Молекулярно-генетические маркеры риска генерализованного пародонтита и их применение в диагностике

После применения метода главных компонент и вращения факторов были выделены 4 общих фактора, которые могли бы объяснить связи между наблюдаемыми признаками. Были введены 4 новые переменные: 1. -“Бактерии”, 2. - “Предрасп.”, 3. - “Протект.”, 4. - “Вирусы”, которым присвоили коды от 0 (при отсутствии признака) до 3 (при наличии всех признаков).

Для изучения взаимосвязи глубины пародонтального кармана и определенных выше факторов использовали модель линейной регрессии, которую рассчитывали исходя из того, что глубина пародонтального кармана (ПК) является откликом, а “Бактерии”, “Вирусы”, “Протект.”, “Предрасп.” - предикторами агрегированных переменных. Статистический анализ показал, что рассчитанная регрессия являлась значимой на уровне 0,001. При этом все предикторы также были значимыми на уровне 5 %.

На основе стандартизированных коэффициентов (бета), указывающих на важность независимых переменных, вовлеченных в регрессионное уравнение, было сделано заключение, что три фактора - “Бактерии”, “Вирусы” и “Предрасп” (гены, ассоциированные с пародонтитом) значимо связаны с увеличением глубины пародонтального кармана. При этом сильнее всего на этот показатель влиял предиктор “Бактерии”, несколько менее - предиктор “Вирусы” и еще меньше - фактор “Предрасп”. Отрицательные регрессионные коэффициенты фактора “Протект” - 0,162 (В) и - 0,134 (бета) свидетельствовали о том, что данный фактор может способствовать уменьшению глубины пародонтального кармана (табл. 2).

Таблица 2 - Коэффициенты линейной регрессии зависимой переменной - глубины пародонтального кармана

Таким образом, на основании проведенного анализа мы пришли к выводу, что линейная регрессионная модель:

ПК (мм) = 3,04 + 0,848*Бакт. + 0,935*Вирусы - 0,162*Протект. + 0,243*Предрасп.

достаточно хорошо описывает зависимость отклика ПК от предикторов, поэтому с ее помощью можно рассчитать предполагаемую глубину пародонтального кармана (в мм) в участке обследования.

С целью изучения зависимости степени тяжести заболевания (“Диагноз”) от агрегированных предикторов мы использовали модель полиномиальной логистической регрессии с упорядоченным откликом (ordinal regression): “Диагноз” - отклик, а “Бактерии”, “Вирусы”, “Протект.”, “Предрасп.” - предикторы. В качестве предикторов использовали микробиологические и иммуногенетические показатели 160 пациентов с ХГП. Приближение регрессионной модели оценивали при помощи функции максимального правдоподобия, которая оказалась статистически значимой на уровне 0,001.

Отклик “Диагноз” принимал следующие значения: 0 - здоровый пародонт (контрольная группа), 1 - легкая степень заболевания, 2 - средняя степень заболевания, 3 - тяжелая степень заболевания. Были рассчитаны оценки параметров регрессии (табл. 3). Каждой категории зависимых переменных и каждой категории факторов сопоставлена оценка параметра регрессии, причём оценки для соответствующих категорий высших порядков являются дублирующими и поэтому приравнены к нулю. Оценки параметров регрессии для зависимой переменной являются пороговыми оценками, которые для факторов называются оценками положения. Оценки положения дают возможность толковать влияние факторов и указывают на степень этого влияния. Было показано, что значимое на уровне 5 % влияние оказывали следующие предикторы: “Бактерии” на уровне 0, “Вирусы” на уровнях 0 и 1, “Протект” на уровне 1, “Предрасп” на уровнях 0, 1, 2. Поэтому все данные показатели мы могли использовать при дальнейших расчетах. При этом знак оценки регрессионного коэффициента предиктора “Протект” отличался от знака остальных, значимо отличных от нуля, оценок коэффициентов. Это могло свидетельствовать о том, что наличие у человека данного признака может препятствовать развитию пародонтита.

