Главная Коллекция "Otherreferats" Сельское, лесное хозяйство и землепользование Лейкоз крупного рогатого скота

Лейкоз крупного рогатого скота

Эпизоотология, этиология, патогенез, симптомы, патоморфология лейкоза крупного рогатого скота. Характеристика эпизоотического состояние хозяйства СПК Рассвет Баймакского района. Меры борьбы и профилактика лейкоза крупного рогатого скота в хозяйстве.

Рубрика Сельское, лесное хозяйство и землепользование
Вид отчет по практике
Язык русский
Дата добавления 18.03.2012
Размер файла 60,6 K

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Страница:

Размещено на http://www.allbest.ru/

Введение

Улучшение обеспечения потребности населения продуктами питания и, в первую очередь, мясомолочными продуктами является актуальной проблемой животноводства. Выполнение этих решений предполагает дальнейшее увеличение поголовья скота и на основе использования временных достижений науки повысить продуктивность животных.

Одной из актуальных задач ветеринарной науки является решение проблемы лейкоза крупного рогатого скота. Широкое распространение лейкоза наносит значительный экономический ущерб. Падеж и вынужденная выбраковка животных, утилизация туш и органов при убое, нарушение воспроизводительной функции больных коров, а также ограничения, связанные с реализацией продукции в неблагополучных хозяйствах - все это приводит к потерям, которые особенно ощутимы в племенном животноводстве.

Существенный вклад в изучение вопросов эпизоотологии, этиологии, патогенеза, патоморфологии, биохимии и роли наследственных факторов в развитии лейкоза крупного рогатого скота внесли отечественные и зарубежные исследователи. Установлено, что продукты, полученные от больных лейкозом животных - молоко и мясо - содержат вредные метаболиты триптофана и других циклических аминокислот и, следовательно, являются экологически опасными для человека.

Поэтому целенаправленная борьба с лейкозом крупного рогатого скота в нашей стране и Республике Башкортостан в частности является большой социальной задачей.

В первую очередь для достижения этой цели необходимо проводить широкомасштабные серологические, гематологические исследования животных всех категорий хозяйств с целью выявления больных. В настоящее время предложены и применяются в ветеринарной практике профилактические мероприятия против данного заболевания.

Заметный прогресс научных исследований в изучении вирусной этиологии лейкозов крупного рогатого скота, который наметился после обнаружения в культурах лимфоцитов крови больных лейкозом коров онковируса типа С. Многие исследователи считают его этиологическим агентом и называют бычьим лейкозным вирусом или ретровирусом лейкоза крупного рогатого скота.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 ОБЩИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БОЛЕЗНИ

Лейкоз крупного рогатого скота (Leucosis bivum, Л КРС) - хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, характеризующаяся неопластической пролиферацией кроветворной и лимфоидной тканей, смертельным исходом. Проявляется в виде инфекционного энзоотического лейкоза крупного рогатого скота (ЭЛ КРС) и спорадического лейкоза молодняка (СЛМ), ЭЛ КРС встречается преимущественно у скота в возрасте свыше двух (чаще 4-8) лет; ему свойственно энзоотическое распространение, в основном бессимптомное хроническое течение, начальная и развитая стадия лейкемии (лимфоидного или миелоидного ряда), персистирующий лимфоцитоз (ПЛЦ), СЛМ регистрируют очень редко у животных до 2-летнего возраста, характеризуется он острым или подострым течением, увеличением многих лимфатических узлов (злокачественная лимфома, лимфосаркоматоз). Основной признак которой - злокачественное разрастание клеток кроветворных органов с нарушением их созревания, в результате чего происходит диффузная инфильтрация органов. Причина СЛМ до сих пор неизвестна; в сыворотке крови не образуется антитела против вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС) и не возникает ПЛЦ.

1.2 ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА

Первые случаи лейкозов были описаны в Германии: у человека (1845), лошадей и свиней (1858) и крупного рогатого скота (1878). К настоящему времени их диагностируют как у теплокровных, так и холоднокровных животных. В разные годы эту болезнь именовали белокровием, лейкемией, раком крови, лейкозом и др. В последнее время, по международной терминологии, ее называют лейкозом, так как основные изменения (патогенетическая сущность) происходят в различных органах и не всегда периферической крови.

Большой вклад в изучение лейкозов внесли отечественные исследователи А. Томаров (1862), К. Славянский и А. Щастнов (1867-1876), впервые указавшие на патоморфологические и биологическое сходство лейкозного и опухолевого процессов. М.А. Новинский (1846-1914) считается основоположником экспериментальной онкологии. Вирусогенетическая теория происхождения злокачественных опухолей. Л. А. Зильберав настоящие время доминирует; она подтверждается результатами исследования данной болезни. Потоморфологически Л КРС объединяет опухолевые болезни кроветворных органов, а также, лимфоидный, миелоидный, слабодифференцированные (гемацитобластоз) лейкозы, лимфосакому, ретикулосаркому, лимфогрануломатоз.

Возбудитель болезни - РНК-содержащий вирус, экзогенного происхождения, который классифицирован как вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) или бычий лейкозный вирус (БЛВ) морфологически сходен с возбудителями лейкоза у животных других видов. Однако имеется существенные различия в антигенной структуре. Существует только один серовариант ВЛ КРС, которому восприимчивы , кроме КРС, еще овцы и козы.

Устойчивость ВЛ КРС во внешней среде не большая. В клеточных культурах при нагревании до 600С он погибает через 1 мин, быстро обезвреживается 2-3%-ными растворами едкого натра, формальдегида и другими дезинфицирующими средствами в общепринятых концентрациях. Инактивируется ВЛ КРС в молоке нагреванием его до 740С в течение 7с или скисанием (рН 4,75). Вирус можт длительное время находиться в клетке в частности или полностью в связанном состоянии с ее геномом. Патогенное действие он проявляет при снижение иммунологического реактивности организма.

1.3 ЭТИОЛОГИЯ

Наличие вируса лейкоза является обязательным, хотя и не единственным этиологическим фактором в развитии лейкозного (опухолевого) процесса. Для реализации его лейкозогенных потенций необходимы генетическая предрасположенность и иммунологическая недостаточность инфицированного вирусом лейкоза организма животных. А в целом этиология лейкоза не известна.

