Искусственное осеменение сельскохозяйственных животных

Способ заключается в ультразвуковом тестировании состояния матки и рогов матки с помощью прибора для ультразвукового сканирования (т.н. УЗ-сканера). Это - наилучший способ тестирования стельности, который позволяет обнаруживать наличие зародыша в матке уже на 21-22-ой день. К этому дню у зародышей коров обнаруживается сердцебиение плода, которое хорошо видно на приборе. Применение этого способа позволяет диагностировать наличие стельности у животных, у которых она в дальнейшем может завершаться резорбцией (рассасыванием) плода. Недостатком данного способа является то, что его применение возможно при ранних (до 3-х месяцев) сроках стельности, т.к. позже плод становится слишком большим и, кроме того, опускается в брюшную полость, уходя из рабочей зоны датчика прибора.

Ниже приводятся результаты УЗ-сканирования половых путей коровы после искусственного осеменения.

4.3 Методы искусственного осеменения свиней

4.3.1 Способы выявления половой охоты свиней

Наиболее точным признаком готовности самки к спариванию и оптимальным сроком осеменения является период половой охоты при наличии течки и полового возбуждения.

До сих пор единственным достаточно приемлемым способом выявления половой охоты у свиней является рефлексологический способ, который должен быть подтвержден вагинальный. Гормональный способ (по уровню содержания в крови гормона прогестерона) применяется только как вспомогательный тест при различных исследованиях.

Таблица 6. - Способы выявления половой охоты у свиней

Способ выявления	Применяемые вспомогательные средства	Наблюдаемые явления при наличии половой охоты	Недостатки данного способа
Рефлексологический	Использование хряка-пробника (с подвязанным фартуком или с отведенным в сторону половым членом).	Животные допускают прыжки хряка-пробника и других самок на себя, проявляют общую поисковую реакцию на самца. Подтверждением наличия половой охоты является безусловное проявление рефлекса неподвижности. Если свиноматке в охоте положить руку на спину и поясницу, она успокаивается и остается неподвижной. Так как начало охоты можно установить при индивидуальном контакте одной (а не многих) свиноматки, рекомендуется иметь отдельный дворик, куда можно было бы загнать свиноматку и хряка. Не рекомендуется пускать хряка в станок, где находится несколько свиноматок, а тем более в выгульные дворики, где одновременно содержится группа свиней. Не следует прогонять хряка по проходу свинарника, так как на хряка реагируют многие матки и даже вне течки, а для осеменения необходимо установить время начала охоты (рефлекса неподвижности).	При малых размерах самок и больших размерах самца некоторые самки плохо стоят, стремятся уйти.
Вагинальный	Осмотр наружных половых органов, влагалища и шейки матки при помощи влагалищного зеркала.	Наблюдается набухшая и покрасневшая слизистая оболочка влагалища, из канала шейки истекает слизь, которая скапливается на дне влагалища, вытекающая произвольно из половой щели. Наружные половые органы сильно гиперемированы (налиты кровью), иногда до "синюшности".	Необходимость фиксации животного при осмотре.

4.3.2 Оптимальное время и кратность осеменения

Выбор сроков осеменения самок - один из наиболее важных факторов при организации и проведении искусственного осеменения. Оптимальным сроком осеменения является период, наиболее благоприятный для встречи спермиев с яйцеклеткой.

При выборе срока осеменения при искусственном осеменении играют роль такие факторы:

Во-первых, способность яйцеклетки к оплодотворению довольно ограничен (приблизительно 5-6 часов). После этого яйцеклетка стареет, что уменьшает ее вероятность слияния со спермием и увеличивает вероятность ненормального развития и гибели. Если "старые" яйцеклетки все же оплодотворяются, то это может вести к гибели зародышей на ранних стадиях, снижению плодовитости, появлению мумий, мертворожденных и заморышей. Это обстоятельство определяет то, что спермии к моменту овуляции яйцеклетки должны уже находится в половых путях животного.

Во-вторых, исследования показали, что для соединения спермия с яйцеклеткой самому спермию необходимо пройти в половых путях самки некоторую подготовительную процедуру, именуемую капацитацией. Это своего рода подготовительная процедура подготовки внешних структур спермия к прохождению короны радиаты яйцеклетки. Продолжительность этой процедуры у сельскохозяйственных животных составляет приблизительно 5-6 часов. Это обстоятельство требует необходимости введения спермы в половые пути самок за 5-6 часов до предполагаемой овуляции.