Значения предсказанной степени тяжести заболевания и вероятности прогноза для всех 160 случаев были внесены в исходную базу данных, и на их основе была вычислена таблица сопряженности признаков прогнозируемых и наблюдаемых категорий диагноза. Категория 0 (здоровый пародонт) была правильно предсказана в 47 из 51 (92 %) случаев, но в 4 (8 %) случаях люди со здоровым пародонтом были отнесены в группу пациентов со средней степенью тяжести ХГП. Легкая степень заболевания (категория 1) была правильно диагностирована в 10 из 18 (55,5 %) случаев, 3 (17 %) человека были отнесены ко здоровым людям, 2 (11 %) пациентам был поставлен неправильный диагноз ХГП средней степени и 3 (44 %) - ХГП тяжелой степени. Категория 2 (средняя степень заболевания) была правильно предсказана в 24 (54,5 %) случаев, 8 (18 %) человек были отнесены к здоровым, а 12 (27 %)

Таблица 3 - Оценки параметров регрессии

Примечание: а - данный параметр обнуляется, так как он является дублирующим. Ст. Ош. - стандартная ошибка.

- в группу людей, страдающих ХГП тяжелой степени. Категория 3 (тяжелая степень заболевания) была правильно предсказана в 34 (75,5 %) из 45 случаев; в контрольную группу попали 2 (4 %), 1-ю (легкая степень) - 4 (9 %) и 2-ю (средняя степень) - 5 (11 %) пациентов.

Таким образом, полиномиальная логистическая регрессия с упорядоченным откликом позволяет достаточно хорошо предсказывать категории 0 (здоровый пародонт) и 3 (тяжелая степень) и удовлетворительно - категории 1 (легкая степень) и 2 (средняя степень). Скорее всего, это можно объяснить не достаточным количеством данных: в частности, в категории 1 (легкая степень) было только 18 человек.

На практике эту модель можно использовать для определения вероятности постановки диагноза ХГП или его отсутствия на основе микробиологических и иммуногенетических показателей с помощью вычисленных оценок параметров логистической полиноминальной регрессии с упорядоченным откликом. Математическое значение оценок параметров регрессии заключается в том, что на них основе могут быть вычислены кумулятивные (суммарные) вероятности для категорий независимых переменных.

Применение этих моделей может служить хорошим дополнительным лабораторным показателем, позволяющим повысить эффективность диагностики воспалительных заболеваний полости рта, которая в настоящее время проводится врачами-стоматологами не всегда в полном объеме и с невысокой точностью.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате проведенных нами исследований доказана этиологическая роль P. intermedia, B. forsythus, T. denticola, P. gingivalis и A. аctinomycetemcomitans в развитии воспалительных процессов области в зубодесневой борозды (по данным сравнительного анализа результатов ПЦР и бактериологического исследования с использованием анаэробной техники культивирования). Причем B. forsythus и T. denticola с помощью традиционных методов микробиологических исследований в отечественной практике ранее не выявляли. Проведенные нами исследования позволяют судить о возможности введения новой отечественной диагностической системы “Мультидент - 5” в состав средств для комплексного обследования больных с заболеваниями пародонта и ЧЛО. Получена развернутая клинико-лабораторная характеристика показателей ХГП на основании изучения микробиологических и иммуногенетических параметров.

Выделены следующие наиболее значимые критерии для диагностики ХГП и прогнозирования осложненного течения воспалительного процесса на основании применения молекулярно-генетических исследований:

- для подтверждения диагноза генерализованного пародонтита не достаточно идентификации одного или двух видов бактерий, кроме P. gingivalis, или комбинации B. forsythus и T. denticola;

- пародонтопатогенные виды бактерий P. intermedia, B. forsythus, Treponema denticola и Actinobacillus actinomycetemcomitans, являются индикаторами риска развития ХГП, их присутствие необходимо, но не достаточно для развития острого воспаления;

- B. forsythus является индикатором риска кровоточивости десен;

- факторами риска ХГП являются P. gingivalis или комбинации - B. forsythus и T. denticola; P. intermedia, B. forsythus и P. gingivalis; P. intermedia, B. forsythus, T. denticola и P. gingivalis; P. intermedia, B. forsythus, T. denticola, P. gingivalis и A. аctinomycetemcomitans;