1.4 ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

ЭЛ КРС диагностируют на всех континентах мира. В 1986 г. Из европейских стран были свободны от ЭЛ КРС лишь Исландия, Мальта, Нидерланды и Швейцария. Обычно ВЛ КРС передается конгенитально (через плацент) или горизонтально.

Конгенитальное заражение вирусом телят в хозяйствах происходит сравнительно редко. Телята заражаются главным образом постнатально, в первую очередь с молозивом и молоком. От животных возбудитель передается путем прямого или косвенного контакта: с молоком, слюной, кровью (независимо от того, содержит ли кровь лейкоциты или нет).Возбудитель болезни разносится быстро, если не соблюдается правила асептики и антисептики при манипуляциях у животных (взятие крови, прививки и др.). Горизонтальная передача ВЛ КРС имеет большое значение внутри стада; при этом особую роль играют кровососущие насекомые.

Как правило, болезнь встречается у высокопродуктивного скота(лучший генетический фонд молочного скота), в частности, при несбалансированном кормлении, когда молочная железа израсходует вещества, некомпенсируемые кормами, и ослабляются физиологические функции организма. Между хозяйствами, районами, областями, странами ЭЛ КРС распространяется в основном при транспортировки племенных животных, зараженных ВЛ КРС. Существенное значение в распространение болезни имеет гено- и фенотипическая предрасположенность животных к лейкозу, например, среди красного и черно-пестрого пород скота. В отдельных хозяйствах заболеваемость составляет 3-20% и более, а летальность - до 15%.

1.5 ПАТОГЕНЕЗ ЛЕЙКОЗА

По данным многих отечественных и зарубежных ученых, лейкоз крупного рогатого скота протекает бессимптомно или проявляется лимфоцитозом с образованием опухолей в кроветворных и других органах и тканях. Раскрытие процесса возникновения лейкоза, начиная от внедрения ВЛ КРС в организм и развития патологических изменений, обуславливающих клинический синдром болезни, позволяет выяснить сущность патогенеза. Основным источником лейкоза крупного рогатого скота служит больное животное. Вирус лейкоза крупного рогатого скота не обладает той контагиозностью, которой обладает вирус ящура, вирус чумы свиней. Это медленная инфекция, передающаяся от животного к животному только через живую клетку - лимфоцит, инфицированный ВЛ КРС. Основным фактором передачи вируса лейкоза крупного рогатого скота в пастбищный период могут быть быки-производители. При лейкозе патологические изменения в той или иной степени касаются всех ростков кроветворной ткани. Чаще расстраивается функция лейкобластической ткани. При этом происходит усиленная пролиферация клеток, но они частично или полностью лишены способности дифференцироваться в различные типы лейкоцитов.

Многочисленные наблюдения показали, что порода, продуктивность животных, корма, климат, характер почвы, пастбища имеют большое значение в развитии лейкоза. Патогенетические особенности начального проявления и дальнейшего развития патологического процесса при лейкозе только констатируют происходящими изменениями без определения их механизма. Комплексные клинико-гематологические, цитоморфологические исследования крови и кроветворных органов в динамике развития лейкозного процесса с последующим патоморфологическим анализа материала показали, что все формы гемобластозов у крупного рогатого скота проявляются лишь относительным и абсолютным лимфоцитозом в крови. Прогрессирование болезни выражается в нарастании количества лейкоцитов (лимфоцитов) в 1 мкл крови до сублейкемического и лейкемического уровня, в задержке дифференциации молодых и малодифференцированных клеток, увеличении их количества в кроветворных органах и поступлении в периферическую кровь или образованием атипичных, малигнизированных клеток в пораженных органах с последующим поступлением в ток крови. С появлением клинических симптомов и патологоанатомических изменений, характерных для лейкозной патологии. На сегодняшний день выделяют следующие стадии инфекционного процесса: инкубационный период; стадия бессимптомного вирусоносительства; гематологическая стадия; стадия опухолевого проявления заболевания. В инкубационном периоде антитела в сыворотке крови появляются в ответ на заражение организма ВЛ КРС не сразу, а спустя определенное время. В то же время инкубационный период может составлять для этого заболевания ряд лет. Стадию бессимптомного вирусоносительства животных, определяют с помощью иммунологических реакций в сыворотке крови специфических антител к антигену вируса лейкоза крупного рогатого скота. Состояние антителоносительства не вызывает у животных видимых физиологических или патологических отклонений. У коров не наблюдают нарушение воспроизводительной функции и деятельности молочной железы, сохраняется масса и полностью сохраняются поведенческие рефлексы. В состоянии вирусоносительства животные могут находиться на протяжении всей своей жизни. Только у незначительной части животных-антителоносителей при систематических клинико-гематологических исследованиях определяют изменения крови в виде относительного и абсолютного лимфоцитоза. Гематологическая стадия лейкоза крупного рогатого скота протекает на алейкемическом, сублейкемическом уровнях. Алейкемическая картина крови обычно проявляется без изменений общего количества лейкоцитов в единице объема крови. Эту фазу, как правило, устанавливают у молодых животных в возрасте до 2-2,5 года, продолжается она от 1 до 3 лет. Более продолжительный период гематологического проявления болезни - фаза хронического течения с сублейкемическими показателями крови. Такое течение лейкоза устанавливают у коров 3-5 лет. У больных лейкозом коров с сублейкемической картиной крови, постепенное нарастание общего количества лейкоцитов в периферической крови с преобладанием лимфоидных форм. Лейкемическая фаза, при гематологической стадии лейкоза, характеризуется гиперлейкоцитозом (более 40 тыс. в 1 мкл крови) и повышением содержания в лейкограмме молодых малодифференцированных клеток (продолжается она 1-3,5 года). Продолжительность опухолевой стадии зависит от вовлечения в патологический процесс лимфатических узлов и соответствующих им жизненно важных органах. Созданная унитарная теория кроветворения крупным русским ученым А.А. Максимовым рассматривает малый лимфоцит как полипотентную клетку. Однако нет подтверждения, что В- и Т-лимфоциты имеют общую клетку-предшественницу.

У млекопитающих и птиц основу костного мозга составляет ретикулярная клетка, фибробласты и остеобласты. Число гигантских клеток в этом органе при патологических состояниях увеличивается. При гистологическом исследовании костного мозга можно выявить очаговую лимфоидную инфильтрацию.