В-третьих, жизнеспособность спермиев в половых путях самки при естественном покрытии самцом составляет, в среднем, 24-48 часов. Жизнеспособность свежеразбавленных спермиев хряка в половых органах свинки намного ниже, в среднем, 12 часов. Если осеменение провести преждевременно, сперматозоиды стареют, истощаются и теряют биологическую ценность и оплодотворяющую способность. В этих условиях оплодотворение происходит, но качество зигот снижается, что отражается в снижении плодовитости и крупноплодности, появлении заморышей. Этот факт требует введения спермы не более чем за 12 часов до предполагаемой овуляции.

Оптимальным временем осеменения свиней является период хорошо выраженной охоты. Началом половой охоты считают среднее время между проверками. Если, например, при проверке в 8 часов утра свиноматка не допускала хряка, а при пробе в 19 часов появился рефлекс неподвижности, то считают, что охота началась в 14-15 часов, ее осеменяют вечером и на следующее утро. При трехкратном в течение суток выявлении охоты свиноматок осеменяют однократно.

Свинья относится к истинно многоплодным животным, т.е за один половой цикл у нее овулируют более 1 (в среднем, 12-15) яйцеклеток. Овуляция у взрослых свиней происходит через 20-24 часа после начала охоты, а у молодых животных на 5-6 часов позже. Лучшим временем осеменения будет конец первых (для взрослых) и начало вторых (для молодых) суток от появления рефлекса неподвижности.

Однако, процесс овуляции всех яйцеклеток растягивается у свиней на 3-5 часов (иногда до 12 часов). Это обстоятельство требует обязательного повторения процедуры осеменения через 12 часов после первого. При продолжении у животного состояния половой охоты искусственное осеменение повторяют через каждые 12 часов до окончания половой охоты.

Указанные факторы определяют необходимость точного знания сроков овуляции предовуляторных фолликулов у свиней.

У свиней овуляция имеет место в конце половой охоты, поэтому свиней, выявленных в охоте хряком-пробником, осеменяют сразу, и если охота продолжается, то повторно через 12 часов. На следующее утро маток пускают в новую группу для выявления в охоте пробником и при наличии охоты их осеменяют. Выявление половой охоты у свиней проводят в утренние и вечерние часы, до наступления и после спада сильной жары.

4.3.3 Техника искусственного осеменения свиней

Свиньи относятся к животным с маточным типом осеменения, у которых сперма при естественном осеменении изливается непосредственно в матку. Кроме того, свиньи характеризуются значительной длиной рогов, что определяет увеличенный объем семени. Половой акт у свиней из-за большого объема изливающегося семени довольно продолжителен (3-4 минуты). Исходя из этого, свиней осеменяют прямо в матку с продолжительностью введения спермы 4-6 минут. Так как способы криоконсервации спермы хряков на сегодня не разработаны, при искусственном осеменении используют свежеполученную разбавленную сперму. Существует два способа осеменения, которые различаются типом вводимой спермы: фракционный и нефракционный.

Фракционный способ:

При таком способе сначала в матку вводят сперму (неразбавленную или разбавленную 1:1), а затем для проталкивания ее в матку и яйцеводы вводят разбавитель.

Нефракционный способ:

Разбавленную (от 1:3 до 1:5) сперму вводят с помощью прибора для искусственного осеменения непосредственно в матку или в шейку как можно ближе к матке.

В набор инструментов входят:

ПОС-5 - полиэтиленовый прибор, который состоит из флакона емкостью 150-200 мл, крышки, катетера с соединительной муфтой. Техника осеменения:

Животное фиксируют. После тщательного туалета наружных половых органов их орошают раствором фурацилина (1:5000). Половые губы раздвигают и вводят катетер во влагалище до его упора в шейку матки (на глубину 25-30 см). Флакончик поднимают дном вверх выше спины животного и слегка сдавливают. Сперму вводят медленно. После опорожнения флакона катетер оставляют на 1-2 минуты в прежнем положении, а затем легкими вращательными движениями извлекают наружу.

Доза вводимого разбавленного семени - около 1 мл на 1 кг веса тела, но не более 150 мл. При обоих способах осеменения в конечной дозе должно содержаться не менее 3 млрд активных спермиев.

4.3.4 Способы диагностики супоросности свиней

Имеет место использование четырех способов определения наличия супоросности у свиней:

- оценка по внешним признакам,

- ректальная пальпация,

- с помощью ультразвуковой техники,

- лабораторный способ.

Оценка по внешним признакам

Чтобы свинья легла на левый бок, ей почесывают живот. На третьем месяце супоросности на уровне двух последних доек выявляют плоды. Но этим способом можно выявить супоросность у плохо откормленных или несальных животных.

Ректальная пальпация

Способ предложен А.Н. Преображенским.

Рукой, введенной в прямую кишку, осторожно прощупывают сосуды и матку свиньи.

