Воспроизводительная функция у высокопродуктивных коров при нарушении обмена веществ и ее коррекция

По содержанию меди (физиологическая норма содержания 0,7-0,9 мг/л) отклонений не отмечено, лишь у 2,5% животных занижен результат - 0,68 мг/л. Марганец при исследовании крови оказался во всех пробах ниже физиологической нормы (0,03-0,05 мг/л), колебания значений составили от 0,006 до 0,029 мг/л.

Оценка результатов анализа на содержание в крови железа показала, что у 76% исследованных животных данный показатель находится в пределах физиологической нормы (10,0-29,0 ммоль/л), колебания составили от 18,5 до 25,3 ммоль/л. У 24% данный показатель завышен - колебания составили от 406 до 733 мг/л, при этом наибольшее зафиксированное значение превышает верхний предел физиологической нормы в 1,6 раза. Вероятнее всего, это связано с откладыванием в организме экзогенного железа - в виде трехвалентного оксида железа (Кононский, 1992 г.).

В результате биохимического анализа было выявлено, что у 60% животных в сыворотке крови низкое содержание АСТ (аспартатаминотрансферазы). При норме содержания 80-120 ед./л показатели определяли в пределах от 40,9 до 79,6 ед./л.

Особенно активно реагирует АЛТ на скармливание коровам больших количеств концентратов, на сверхдопустимое содержание нитратов и нитритов в кормах. В этих случаях АЛТ повышается, а ACT понижается, а их отношение снижается, что указывает на заболевания печени или её интоксикацию продуктами метаболизма, аммиаком (Казарцев, Ратошный, 1986).

Снижение данного компонента свидетельствует о нехватке в организме витаминов группы В, а в частности В₆ (Холодов, 1988). У 9,7% обследованных коров АСТ превышает физиологическую норму организма, показатели колебались от 82,2 до 190,3 ед./л., при этом средний уровень содержания во всех исследованных образцах крови составил 85,2 ед./л. Высокое содержание щелочной фосфатазы отмечено у 72,9 % обследованных животных, как у коров, так и у телят, колебания составляют 85,9-1420,4 ед./л (при норме содержания 55-80 ед./л). Это является результатом кормления углеводсодержащими кормами с легкорезорбируемыми основаниями. Щелочная фосфатаза катализирует гидролитическое расщепление монофосфорных эфиров, приводя к увеличению содержания фосфат-ионов. Увеличение данного фермента происходит до возникновения заболевания и поэтому требует особого внимания для его предотвращения, особенно у молодняка. Необходимо отметить, что повышенное содержание щелочной фосфатазы является одним из признаков нарушения кальцие-фосфорного обмена, костных заболеваний, при этом изменения уровня содержания кальция и фосфора наступают не сразу. В дальнейшем это приводит к развитию остеомаляции, слабой молокоотдаче, уменьшению сохранности молодняка (Григорьева, Юрьева, 1991).

У 10% обследованных нами животных был отмечен низкий уровень содержания щелочной фосфатазы, показатели варьировали от 0,21 до 68,3 ед./л, причиной чего может быть ослабление остеобластических процессов, развитие остеопороза, анемия. Среднее содержание во всех проанализированных пробах составило 122,28 ед./л, что превышает верхний предел содержания щелочной фосфатазы в 1,5 раза [27, 38, 40, 41, 43].

3.4 Клинико-морфологическое и гисто-структурное состояние яичников и матки бесплодных коров

В обследованных нами хозяйствах наибольший процент нарушения обмена веществ наблюдали у животных с продуктивностью выше средней по стаду, и эти животные чаще всего оказывались проблемными по воспроизводительным способностям.

Определенная часть коров длительно не проявляла стадию возбуждения после отела и не оплодотворялась. При гинекологическом исследовании 617 многократно переосеменяющихся и длительно не приходящих в охоту коров после отела у 220 (37%) устанавливали гипофункцию яичников и матки (22%), низкофункционирующие желтые тела на яичниках, а 187 (30%) коров, из числа обследованных животных, не имели клинически выраженной патологии половых органов. Следовательно, 67% коров не имели необратимой патологии половых органов, а после улучшения и коррекции условий содержания и кормления, стимуляции половых функций большинство из них оплодотворилось. Основными причинами снижения плодовитости были погрешности агрономические, зоотехнические и ветеринарные.

Гипофункция яичников у коров клинически проявлялась отсутствием половых циклов, анафродизией. Яичники были уменьшены в размерах, плоские, дряблые, иногда при пальпации определяли плотную консистенцию, с гладкой поверхностью, в них не определялись фолликулы и желтые тела, матка атоничная, не отвечала ригидностью на пальпацию стенки, но проявляла легкую флюктуацию.

Дисфункция яичников, проявляющаяся ановуляцией, не сопровождалась ростом фолликула в размере до 1,5-2 см. Фолликулы, приостановившиеся в росте, подвергались обратному развитию, рассасыванию, или инволюции.

Атрезия фолликулов изменяла морфологию яичника и приводила к фиброзу стромы, некрозу клеток гранулезы и теки, гиалинозу кровеносных сосудов и теки интерна, тромбозе сосудов и образованию лютеиновых и фолликулярных кист, диффузной гистоцитарной инфильтрации паренхимы матки. Эти изменения отражались на аденомиозе и железистой гиперплазии эндометрия. При пальпации поверхности яичника выявляли ее шероховатость и мелкую бугорчатость.

Нами проведено исследование по изучению влияния аминокислотной и микроэлементной недостаточности на морфофункциональное состояние яичников и матки коров. С этой целью в ЗАО «Красноармейское» в результате клинико-гинекологического исследования было выявлено 66 коров, имеющих гипофункцию яичников. Пониженная функция яичников у этих животных сопровождалась неполноценностью или длительным отсутствием после родов половых циклов.

Это были коровы в возрасте от 3 до 8 лет, содержащиеся на молочном комплексе. При исследовании крови установлено, что 72,4 % коров испытывали в декабре витаминную и аминокислотную недостаточность.

С экспериментальной целью был произведен диагностический убой 4-х коров, яичники которых были подвергнуты гистологическому исследованию.