- наличие в пародонтальных карманах вирусов семейства Herpesviridae: HSV1 и HSV2 типа, EBV и CMV, - является индикатором прогрессирования ХГП;

- повышенные уровни антител класса G к HSV 1 типа или HSV 2 типа, антител класса G к CMV и ядерному белку EBNA-1 p72 в сыворотке крови больных ХГП, свидетельствуют об иммунодефицитном состоянии и необходимости исследования иммунного статуса и проведения ПЦР - диагностики;

- пациенты с полиморфным генотипом IL - 1б (-899) С>Т, IL - 1в (+3953) С>Т относятся к группе риска заболевания тяжелыми формами пародонтита в возрасте до 35 лет, по сравнению с лицами, не обладающими данным генотипом;

- cпецифичность HLA-DRB1 *04 и аллель DQA1 *0301 являются индикаторами риска ХГП, ассоциированного с вирусами семейства Herpesviridae;

- специфичность HLA-DRB1 *01, аллели локуса DQA1 *0501 и DQB1 *0501 ассоциированы с устойчивостью к пародонтиту;

- курение приводит к увеличению видового состава пародонтопатогенов в содержимом пародонтальных карманов, не зависимо от степени тяжести ХГП и полиморфизма генов IL - 1б -899, IL - 1в +3953.

Разработанные нами алгоритмы диагностики степени тяжести ХГП на основе микробиологических и иммуногенетических показателей с помощью полиномиальной логистической регрессии с упорядоченным откликом, на наш взгляд, можно использовать в качестве дополнительного диагностического средства, позволяющего оценивать результаты молекулярно - генетических анализов.

Исследования на молекулярном уровне позволят повысить надежность диагностической информации, связанной с оценкой риска генерализованного пародонтита и, таким образом, определить роль пародонтопатогенов и иммуногенетической детерминированности макроорганизма в развитии и прогрессировании заболевания. Подобные данные позволят стоматологу планировать индивидуальное лечение, соответствующее потребностям пациента, более эффективное с экономической точки зрения, за счёт минимизации излишнего или недостаточного терапевтического и хирургического вмешательства; исключить возможность повторного инфицирования и улучшить качество профилактических мероприятий.

Выводы

Впервые в Российской Федерации разработана тест - система “Мультидент - 5”, позволяющая определять с высокой точностью ДНК пародонтопатогенных микробов Prevotella intermedia sensu stricto, Bacteroides forsythus, Treponema denticola, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции.

Этиологическая диагностика хронического генерализованного пародонтита и других воспалительных заболеваний пародонта и челюстно -лицевой области должна включать современные технологии молекулярно - биологических и иммуноферментных исследований.

Методами генодиагностики установлена взаимосвязь выявления с высокой частотой вирулентных видов бактерий (P. gingivalis, P. intermedia, B. forsythus, A. actinomycetemcomitans и T. denticola) и их ассоциаций с клиническими параметрами у больных хроническим генерализованным пародонтитом, но не у лиц со здоровым (интактным) пародонтом. Факторами риска хронического генерализованного пародонтита являются P. gingivalis или ассоциации B. forsythus и T. denticola; P. intermedia, B. forsythus и P. gingivalis; P. intermedia, B. forsythus, T. denticola и P. gingivalis; P. intermedia, B. forsythus, T. denticola, P. gingivalis и A. аctinomycetemcomitans.

Наличие в пародонтальных карманах вирусов семейства Herpesviridae: HSV 1 и HSV 2 типа, EBV и, в меньшей степени, CMV, - является индикатором прогрессирования хронического генерализованного пародонтита.

Cпецифичность HLA-DRB1 *04 и аллель DQA1 *0301 являются маркерами риска хронического генерализованного пародонтита у представителей смешанной популяции г. Москвы. Аллели DRB1 *01 и DQA1 *0101 ассоциированы с устойчивостью к различным формам генерализованного пародонтита.