1.6 КЛИНИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ БОЛЕЗНИ

Клиническая стадия болезни характеризуется проявлением ведущих специфических признаков лейкоза: прогрессирующее увеличение лимфатических узлов в разных участках тела, увеличение селезенки, печени, опухолевые (лейкозные) разрастания в разных участках тела и экзофтальмия. В 3-5 % случаев у больных животных отмечают воспалительные явления глаз и экзофтальм. При лейкозе лимфоузлы увеличены, гладкие, подвижные, эластичные, плотной консистенции, безболезненные, без заметной температурной реакции. Клиническое обследование вялых животных показывает, что у некоторых из них наблюдается повышенная возбудимость, нарушение сердечнососудистой деятельности. У животных с клиническими признаками лейкоза снижается упитанность, нарастает общая слабость, аппетит непостоянен, снижается удой. Одновременно усиливается цианоз слизистых оболочек глаз и ротовой полости, появляется желтушность. Возможны нарушения ритма и глубины дыхания; нарастание сердечнососудистой недостаточности, и следствием этого может быть отек в области нижней челюсти, подгрудка, переходящий на стенку живота и вымя. Пульс становится нитевидным, замедленным (брадикардия) составлял 30-40 ударов в минуту, но иногда бывает и ускоренным (тахикардия). Можно наблюдать беспрерывные жевательные движения без пищевого кома. Причиной этого является наличие лейкозных узлов на корне языка или стенке глотки. При ректальном исследовании сравнительно легко прощупывают увеличенные лимфатические узлы тазовой полости, каудальной части брюшной полости и гиперэластичные разрастания в прилежащих органах. Больные коровы могут быть яловыми, ткань вымени редко бывает поражена лимфоидными инфильтрациями, хотя лимфатические узлы вымени поражаются часто. У коров клиническая картина болезни выражена ярче, чем у быков.

Инкубационный период ЭЛ КРС (до проявления изменений в периферической крови ) при экспериментальном заражение длится 60-750 дней, а при спонтанном - 2-6 лет. При ЭЛ КРС выделяют предлейкозную, начальную, развернутую и терминальную стадии болезни. С развитием патологического процесса указанные стадии следует одна за другой и обычно является переходящими.

Предлейкозную стадию выявляют серологическим и вирусологическими исследованиями, при этом еще ни каких гематологических изменений нет.

При начальной стадии отмечают количественные и качественные сдвиги в составе клеток крови. Увеличивается число лейкоцитов, увеличивается процент лимфоцитов, появляются малодифференцированные, незрелые, различной величины, патологические форы клеток.

Развернутая стадия характеризуется, кроме гематологических сдвигов, разнообразием неспецифических и специфических клинических признаков, их проявление зависит от локализации патологического процесса. Неспецифические признаки - это ухудшение общего состояния животного, плохое усвоение кормов, снижение удоя, быстрая утомляемость, прогрессирующее исхудание, расстройства пищеварения (диарея, запоры, атония или тимпания преджелудков), ослабление сердечной деятельности, цианоз и желтушность слизистых оболочек, нарушение дыхания, отеки в области подгрудка, живота , вымени, хромата на одну или на обе задние конечности, затруднение выделения мочи, аборты, яловость, увеличение одной или нескольких долей вымени.

Специфическими признаками лейкоза считается увеличение поверхностных (предлопаточных, околоушных, надколенных, подчелюстных, надвымянных) и внутренних (доступных ректальному исследованию) лимфатических узлов; появление опухолевых разрастаний в различных областях тела, экзофтальм, увеличение селезенки и печени. Лимфоузлы имеют величину от грецкого ореха до детской головы. Они безболезненны, подвижны, эластичной или плотной консистенции, а при сильном растяжение капсулы становится болезненными. Внутренние лимфоузлы поражаются чаще поверхностных.

При терминальной стадии быстро развивается патологический процесс.

Отчетливо проявляется неспецифические признаки. Количество лейкоцитов в периферической крови иногда снижается, при этом преобладают их патологические формы. Резко изменяется качественный состав лимфоцитов в сторону их патологии. Уменьшением количества лейкоцитов объясняется истощением кроветворной ткани и понижением физиологической реактивности организма. Лейкозные изменения обнаруживаются в селезенки, сердце, печени, почках, сычуге. Данная стадия развивается при пониженной резистентности организма животного и заканчивается острым течением смертельно, нередко от разрыва селезенки или других внутренних органов.

У молодняка, преимущественно в возрасте 4-12 мес., болезнь встречается в трех формах: мультицентрической (лимфосаркома, общая лимфаденопатия), тимусной (опухолевидные разрастание в нижней части шеи) и кожной (кожный лейкоз), протекающей с развитием инфильтративных разрастаний в коже.

1.7 ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ

При вскрытии трупа в зависимости от формы и течения лейкоза обнаруживают значительные изменения (в виде диффузной и очаговой инфильтрации) в органах кроветворения, пищеварения, на серозных покровах, в сердце, печени, почках и матке.

Основными формами ЭП КРС считаются собственно лейкозы и ретикулозы. К собственно лейкозам относят лимфо- и миелолейкоз, гемобластоз, а к ретикулозам - лимфо- и ретикулосаркому, ситемный ретикулоз, лимфогрануломатоз плазмоцитому. Эта классификация ЭЛ КРС основана на патоморфологической характеристике разрастаний ( новообразований),результатов цитологического и гематологического исследований циркулирующих в крови клеточных элементов (степени их созреванию).

Морфологические изменения при лимфоидном лейкозе у крупного рогатого скота, характеризуются большим разнообразием частоты и степени поражения отдельных органов у больных животных и неодинаковым участием в развитии опухолевых процессов клеток кроветворной ткани. Опухоли в лимфоидной ткани являются наиболее частыми у сельскохозяйственных и домашних животных. У больных животных поражаются до 50 % наружные лимфоузлы.

В основе лимфоидного лейкоза лежит лимфоидная гиперплазия (лимфатических узлов и селезенки) и метаплазия (костного мозга) кроветворных органов, сопровождающихся лимфоидной инфильтрацией других органов и тканей.