У холостых и покрытых свиноматок на протяжении 2-3 недель супоросности пульсируют средняя маточная и мочеполовая артерии.

При одномесячной супоросности вибрирует увеличенная в диаметре средняя маточная артерия. Мочеполовая артерия вибрирует слабо. В два месяца супоросности состояние артерий такое же самое, но увеличивается просвет маточной артерии. Третий месяц супоросности характеризуется четкой вибрацией средних маточных артерий, а также началом вибрации в мочеполовой артерии.

Ультразвуковой способ определения супоросности свиней

Способ заключается в ультразвуковом тестировании состояния матки и рогов матки с помощью прибора для ультразвукового сканирования (т.н. УЗ-сканера). Это - наилучший способ тестирования стельности, который позволяет обнаруживать наличие и количество зародыше в рогах матки.

Исследования проводят так: на животное, которое стоит, накладывают датчик на область последнего ребра левого бока животного, на 4-6 см спереди задней конечности и 2-4 см выше последней дойки с правого бока. На датчик и шкуру животного наносят глицерин или гель для УЗ-исследований. Датчик ориентируют для нахождения последовательно обоих рогов и, двигая датчик вдоль тела, подсчитывают количество плодов в рогах матки.

Недостатком метода является трудность подсчета количества плодов у хорошо откормленных животных.

Лабораторный (по Кульману и Шредеру) способ

Через 30 дней после осеменения из влагалища свиноматки берут (выщипывают) кусочек (размером с горошину) слизистой оболочки влагалища и просматривают под микроскопом. Определяют, в частности, количество слоев эпителия в слизистой оболочке. У небеременных животных эпителий имеет 5-25 слоев, а у супоросных - 2-3 слоя.

4.4 Методы искусственного осеменения овец

4.4.1 Способы выявления половой охоты овец

Наиболее точным признаком готовности самки к спариванию и оптимальным сроком осеменения является период половой охоты при наличии течки и полового возбуждения.

Однако, у овец, в отличие от других животных признаки течки и полового возбуждения выражены очень слабо. Самки могут проявлять локомоторный рефлекс, который проявляется в специфической реакции на самца путем обострения зрительных и обонятельных восприятий, но в отличие от коров, животные не вспрыгивают один на другого. В связи с такими особенностями поведения выявление половой охоты у овец проводят при помощи самцов-пробников (рефлексологический способ). Как самцов-пробников используют неценных в генетическом отношении животных, которым, чтобы они не крыли самок, подвязывают фартуки или делают операцию по отведению полового члена в сторону. Кроме того, процедуру выявления охоты с помощью баранов-пробников дублируют визуальным осмотром наружных половых органов (вагинальный способ).

Таблица 7. - Способы выявления половой охоты у овец

Способ выявления	Применяемые вспомогательные средства	Применяемые вспомогательные средства	Недостатки данного способа
Рефлексологический	Использование барана-пробника (с подвязанным фартуком или с отведенным в сторону половым членом).	Животные допускают прыжки барана на себя, проявляют общую поисковую реакцию на самца.	При малых размерах самок и больших размерах самца некоторые самки плохо стоят, стремятся уйти. При недостатке пространства для движения некоторые животные зажимаются баранами насильно.
Вагинальный	Осмотр наружных половых органов, влагалища и шейки матки при помощи влагалищного зеркала.	Наблюдается набухшая и покрасневшая слизистая оболочка влагалища, канал шейки расслаблен и приоткрыт, из него истекает слизь, которая скапливается на дна влагалища. Наружные половые органы гиперемированы (налиты кровью), иногда до "синюшности".	Необходимость фиксации животного при осмотре. У некоторых животных покраснение наружных половых органов и раскрытие шейки матки выражено не сильно.

4.4.2 Оптимальное время и кратность осеменения

Выбор сроков осеменения самок - один из наиболее важных факторов при организации и проведении искусственного осеменения. Оптимальным сроком осеменения является период, наиболее благоприятный для встречи спермиев с яйцеклеткой.

При выборе срока осеменения при искусственном осеменении играют роль три фактора:

Во-первых, способность яйцеклетки к оплодотворению довольно ограничена (приблизительно 5-10 часов). После этого яйцеклетка стареет, что уменьшает ее вероятность слияния со спермием и увеличивает вероятность ненормального развития и гибели. Это обстоятельство определяет то, что спермии к моменту овуляции яйцеклетки должны уже находится в половым путях животного.

Во-вторых, исследования показали, что для соединения спермия с яйцеклеткой самому спермию необходимо пройти в половых путях самки некоторую подготовительную процедуру, именуемую капацитацией. Это своего рода подготовительная процедура подготовки внешних структур спермия к прохождению короны радиаты яйцеклетки. Продолжительность этой процедуры у сельскохозяйственных животных составляет приблизительно 5-6 часов. Это обстоятельство требует необходимости введения спермы в половые пути овец за 5-6 часов до предполагаемой овуляции.