Пациенты с полиморфным генотипом IL - 1б (-899) С>Т, IL - 1в (+3953) С>Т относятся к группе риска заболевания тяжелыми формами пародонтита в возрасте до 35 лет. Относительная частота выявления генотипа IL - 1б (-899) С>Т, IL - 1в (+3953) С>Т у больных хроническим генерализованным пародонтитом в возрасте до 35 лет составляет 86 %, у больных старше 50 лет - 30 % и 10 % - у людей со здоровым пародонтом.

Обоснованы критерии определения микробиологических и иммуногенетических индикаторов риска генерализованного пародонтита для оптимизации диагностики и прогнозирования характера течения воспалительных заболеваний пародонта с помощью однофакторных и многофакторных методов статистического анализа.

Предложен алгоритм прогнозирования глубины пародонтального кармана основе линейной регрессионной модели, в которой предикторами являются показатели, отражающие присутствие в области зубодесневой борозды определенных видов пародонтопатогенных бактерий или вирусов в различных сочетаниях, а также иммуногенетические показатели пациента, отражающие особенности аллельного полиморфизма генов HLA класса II.

Разработан алгоритм диагностики степени тяжести хронического генерализованного пародонтита на основе микробиологических и иммуногенетических показателей с помощью полиномиальной логистической регрессии с упорядоченным откликом.

Предложен алгоритм применения молекулярно - биологических и иммуноферментных методов диагностики герпес - вирусной инфекции, ассоциированной с ХГП.

Практические рекомендации

Для повышения эффективности диагностики и контроля лечения хронического генерализованного пародонтита и других воспалительных заболеваний ротовой полости и челюстно - лицевой области, а также с целью изучения роли пародонтопатогенной флоры при системных заболеваниях организма человека рекомендуется использовать набор реактивов “Мультидент - 5”, который позволяет определять ДНК пародонтопатогенных микробов P. intermedia, B. forsythus, T. denticola, A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции.

Показаниями для идентификации пародонтопатогенов с помощью набора реактивов “Мультидент - 5” являются:

- все случаи пародонтита у взрослых, а также подростковые и юношеские пародонтиты, характеризующиеся упорным и быстро прогрессирующим течением. Выявление вида возбудителей позволит провести правильный подбор антибактериальных препаратов и контролировать эффективность их применения в случае необходимости;

- тяжелые формы генерализованного пародонтита взрослых, устойчивые и плохо поддающиеся лечению. Выявление вида пародонтопатогенных бактерий в этих случаях поможет контролировать терапевтический успех после механического лечения, применения средств профессиональной гигиены или курса антибиотиков и делают возможным раннее диагностирование рецидивов в процессе наблюдения;

- обследование членов семьи больного, у которого выявлены пародонтопатогенные бактерии, особенно P. gingivalis и A. аctinomycetemcomitans, обладающих высокой контагиозностью для контактирующих лиц, с целью антибактериальной профилактики повторного заражения членов семьи больного;

- в случаях сложного протезирования или внутрикостной имплантации зубов, связанных с большими финансовыми затратами, анализ видового состава патогенов может быть полезен для назначения адекватной антибактериальной профилактики на стадии подготовки к этим видам лечения;

- относительным показанием следует считать все ситуации, при которых оправдано получение объективных данных о наступлении стойкой ремиссии. То есть, после проведения курса пародонтологического лечения, особенно, с применением лоскутных операций, коррекции прикуса в практике ортодонтии и т.п. Отсутствие пародонтопатогенных бактерий в этих случаях позволит более уверенно гарантировать стабилизацию состояния больного, а выявление - своевременно назначить адекватное лечение.

Клиническую диагностику различных проявлений деструктивных форм хронического генерализованного пародонтита рекомендуется сочетать с лабораторными показателями и алгоритмом определения глубины пародонтального кармана с помощью линейной регрессионной модели:

ПК (мм) = 3,04 + 0,848*Бакт. + 0,935*Вирусы - 0,162*Протект+ 0,243*Предрасп,

где “Протект.” и “Предрасп” - определенные аллели и их трехлокусные сочетания генов HLA, позволяет рассчитать предполагаемую глубину пародонтального кармана в мм.

