РНК в ядре и цитоплазме; третья - 5 - 7 мес., повышения интенсивности реакции на РНК; четвертая - от 7 мес. до рождения, повышения РНК и стабильности ДНК; пятая - от рождения до 10-15 суток, повышение содержания РНК в энтероцитах.

5. В динамике углеводных компонентов энтероцитов тонкой кишки в эмбриогенезе установлены четыре стадии: первая до 2,3-3 мес. - содержание большого количества гликогена и малого - протеогликанов, включающих гликозаминогликанов типа гиалуроновой кислоты. Вторая от 2 до 5 мес. плодов - накопление протеогликанов, гликозаминогликанов типа гиалуроновой кислоты и сульфатированных гликозаминогликанов типа хондроитин-4-сульфат и хондроитин-6-сульфат. В этом возрасте впервые выявляются сиалогликопротеины. Третья стадия от 5-5,5 мес. до рождения - стадия дефинитивной дифференциации углеводного обмена всех клеточных дифферонов кишечного эпителия. Четвертая - этап новорожденности (от рождения до 10-15 суток) - десинхронизация углеводных компонентов эпителия разных отделов тонкой кишки и повышение сиалогликопротеинов.

6. В динамике содержания белков в энтероцитах тонкой кишки в эмбриогенезе выделены последовательные стадии: первая до 3-4 месяцев плода - накопления суммарных белков; вторая от 3-4 мес. до 6 мес. плода - снижения содержания кислых белков и постепенное накопление основных белков; третья от 6 мес. плода до рождения - накопление в энтероцитах суммарных белков; четвертая от рождения до 10-15 сут. телят - десинхронизация белкового обмена энтероцитов тонкой кишки телят.

7. У телят на молочном и переходном этапах развития установлен структурно-функциональный статус «норма» стенки тонкой кишки. В архитектонике возрастных изменений кишечной стенки, ее оболочек, ворсинок, крипт и складок выявлены специфические отличия для двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок: а) по толщине кишечной стенки; б) по высоте складок; в) по высоте и ширине ворсинок; г) по длине и ширине крипт; д) по возрастной динамике плотности расположения дуоденальных желез; е) по толщине мышечной оболочки; ж) по толщине серозной оболочки; з) по относительному росту и напряженности прироста в процентах по Броди толщины стенки и ее оболочек; и) по содержанию в клеточных дифферонах эпителия нуклеиновых кислот, углеводных компонентов, белков, белковых групп и аминокислот.

Соотношение количества крипт и ворсинок на 550 мкм длины слизистой оболочки разных отделов тонкой кишки в постнатальном периоде развития телят неодинаково. В двенадцатиперстной кишке соотношение количества ворсинок и крипт в 1-мес. возрасте составляет 2,45, в 2 мес. - 2,58, в 3 мес. - 2,68, в 4 мес. - 2,73, в 5 мес. - 2,77, в 6 мес. - 2,83, у взрослых животных - 2,5. Аналогичные показатели по месяцам для тощей кишки: 2,68, 2,79, 2,93, 3,13, 3,34, 2,99; для подвздошной кишки - 2,91, 3,04, 3,06, 3,0, 2,93, 2,86 и 3,04.

8. По содержанию нуклеопротеидов в дифферонах эпителия кишечной стенки тонкой кишки гистохимическими исследованиями установлен криптально-ворсиночный градиент распределения, а по длине тонкой кишки - проксимо-дистальный градиент. В динамике РНК обмена установлены стадии подъема - от 3 до 6 мес. и стадии снижения - от 15 сут. до 3 мес.

9. Площадь ядра и площадь клеток эпителия слизистой оболочки, как и ЦЯО, до 6-месячного возраста телят изменяются недостоверно. Исследования митотического индекса и индекса апоптоза клеток эпителия вершины, боковых поверхностей, основания ворсинок, устья, тела и дна крипт свидетельствуют о том, что репродуктивной зоной у телят на молочном и переходном этапах развития являются не только крипты, но и основания ворсинок. О становлении специфичности и стабильности в развитии эпителия к 6-месячному возрасту телят свидетельствуют данные о МИ и ИА энтероцитов, отношения МИ к ИА энтероцитов крипт, основании ворсинок, дуоденальных желез и системы «крипта> ворсинка».

10. Клеточный дифферонный состав эпителия слизистой оболочки двенадцатиперстной, тощей и подвздошной кишок на этапе формирования половой зрелости изменяется незначительно. Количество клеток «мигрантов» в эпителии увеличивается на 10 каемчатых клеток от 2,2 до 2,5. Среди клеток «мигрантов» чаще выявляются лимфоциты, эозинофилы, базофилы.