В-третьих, жизнеспособность спермиев в половых путях самки при естественном покрытии самцом составляет, в среднем, 24-48 часов. Жизнеспособность свежеразбавленных спермиев баранов намного ниже, в среднем, 12 часов. Этот факт требует введения спермы не более чем за 12 часов до предполагаемой овуляции.

Указанные три фактора определяют необходимость точного знания сроков овуляции предовуляторного фолликула у овец.

У овец овуляция имеет место в конце половой охоты, поэтому овец, выявленных в охоте бараном-пробником, осеменяют сразу, и если охота продолжается, то повторно через 12 часов. На следующее утро маток пускают в новую группу для выявления в охоте пробником и при наличии охоты их осеменяют. Выявление половой охоты у овец проводят утром и вечером, до наступления и после спада сильной жары.

4.4.3 Техника искусственного осеменения овец

Овцы относятся к животным с влагалищным типом осеменения, у которых сперма при естественном осеменении изливается во влагалище, как можно ближе к влагалищному отверстию шейки матки. Исходя из этого, овец осеменяют цервикально, т.е. в канал шейки матки, неразбавленной и разбавленной свежеполученной и замороженно-оттаянной спермой.

В набор инструментов входят:

шприцы-катетеры, шприцы-полуавтоматы различных конструкций, влагалищные зеркала двух размеров - большое для взрослых и малое для ярок и овец с узким влагалищем.

Техника осеменения:

Стерильный шприц-катетер перед работой промывают несколько раз стерильным 1%-ным раствором цитрата натрия. В подготовленном шприце устанавливают дозирующее устройство - бегунок так, чтобы ввести в шейку матки 0,05 мл неразбавленной спермы или 0,1 мл-0,15 мл разбавленной спермы с содержанием не менее 80 млн. активных спермиев. Животных осеменяют в станке после обтирания наружных половых органов.

Овец предварительно осматривают при помощи влагалищного зеркала на отсутствие в половы органах признаков заболеваний - сыпи, крови, гноя. Если животное здоровое, осторожным движением зеркало вводят во влагалище, раскрывают и находят шейку матки. Определяют степень раскрытия шейки. После катетер шприца вводят в канал шейки на глубину 1-2 см. Для введения спермы надавливают на поршень большим пальцем. Перед осеменением следующей овцы катетер шприца обтирают тампоном, пропитанным 96%-ным спиртом, следя за тем, чтобы спирт не попал в каналы шприца.

Если сперма израсходована, шприц промывают 2,9%-ным раствором цитрата натрия, а затем 70%-ным спиртом и оставляют на хранение.

4.4.4 Способы диагностики суягности овец

У овец из-за небольших размеров тела нельзя применить ректальный способ диагностики суягности. Имеет место использование трех способов:

- оценка по внешним признакам;

- пальпация;

- с помощью ультразвуковой техники.

Оценка по внешним признакам

К внешним признакам суягности относят такие: отсутствие очередной охоты через 20-30 дней после случки, улучшение аппетита. В первой половине суягности овцы имеет лучшую откормленность, чем во второй. Наблюдается увеличение объема живота и изменение его контуров. У овец отвисает и выгинается участок брюшной стенки справа. Этот признак нехарактерен для суягных старых животных. У них живот имеет отвислую конфигурацию. Кроме того, охота может не повторятся в связи с заканчиванием полового сезона.

Выделение молока прекращается за 60 и более дней до родов. Вкусовые качества молока ухудшаются, оно становится горьковато-соленоватым. У маток, которые ранее были суягными, вымя набухает за 15-30 дней до родов, а у первосуягных - за 45-60 дней до родов.

Пальпация

Перед тем, как проводить исследование, овцу выдерживают на голодной диете не менее 12 чесов. Животное размещают так, чтобы задняя часть тела была выше передней. При таком положении рубец и кишечник смещаются к диафрагме.

Пальпируют плод разными приемами. Один из них состоит в прощупывании твердых частей плода кончиками пальцев с обоих сторон живота. Можно с одной стороны живота нажимать ладоней, а с другой пальпировать кончиками пальцев.

Массовое исследование на суягность проводят так: акушер, присев возле животного, правую ногу, согнутую в колене, подводит под нижнюю стенку живота. Правой рукой находит твердые части плода. До трех месяцев суягности пальпация затруднена из-за накопления околоплодных вод и небольших размеров плода. Ректальным исследованием (пальцем) определяют вибрацию задней маточной артерии начиная с 3,5-4 месяцев. Палец прикладывают к боковой стенке влагалища или прямой кишки. Вибрация маточной артерии небеременного рога появляется за 2-3 недели до родов.