Для диагностики лейкоза большое значение имеет состояние лимфатических узлов. У крупного рогатого скота в организме насчитывают более 300 лимфоузлов, которые располагаются регионально. Нормальные лимфатические узлы обычно бывают круглой или округлой формы с ясно заметным темным корковым и светлым мозговым слоем. При лимфолейкозе лимфоузлы обычно равномерно увеличиваются, достигают больших размеров. На разрезе ткань их представляется саловидной, однородной массы, плотной консистенции, подвижной, не сращенной с окружающей тканью. При диагностике лейкоза большое значение имеет макро- и микроскопическое строение селезенки. Лимфатические узлы характеризуются гиперплазией лимфоидных клеток, усиленной пролиферацией незрелых лимфоидных клеток в центрах размножения и инфильтрацией ими интермедиарных синусов.

Пульпа в селезенке разрыхлена и легко соскабливается. В наиболее увеличенных узлах часто имеется омертвения в виде неправильной формы гнезд различной величины. Некротические участки гомогенные, напоминают сухой сыр.

Фолликулы и мякотные шнуры, как правило, сдавливаются и постепенно атрофируются, корковый слой уменьшается. В более крупных лимфоидных клетках хорошо выражена базофильная цитоплазма, иногда с вакуолями; их ядра зернистые, округлые, угловатые с хорошо заметной хроматиновой сетью. Отдельные клетки изменены, в них выявляется кариорексис, лизис и гнездные кровоизлияния.

Основное патологоанатомическое изменение селезенки заключается в значительном ее увеличении, если же увеличение незначительно, тогда с поверхности заметна мелкая бугристость.

Селезенка темно-серого цвета с синеватым или розоватым оттенком, на разрезе - коричневато-красного или вишнево-красного.

В норме в селезенке выделяют трабекулы и фолликулы, а между ними находятся лимфоциты, ретикулярные клетки и моноциты. При лимфолейкозе селезенка всегда увеличена в размере. Капсула у селезенки напряжена, пульпа рыхлая, малинового цвета, на разрезе вырывается из капсулы с большой силой, поверхность разреза гладкая или зернистая за счет выступающих увеличенных фолликул. При гистологическом исследовании селезенки выявляют сильную инфильтрацию лимфоидными клетками центров размножения в фолликулах, а также красной пульпы, трабекул и капсул органов. В конечной стадии болезни - происходит полное нарушение границы белой и красной пульпы. При лимфолейкозе помимо собственных органов кроветворной системы в патологический процесс вовлекаются другие органы, не имеющие непосредственного отношения к кроветворению, т.е. появляются миелоидные очаги. Разрастание кроветворной ткани может происходить во всех частях организма, где имеются ее родоначальные ретикулогистиоцитарные элементы. Однако, частота локализации лейкозных поражений в отдельных системах и органах существует известная закономерность. Где бы эти изменения ни локализовались, они носят однотипный характер и имеют определенное диагностическое значение. Патологоанатомические изменения в них характеризуются или диффузной инфильтрацией лейкозной ткани или опухолевидными разрастаниями с образованием ограниченных лейкозных очагов различной величины. Они проявляются в виде увеличения размеров и массы пораженного органа, а также изменением его цвета. Наряду с изменениями диффузного характера в органе образуются ограниченные, чаще округлой формы образования, серого или желто-серого цвета, которые отчетливо выступают над поверхностью органа. Опухолевые разросты чаще локализуются в предсердиях. В связи с этим появляются неспецифические симптомы с расстройством ряда систем, которые не отражают особенностей клинического проявления болезни. Например, развивается травматический перикардит, с ослаблением сердечной деятельности, цианозом, желтушностью слизистых оболочек, нарушением дыхания, отеком подкожной соединительной ткани в области подгрудка, живота, вымени, межчелюстного пространства. Микроскопически в мышце предсердия можно заметить опухолевые диффузные изменения, саловидные разрастания, которые также находятся под эпикардом предсердия. Узловатые разрастания могут быть множественными и пронизывать значительную часть стенки предсердий, и даже желудочков. При лейкемических разрастаниях миокард дрябловатый, красно-серого цвета, несколько суховат. Гистологическая картина проявляется в сердечной мышце инфильтрированным разрастанием клеток в виде цепочек, мелких очажков или сплошных тяжей из лимфоцитов, окружающих мышечные волокна и других структур с неструктивными изменениями, или атрофией. В печени наблюдается инфильтративное разрастание соединительной ткани неодинаковой интенсивности, что приводит к разрушению балочного строения органа. Изменения почек происходят в виде образования диффузных полей из лимфоидных элементов в корковом слое почек. В тонком отделе кишечника стенка утолщена, на слизистой оболочке появляются изъязвления. Солитарные фолликулы и Фейровы бляшки этого отдела увеличены и возвышаются над поверхностью слизистой оболочки. Гистологическими методами в кишечнике наблюдают дистрофические изменения и дисквамацию эпителия, инфильтрацию всех слоев большим количеством лимфоидных клеток, атрофию желез слизистой оболочки и мышечных волокон с резким утолщением подслизистого слоя. Известно, что 58% случаев при лейкозе поражается печень. Она увеличена в объеме, на поверхности разреза заметна мускатность и рельефно выступающая дольчатость, в паренхиме встречаются саловидные сероватые разрастания как с поверхности, так и проникающие в глубину. Микроскопически наблюдают лейкемические разрастания в капиллярах долек ил между печеночных балок.

При лимфоидном лейкозе крупного рогатого скота отмечают инфильтрацию лимфоидными элементами в кроветворных органах. Гиперпластические изменения наиболее выражены в лимфатических узлах, селезенке, печени в диффузной форме, а в сердце, почках - в виде опухолевидных разрастаний. Диффузная и очаговая инфильтрация тканей, пораженных органов лимфоидными элементами приводит нередко к атрофическим изменениям в паренхиме органов. В основе специфических, морфологических изменений при лейкозе лежит генерализованная гиперплазия всего лимфатического аппарата пролиферацией клеток ретикулоэндотелиальной системы с преимущественной дифференциацией в сторону лимфопоэза.

Гистологически лимфоидные инфильтраты характеризуются процессом интенсивной пролиферации с локализацией в отдельном органе. Лимфолейкозу свойственна распространенность процесса.