С целью уточнения диагноза и прогнозирования тяжелых форм хронического генерализованного пародонтита рекомендуется применять полиномиальную логистическую регрессию с упорядоченным откликом, в которую включены предикторы: “Бактерии”, “Вирусы” “Протект.” и “Предрасп”. Данный алгоритм позволяет предсказывать отсутствие деструктивных изменений пародонта (категория 0) на уровне 92 %, среднюю степень тяжести ХГП (категория 2) на уровне 56 %, легкую степень ХГП (категорию 1) на уровне 55 % и тяжелую степень ХГП (категорию 3) на уровне 76 %.

В качестве экспресс - диагностики различных форм воспалительных заболеваний полости рта рекомендуется проводить молекулярно-биологическое определение маркеров пародонтопатогенов и вирусов семейства Herpesviridae и полиномиальную логистическую регрессию с упорядоченным откликом, которая позволяет предсказывать категорию 0 (здоровый пародонт) на уровне 98 %, - категорию 2 (средняя степень тяжести ХГП) на уровне 47 %, и категорию 3 (тяжелая степень ХГП) на уровне 24 %, либо полиномиальную логистическую регрессию с упорядоченным откликом, где предикторами являются “Бактерии” и “Вирусы”, и позволяет предсказывать категорию 0 (здоровый пародонт и легкая степень ХГП) на уровне 82 %, категорию 2 (средняя и тяжелая степени тяжести ХГП) на уровне 68 %.

Для диагностики хронического генерализованного пародонтита, ассоциированного с вирусами простого герпеса 1 и 2 типа, Эпштейн - Барра и/или ЦМВ, пациентам группы риска (определяемой по данным анамнеза, клиническим и рентгенологическим признакам), а также при отрицательных результатах на пародонтопатогены предлагается проводить дополнительные лабораторные исследования по следующему алгоритму:

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Барер Г., Царев В., Николаева Е., Рамин С. Особенности микробной колонизации десны при сочетанной патологии пародонта и сахарного диабета 1 типа // «Cathedra» - стоматологическое образование. - 2004. - Т. 4, № 11 - С. 26 - 29.

2. Дмитриева Л.А., Теблоева Л.М., Гуревич К.Г., Золоева З.Э., Николаева Е.Н. Особенности изменения микрофлоры пародонтального кармана при применении озонотерапии // Пародонтология. - 2004. - № 4 (33). - С. 20 - 24.

3. Ефанов О.И., Царев В.Н., Николаева Е.Н., Волков А.Г., Дикопова Н.Ж. Изучение влияния апекс-фореза на микрофлору корневых каналов зубов с помощью ПЦР // «Cathedra» - стоматологическое образование. - 2006. - Т. 5, № 2. - C. 36 - 38.

4. Ефанов О.И., Царев В.Н., Волков А.Г., Николаева Е.Н., Дикопова Н.Ж., Носик А.С. Оценка антибактериальной активности апекс - фореза // Стоматология. - 2006. - Т. 85, № 5. - С. 20 - 23.

5. Иванов С.Ю., Царев В.Н., Алешанов К.А., Николаева Е.Н. Антисептическое действие препарата Гивалекс на вирулентную микрофлору полости рта // Актуальные проблемы стоматологии: Тез. докл. - Уфа, 2004. - С. 143 - 144.

6. Иванов С.Ю., Царев В.Н., Чувилкин В.И., Солощанский И.И., Николаева Е.Н. Диагностика возбудителей периимплантитов с помощью молекулярно-генетических методов // Человек и лекарство: Тез. докл. - М., 2003 г. - С. 196.

7. Иванов С.Ю., Царев В.Н., Чувилкин В.И., Николаева Е.Н., Солощанский И.И. Оценка эффективности антибактериальной санации пациентов от возбудителей периимплантитов с помощью молекулярно-генетических методов // Мед. вест. МВД. - 2005. - № 1. - С. 8 - 12.