При проведении гистологического исследования материалов у забитых коров с гипофункцией яичников были выявлены изменения, характерные для гипофункции яичников. Характерными гистологическими изменениями яичников явилось: уменьшение количества примордиальных и вторичных фолликулов, дегенерация и перерождение третичных фолликулов, наличие большого количества атрезированных фолликулов. В корковом и мозговом веществе отмечено усиленное разрастание соединительной ткани. Кровеносные сосуды в корковом веществе облитерированы и гиалинизированы.

Толщина эндометрия составляла 2,1±0,8 мм, покровный эпителий эндометрия низкий, средняя толщина - 14,4±0,8 мкм у коров и 9,5 мкм у тёлок. Форма клетки поверхностного эпителия призматическая, кубическая и плоская. Ядро клеток эпителия округлое и расположено в базальной части.

Соединительнотканная строма эндометрия бедна клеточными элементами, а местами компактная. Признаки секреции не обнаружены, железы не функционируют. Результаты гистоморфологического исследования яичников представлены на рисунке 8, 9.

Изучение тканей яичников показало, что при гипофункции в этих органах не прекращается гистогенез примордиальных фолликулов. Однако первичные и вторичные фолликулы почти отсутствуют, встречаются лишь единичные фолликулы в стадии атрезии.

Тека имеющихся средних пузырчатых фолликулов заметно уплотнена. обнаруживается небольшое количество кровеносных сосудов, расположенных единично или малыми группами. Просветы их сужены, особенно в корковом веществе яичника.

Соединительнотканная основа фолликулярной зоны яичника резко выражена, плотная. Гистологическими исследованиями у коров с гипофункцией яичников отмечено уменьшение количества маточных желез на единице площади эндометрия. Отмечено наличие клеточного детрита. Просветы желез сужены. При этом железы располагаются отдельными небольшими группами. Они имеют извитую форму, их просветы иногда заполнены слущившимися клетками железистого эпителия. Стенки желез утолщены за счет соединительной ткани.

Полученные в результате гистологических исследований данные о структуре половых желез и эндометрия свидетельствуют о том, что гипофункция яичников сопровождается резкими структурными изменениями как яичников, так и слизистой оболочки матки. Однако в организме животного форма и функция любого органа взаимно связаны и взаимно обусловлены. Поэтому описанные морфологические изменения приводят к ослаблению функции яичников и матки. Происходит разрыв сложной физиологической регулирующей цепи в системе гипоталамус-гипофиз-яичник. Выпадение одного из звеньев этой цепи неизбежно приводит к расстройству всего полового цикла животного в различных вариантах, а также к отсутствию в полости рогов матки необходимой биохимической среды для имплантации зародыша.

Следовательно, недостаточность микроэлементов и аминокислот наряду с изменениями биохимических показателей крови, приводит к значительной морфологической перестройке в яичниках и слизистой оболочке матки коров, что сопровождается низким содержанием гликогена, ослаблением окислительно-восстановительных реакций в тканях половых органов и проявляется гипофункцией яичников.

Результаты наших исследований свидетельствует о том, что у коров и телок наблюдается структурная и функциональная недостаточность эндометрия, атретические изменения в фолликулах.

В яичниках отмечали массовую атрезию фолликулов на всех стадиях развития с явными признаками дистрофических изменений ооцитов, разращения соединительной ткани при наличии желтых тел. В них отмечали уменьшение размеров лютеиновых клеток, просветление цитоплазмы и наличие жировых вакуолей, разрастание соединительной ткани, уменьшение количества капилляров.

Гистологическое изучение тканей яичников, проведенное через 10 дней после окончания курса инъекций Гемобаланса показало на возрастание компенсаторно-регуляторной роли препарата на морфофункциональные процессы протекающие в половых железах этих животных. В них отмечено уменьшение количества соединительной ткани, разрыхление коркового вещества, появление единичных вторичных и мелких фолликулов в поверхностных слоях яичников. В более глубоких слоях обнаружены растущие фолликулы средних размеров с разрыхленной текой и окружающей их соединительной тканью.

После применения Гемобаланса белочная оболочка яичника стала более четко выраженной, уменьшилась ее толщина, исчезли имевшиеся у контрольных животных глубоко проникающие в корковое вещество широкие выступы.

Курс инъекций Гемобаланса вызвал заметные морфологические сдвиги в морфологии тканей яичников опытных животных, которые проявились как следствие дальнейшего развития описанных выше процессов. При этом наступило увеличение диаметра и изменение формы просветов кровеносных сосудов во всех зонах яичников. Возросло их количество на единице площади среза из органа. Наряду с этим произошло разрыхление мозгового вещества яичников.

Гистологически исследования тканей яичников, полученных при убое животных через 20 дней после их трехкратной обработки Гемобалансом показали, что в срезах еще более выраженным стало разрыхление соединительнотканной основы как коркового, так и мозгового вещества яичников, увеличилось число первичных и вторичных фолликулов.

С целью изучения возможных гистологических изменений в эндометрии под действием комплекса Гемобаланс у трех коров опытной группы через 10 дней после курса инъекций произвели биопсию эндометрия в межкарункулярной зоне средних участков рогов матки.

После инъекций комплекса Гемобаланса эпителиальный слой, выстилающий полость матки коров, представляет собой клетки цилиндрической или высокопризматической формы. Исчезали явления коллагенизации слизистой оболочки и утолщения ее стенки, присущие этим особенностям при гипофункции яичников. Наступало разрыхление компактного слоя эндометрия, поэтому все клеточные элементы распологались более рыхло. Появлялось большое количество макрофагальных клеток. Происходило увеличение числа кровеносных сосудов на единице площади (особенно мелких), отмечено сильное расширение их просветов в собственном слое слизистой оболочки матки вообще, и в компактном слое особенно. Все кровеносные сосуды были заполнены кровью. Четче обозначилось количество маточных желез, расположение их было более равномерным на поверхности эндометрия. Железы хорошо развиты, имели более прямой ход, лежали близко к поверхности и содержали значительное количество секрета, имели место прогрессирующие явления отёка промежуточного вещества.

Следовательно, под воздействием комплекса Гемобаланс в эндометрии коров развивается комплекс явлений и морфологических сдвигов, аналогичных изменениям и процессам, характерным для стадии проэструса полового цикла.

Эти результаты еще раз подтверждают, что высокая молочная продуктивность напрямую зависит от состояния обмена веществ.