Патологоанатомические, гистологические исследования не следует переоценивать. Во-первых, их значение ограничено рамками посмертной диагностики лейкоза и, во-вторых, они не могут обеспечить получение достоверных данных в ранней стадии болезни, когда видимые патологоанатомические изменения в органах еще отсутствуют, а морфологические недостаточно выражены и имеются лишь в отдельных органах, локализуясь диффузно или ограниченно. Для патогистологического исследования направляют от павших или убитых животных кусочки (2х2 см) измененных органов, фиксированных 10%-ным раствором формалина. При ЭЛ КРС наблюдают в органах характерные изменения, в первую очередь - лимфоидно-клеточную инфильтрацию.

1.8 ДИАГНОЗ И ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА

На сегодняшний день диагноз лейкоз крупного рогатого скота рекомендуется ставить на основании комплексных лабораторных исследований: серологических, гематологических, патологоанатомических, гистологических и клинических. Ранняя и точная диагностика лейкоза является основой всех профилактических и оздоровительных противолейкозных мероприятий. При первичной постановке диагноза в хозяйствах, фермах, стадах проводят диагностический убой больных животных с последующим патологоанатомическим и гистологическим исследованием.

Иммунологическая диагностика лейкоза. Одним из важных моментов в диагностике лейкоза крупного рогатого скота является выявление инфицированных животных с помощью разных серологических методов (РИД, РСК, МФА, РИА, ИФА). Постоянным и характерным признаком инфицированности животных является наличие антител к антигену ВЛ КРС. Среди них РИД (реакция иммунной диффузии) отличается достаточно высокой чувствительностью и специфичностью, простотой и легкостью постановки. Стандартный диагностический набор, выпускаемый биопромышленностью, делает эту реакцию весьма удобной для проведения массовых исследований в любой диагностической лаборатории. В настоящее время у нас в стране и в большинстве зарубежных государств РИД принята в качестве основного серологического теста для диагностики лейкоза. Вместе с тем на завершающем этапе оздоровления желательно было бы использовать и более чувствительные реакции - такие как ИФА, ПЦР. Серологический же метод, специфичен и выявляет животных на всех стадиях инфекционного процесса, вызванного ВЛ КРС, а также позволяет проводить мероприятия, направленные на ликвидацию инфекции. Основан этот метод на обнаружении в сыворотке крови антител против гликопротеидного антигена вируса лейкоза. Время с момента внедрения вируса до образования антител к ВЛ КРС, определяемых в реакции иммунодиффузии (РИД), составляет 1-1,5 месяца. Результаты серологических исследований позволяют выявить некоторые возрастные особенности. Уровень инфицированности у молодняка 6-24 месяцев, а также количество носителей антител в ВЛ КРС гораздо ниже по сравнению с более старшими возрастными группами животных. Весной серо-негативный бык-производитель в пастбищный период заражается вирусом лейкоза от серо-позитивных коров может стать источником инфекции через 3 месяца. Поэтому осенью количество инфицированных быков-производителей увеличивается. Лейкоз по серологическим исследованиям установлен среди разных пород крупного рогатого скота. Так, уровень инфицированности черно-пестрой и красной породы (бурая латвийская, красная эстонская, красная литовская, красная степная, красная датская) выше, чем среди пород шведского происхождения (бурая карпатская, костромская, лебединская, бурая кавказская). На течение лейкоза и уровень инфицированности большую роль играет сезонность. Интенсивность перезаражения у коров выше зимой, нежели летом.

Выявление больных коров гематологическим методом. Больные лейкозом - это инфицированные вирусом лейкоза с переходом у животного процесса в гематологическую или клиническую стадию лейкозного (злокачественного, т.е. опухолевого) процесса. Серо-позитивных животных с двухлетнего возраста следует (согласно инструкции по лейкозу от 9 августа 1989 г.) исследовать гематологически. Эта стадия лейкозного процесса характеризуется более постоянными изменениями количественного и качественного состава периферической крови в виде абсолютного лимфоцитоза и наличием единичных малодифференцированных клеток.

Гематологические исследования способствовали более углубленному изучению патологических процессов в организме при.

Лейкозы включают в себя лимфоидный, миелоидный, недифференцированный, неклассифицированный (гемоцитобластоз) лейкоз, злокачественный гистиоцитоз. Длительное, бессимптомное течение лейкоза у крупного рогатого скота и многочисленное поражение животных происходит в гематологической стадии. Изменения в периферической крови отражают почти все патологические процессы, протекающие в организме явно и скрыто. Морфологическое исследование крови играет большую роль при заболеваниях кроветворной системы. Сущность ее заключается в оценке двух показателей белой крови (количество лейкоцитов в 1 мкл крови и процент лимфоцитов в лейкограмме). Сравнительно значимые изменения в показателях белой крови наблюдают в связи с возрастом животных, что находит отражение в "лейкозном ключе". По нему серо позитивно реагирующих животных подразделяют на здоровых, подозрительных и больных, Лимфолейкоз характеризуется острой и хронической формой течения. По мере прогрессирования лейкозного процесса наблюдают чередование алейкемического, сублейкемического, лейкемического составов крови. Сублейкемический уровень лейкоцитоза (лимфоцитоза) характерен для начальной стадии болезни, тогда как лейкемический показатель характеризуется быстрым, прогрессивным развитием процесса с наступлением конечной стадии лейкоза. При лимфолейкозе важное диагностическое значение имеет качественный состав лимфоидных элементов крови. В начале болезни клеточные элементы представлены в основном зрелыми лимфоцитами всех трех величин (малые, средние, большие). Могут появляться ридеровские, двухъядерные формы лимфоцитов (1-1,5 %), пролимфоциты, лимфообласти 1,5 %.

Возможно выделение и других клеток - теней Боткина-Гумпрехта, с рыхлым хроматином в ядре и цитоплазме, легко разрушающихся в связи с пониженной их устойчивостью к воздействию внешней среды. Часто их выявляют при высоком лейкоцитозе и при преобладании молодых клеток (пролимфоцитов, лимфобластов). Следовательно, морфологические исследования крови важны и с помощью их можно диагностировать больных лейкозом животных.

Необходимо исключить СЛМ и болезни, сопровождающиеся сходным с ЭЛ КРС изменениями в составе крови. СЛМ отличается от ЭЛ КРС по этиологии. Возбудителем СЛМ не является ВЛ КРС. При СЛМ не образуются антитела против ВЛ КРС, не возникает ПЛЦ, отмечается спорадическое распространение, острое и подострое течение и заболевание молодняка.