Ультразвуковой способ определения суягности овец

Способ заключается в ультразвуковом тестировании состояния матки и рогов матки с помощью прибора для ультразвукового сканирования (т.н. УЗ-сканера). Это - наилучший способ тестирования стельности, который позволяет обнаруживать наличие зародыша в матке уже на 21-22-ой день. К этому дню у зародышей овец обнаруживается сердцебиение плода, которое хорошо видно на приборе.

5. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ВОСПРОИЗВОДСТВА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ

Крупный рогатый скот, овцы и козы имеют ограниченный потенциал воспроизводства. Это объясняется тем, что самки этих животных способны привести в год одного-двух, редко трех потомков. Такая физиологическая особенность сдерживает размножение лучших генотипов и, в конечном итоге, снижает рентабельность ведения сельского хозяйства.

Подобная ситуация обусловила необходимость разработки способов и методов, позволяющих увеличит скорость селекции не только за счет использования репродуктивного материала самцов, но и путем повышения относительного содержания в популяции генетических признаков высокопродуктивных самок. Сегодня это достигается распространением генотипа в виде зародышевых клеток (ооцитов и ранних зародышей) с помощью трансплантации эмбрионов.

Кроме того, в последнее время увеличивается объем работ по разработке методов, которые позволяют целенаправленно изменять генетический материал отдельных индивидумов с помощью приема трансгенеза, а также многократно умножать число созданных искусственно или естественно животных с использованием методики клонирования.

5.1 Трансплантация эмбрионов

Методика трансплантации эмбрионов базируется на способности зародышей, извлеченных из половых путей одной самки, продолжить развитие в половых путях другой самки того же вида. Впервые такая способность была продемонстрирована Вальтером Хипом (Valter Heap) в апреле 1890 года на кролях.

Однако, как известно, в яичниках самок млекопитающих при рождении насчитывается до 0,5 млн ооцитов, каждый из которых потенциально может дать начало новому организму и из которых за всю жизнь животного овулируют только несколько десятков. На первых этапах работ по трансплантации использовали эмбрионы, которые получали после естественной овуляции. Но, у таких сельскохозяйственных животных как крупный рогатый скот редко овулирует больше одного фолликула. Практическая целесообразность применения метода трансплантации стала очевидной с открытием способности некоторых гормонов стимулировать одновременный рост и овуляцию в один половой цикл сразу нескольких фолликулов. Вначале в качестве такого гормона использовали ГСЖК - гонадотропин сыворотки жеребой кобылы. Однако, в некоторых случаях он способен вызвать анафилактический шок. Кроме того, по физиологическому действию ГСЖК соединяет в себе способности лютеинизирующего и фолликулостимулирующего гормонов, а также имеет сравнительно долгий период полураспада в организме, что часто провоцирует развитие гормональных нарушений у обработанных животных. В настоящее время для стимуляции множественной овуляции (иначе полиовуляции) используют очищенный фолликулостимулирующий гормон, получаемый из переднего отдела гипофиза свиней и овец.

Искусственное осеменение стимулированных самок ведет к развитию в их половых путях сразу нескольких зародышей. Но, поскольку, половые пути коров и овец обеспечивают развитие одного-двух, реже трех плодов, при естественном продолжении беременности лишние плоды подвергались бы рассасыванию. Поэтому, при трансплантации эмбрионов образованные зародыши извлекают из половых путей самки-донора и переносят в половые пути самки-реципиента, стадию полового цикла синхронизируют со стадией полового цикла донора. Успешность пересадки способствует увеличению количественного содержания в популяции животных с генетическими признаками самки-донора.

Методика трансплантации эмбрионов (MOET - multiovulation embryo transfer) включает в себя:

- гормональную стимуляцию суперовуляции и искусственное осеменение самок-доноров;

- синхронизацию полового цикла самки-реципиента c половым циклом самки-донора или стадией развития трансплантируемого эмбриона;

- извлечение ранних эмбрионов из половых путей самки-донора;

- оценку состояния извлеченных эмбрионов;

- криоконсервацию эмбрионов (в случае необходимости их длительного хранения);

- пересадку эмбрионов синхронизированным животным-реципиентам.

Для извлечения ранних эмбрионов у коров применяются хирургический (с доступом до рогов матки через боковой разрез брюшной стенки) или нехирургический (с введением катетера в полость рога через цервикальный канал шейки матки) способы. У овец применяют лапаротомический (с доступом до рогов через хирургический разрез по белой линии живота) или лапароскопический способ (с доступом до рогов через проколы брюшной стенки троакарами). У свиней применяются хирургический и лапароскопический способы.