Наши исследования показали, что при гипофункции яичников у коров, возникшей на почве витаминной и минеральной недостаточности, неполноценного кормления в яичниках и эндометрии развиваются глубокие гистоструктурные изменения, В основе которых лежат нарушения обмена веществ. Эти данные согласуются с материалами исследований Г.Н. Черемисинова с сотр., Андреева Г.М., Бибилашвили А.С., Селуцкой Г.И и др. При этом происходит нарушение процесса созревания фолликулов, когда растущие фолликулы не достигают овуляционной зрелости и подвергаются атрезии. Гистологические изменения в эндометрии при гипофункции яичников в основном встречаются в маточных железах и строме, что подтверждается также исследованиями Г.А.Кононова, А.Г. Нежданова и других авторов.

Полученные результаты позволяют сделать заключение, что не только гормональная, но и овуляторная деятельность яичников были восстановлены путем применения комплекса Гемобаланс. Применение этого препарата регулирует обмен веществ и нормализует в организме гормональный фон в пределах физиологических значений, который вызывает охоту у животного. Успешное оплодотворение после применения Гемобаланса подтверждено гормональными исследованиями на содержание прогестерона в сыворотке крови и ректальными исследованиями.

Таким образом, для решения проблемы воспроизводства стада в хозяйствах Российской Федерации с продуктивностью коров более 6000 кг молока за лактацию, необходимо решить в первую очередь проблему полноценного кормления высокопродуктивных коров, что обеспечит не только наиболее полную реализацию генетического потенциала животных, но и повысит экономическую эффективность отрасли.

3.5 Обоснование применения биологического комплекса Гемобаланс для нормализации обмена веществ и воспроизводительной функции высокопродуктивных коров

Технология воспроизводства очень важна для продуктивности домашних животных. Генетические изменения в наследственных факторах весьма существенно улучшили показатели скота по росту, разведению, продукции молока. В свою очередь эти изменения привели к повышению потребности организма животного в обеспечении соответствующими пищевыми веществами (пищевой энергией), протеином, витаминами, минеральными веществами и микроэлементами. Если обеспечение этими веществами животных не соответствует их потребностям, то их способность к размножению ухудшается или нарушается. Такой адаптивный механизм является биологически целесообразным, т.к. снижается та нагрузка, которую испытывает беременное животное в периоды скудного питания. Излишние затраты на питание и содержание бесплодных животных снижают доходы от животноводства.

Недостаточное поступление энергии с кормом чаще всего наблюдается у жвачных (Lotthammer & Wittkowski, 1994). Частой ошибкой в кормлении является скармливание рациона с избыточным количеством энергии в последние недели стельности. Это приводит к большему отложению запасов жира. При нормальных условиях начало кормления сопровождается увеличением уровня мобилизации жирных кислот из жирового депо. Большое количество произведённого молока при недостаточном поступлении питательных веществ после отёла приводит к недостатку глюкогеновых соединений и падению уровня глюкозы в плазме. Всё это, приводит к изменениям в синтезе гормонов (Kolb& Elze, 1995):

Недостаток белка в рационе, т.е. незаменимых аминокислот подавляет белковый синтез в организме, рост, развитие и формирование органов размножения. Было обнаружено, что потребление в большом количестве протеинов, имеет негативное влияние на воспроизводство у высокоудойных коров молочных пород, особенно, если поступление корма, обеспечивает энергию недостаточно. В таких условиях происходит повышение абсорбции аммиака из преджелудков и повышение образования мочевины в печени. Повышение концентрации этих веществ в плазме и половых органах имеет отрицательное влияние на созревание ооцитов, яйцеклеток и развитие эмбриона (Ferguson & Chalupa, 1989).

При повышении молочной продуктивности и связанными с этим большими затратами энергии у высокопродуктивных коров возникает нарушение обмена веществ.

Проблема организации кормления лактирующих коров на крупных фермах заключается в том, что часто не учитываются потребности в питательных веществах коров на разных стадиях лактации. Результатом этого является избыточное/недостаточное потребление энергии, белка, витаминов, минеральных веществ в конце/начале лактации.

Результатом этого является возникновение ацидоза, кетоза и, как следствие, проблем с воспроизводством стада, отсутствие высокого пика молочной продуктивности, низкий уровень белка в молоке и проблемы с конечностями (размягчение копытного рога, асептическое воспаление суставов). Учитывая это, разработка и совершенствование способов нормализации функциональной активности яичников является одним из необходимых мероприятий в системе профилактики и ликвидации бесплодия животных.

После проведения анализа уровня кормления, применения витаминно-минеральных препаратов для высокопродуктивных коров мы пришли к выводу, что существует дополнительная потребность в парентеральном введении витаминов, аминокислот и микроэлементов, способных нормализовать обмен веществ у животных в короткие сроки.

Применение подобных комплексов путем орального введения часто является неэффективным, так как вследствие нарушения обмена веществ всасывание в желудочно-кишечном тракте нарушено, содержание рубцовых микроорганизмов, участвующих в синтезе витаминов группы В и переваримость питательных веществ, понижено, поэтому в большинстве случаев результат от использования БМВД не даёт желаемого результата.

В то же время внутримышечное/внутривенное применение подобных препаратов может являться эффективным, так как, минуя кишечник, полезные вещества сразу поступают в кровь и оказывают заметное влияние на организм животного.

После проведенного анализа российских и зарубежных БМВД предпочтение в выборе было отдано Гемобалансу производства компании Nature Vet, Австралия. Гемобаланс (Haemobalans) - лекарственное средство в форме раствора для инъекций, предназначенное для повышения резистентности организма и регуляции обмена веществ, вызванного недостатком витаминов, микроэлементов, аминокислот в организме животных и птицы. Биологические свойства лекарственного средства обусловлены наличием в его составе комплекса аминокислот, витаминов и микроэлементов, регулирующим обменные процессы в организме (в частности, белковый, витаминный и минеральный).