Необходимо учитывать, что многие острые и хронически протекающие болезни (туберкулез, бруцеллез, паратуберкулез, актиномикоз, некоторые инвазионные болезни, травматический перикардит, ретикулит, метриты, маститы, гепатиты и др.) нередко сопровождаются значительными изменениями крови, которые имеют защитный характер и определяется как лейкемоидная реакция организма (ЛР), отражающая функционально-реактивные изменения. Изменения крови при лейкозе носят органический характер. ЛР является временной, исчезает она с улучшением состояния животного. Для исключения указанных болезней проводят соответствующие микробиологические, серологические, аллергические, гистологические, копрологические, повторные гематологические и другие исследования.

1.9 ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

В организме животных, зараженных ВЛ КРС, выявляют преципитирующие и комплементсвязывающие антитела. Проблема специфической профилактики лейкоза крупного рогатого скота не решена, хотя исследования в этой области продолжаются и по сегодняшний день. Против лейкоза крупного рогатого скота получена рекомбинантная вирус-вакцина, содержащая генетическую информацию. Действующая ныне система ветеринарно-санитарных мероприятий по оздоровлению хозяйств от лейкоза и современные методы прижизненной диагностики болезни позволяют оздоровить неблагополучное стадо в течение 3-5 лет. Период оздоровления от данной инфекции требует значительных материальных затрат на организацию и проведение оздоровительных мероприятий. В неблагополучном хозяйстве ежемесячно проводят серологические исследования с удалением из стада животных положительно реагирующих на РИД, а на фермах проводят дезинфекционные и дератизационные работы.

Серологические исследования (РИД) дали основу для составления эпизоотических карт районов и разработок планов по интенсивному оздоровлению хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота. Наиболее щадящий вариант оздоровления неблагополучных хозяйств - постоянная замена инфицированных ВЛ КРС дойных коров нетелями, свободными от ВЛ КРС.

Главное внимание следует уделять выращиванию ремонтного молодняка, свободного от ВЛ КРС. Вторым важным элементом считают проведение двухкратного (в год) гематологического исследования всего взрослого поголовья для выявления животных, больных лейкозом. Также необходим высокий санитарно-ветеринарный уровень обслуживания скота, исключение возможности передачи ВЛ КРС контактным животным.

Второй вариант при этом предусматривает разделение основного стада на две группы - серо-позитивных и серо-негативных, с последующим удалением серо-позитивных животных.

Основу системы профилактики и борьбы с лейкозом крупного рогатого скота составляет реакция иммунодиффузии для прижизненной диагностики лейкоза и контроля оздоровления неблагополучных хозяйств от инфекции ВЛ КРС. Заслуживают внимания результаты оздоровительных мероприятий с различным уровнем инфицированности и технологий ведения молочного скотоводства в некоторых хозяйствах.

На основании практического опыта и научных исследований, направленных на ликвидацию лейкоза племенных предприятиях, племенных заводах; хозяйствах, фермах, специализированных хозяйствах по выращиванию нетелей, товарных хозяйствах. Оздоровление проводили в достаточно короткие сроки. Этого достигали путем удаления из стад серо-позитивных (РИД) быков и регулярного - двукратного, в течение года исследования. Причем товарные хозяйства рекомендовали оздоравливать по двум схемам. Первая - в хозяйствах, где имелась низкая зараженность (до 10 %), сразу после выявления инфицированных животных их удаляли из стада, а остальных через 2-3 месяца при этом повторно исследовали серологически (РИД). Вторая схема предусматривалась в хозяйствах, где зараженность составляла 10-40 % оздоровление проводили, разделяя стадо на дворы (группы) с учетом серо-негативных и серо-позитивных животных. Другие исследователи главное внимание уделяют изолированному выращиванию здорового молодняка - основного звена в системе противолейкозных мероприятий. Лучшим вариантом оздоровления хозяйств от лейкоза является создание серо-негативного по РИД стада. Причем при любом проценте инфицированности предусмотрены аналогичные мероприятия. Животные, инфицированные вирусом лейкоза (РИД-положительные) коровы и нетели должны быть затаврены (тавром в виде буквы "Л") с двух сторон в области шеи или крупа. Ветеринарно-зоотехнические мероприятия в таком случае проводят, начиная с РИД-отрицательных и заканчивают РИД-положительными. Для обеих категорий коров и нетелей следует предусмотреть изолированные родильные отделения. Одновременно следует вести работу с молодняком. Следует обязательно учитывать следующие пункты при профилактике лейкоза:

Приобретать для племенного использования животных из благополучных по лейкозу хозяйств.

Не допускать вновь поступивших животных в стадо без профилактического 30-дневного карантина.

Запрещать производственные связи с хозяйствами, которые не благополучны по лейкозу.

При появлении у животных признаков, вызывающих подозрение на лейкоз, необходимо сразу организовать проведение клинических, лабораторных исследований для подтверждения или исключения заболевания.

Племенные хозяйства целесообразно оздоравливать путем проведения серологических исследований (РИД), изолировать инфицированных и своевременно проводить гематологические исследования серо-позитивных (РИД-положительных) животных со сдачей на убой больных.

В товарных хозяйствах также рекомендуется ориентироваться на выявление больных лейкозом животных. Для этого регулярно необходимо проводить серологические исследования и клинический осмотр животных, исследовать продукты, полученные от больных животных. Имеется обратная связь между продолжительностью оздоровления и началом проведения противолейкозных мероприятий в хозяйствах. Как видно из приведенных данных набор профилактических мероприятий при лейкозе животных незначителен. Наиболее эффективным, до настоящего времени, остается серологический контроль, который позволяет достоверно оценить состояние животного.

Для каждой группы хозяйств с различным уровнем инфицированности животных характерен определенный коэффициент роста пораженности стада лейкозом. Если не проводить оздоровительные мероприятия при 1-процентной инфицированности начальной стадии болезни, иногда оздоровление может произойти в течение 8 лет. Интенсивность перезаражения животных выше зимой, чем летом, если рассматривать этот процесс относительно пород животных, то зараженность выше у черно-пестрой пород, чем у холмогорской и ярославской.

