Теоретичні та практичні аспекти виготовлення гіперімунних сироваток (на моделі вірусів хвороби Ауєскі, геморагічної хвороби кролів і чуми м’ясоїдних)

Автором отработаны оптимальные условия постановки РДП, РРИД, РСК, РДСК, РН, РГА, РЗГА для контроля активности гипериммунных сывороток против чумы плотоядных, болезни Ауески и вирусной геморрагической болезни кроликов и для идентификации возбудителей этих инфекций в культуральных суспензиях и вируссодержащих суспензиях из органов и тканей инфицированных животных.

Показано, что в технологии получения гипериммунных сывороток существенное значение имеет очистка и концентрирование антигена (аэросил, полиэтиленгликоль, комбинированный метод), место и кратность инъекций последнего (в лимфатический узел, внутрибрюшинно, внутривенно), выбор адъюванта (НАФ с типом эмульсии “вода в масле”, ПАФ, масляные адъюванты фирмы “SEPPIC”). Использование этих методов позволяет сократить срок получения гипериммунных сывороток с высокими титрами вирусоспецифических антител от животных-доноров на 29-40 сутки от начала иммунизации. В процессе сравнительных испытаний адъювантов французской фирмы “SEPPIC” (ISA25, ISA27, ISA28, ISA35, ISA50, ISA206) и отечественного производства (НАФ и ПАФ) показана корреляция между степенью воспалительных процессов в месте введения препарата и адъювантными свойствами при оценке их реактогенности и эффекта индукции антител. Установлено, что препараты фирмы “SEPPIC” имеют значительный иммуностимулирующий и пролонгирующий эффект на фоне минимальной реактогенности для животных.

Оптимизированы схемы гипериммунизации лабораторных животных (морских свинок, кроликов), которые при трехкратном введении концентрированных эмульсированных антигенов позволяют за 30-40 суток получать высокоактивные специфические сыворотки, пригодные для постановки серологических реакций. Для биофабричного производства диагностических и лечебных препаратов предложена схема гипериммунизации крупного рогатого скота. Трехкратным введением инактивированных концентрированных антигенов на основе масляных адъювантов, и использования локальной реакции лимфатических узлов, достигается получение на 29-35 сутки от начала иммунизации специфической сыворотки с активностью к вирусу болезни Ауески в РН 7,8±0,2-8,9±0,09 log2, чумы плотоядных 11,15±0,02 log2 и геморрагической болезни кроликов в РЗГА - 14,2±0,2 log2.

Для очистки и консервирования сыворотки с успехом испытан раствор формальдегида. Применение дезмола для очистки целевого продукта от балластных веществ обеспечивает высокую эффективность такого подхода.

На основании экспериментальных и производственных испытаний разработаны и утверждены на государственном уровне ТУ Украины на изготовление “Сыворотки против вирусной геморрагический болезни кроликов”, “Гипериммунной сыворотки против чумы плотоядных из культурального вируса”, “Инактивированной тканевой концентрированной формол-вакцины против вирусной геморрагический болезни кроликов из штамма НК/99”. Изготовленные гипериммунные сыворотки против чумы плотоядных с активностью - 6,2-7,0 log2 в РН и вирусной геморрагический болезни кроликов с активностью - 11,0-13,0 log2 в РЗГА имели высокие превентивные и лечебные свойства при применении на восприимчивых животных.

Ключевые слова: гипериммунная сыворотка, болезнь Ауески, чума плотоядных, геморрагическая болезнь кроликов, диагностика, лечение, инактивация, культура клеток, адъюванты, профилактика.

Kornienko L. Theoretical and practical aspects of hyperimmune sera manufacturing (on pseudorabies viruses models, haemorrhagic illness of rabbits and canine distemper). - Manuscript.

Dissertation on winning of scientific doctor degree of veterinary sciences for speciality 16.00.03 - veterinary microbiology and virology. - National agricalture universitz, Kiev, 2006.

Dissertation is devoted to study to improvement of technological receipt stages hyperimmuns of serums from animals-donors (guinea-pigs, rabbits, pigs, horses, cattle) and scientyfically-experimental basing on this base of methods: inactivation, concentrating, clearance to antigen; different adjuvants, clearance methods of got having a special purpose product, and further application of such preparations with view medical and diagnostic of.

For clearance and conservation of whey with success is examinee a solution formaldehyd. Application dezmol for clearance of having a special purpose product from ballast matters showed a perspectives and high effectiveness of such approach. On base of developed plague viruses indication methods carnivorous and haemorrhagic illness of rabbits trained developments peculiarities of these diseases into dogs and crawls attached to experimental infection.

On the basis of experimental and production tests developed and learned by rote on state level technical making conditions Ukraine on making “Serum against viral haemorrhagic rabbits illness”, “Hyperimmune serum whey against canine distemper of cultivation virus”, “Inactivation tissue concentrated formol-vaccine against viral haemorrhagic illness of rabbits from HK/99 strain”. Made hyperimmune serum wheys against canine distemper and viral haemorrhagic illness of rabbits had high preventive and medical properties attached to application on receptive animals.

Key words: hyperimmune serum, pseudorabies, canine distemper, viral haemorrhagic illness of rabbits, diagnistics, cure, inactivation, cell culture, adjuvants, prophylaxy.

Размещено на Allbest.ru