Гемобаланс содержит в качестве действующих веществ: L-лизина гидрохлорид - 20 мг/мл, DL-метионин - 20 мг/мл, глицин - 20 мг/мл, железа аммония цитрат -15мг/мл, кобальта сульфат - 240 мкг/мл, меди сульфат - 70 мкг/мл, рибофлавин (витамин В2) - 10мг/мл, холина битартрат (витамин В4) - 10 мг/мл, пиридоксина гидрохлорид (витамин В6) - 10 мг/мл, инозитол (витамин В8) - 10 мг/мл, цианкобаламин (витамин В12) - 150 мкг/мл, никотинамид - 100 мг/мл, D-пантенол - 15 мг/мл, биотин - 10 мкг/мл, а также вспомогательные компоненты: консервант бензиловый спирт, натрия гидроксид, стабилизатор натрия глюконат и воду для инъекций.

Фармакологические свойства лекарственного средства Гемобаланс обусловлены наличием в его составе комплекса аминокислот, витаминов и микроэлементов, регулирующих обменные процессы в организме (белковый, витаминный и минеральный). Особенностью комплекса является то, что его компоненты подобраны с учетом взаимодополняемости друг друга. Так, например, витамины подобраны с расчетом взаимного усиления физиологических эффектов в организме животного. Витамины участвуют в обмене веществ и необходимы для поддержания нормальной деятельности организма, роста животных, обеспечения высокой продуктивности и воспроизводительных функций. Аминокислоты метионин и глицин используются организмом для синтеза креатина - азотсодержащих молекул, выполняющих функцию аккумуляции энергии в организме. В организме креатин трансформируется в креатинфосфат, создавая определенную форму энергетического резерва, используемого для пусковой фазы любого энергетического процесса, что играет решающее значение в увеличении продуктивности. Микроэлементы железо, кобальт, медь способствуют стимуляции эритропоэза, гемоглобинообразования, окислительно-восстановительных процессов и повышению общей резистентности организма животных [45,46].

3.5.1 Изучение острой и субхронической токсичности препарата Гемобаланс на лабораторных и сельскохозяйственных животных

Изучение острой токсичности показало, что введение даже самой высокой дозы 7000 мг/кг не приводило к гибели крыс и мышей. Так как большие дозы Гемобаланса невозможно ввести перорально, параметры острой токсичности рассчитать не удалось. Тем не менее, согласно ГОСТ 12.1.007-76 препарат можно отнести к 4 классу опасности - веществам малоопасным (ЛД50>7000 мг/кг), а в соответствии с классификацией Медведя (1977) - к 4-му классу токсичности - малотоксичным соединениям (ЛД50>1000 мкг/кг).

Результаты изучения субхронической токсичности препарата в опытах на лабораторных животных показали, что неблагоприятное влияние лекарственного средства на организм крыс носит дозозависимый характер. Ежедневное введение препарата в дозе 300 мг/кг (трехкратная терапевтическая), на протяжении 30 дней не вызывает функциональных изменений в организме крыс, следовательно, эту дозу можно считать нетоксичной.

Так как основным видом животных, которым применяли Гемобаланс ранее, были лошади, а применение в соответствии с рекомендациями изготовителя осуществлялось одно- либо двухкратно, нами была поставлена и решена задача по изучению субхронической токсичности Гемобаланса у крупного рогатого скота.

При изучении субхронической токсичности комплексного препарата Гемобаланс в опыте на телятах нами было установлено, что введение препарата в терапевтической дозе в течение 1 месяца не оказывает негативного влияния на организм опытных животных. Во всех группах, получавших лекарственное средство, были отмечены более высокие по сравнению с контрольной группой привесы, что можно объяснить ростостимулирующим влиянием Гемобаланса.

Результаты изучения субхронической токсичности показали, что Гемобаланс в терапевтической дозе не оказывает токсического действия на организм животных даже при дозе применения в 3-6 раз превышающем рекомендуемый курс лечения. Но учитывая, что наиболее чувствительными органами при передозировке препарата являются печень и почки, в случае патологии этих органов препарат следует назначать с осторожностью.

3.5.2 Применение препарата Гемобаланс для нормализации нарушения обмена веществ у сухостойных коров и профилактики послеродовой субинволюции матки

Для нормализации физиологических процессов, восстановления продуктивного здоровья была разработана система мероприятий, включающая применение препарата Гемобаланс, оптимизацию кормления животных. Систематические наблюдения за животными опытных групп свидетельствовали о том, что у коров всех групп не было отклонений от нормы в состоянии здоровья, отелы проходили благополучно.

В опыте использовали 10 опытных и 10 контрольных коров в последний месяц сухостойного периода. Животные были подобраны по принципу аналогов. Инъекции комплекса витаминов, аминокислот и микроэлементов осуществляли курсами за 60 и за 30-40 дней до отёла трижды с интервалом 10 дней. Введение Гемобаланса осуществляли внутримышечно или внутривенно в дозе 10 мл на 450 кг живой массы, курсом 3-5 инъекций с интервалом 1-2 дня.

Определяли частоту встречаемости у коров послеродовых осложнений, особое внимание обращали на задержание последа, субинволюцию матки и послеродовые эндометриты. Подсчитывали кратность осеменения и продолжительность сервис-периода.

Субинволюция матки у коров опытной группы встречалась реже в 1,7 раза, а задержание последа - в 1,9 раза по сравнению с контролем. Послеродовые эндометриты встречались в 2,3 раза реже. Животные опытной группы пришли в охоту в среднем через 28,4 дня после родов. Через 2 месяца было проведено ректальное исследование коров и получены следующие результаты: в опытной группе 9 коров были стельными, одна оказалась холостой с диагнозом желтое тело. В контрольной группе 6 коров были стельными, 4 - холостыми с диагнозом киста яичников (3 гол.), персистентное желтое тело (1 гол.).

В результате ректальных исследований коров на всём протяжении исследований было установлено, что инъекции Гемобаланса способствовали восстановлению инволюции половых органов после отела в более короткие сроки у основной массы животных (т.е. в 3,5 раза короче, чем в контроле), что отражалось и на показателях субъинволюции матки (в контроле инволюция половых органов протекала в 7 раз дольше). Также отмечали, что у коров после применения Гемобаланса уменьшалась отечность вымени в послеродовый период и в то же время уменьшалось количество отделяемых лохий с частичным их просветлением в двух недельный срок.