Следовательно, современные методы исследования лейкоза крупного рогатого скота позволяют оздоровить хозяйство от этой болезни независимо от стадии проявления инфекционного процесса (скрытая или явная инфекция).

1.10 ПРОФИЛАКТИКА И МЕРЫ БОРЬБЫ

Основными мероприятиями по профилактике и меры борьбы с Л КРС является: охрана благополучных по болезни хозяйств от заноса ВЛ КРС,в первую очередь животными-вирусоносителями; систематические иммунодиагностические, клинико-гематологические и другие исследования всего поголовья скота в первую очередь племенных хозяйств и быков производителей с целью современного выявления заболевших животных; оздоровление неблагополучных по лейкозу хозяйств (ферм, отделений) путем немедленного изолирования больных и подозрительных по заболеванию животных и предупреждение распространения ВЛ КРС (с молозивом и молоком от больных коров, хирургическими инструментами и т.д., при несоблюдение правил асептики и антисептики); генетическое исследование заболевших коров, выявление неустойчивых к болезни семейств и линий и исключение их из племенного состава; повышение требований при проведении ветеринарно-гигиенических мероприятий и полноценного кормления животных.

В благополучных хозяйствах животных старше 2-летнего возраста исследуют на лейкоз один и быков-производителей - 2 раза в год. При установление болезни у двух и более животных хозяйство объявляют неблагополучным по лейкозу, вводят ограничения и осуществляют в нем оздоровительные мероприятия. Ограничения по болезни с хозяйства снимают после вывоза последнего больного лейкозом животного и получения трех подряд с интервалом в 3 мес. отрицательных результатов серологическом исследование всего стада.

Больных немедленно отправляют на убой, а их потомство удаляют из стада. Подозрительных по заболеванию животных исследуют дополнительно 2-3 раза с интервалом 2-3 мес. Молоко от больных лейкозом коров кипятят в течение 5 мин и используют для откорма животных. Молоко подозрительных по заболеванию животных можно использовать в пищу людям после кипячения 5 мин или пастеризации при 850С в течение 10 мин. Молоко здоровых коров неблагополучного стада используют на месте (после пастеризации) или сдают на молокозавод для дальнейший переработки.

Туши лейкозных животных при генерализованном поражении внутренних лимфоузлов и скелетных мышц направляют в техническую утилизацию. Если скелетные мышцы не поражены и результат микробиологического исследования на сальмонеллез отрицательные, то мясо и неизмененные внутренние органы обезвреживают проваркой. Животноводческие помещения после вывоза больного или подозрительного животного очищают и дезинфицируют 2-3%-ным раствором едкого натра.

Хозяйство (отделение), неблагополучное по ЭЛ КРС, считают оздоровленным по истечении двух лет после сдачи на убой последнего больного животного. В последующем в течение двух лет весь скот подвергают диагностическим исследованиям не менее одного года в раз. Оздоровление хозяйства с небольшим количеством поголовья заменой всех животных эффективно лишь при одновременной замене всего стада благополучными по лейкозу животными и проведении профилактических и противоэпизоотических мероприятий.

Мероприятия по профилактике лейкоза в благополучных дворах, стадах, отделениях, фермах и хозяйствах Таблица 1

п/п

Мероприятия

Срок исполнения

Ответственные

1.

Систематический контроль за клиническим состоянием животных

постоянно

ветеринарное специалисты хозяйств.

2.

Проведение исследований на лейкоз сыворотки крови всех коров один раз в год по РИД.

ежегодно

ветспециалисты хоз-в, ветстанций, ветлабораторий.

3.

Проведение комплекса ветеринарных, зоогигиенических, селекционно-генитических и организационно - хозяйственных мер, направленных на повышение резистентности организма животных и предупреждение возникновения болезни.

постоянно

руководители, главные зоотехники, гл. ветврачи и другие специалисты хоз-в

4.

Не допускать ввода (ввоза) в хозяйство (двор, стадо, ферму, отделение, предприятие) животных не проверенных на лейкоз по РИД.

постоянно

руководители, зооветспециалисты, начальники ветстанций, зоотехн. служба сельхозуправлений

5.

В случае выявления среди завезенного поголовья животных, больных лейкозом или имеющих антитела к ВЛ КРС немедленно сообщить начальнику ветстанции района, племобъединению и хозяйству - поставщику.

После каждого завоза скота

Руководители и ветврачи хозяйства

6.

Завезенных больных или серопозитивных животных по согласованию сторон возвращают поставщику или направляют на убой. Остальных животных этой группы содержат отдельно и через 3 месяца исследуют по РИД до получения двух подрят отрицательных результатов. После этого их используют на общих основаниях.

После каждого завоза скота

Руководитель, гл. ветврачи, гл. зоотехники хозяйств.

7.

Строгое соблюдение асептики при ветеринарных и зоотехнических обработках животных, обуславливающих возможное внесение в организм лимфоцитов инфицированных ВЛ КРС (взятие крови, лечение, гемотерапия, кастрация животных, обрезка хвостов, вакцинации, осеменение и др.)

Постоянно

зоответспециалисты хозяйств, госветсити

8.

Исследование быков производителей на лейкоз серологическим методом не менее 2-х раз в год с интервалом 6 месяцев. Серопозитивных животных сдают на убой. Запасы спермы, полученные от инфецированных быков за 2 месяца до выявления у них антител к ВЛ КРС, подлежат уничтожению.

Постоянно на племпредприятиях и хозяйствах.

Руководители, зооветспециалисты хоз-в, зав. фермами.

Мероприятия в неблагополучных фермах, хозяйствах, дворах и в стадах, инфицированных ВЛ КРС Таблица 2

1.

В неблагополучных по заболеванию лейкозом или с наличием только имеющих антитела к ВЛ КРС (инфицированных) животных, дворах, стадах, отделениях, фермах, хозяйствах и предприятиях запрещается:

а) перегруппировать животных без разрешения ветеринарного специалиста, обслуживающего хозяйство;

б) совместное содержание в одном родильном отделении свободных от ВЛКРС (серонегативных) и инфицированных вирусов лейкоза животных;

в) использование для лечебных профилактических целей нативной крови и сыворотки от серопозитивных к ВЛКРС животных. Ректальное исследование коров нужно проводить в разовых перчатках или соответствующей обработкой рук после каждого исследования.