8. Иванов С.Ю., Бизяев А.Ф., Царев В.Н., Николаева Е.Н., Алешанов К.А. Профилактика воспалительных осложнений стоматологической имплантации методом антисептических полосканий раствором “Гивалекс” // Мед. вест. МВД. - 2005. - № 2. - С. 40 - 43.

9. Иллюстрированные ситуационные задания по микробиологии, иммунологии и вирусологии: Учеб. пособие для студентов мед. ВУЗов / под ред. А.А. Воробьева и В.Н. Царева. - 4-е изд. - М.: МГМСУ - МИА, 2006. - 80 с.

10. Максимовская Л.Н., Царев В.Н., Рунова Г.С., Николаева Е.Н., Фомичева Е.М., Новикова А.С. Диагностика и лечение хронического генерализованного пародонтита, ассоциированного с цитомегало- и герпесвирусной инфекцией // Образование, наука и практика в стоматологии. - М., 2006. - C. 98 - 99.

11. Митронин А.В., Царева Т.В., Николаева Е.Н., Митронин В.А., Фомичева Е.М. Оценка антимикробной активности гидроксида кальция в лечении периодонтита // Форум стоматологии. - 2004. - № 1 (13) - С. 8 - 13.

12. Митронин А.В., Царев В.Н., Николаева Е.Н., Новикова А.С. Использование полимеразной цепной реакции в диагностике верхушечного периодонтита // Образование, наука и практика в стоматологии. - М., 2005. - С. 194 - 197.

13. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Плахтий Л.Я. Генетический полиморфизм генов IL-1 б и IL - 1в у больных с воспалительными заболеваниями пародонта // Владикавказ. медико - стоматол. вестн. - 2003. - Т. 3, № 6. - С. 159 - 161.

14. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Земляная Н.Ю., Щербо С.Н., Воронцова Н.И., Руднева Е.В., Стецюк И.В. Лабораторная диагностика инфекционных пародонтитов // Человек и лекарство: Тез. докл. - М., 2004. - C. 465.

15. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Щербо С.Н., Земляная Н.Ю., Воронцова Н.И. Опыт разработки стандартного метода молекулярно-генетической диагностики и оценки эффективности лечения заболеваний пародонта // Форум стоматологии. - 2004. - № 1 (13) - С. 20 - 24.

16. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Щербо С.Н., Земляная Н.Ю., Воронцова Н.И. Применение молекулярно генетических методов исследований в диагностике пародонтита // Институт стоматологии. - 2004. - № 4 (25). - С. 63 - 66.

17. Николаева Е.Н., Алексеева Ю.В., Царев В.Н., Агапов В.С. Применение молекулярно-генетических методов исследования в диагностике гнойно-воспалительных заболеваний челюстно - лицевой области // Стоматология для всех. - 2004. - № 2. - С. 46 - 49.

18. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Щербо С.Н. Разработка и применение отечественной тест-системы для диагностики пародонтита с помощью мультиплексной ПЦР // Cъезд о-ва биотехнологов России, 2-й: Тез. докл. - М., 2004 - С. 121.

19. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Щербо С.Н. Разработка и применение отечественной тест-системы для диагностики пародонтита с помощью мультиплексной ПЦР // Cъезд о-ва биотехнологов России, 2-й: Тр. 2004. - М., - 2005. - С. 173 - 177.

20. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Бизяев А.Ф., Алешанов К.А. Эффективность использования антисептических полосканий раствором “Гивалекса” в комплексной профилактике и лечении воспалительных осложнений при операциях в полости рта // Медицинский алфавит. Стоматология. - 2005. - № 1 - С. 24 - 27.

21. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Плахтий Л.Я., Ипполитов Е.В., Валиева М.А. Сравнительные результаты выявления резистентных штаммов анаэробных бактерий в Москве и Владикавказе с помощью молекулярно-генетического метода // Cезд о-ва биотехнологов России, 4-й: Матер. - Пущино. - 2006. - С. 181 - 182.

22. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Горбачева Е.А., Ипполитов Е.В. Особенности полиморфизма генов HLA II класса у пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта // Вестн. биотехнологии и физ. - хим. биологии. - 2006. - Т. 2., № 2 - C. 21 - 28.

23. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Горбачева Е.А., Ипполитов Е.В., Логунов Н.А. Полиморфизм генов HLA II класса в норме и у пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта (Часть I) // Институт стоматологии. - 2006. - № 4 (33). - C. 58 - 60.

24. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Горбачева Е.А., Ипполитов Е.В., Логунов Н.А. Полиморфизм генов HLA II класса в норме и у пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта (Часть II) // Институт стоматологии. - 2007. - № 1 (34). - C. 74 - 75.

25. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Лагутин М.Б. Алгоритм диагностики генерализованного пародонтита на основе микробиологических и иммуногенетических показателей // Стоматолог. - 2007. - № 8. - C. 35 - 40.

26. Николаева Е.Н., Царев В.Н., Лагутин М.Б. Разработка алгоритма диагностики хронического генерализованного пародонтита на основе микробиологических и иммуногенетических показателей / Е.Н. Николаева, В.Н. Царев, М.Б. Лагутин //«Cathedra» - стоматологическое образование. - 2007. - Т. 6, № 3. - C. 34 - 40.

27. Остроухова А.А., Николаева Е.Н., Тихонов А.А. Применение плазменной стерилизации для профилактики инфекции в ортодонтии // Профилактика основных стоматологических заболеваний: Сб. тез. - М., 2003. - С. 100 - 101.

28. Остроухова А.А., Николаева Е.Н., Тихонов А.А. Эффективность плазменной стерилизации инструментов, применяемых в ортодонтии // Ортодонтия. - 2003. - № 1. - С. 22 - 26.

29. Плахтий Л.Я., Давыдова М.М., Николаева Е.Н. и др. Учебное пособие по иммунологии: Учеб. пособие для студентов мед. ВУЗов - 3-е изд. испр. и доп. - М.: Изд-во ГОУ ВПО МГМСУ, 2006. - 55 с.

30. Рабочая тетрадь-практикум по микробиологии, иммунологии и вирусологии: Учеб. пособие для студентов стоматологического и лечебного ф-тов / под ред. В.Н. Царева.- М.: Изд-во «Карпов», 2006. - 99 с.

31. Романов А.Е., Николаева Е.Н., Фомичева Е.М., Золоева З.Э., Жамалдинова А.В., Дмитриева Л.А. Характеристика лейкоцитарных маркеров у больных с хроническим генерализованным пародонтитом в фазе обострения // Стоматология. - 2003. - № 6. - C. 13 - 16.

32. Фомичева Е.М., Николаева Е.Н., Горбачева Е.А., Логунов Н.А., Царева Т.В. Выявление герпесвирусной инфекции при генерализованном пародонтите и тактика противовирусного лечения // Cъезд о-ва биотехнологов России, 4-й: Матер.- Пущино, 2006. - С. 276 - 277.

33. Царёв В.Н., Николаева Е.Н., Максимовский Ю.М., Плахтий Л.А. Носик А.С. Перспективы применения молекулярно-генетических методов исследований в диагностике пародонтита // Рос. Стоматол. журн. - 2002. - № 5. - С. 6 - 9.

34. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Николаева Л.Н., Носик А.С., Мегрелишвили Н.А. ПЦР - диагностика пародонтита // Человек и лекарство: Тез. докл. - М., 2003. - С. 399.

35. Царев В.Н., Покровский В.Н., Давыдова М.М., Тихонова С.И., Николаева Е.Н. Экзаменационные тестовые задания по микробиологии, иммунологии и вирусологии: Учеб. пособие для студентов мед. ВУЗов. М.: ВУНМЦ, 2003. - 74 с.

36. Царев В.Н., Митронин А.В., Максимовский Ю.М., Ушаков Р.В., Николаева Е.Н., Тютюник Ю.Л. Диагностика хронического периодонтита с помощью полимеразной цепной реакции и перспективы эндодонтического применения макролидов и цефалоспоринов // Стоматология для всех. - 2004. - № 1. - С. 8 - 11.

37. Царев В.Н., Плахтий Л.Я., Николаева Е.Н. и др. Диагностика хронического генерализованного пародонтита молекулярно- генетическими и иммунологическими методами: Методические рекомендации. - М.: МЗ РФ, 2004. - 56 c.