Применение Гемобаланса и связанное с этим повышение энергии в организме коров на здоровье животных, течение отелов и отделение последа выявлено не было. Применение Гемобаланса не только положительно влияло на физиологическое состояние коров, но также и на жизнеспособность приплода. Все телята родились и развивались нормально, заболеваний не наблюдалось. Живая масса телят при рождении от коров контрольной группы в среднем составила 33,6±1,29 кг, а от коров опытных групп 35,2±0,43 кг, 35,4±0,85 кг, 35,1±1,75 кг соответственно. Таким образом, по живой массе телят при рождении существенных различий между опытными группами не было.

3.5.3 Применение препарата Гемобаланс для нормализации обмена и профилактики нарушений репродуктивной функции у лактирующих коров

Для опыта было взято 102 коровы, из них 86 составляли опытную группу, 16 - контрольную группу (лечению не подвергались).

Коровы в опытной группе до лечения были бесплодными в течении 120±18 суток. С момента лечения через 73±5 суток у них восстановилась половая функция и через 193 суток от отела 80% коров стали стельными. Лечебный эффект при этом составил 83,4%.

При выяснении эффективности лечения высокопродуктивных коров с нарушениями функции воспроизводства, наряду с клинико-гинекологичекими исследованиями, определяли морфологические и биохимические показатели крови, молока и мочи.

У коров с нарушением репродуктивной функции до лечения было установлено учащение пульса и дыхания, эозинофилия, кетонемия, кетонолактия, кетонурия, ацидоз и гиповитаминозы витаминов группы В и витамина А. После лечения коров с помощью комплекса Гемобаланс у них нормализовались клинические, гематологические, биохимические показатели крови, молока и мочи.

В СПК «Красноармейское» нами разработан и проверен метод лечения путем введения комплекса Гемобаланс высокопродуктивным коровам с гипофункцией яичников. Он состоял в применении комплекса различным курсом (1, 3, 5, 7, 10 инъекций) коровам, длительное время не приходящих в охоту.

По нашим наблюдениям, в высокопродуктивных хозяйствах гипофункция яичников в течение последних 10 лет регистрируется в среднем у 16,25% животных.

Учитывая это, разработка и совершенствование способов нормализации функциональной активности яичников является одним из необходимых мероприятий в системе профилактики и ликвидации бесплодия и яловости животных.

Для изучения воспроизводительной способности у коров с гипофункцией яичников было сформировано 6 групп по 16-18 голов в каждой. Воздействие различными курсами Гемобаланса (3-5-7-10) инъекций на функциональную активность яичников дало положительные результаты по отношению к контрольной группе.

Оплодотворяемость у коров опытных групп после первого осеменения колебалась в пределах 50,0-72,22 %, что на 12,5-34,7% выше, чем в контролной групп (р<0,001). При этом максимальная оплодотворяемость (72,22%) зарегистрирована у коров 5-й группы, где коровам инъецировали Гемобаланс в количестве 10 инъекций, минимальная (37,5%) - у коров контрольной группы. Среди коров опытных групп минимальная оплодотворяемость (50,0%) зарегистрирована у животных 1-й группы, в которой Гемобаланс применяли однократно.

Оплодотворяемость после второго осеменения у коров контрольной группы составила 43,75%, что значительно выше, чем у коров в опытных группах. Всего в течение 80 дней в опытных группах были плодотворно осеменены все животные, за исключением 1-й группы (6,25%), где одна корова была выбракована по причине болезней суставов.

Продолжительность беременности у животных всех групп не имела существенных отличий и колебалась в пределах 281-288 дней. Стельность завершилась родами у всех коров контрольной и опытной групп. Разница продолжительности беременности между животными контрольной и опытных групп была несущественной (не превышала 7 дней). У животных всех групп получены жизнеспособные телята.

Наряду с клинико-гинекологическими исследованиями определяли морфологические и биохимические показатели крови, молока и мочи.

При биохимическом исследовании крови, молока и мочи до лечения установили, что в возникновении гипофункции яичников у коров лежат специфические патологические сдвиги в организме. В белковом, углеводном, жировом, минеральном и витаминном обмене веществ у коров в большинстве случаев отмечены гипогликемия, кетонемия, кетонолактия, кетонурия в сочетании с ацидозом и гиповитаминозом А.

При применении комплекса Гемобаланс у больных животных происходила нормализация клинических и гематологических показателей. Так было отмечено снижение частоты пульса и дыхания, учащение сокращений рубца, увеличение содержания гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и нейтрофилов в пределах физиологической нормы для данного вида животных.

В процессе лечения у больных коров в дистрофически измененных тканях внутренних органов вследствие аутоинтоксикации недоокисленными продуктами (кетоновыми телами и пр.) происходила нормализация биохимических показателей: в крови - снижение общего количества кетоновых тел и их фракций, пировиноградной кислоты, щелочной фосфатазы, а также увеличение глюкозы, уровня кислотной емкости щелочности крови, холестерина, активизация окисилительно-восстановительных процессов.

В результате проведенного лечения значительно улучшились средние по группе биохимические показатели молока и мочи, прекратилось выделение ацетоновых тел с молоком, увеличились плотность и уровень содержания белка в молоке.

В СПК «Красноармейское» было проведено лечение Гемобалансом в дозе 10 мл на 450 кг живой массы курсом 3-5 инъекций в течение 2006-2009 гг., коров с гипофункцией яичников, у которых при биохимическом исследовании крови, молока и мочи установлено нарушение обмена веществ в субклинической форме с симптомами ацидоза, кетонемии, кетонолактии, гиповитаминозов группы В.

Терапевтический эффект от применения Гемобаланса у высокопродуктивных молочных коров при гипофункции яичников составил 68,4%, субинволюции матки - 34,26%, атрофии яичников - 40,25% Контрольные группы коров, имеющие данную патологию, оставались в прежнем патологическом состоянии.

При применении Гемобаланса на 2-й, 4-й и 6-й дни после родов в дозе 1 мл на 45 кг живой массы отмечали нормализацию обмена веществ (регуляция уровня белка, глюкозы, щелочной фосфатазы, печеночных ферментов; снижение концентрации кетоновых тел в крови, что способствует улучшению молочной продуктивности и повышает содержание белка в молоке; улучшение потребления корма, так как он снижает концентрацию кетоновых тел в крови, угнетающих аппетит коровы. Применение Гемобаланса так же стимулирует рост продуктивности в период раздоя.

Таким образом, результаты изучения терапевтической эффективности в производственных условиях дают основание рекомендовать Гемобаланс для восстановления обменных процессов в организме и регуляции репродуктивной функции организма высокопродуктивных коров [28,29,46].