Постоянно

Руководители, зооветспециалисты хозяйств, зав. фермами.

2.

Серопозитивных животных с клиническими и гематологическими (после первого исследования) проявлениями лейкоза признают больными, изолируют в течение 15 дней сдают на убой. Телят последнего отела, полученных от коров с выше отмеченными показателями, переводят в группы откорма. Животных (потомство) старших возрастов от таких коров используют в зависимости от результатов их индивидуальных серологических исследований.

постоянно

Руководители, зооветспециалисты хоз-в.

3.

Молоко от коров с клиническими и гематологическими признаками лейкоза подлежат кипячению и использованию только внутри хозяйства для откорма животных. Молоко от остальных коров оздоравливаемого стада сдают на молокозавод или используют внутри хозяйства, в том числе и для выпойки телкам после пастеризации в обычном технологическом режиме.

для оздоровления хоз-ва

зооветспециалисты хоз-в, ветстанций

4.

Животных инфицированного стада исследует серологическим методом на лейкоз и при выявлении до 30% коров зараженных ВЛ КРС, проводят разделение стада на 2 группы: первая (серонегативная) свободные от ВЛ КРС животные, в сыворотке крови которых не выявлены специфические антитела к вирусу; вторая (серопозитивная) - зараженные ВЛ КРС животные, в сыворотке крови которых обнаружены специфические антитела к вирусу лейкоза.

До оздоровления хозяйства

Руководители, ветспециалисты хоз-в, зав. фермами. Зооветспециалисты хозяйств, участков начальники ветеринарных станций, гл. зоотехник с/х управлений.

5.

Коров и другой крупный рогатый скот всех возрастов первой и второй групп нужно размещать раздельно (по группами) на отдельных фермах или в отдельных скотных дворах. Телят, полученных от матерей обеих групп с 10-ти дневного возраста содержат отдельно.

До оздоровления хозяйства.

Зооветспециалисты хозяйств, ветспециалисты участков, начальники ветеринарных станций, гл. зоотехники с/х управлений.

6.

В 6-ти месячном возрасте телят исследуют серологическим методом, серопозитивных животных переводят в группу откорма.

До оздоровления

Зооветспециалисты хозяйств, ветспециалисты.

7.

Коров первой (серонигативной) группы исследуют только серологическими методами с интервалом в 3 мес. После вывода всех серопозитивных животных и получения двух подряд отрицательных результатов во всей группе стадо считают свободным от лейкоза.

До оздоровления после получения результатов исследования во всех хозяйствах.

Ветеринарные специалисты хозяйств, ветучастков и ветстанций.

8.

Животные второй (серопозитивной) группы (в. т. ч.коров ) с целью недопущения опухолевой формы , начиная с двухлетнего возраста исследуют гематологическим методом два раза в год с интервалом в 6 месяцев, животных с изменениями крови , характерными для лейкоза по результатам первичного исследования изолируют и в течение 15 дней сдают на убой .

9.

В племенных хозяйствах ( фермах, отделениях, дворах) телок и бычков исследуют серологическим методом в 6-ти, 12-ти месячном возрасте, а также перед осеменением и переводом в основное стадо. Положительно реагирующих животных переводят в группу откорма.

10.

В хозяйстве (стаде, ферме) где выявляются более 30 % серопозитивных коров и нет возможности проводить оздоровление методом разделения, все поголовье коров относят ко второй ( серопозитивной) группе. Взрослых животных такого стада нужно исследовать на лейкоз через каждые 6 месяцев гематологическим методом.

Животных, клинически больных лейкозом и с изменениями крови, характерными для болезни, в течение 15 дней сдают на убой. Одновременно организуют выращивание первотелок, свободных от ВЛ КРС для создания нового стада. С этой целью молодняк исследуют серологическим методом в 6-ти, 12-ти месяцев, перед осеменением и перед переводом нетелей в основное стадо.

Серонегативных нетелей размещают в скотных дворах ( в отдельных помещениях) отдельно от животных, зараженных ВЛ КРС.

Серопозитивных животных в течение 15 дней после получения результатов исследований переводят на откорм.

11.

Животных с клиническими или гематологическими проявлениями лейкоза разрешается перевозить на мясокомбинаты железнодорожным, водным и автомобильным транспортом согласно утвержденным ветеринарно-санитарным требованиям при перевозке в особых условиях. Клинически здоровый скот (серонегативный) перевозится на общих основаниях.

Постоянно

Руководители хозяйств, зооветспециалисты колхозов, совхозов, ветспециалисты водного, железнодорожного транспорта.

12.

Животных больных лейкозом подвергают убою на санитарной бойне. При ее отсутствии разрешается такой скот убивать на общем конвейере после завершения убоя здоровых животных

и удаления из цеха всех полученных от них туш и других продуктов.

При этом запрещают сбор крови, эндокринных и других органов для ветеринарных, медицинских и пищевых целей. Помещение и оборудование цеха после убоя больных животных подвергают тщательной уборке и дезинфекции. Все случае выявления лейкоза, а также опухолей различного происхождения подлежат регистрации в журнале учета ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и субпродуктов в цехе первичной переработки скота и на санитарной бойне мясокомбината с включением в отчет Ф.№6-вет.

Постоянно

Начальники ОПВК, ветспециалисты мясокомбинатов, ветврачи хозяйств и ветстанций.

13.

При обнаружении лейкоза при убое скота на мясокомбинате нужно сообщить главному ветврачу района и ветврачу хозяйства, откуда поступили животные. От подозрительных на лейкоз туш взять патматериал и направить его в республиканскую ветлабораторию для исследования.

Постоянно

Начальник ОПВК мясокомбината.

14

В оздоровливаемых от лейкоза животных хозяйствах проводят дезинфекцию животноводческих помещений и оборудования согласно действующей Инструкции по проведению ветеринарной дезинфекции объектов животноводства.

Особое внимание обращают на места и предметы загрязненные кровью. При дезинфекции используют 5% водный раствор формалина, 2%-ный раствор едкого натра и др.

Страница:


Подобные документы

Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.д.
PPT, PPTX и PDF-файлы представлены только в архивах.
Рекомендуем скачать работу.

© 2000 — 2023, ООО «Олбест» Все права защищены