38. Царев В.Н., Митронин А.В., Николаева Е.Н., Щербо С.Н., Земляная Н.Ю., Воронцова Н.И. Трансканальное использование антибиотиков нового поколения в лечении хронического периодон тита и оценки их эффективности с применением генодиагностики //«Cathedra» - стоматологическое образование. - 2004. - Т. 4, № 9. - С. 34 - 40.

39. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Ушаков Р.В. и др. Применение генодиагностики для контроля персистенции пародонтопатогенных бактерий в полости рта здоровых и больных пародонтитом людей // Стоматолог. - 2004. - № 8. - С. 30 - 33.

40. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Максимовская Л.Н. и др. Генодиагностика вирусов семейства Herpesviridae у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом // Образование, наука и практика в стоматологии. - М., 2005. - С. 222 - 224.

41. Царев В.Н., Николаева Е.Н. Микробиологическая диагностика воспалительных заболеваний полости рта и челюстно-лицевой области с помощью отечественной системы “Мульти - Дент” // Образование, наука и практика в стоматологии. - М., 2005. - С. 224 - 226.

42. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Носик А.С., Щербо С.Н. Современные методы микробиологической диагностики заболеваний тканей пародонта // Медицинский алфавит. Стоматология. - 2005. - № 2 - С. 26 - 29.

43. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Ипполитов Е.В., Горбачева Е.А. Выявление резистентных штаммов анаэробных бактерий с помощью ПЦР в стоматологической практике // Mеждунар. конгр. МАКМАХ/ASM по антимикробной терапии, 8-й: Тез. докл. - М., 2006. - C. 29 - 30.

44. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Плахтий Л.Я. и др. Диагностика и прогнозирование течения заболеваний пародонта с применением молекулярно-биологических и иммуноферментных систем // Медицинская технология № ФС -2006/043-У от 10 апреля 2006 г.

45. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Фомичева Е.М., Максимовская Л.Н., Рунова Г.С., Новикова С.Т., Логунов Н.Н. Диагностика хронического генерализованного пародонтита, ассоциированого с цитомегало- и герпесвирусной инфекцией // Стоматология для всех. - 2006. - № 3. - C. 6 - 12.

46. Царев В.Н., Барер Г.М., Янушевич О.О., Николаева Е.Н., Салем Рамин, Парунова С.В., Горбачева Е.А., Ипполитов Е.В. Клинико-микробные аспекты и контроль эффективности комплексного лечения воспалительных заболеваний пародонта у больных сахарным диабетом I типа // Стоматолог. - 2006. - № 4. - С. 40 - 46.

47. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Носик А.С. Применение новых молекулярно-генетических систем для диагностики воспалительных заболеваний слизистой оболочки рта и пародонта // Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2006. - № 7. - С. 69 - 73.

48. Царев В.Н., Николаева Е.Н., Ипполитов Е.В., Горбачева Е.А. Полиморфизм генов HLA II класса у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом, ассоциированным с вирусами семейства Herpesviridae // «Cathedra» - стоматологическое образование. - 2007. - Т.6, № 1. - С. 50 - 53.

49. Царев В.Н. Николаева Е.Н., Плахтий Л.Я. Сравнительное изучение резистентности анаэробных пародонтопатогенных бактерий к антибиотикам в Москве и Владикавказе // Образование, наука и практика в стоматологии. - М., 2007. - С. 217 - 219.

50. Царев В.Н., Николаева Е.Н. Аллельный полиморфизм генов ИЛ-1б и ИЛ-1в у больных с хроническими воспалительными заболеваниями пародонта // Вестн. РАМН. - 2007. - № 3. - С. 43 - 47.

51. Шишкина И.М., Ипполитов Е.В., Чиркова Т.Д., Николаева Е.Н. Значение пародонтопатогенной и стрептококковой флоры в развитии хронического катарального гингивита // Образование, наука и практика в стоматологии. - М., 2007. - С. 219 - 221.

Размещено на Allbest.ru