Кроме того, в последнее время все больше применяется метод получения ранних эмбрионов с использованием незрелых ооцитов, извлекаемых из яичников животных при забое или прижизненно (техника ovum pick-up). Извлеченные ооциты доращивают и осеменяют вне организма - так называемое получение зародышей "в пробирке", или "in vitro" культивирование, доращивают и трансплантируют животным-реципиентам.

5.2 Клонирование

Слово "клон" (греч.) означает потомство растительного или животного организма, которое образуется вследствие вегетативного размножения (у многоклеточных) или неполового деления клеток (у одноклеточных организмов). Соответственно, "клонирование" обозначает процесс создания такого потомства.

Естественные клоны у млекопитающих - это однояйцовые близнецы, два отдельных организма, полученные в результате того, что на определенном этапе развития зародыш делится на две генетически идентичные половины (в отличие от разнояйцовых близнецов, каждый из которых образуется из двух отдельных яйцеклеток).

На сегодня существуют три способа клонирования:

- хирургическое деление эмбрионов на несколько равноценных частей (чаще две) с последующим переносом каждой части в половые пути одного или нескольких реципиентов;

- эмбриональное клонирование, которое осуществляют при помощи переноса ядра клетки из желательного к размножению (клонированию) организма в энуклеированную (с удаленным собственным ядром) зиготу любого животного того же вида. При этом переносимые ядра получают из бластомеров ранних зародышей, генетический аппарат которых еще не утратил свойства тотипотентности. К преимуществу данного способа клонирования относится большая его эффективность, т.к. используются малодифференцированные ядра, к недостаткам - отсутствие знаний о генотипе получаемых эмбрионов;

- соматическое клонирование, при котором также применяется техника переноса ядер, но ядра для переноса берут из клеток взрослых животных или дифференцированных тканей плода. Ядра таких клеток утрачивают тотипотентность и являются дифференцированными, т.е. ориентированы на выполнение клеткой какой-то одной определенной функции, например, проведение нервного импульса, секрецию желудочного сока и тому подобное. Преимущества данного способа в том, что получаемый организм генетически полностью повторяет свою взрослую копию, и, следовательно, в тех же условиях, способен повторить ее фенотипически.

5.3 Трансгенез

Целью данного метода является создание животных с полезными признаками, сочетанное получение которых естественным путем (методом естественной селекции) невозможно или требует значительного времени.

Методика данного способа состоит в том, что изолированный ген, отвечающий за развитие или проявление желательного признака, вводят в геном животного, у которого хотят получить данный признак.

Теоретически можно вводить (инжектировать) желательный ген в любую клетку животного, но на практике его вводят в зиготу, представляющую собой одноклеточную стадию развития организма. Если ген "приживется" в зиготе, он будет присутствовать в каждой клетке сформированного из зиготы организма и передастся потомкам, тогда как, при введении в уже дифференцированные клетки (кроме половых) этот ген потомкам не передастся. Сложность получения трансгенных (т.е. со встроенным "чужим" геном) животных заключается в том, что:

- во-первых, вероятность встраивания внесенного гена в целостный сбалансированный геном очень низка;

- во-вторых, даже в случае успешного встраивания нет уверенности в том, что встроенный ген будет успешно "работать" (экспрессироваться), т.к. включение-выключение работы генов часто характеризуется сложностью и многоэтапностью.

В настоящее время метод трансгенеза применяется, в основном, для получения животных-биофабрик, которые секретируют, например, с молоком определенные вещества (факторы свертывания крови, и т.п.).

6. ПРАВА И ОБЯЗАННОСТИ ОПЕРАТОРА ПО ИСКУССТВЕННОМУ ОСЕМЕНЕНИЮ ЖИВОТНЫХ

Операторами по искусственному осеменению животных могут работать зооветспециалисты, а также лица, имеющие среднее образование, опыт работы в животноводстве, прошедшие подготовку на специальных курсах и стажировку по искусственному осеменению, получившие удостоверение на право работы.

Оператор по искусственному осеменению обязан:

- выполнять действующую инструкцию по искусственному осеменению коров и телок;

- содержать в чистоте пункт, 3 раза в месяц проводить дезинфекцию;

- принимать сперму и соблюдать правила ее хранения;

- контролировать уровень жидкого азота в сосуде Дьюара;

- использовать сперму в соответствии с селекционно-племенным планом хозяйства;

- проверять под микроскопом качество спермы при получении и перед каждым осеменением коров и телок;

- организовать и лично участвовать в работе по выявлению коров и телок в охоте, сообщать ветеринарному специалисту хозяйства о многократно осеменявшихся и подозреваемых в заболеваниях животных;

- своевременно проводить осеменение коров и телок;

- вести записи в журнале осеменений, запусков и отелов или в специальной карточке на осеменяемую корову об использовании спермы быков-производителей, о результатах исследования на стельность и отелах животных;

- составлять заявки на приобретение инструментов и оборудования;

- ежемесячно представлять главному специалисту хозяйства отчет по искусственному осеменению животных;

- постоянно работать над повышением своей квалификации.