3.5.4 Применение препарата Гемобаланс при гипофункции яичников у коров

Отмечено, что наибольшее распространение гипофункции яичников у коров регистрировали в период с февраля по апреле меяце, что на наш взгляд, вызвано влиянием неблагоприятных внешних факторов (неполноценное кормление, отсутствие моциона, снижение длительности светового дня). Основу рациона составляли заготовленное хозяйством сено, силос удовлетворительного качества, сенаж, концентрированные корма, поваренная соль и витаминизированные добавки.

У большинства коров гипофункция яичников проявлялась неполноценностью полового цикла, а затем - анафродизией, которая продолжалась несколько месяцев (от 6 мес до 1,5 лет). У некоторых коров отмечали восстановление половой цикличности, но обычно течение её было неполноценным. При ректальном исследовании прощупывали маленькие, чаще плотные яичники, в которых не обнаруживали ни фолликулов, ни желтых тел. У некоторых коров исследование проводили в период ановуляторного полового цикла, при этом в яичниках обнаруживали растущие фолликулы небольшой величины. Однако овуляции не происходило. Матка у большинства коров была атонична.

Лечение общепринятыми методами (моцион, гормональные и нейротропные препараты, физиотерапия) не принесли желаемых результатов.

В результате проведенных клинических исследований кафедрой акушерства СПбГАВМ был предложен метод лечения гипофункции яичников у коров посредством нормализации обмена веществ используя препарата Гемобаланс [45].

Критерием оценки стали биохимические и гематологические показатели, определение уровня гормонов (эстрадиола, прогестерона) и степени сенсибилизации лейкоцитов с митогеном - фитогемагглютинином.

Клиническим и ректальным исследованиями установили наличие атонии матки у коров, которые длительное время от шести до четырнадцати месяцев не приходили в охоту, т. е. их сервис-период был продолжительным и превышал 180 дней. В данном случае самки не оплодотворялись при их осеменении три и более раз, а именно в свои физиологические сроки и организм коров не был готов к новой стельности. Отсутствию стельности и возникновение перегулов способствовала атония и увеличение матки, уплотнение её стенок. Наличие многочисленных неплодотворных осеменений приводило к развитию гипофункции яичников.

Коровам опытной группы инъецировали внутримышечно в области крупа трёхкратно с интервалом 2 суток комплекс Гемобаланс из расчета 1 мл на 45 кг живой массы тела. При этом в день начала опыта от 10 коров опытной и 10 коров контрольной групп взяли кровь для клинического анализа и исследования на содержание кальция, фосфора и кислотную емкость.

Судя по показателям резервной щелочности крови, окислительно-восстановительные процессы находились в пределах физиологической нормы у коров опытной группы и были ниже пороговых величин у животных контрольной группы. Следовательно, комплекс Гемобаланс участвует в регуляции кислотно-щелочного равновесия в организме и оказывает влияние на течение окислительно-восстановительных реакций.

Клинические показатели крови опытных животных после применения Гемобаланса изменялись: отмечали достоверное повышение уровня гемоглобина в 1,3 раза по сравнению с уровнем у контрольных животных, а также в 1,34 раза по сравнению с начальным уровнем. Количество эритроцитов увеличивалось в 1,25 раза по сравнению с их количеством, выявленным до применения Гемобаланса. Необходимо отметить, что у всех животных определяли слабовыраженную железодефицитную микроцитарную анемию, которая у коров опытной группы восстанавливались в результате терапии. Этот факт заслуживает внимания потому, что в воде, используемой для водопоя коров, ионы железа находятся в избыточном количестве, но железо не усваивается, по-видимому, из-за недостатка витаминов и незаменимых аминокислот, влияющих на его всасывание.

Также по лейкограмме был выведен лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ). Данный показатель у коров обеих групп равнялся 1,6±0,15, тогда как после применения Гемобаланса происходило его понижение в два раза у опытных животных, а у контрольных коров уровень ЛИИ не отличался от первоначального уровня (p>0,05).

У контрольных животных обнаруживали нейтрофилию с регенеративным сдвигом влево и лимфоцитопению, что подтверждало наличие хронического воспаления, ни одна корова в охоту за время опыта не пришла.

При функциональных нарушениях яичников применение Гемобаланса позволило нормализовать регуляцию половых функций, усилить процессы обмена веществ и улучшить кровоснабжение половых процессов.

Результаты исследований показали, что двукратное введение комплекса Гемобаланс из расчета 10 мл на 450 кг живой массы внутримышечно способствовало проявлению стадии возбуждения полового цикла у коров.

Введение Гемобаланса опытным коровам способствовало установлению полноценных половых циклов, с наличием возбуждения, течки, охоты и овуляции. От осеменения в первую охоту оказалось стельными 80,5% коров (в контроле - 44,7%), общая оплодотворяеомсть и индес осеменения были выше у опытных коров соответственно на 18,5 и 1,6±0,1 (Р?0,05).

Наши дальнейшие исследования показали, что внутримышечные инъекции Гемобаланса оказывают положительное влияние на ряд других показателей в организме животного опытной группы 80% коров пришли в охоту в течение 20-25 дней, 10% - в течение 40-50 дней, остальные 10% животных в охоту не приходили, что было напрямую связано с развитием хронического эндометрита и кист яичников. Две обследованных коровы были выбракованы в связи с наличием кист (фолликулярной и лютеиновой), которые были обнаружены при ректальном исследовании, а затем подтвердили и гормональным исследованием.

Таким образом, анализ проведенных исследований по изучению влияния комплекса Гемобаланс на организм коров при гипофункции яичников указывает на благоприятное действие на воспроизводительную способность обработанных животных. Полученные данные могут служить основанием для применения комплекса Гемобаланс в патогенетической терапии и профилактики бесплодия у коров при гипофункции яичников на почве несбалансированного кормления.

Таким образом,витаминизация коров в ветеринарной практике является оправданная с точки зрения профилактики и лечения акушерско-гинекологических заболеваний. Регулярное же применение комплекса аминокислот, микроэлементов и витаминов Гемобаланс благоприятно влияет на репродуктивные функции у коров и телок [3,4,9,43].

