Клініко-експериментальне обґрунтування діагностики пастерельозу великої рогатої худоби і свиней

При исследовании проб клинического материала от свиней, больных респираторными заболеваниями разной тяжести, также сопоставили эффек-тивность методов диагностики P. multocida и оказалось, что при применении ПЦР пастерелла выделялась в 100,0 %, при бактериологическом исследо-вании - в 80,0 % случаев.

При исследовании факта пастереллоносительства среди свиней благопо-лучного хозяйства отмечено, что бактериологическими исследованиями обнаружено 87,0 % , ПЦР -100,0 % животных-носителей пастереллеза.

Как изучение фактора передачи пастереллезной инфекции, в данной работе продемонстрированы исследования продуктов животного происхож-дения (обрат, продукты отходов бойни), почвы и сточных вод. Наибольший процент P. multocida при исследовании данного материала отнесено к серовару В: обрат - 61,4 % (патогенных - 100,0 %); почва - 15,0 % (патогенных - 100,0 %); сточные воды - 60,0 % (патогенных - 83,3 %) и отходы с бойни - 70,0 % (патогенных - 100,0 %). Патогенность P.multocida серовара В изучали под-кожным введением суточной агаровой культуры этого штамма белым мышам. Доза 0,3 мл вызывала их гибель через 48-72 часа. LD50 для белых мышей составляет 2,2 Ч 10⁷ - 4,5Ч 10⁷ микробных клеток. В дальнейшей экспериментальной работе из этих объектов выделялась P.multocida серовара А, и совсем не выделялся серовар D, что может объяснять его слабая патогенность.

При сопоставлении разных методов диагностики (бактериологическая диагностика, полимеразная цепная реакция) при индикации пастерелл из разных объектов исследования (обрат, почва, навоз, продукты бойни, сточные воды), получили такие результаты: при помощи ПЦР выделено 87,0 %, бактериологической диагностикой - 60,0 %, возбудителя пастерел-лезной инфекции.

Одним из проявлений пастереллезной инфекции являеться инфек-ционный атрофический ринит свиней. Штаммы P.multocida сероваров А и D играют основную этиологическою роль в возникновении этого заболевания в ассоциации с Bordetella bronchiseptica. Именно эти штаммы пастерел продуцируют дерматотоксины. Эпизоотологические исследования дока-зывают, что атрофия носовых раковин ведет к пневмонии поросят. При исследовании в ПЦР 31 пробы слизи носовых истечений свиней выделено 83,87 % серовара А и 90,32 % - серовара D.

Анализ полученных данных в ходе экспериментальной роботы о существовании бактериальных паразитоценозов указал на необходимость применения комплексной вакцины с участием штаммов P. multocida, серо-варов А, В и D, S. choleraesuis, S. typhimurium, E. coli 0157 H 7; E. coli 09 K 99 и E. coli 0157 K 88. Поэтому для профилактики пастереллеза свиней, а также инфекционного атрофического ринита была применена вакцина против пастереллеза, сальмонеллеза и колибактериоза свиней «Пасако», в состав которой входят вышеперечисленные штаммы возбудителей. Эффек-тивность ее применения анализировали в сопоставлении с применением другой вакцины - концентрированной формол-вакцины против сальмо-неллеза, пастереллеза и диплококковой инфекции поросят (ППД). В неблагополучных хозяйствах применение вакцины «Пасако» имело 96,2 % эффективности по сравнению с коммерческой вакциной ППД.

Ключевые слова: пастереллез, диагностика, полимеразно-цепная реакция, бактериологические исследования, иммуноферментный анализ, этиологическая структура, профилактика, серовар, штамм.

Annotation

Yanenko U.M. The optimization of diagnostics of cattle and swine pasteurellosis on base of the clinical and experimental substantiation. - Manuscript

Dissertation for obtaining science degree of philosophy doctor in veterinary medicine on specialty 16.00.03 - veterinary microbiology and virology. - National University of Life and Environmental Sciences of Ukraine, Kyiv, 2009.

Dissertation dedicated for investigation of using and experimental basing of the method polymerase chain reaction for pasteurellosis diagnostics in agricultural animals and determination of value of the method. It was investigated the etiological structure of respiratory diseases of cattle and pigs and determinated the leading role of pasteurella as a secondary etiological factor of infectious rhinotraheitis of cattle and infectious atrophic rhinitis of pigs. It was shown the importance of Pasteurella multocida strains A and D in this diseases.

It was developed “The Instruction for laboratory diagnostics of pasteurellosis animals and birds”, it was asserted with science-methodical council of department veterinary medicine MinAPK of Ukraine, protocol 3 from 20.12.2006.

In the laboratory of veterinary expertise was adopted the patent for using immunoglobulin- free purified bovine serum, what was also free from inhibitors, toxins, mycoplasma and have high stimulated properties for pasteurella.

It was stated the patent “The mode of determination of antilysozyme activity of P. multocida with using purified bovine serum” from 12.11.2007, № u 2007 12479, ent № 357907.

Key words : pasteurellosis, diagnostics, polymerase chain reaction, immu-noferment analysis, bacteriological tests, etiological structure, prophylaxis, sero-type, strain.

Размещено на Allbest.ru