Оператор имеет право давать указания работникам фермы о выявлении коров и телок в охоте, времени привода животных на пункт и режиме их содержания до и после осеменения.

7. ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНЫЕ ПРАВИЛА НА ПУНКТАХ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ

При организации искусственного осеменения коров и телок руководствуются «Ветеринарно-санитарными правилами при воспроизводстве сельскохозяйственных животных» (утверждены Главным управлением ветеринарии с Государственной ветеринарной инспекцией Госагропрома СССР 17 октября 1986г.).

При входе в тамбур оборудуют дезбарьер с дезоковриком, который заправляют 2%-ным раствором едкого натра.

После осеменения станок для фиксации животных подвергают механической очистке и моют горячим 2-3%-ным раствором двууглекислой соды.

Оператор должен работать в лаборатории в белом халате, колпаке или косынке, а в неблагополучных хозяйствах - в фартуке и резиновых сапогах; спецодежду используют только на пункте.

Для предупреждения распространения заразных болезней оператор обязан выполнять следующие правила:

- до и после осеменения или обследования каждой коровы на пункте необходимо мыть руки с мылом, а затем обтирать их ватным тампоном, смоченным 70°-ным спиртом;

- для осеменения использовать стерильные инструменты;

- мыть и дезинфицировать резиновые сапоги, фартуки после работы, а также перед выездом на каждую ферму;

- при переезде с фермы на ферму в одном хозяйстве, а при маршрутно-кольцевом обслуживании нескольких пунктов (в ряде хозяйств) оператор должен переносить (перевозить) с собой только сосуд Дьюара (5-20 л) со спермой в жидком азоте. Инструменты и материалы для осеменения коров должны быть на каждом пункте.

Инструменты следует стерилизовать кипячением, сухим жаром, фламбированием и химическими средствами:

- стерилизацию кипячением стеклянных шприц-катетеров и посуды осуществляют в следующем порядке: тщательно промытые шприц-катетеры разбирают, цилиндр шприца обертывают бинтом и прикрепляют к нему поршень. Склянки обертывают ватой или марлей. Инструменты помещают в стерилизатор, заливают на 2\3 объема дистиллированной водой, закрывают крышкой и кипятят 20 мин;

- канал шприца освобождают от остатков воды стерильным 1%-ным раствором хлористого натрия (40°С) или 2,0%-ным - лимоннокислого натрия. После этого в шприц набирают сперму;

- стерилизация сухим жаром в условиях пункта может быть проведена в сушильном шкафу; чистые стеклянные инструменты, посуду и шприц-катетеры в разобранном виде помещают в шкаф, доводят температуру до 180°С и выдерживают 1 ч, затем дают остыть, вынимают и используют. Металлические инструменты стерилизуют в кипящей воде в течение 20 мин. Остатки воды с обеззараженных инструментов удаляют стерильными салфетками, сохраняемыми в стерильной банке с притертой пробкой;

- полимерные шприцы для осеменения в облицованных гранулах после использования моют и стерилизуют путем их погружения (до 10 раз) в 0,5%-ный раствор хлорамина Б не менее чем на 24 ч или путем облучения с двух сторон с помощью бактерицидных ламп в течение 40 мин. на расстоянии 20 см от источника ультрафиолетовых лучей.

Использованные предметные и покровные стекла моют в теплой воде и протирают стерильной марлевой салфеткой.

Стерильные инструменты хранят в застекленных шкафах или в настольной витрине-ящике, оборудованной бактерицидной и электрической лампами. В полевых условиях влагалищное зеркало, корнцанг, стеклянные палочки, ножницы и другие инструменты, можно обеззараживать обжиганием их поверхности не коптящим пламенем походной газовой плитки, примуса, спиртовки или тампона, смоченного 960-ным спиртом.

Растворы хлористого и лимоннокислого натрия приготавливают ежедневно. В 100 мл дистиллированной или кипяченой профильтрованной воды растворяют 1 г хлористого натрия. Раствор лимоннокислого натрия (трехзамещенного пятиводного) готовят путем растворения в 100 мл дистиллированной воды 3 г лимоннокислого натрия, подогревают до 90-95°С и разливают в стерильные пронумерованные банки.