3.5.5 Эффективность применения препарата Гемобаланс для восстановления плодовитости коров при гипофункции яичников в зависимости от гормонального статуса

С целью изыскания объективных критериев диагностики гипофункции яичников проведены исследования по определению уровней половых гормонов в сыворотке крови больных животных. Проведены исследования так же по изучению содержания прогестерона при гипофункции яичников до и после применения комплекса Гемобаланс.

Для этого были подобраны 14 коров и 16 телок с гипофункцией яичников черно-пестрой породы. Изучение содержания прогестерона у них проводили на протяжении 50 суток с интервалом 7 дней.

Возраст телок составлял 22-25 месяцев, масса телок 270 кг, коров - 2-5 лет, масса тела животных составляла 350-450 кг.

Коровы не приходили в охоту в среднем в течение 60-180 дней после родов, телки - 90-180 суток после включения в план осеменений.

В начале опыта было проведено двукратное ректальное исследование с интервалом 21 сутки. За этот период у животных не обнаружили ни зрелых фолликулов, ни желтых тел. Яичники были уменьшены в размерах, плотные. У большинства животных наблюдали атонию матки.

Результаты, полученные во время эксперимента, представлены в таблицах 4, 5, 6.

Исследованиями установлено, что содержание прогестерона в периферической крови при гипофункции яичников было незначительным на протяжении 21 дня с начала опыта, что указывает на отсутствие гормонально активного желтого тела.

Таким образом, мы подтвердили функциональное состояние яичников и диагноз гипофункция.

Таблица 4

Динамика содержания прогестерона в сыворотке крови коров и телок при гипофункции яичников в ЗАО «Рабитицы» (р<0,05), нг/мл

№		Количество голов	1 сутки	7 сутки	14 сутки	21 сутки
	Коровы	14	0,12 ± 0,02	0,06±0,01	0,09±0,01	0,61±0,03
	Телки	16	0,15±0,03	0,08±0,02	0,15±0,01	0,05±0,001
	Средние значения при гипофункции	1,6-1,8 нг/мл
	Средние значения при нормальном половом цикле	2,5-4,0 нг/мл

За период изучения гормонального фона (21 день) изменения в физиологическом состоянии животных не произошло.

Коровы и телки были разделены на опытную и контрольную группы, в каждой из которых количество телок составило 8 голов, коров - 7 голов. Животным опытных групп внутримышечно применяли Гемобаланс из расчета 10 мл на 450 кг живой массы (8-10 мл на голову) курсом 5 инъекций с интервалом 24 часа.

Гормональные исследования на содержание прогестерона у животных опытных и контрольных групп также проводили с интервалом 7 дней.

Таблица 5

Динамика содержания прогестерона в сыворотке крови коров и телок контрольных групп в ЗАО «Рабитицы» (р<0,05), нг/мл

№	Животные	Количество голов	28 сутки	35 сутки	42 сутки	49 сутки
	Коровы контроль	7	0,11 ± 0,01	0,06±0,01	0,10±0,01	0,80±0,2
	Телки контроль	8	0,14±0,01	0,08±0,01	0,15±0,02	0,04±0,03



Данные таблицы свидетельствуют о том, что у животных контрольных групп достоверных изменений в динамике прогестерона не наблюдали.

Через 10 дней после начала применения комплекса Гемобаланс 6 коров и 6 телок опытных групп пришли в охоту, через 21 день в охоту пришли все животные опытных группах. Исследования на гормональный фон проводили сразу после осеменения, на 7, 14, 21 сутки после осеменения. Исследования на прогестерон в контрольных группах (где коровы и телки не пришли в охоту за время эксперимента) проводили также через каждые 7 суток.

Результаты гормональных исследований свидетельствуют, что у животных наступало восстановление функции яичников, происходило оплодотворение, что подтвердили ректальным исследованием через 3 месяца после осеменения.

Таблица 6

Динамика содержания прогестерона в сыворотке крови коров и телок опытных групп животных после применения Гемобаланса в ЗАО «Рабитицы» (р<0,05), нг/мл

№		Количество голов	1 сутки (1 день охоты)	на 7 сутки после охоты	на 14 сутки после охоты	на 21 сутки после охоты	на 28 сутки после охоты
	Коровы опыт	7	0,80±0,3	1,70±0,3	2,60±0,3	3,40±0,5	7,60±0,9
	Телки опыт	8	0,70±0,2	1,60±0,3	2,50±0,1	3,20±0,4	7,20±0,7

Анализируя данные таблиц 4, 5, 6 и графика динамики содержания прогестерона в сыворотке крови у осемененных коров после применения Гемобаланса (рис. 10), можно отметить, что после осеменения у оплодотворившихся коров и телок отмечено постоянное увеличение прогестерона: у коров с 0,80±0,3 до 7,60±0,9 нг/мл, у телок с 0,70±0,2 до 7,20±0,7 нг/мл.

Рисунок 10. (р<0,05), нг/мл

Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что у коров при гипофункции яичников гормональный фон содержания прогестерона остается на одном и том же уровне с незначительными изменениями во время овуляции.

Содержание гормонов прогестерона и эстрадиола-17 в в сыворотке крови коров с нарушениями половой цикличности, подвергнутых различным вариантам лечения, имело разноплановый характер изменений.

После проведения выборочного ректального исследования у коров были отобраны пробы крови для проведения клинического анализа крови, гормональных и биохимических исследований.

По результатам гормональных исследований коровы были разделены на 2 группы:

1) коровы с функционально неактивным желтым телом (прогестерон до 3 нМ/л) - № 2464, 900, 962, 255, 172, 938, 622, 875, 570 - 9 голов;

2) коровы с низкой функциональной активностью желтого тела (3-7 нМ/л) - № 426, 776, 800 - 3 головы.

Отмечали повышение уровня эстрогенной активности на уровне низкого содержания прогестерона в сыворотке крови.