Площадь ядра и цитоплазмы, цитоплазменно-ядерное отношение энтероцитов тонкой кишки на этапе полового созревания изменяются в зависимости от возраста животного и локализации на ворсинках и в криптах. Площадь ядра и цитоплазмы бокаловидных, панетовских клеток и эндокриноцитов находятся в пределах величин, свойственных клеткам взрослых животных. Отношение митотического индекса к индексу апоптоза самое высокое в эпителии двенадцатиперстной кишки в области крипт (24,6 - 26,0 ‰) и основания ворсинок (12,7 - 9,8 ‰).

В динамике содержания суммарных белков и нуклеопротеидов в клеточных дифферонах эпителия слизистой оболочки тонкой кишки выделяются три последовательные стадии: первая от 6 до 12 мес. животных - снижение содержания суммарных белков и нуклеопротеидов; вторая от 12 до 15 мес. - накопление и третья от 15 до 18 мес. - снижение содержания суммарных белков и нуклеопротеидов. По содержанию белков и нуклеопротеидов в энтероцитах установлен криптально-ворсиночный (в эпителии крипт содержание этих веществ больше, чем в эпителии вершины ворсинок) и краниально-каудальный градиенты (в эпителии двенадцатиперстной кишки содержание их больше, чем в эпителии тощей и подвздошной кишок).

11. Развитие кишечного эпителия тонкой кишки в раннем онтогенезе крупного рогатого скота черно-пестрой породы протекает в три периода: доспецифический (у плодов до 3 мес.); период формирования специфичности ткани (у плодов от 3 до 5,5 мес.); специфический (от 5,5 - 6 мес. плода до 18-мес. возраста животного). В последнем периоде выделено три этапа: начальный дефинитивный (от 5,5 - 6 мес. плода до рождения), промежуточный дефинитивный (от рождения животных до 6 - 12 мес.), истинно дефинитивный (у животных от 10 - 12 мес. до 18 мес.). Начальному дефинитивному свойственно накопление содержания РНК и РНП, суммарных белков, белковых групп, аминокислот, структурных и секреторных гликопротеидов, протеогликанов в комплексе с несульфатированными и сульфатированными гликозаминогликанами в клеточных дифферонах эпителия. Промежуточный дефинитивный этап характеризуется: снижением и накоплением РНК и РНП, кислых и суммарных белков, - SH- групп белков и аминокислот, протеогликанов в комплексе с сульфатированными гликозаминогликанами. Истинно дефинитивному этапу свойственно: а) стабильное содержание РНП, РНК и ДНК, суммарных белков, белковых групп, аминокислот, структурных и секреторных гликопротеидов; б) накопление протеогликанов в комплексе с сульфатированными гликозаминогликанами и уменьшение гиалуроновой кислоты в клеточных дифферонах эпителия.

12. Между органогенезом (развитие стенки тонкой кишки) и гистогенезом (развитие эпителиальной ткани) на всех периодах и этапах развития организма существует прямо пропорциональная взаимосвязь, при ведущей роли органогенеза. Орган, как многотканевая система, становится дефинитивным только после того, как ткань достигает истинного дефинитивного развития на каждом этапе.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Сведения о возрастной динамике развития кишечной стенки и ее эпителиальной ткани используются в 21 ВУЗе страны в учебном процессе при чтении лекций и проведении лабораторных занятий на биологических и ветеринарных факультетах и написании учебников, учебных пособий и справочных руководств по сравнительной морфологии и физиологии домашних животных. По материалам диссертации издана монография: Тельцов Л. П., Романова Т. А., Музыка И. Г. «Развитие стенки тонкой кишки и ее эпителиальной ткани в онтогенезе». - Саранск: Изд-во Мордов. ун-та, 2009. - 204 с.

Результаты исследований по возрастной динамике кишечной стенки и ее эпителиальной ткани могут быть использованы в ветеринарной практике при дифференциальной диагностике болезней органов пищеварения различной этиологии как структурно-функциональный статус или «норма», а также в практике животноводства при составлении рационов с целью направленного влияния на рост, развитие и повышение продуктивности крупного рогатого скота.

Сведения о цитологических, цитометрических и гистохимических измерениях клеточных дифферонов эпителия слизистой оболочки стенки тонкой кишки являются фундаментальными, их можно использовать в экспериментальных изысканиях в нанотехнологии, как сравнительный материал при изучении внутриклеточного, мембранного и полостного пищеварения в возрастном аспекте по этапам развития.

Полученные данные открывают новую проблему в биологии развития - периодизацию развития органов и тканей пищеварительной системы по возрастным этапам онтогенеза. Они могут быть использованы как модельные при сравнительном изучении развития других органов и тканей разных животных, в том числе и человека в онтогенезе.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