Для приготовления раствора фурацилина берут 1 л кипящей воды, вносят 10 г хлористого натрия и 0,2 г фурацилина, охлаждают и фильтруют. Раствор хранят не более 2 дней в затемненном месте или в банке из темного стекла с притертой пробкой.

Применяемый 70°-ный раствор спирта готовят путем добавления к 73 мл 96°"ного спирта-ректификата 27 мл прокипяченной дистиллированной воды. Правильность приготовления раствора проверяют спиртометром.

Инструменты, предназначенные для использования на пастбище, после стерилизации завертывают в стерильные марлевые салфетки, затем в полиэтиленовую пленку и укладывают в сумку. Еженедельно сумку моют горячим содовым раствором и прополаскивают горячей водой, а в случае приезда из неблагополучных хозяйств это выполняют немедленно в специально отведенном месте.

Сосуды Дьюара не реже 2 раз в год подвергают мойке и влажной аэрозольной дезинфекции.

8. ОРГАНИЗАЦИЯ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ НА МОЛОЧНЫХ КОМПЛЕКСАХ И КРУПНЫХ ФЕРМАХ

На молочных комплексах пункт искусственного осеменения располагают рядом с цехом раздоя коров или он должен примыкать к линии ежедневного передвижения скота на доильную площадку. Для фермы на 400 коров требуется манеж размером 5 * 10 м. В нем вдоль стен, не имеющих окон, параллельно оборудуют 10 ското-мест. Использование подстилки на пункте не допускается. Возможно применение резиновых и резинокордовых плит. К стене свободного угла манежа прикрепляют откидной столик для инструментов, а вблизи него - электророзетку и санитарно-техническую подводку для холодной и горячей воды.

Рядом с манежем оборудуют моечную и лабораторию. Для крупных комплексов площадь манежа определяют из расчета 2-3 ското-места на каждые 100 животных, размещенных в коровнике.

Пункт искусственного осеменения лучше построить между производственными зданиями и провести в манеж асфальтированные скотопрогонные дорожки от выгульных дворов.

9. ОРГАНИЗАЦИЯ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ В МЯСНОМ СКОТОВОДСТВЕ

Искусственное осеменение коров и телок в мясном скотоводстве основано на описанных выше принципах, но имеет свои особенности. Осеменение животных проводят сезонно и в большинстве хозяйств в летний период. Фермы и гурты располагают, как правило, на больших расстояниях друг от друга. В этих условиях важно своевременно обеспечить доставку на пункты спермы закрепленных быков, выборку животных в охоте и их осеменение. Для этого в зимний период на каждой ферме оборудуют пункт искусственного осеменения, летний передвижной пункт располагают на возвышенном месте пастбища. Пункт должен примыкать к расколу.

Для осеменения утром и вечером в установленное время, согласно распорядку дня, скотники выбирают коров и телок в охоте по номерам. Для этого стадо подгоняют к пункту, загоняют в загон и отбирают коров и телок, пришедших в охоту. После выборки животных в охоте, гурт отгоняют на пастбище, а выявленных коров осеменяют в манеже пункта.

10. УЧЕТ И ОТЧЕТНОСТЬ НА ПУНКТЕ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ

Оператор по искусственному осеменению ведет учет осеменения, отелов коров и телок в журнале искусственного осеменения животных; заполняет второй экземпляр ордера «На отправку-приемку спермы производителя» и возвращает племпредприятию (станции), уточняет потребность в сперме производителей и направляет заявку племпредприятию; составляет совместно с бригадиром (заведующим) фермы акт оприходования приплода, полученного от искусственного осеменения; учитывает в журнале искусственного осеменения результаты ректального исследования; ежемесячно представляет отчет по искусственному осеменению коров и телок.

11. ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С СОСУДАМИ ДЬЮАРА И ЖИДКИМ АЗОТОМ

Оператор искусственного осеменения должен пройти инструктаж по технике безопасности на племпредприятии и иметь допуск на работу с сосудами Дьюара. При этом необходимо руководствоваться «Рекомендациями по технике безопасности и эксплуатации сельскохозяйственного криогенного оборудования» (М, 1984).

Персонал, работающий с сосудами Дьюара и жидким азотом, обязан надевать защитные очки (лучше щитки из органического стекла) и перчатки (или рукавицы). Одежда должна быть без карманов, брюки - без манжет и закрывать верх обуви, рукавицы - свободные, чтобы при необходимости их можно было легко сбросить. При попадании жидкого азота на кожу пораженный участок следует немедленно обильно обмыть водой.

Помещение, где работают с жидким азотом или хранят сосуды Дьюара, следует оборудовать приточно-вытяжной принудительной вентиляцией.

Размещено на Allbest.ru