У коров 1-й группы до начала введения Гемобаланса уровень прогестерона составил 0,62±0,08 нмоль/л, эстрадиола - 4030,6±2,59 пмоль/л. После начала курса обработки коров на 3-и сут количество прогестерона повысилось до 7,94±1,92 нмоль/л (в 12,8 раза, р<0,02), а эстрадиол оставался без изменений - 4014,06±2,4 пмоль/л. Изменения уровня гормонов на 6-е сут после начала лечения составили: прогестерон - 0,69±0,39 нмоль/л (снижение в 11,5 раза), а эстрадиол - 3864±1,6 пмоль/л. У коров 2-й опытной группы, где лечение проводили путем комплексного применения препаратов различного направления действия (ПДС, окситоцин, ихтиол, новокаин в/аортально, бициллин-5), изменение гормональных показателей у животных было в основном равнозначными данным в 1-й группе. У коров 3-й группы (контроль) характер изменения показателей половых гормонов после комплексной обработки традиционно применяемыми препаратами отличался от значений в предыдущих группах. До начала лечения содержание прогестерона было равно 0,59±0,08 нмоль/л, а эстрадиола - 5436,1±1,5 пмоль/л. На 3-и сутки после начала лечения количество прогестерона и эстрадиола практически не изменилось - 0,6±0,02 нмоль/л и 5527,9±9,8 пмоль/л соответственно. В дальнейшем, на 6-е сут. после лечения уровень прогестерона возрос до 1,08±0,5 нмоль/л (в 1,8 раза), а эстрадиола наоборот снизился до 4977,4±1,9 пмоль/л.

Опыт работы показал, что при диагностике и определении способа лечения коров с гипофункцией яичников необходимо учитывать уровень концентрации прогестерона в сыворотке крови. При его значении до 1,5 - 1,01 нг/мл патологию следует классифицировать как начальную стадию снижения функциональной деятельности яичников, при 1,01 - 0,5 нг/мл - как промежуточную, а уровни менее 0,5 нг/мл свидетельствуют о глубоких нарушениях функциональной активности гонад, выражающиеся в гипоплазии соединительной ткани яичников. Закономерные различия в уровне концентрации эстрадиола при этом не прослеживаются.



Таблица 7

Результаты применения Гемобаланса при гипофункции яичников в зависимости от исходного уровня концентрации прогестерона и эстрадиола в сыворотке крови коров

Показатель	Группа животных
	1	2	3
Количество животных (гол.)	18	17	16
Исходная концентрация половых гормонов в сыворотке крови: - прогестерона, нг/мл - эстрадиола, пг/мл	до 0,5 23,6 ± 3,6	0,51 - 1,0 22,8 ± 4,1	более 1,01 24,3± 4,2
Схема лечения (инъекции Гемобаланса в/м)	однократно	трехкратно	пятикратно
Возобновилась половая цикличность ( п-% )	7 - 38,8	12 - 71	13 - 81,2
Уровень оплодотворяемости (% от числа осемененных ) р < 0,05	2 - 28,6	7 - 58,3	10 - 70,9

Анализ полученных данных показывает, что результаты воздействия Гемобаланса имеют прямую зависимость от исходных уровней концентраций прогестерона, то есть предлагаемых классификационных критериев. При его значениях до 0,5 нг/мл, от 0,51 до 1,0 нг/мл и более 1.01 нг/мл признаки охоты, а, следовательно, возобновление половой цикличности в течение 14 дней проявили 38,8%; 71% и 81 % животных, соответственно по группам от числа обработанных. Аналогичная зависимость установлена и в отношении показателя оплодотворяемости.

Низкий уровень прогестерона в сыворотке крови отражает степень пораженности яичников, а именно: глубокую гипоплазию соединительной ткани. [33,37,40]

Таким образом, прослеживается четкая тенденция улучшения результатов лечения в соответствии с уровнем концентрации прогестерона по группам.

Дополнительно необходимо отметить, что, независимо от распределения по группам, концентрация прогестерона у положительно реагировавших животных на стимуляцию, а также у 9 впоследствии плодотворно осемененных коров была достоверно выше аналогичного показателя, чем у отрицательно реагировавших, соответственно - 0,82±0,15 против 0,42±0,1и 0,84±0,15 против 0,56±0,09.

Полученные нами данные свидетельствуют, что при определении способа стимуляции яичников следует учитывать исходный уровень прогестерона. Использование для этой цели сывороточного гонадотропина эффективно при значениях не менее 0,5 нг/мл [13, 27]. При более низких значениях в схему обработки животных целесообразно вводить инъекцию Гемобаланса.

Низкое содержание кортизола было у телок до 13-15 мес. Затем, к 16-24 мес., оно возрастает в два раза и более. Второе резкое повышение уровня кортизола также в два и более раза отмечается в возрасте 25-36 мес.

Уровень эстрадиола постепенно возрастает с повышением удоя. При этом разница в содержании гормона при низкой и высокой молочной продуктивности составляет 33%.

Анализ связи уровня прогестерона с удоем за 305 дней первой лактации позволяет отметить, что пониженное содержание гормона установлено у коров с низкой молочной продуктивностью. Концентрация прогестерона у высокомолочных коров была на 17% больше, чем у низкопродуктивных.

Подобная тенденция установлена между концентрацией кортизола и молочной продуктивностью. При этом, содержание гормона было на 20% выше у коров с высокой молочной продуктивностью по сравнению с низкомолочными.

На основании изложенного можно сделать заключение:

- с повышением уровня ФСГ, ЛГ, эстрадиола, кортизола, прогестерона увеличивается удой за первую лактацию, т.е. имеется положительная связь между концентрацией гормонов в сыворотке крови и молочной продуктивностью.

Результаты исследований дают возможность использовать показатели концентрации гормонов в сыворотке крови наряду с зоотехническими методами при отборе продуктивных животных в процессе формирования стада.

Систематические наблюдения за животными подвергнутыми лечению Гемобалансом свидетельствовали, что у коров всех групп не было нарушений состояния здоровья и отёлы прошли благополучно. В межгрупповом отношении получены равноценные результаты по индексу осеменений и продолжительности сервис-периода.

Таким образом, парентеральные инъекции Гемобаланса коровам с дисфункцией (гипофункцией) яичников по предложенной схеме обеспечило восстановление плодовитости у 85-92% коров при индексе осеменения 1,3-1,4. Эффективность терапии коров с гипофункцией яичников Гемобалансом во многом зависит от степени выраженности данной патологии. При исходных значениях концентрации прогестерона в крови до 0,5 нг/мл возобновление половой цикличности в течение двух недель отмечено у 38,8% животных, при концентрации 0,51-1,0 нг/мл - у 71% животных, и более 1,0 нг/мл - у 81% животных.